Tema: Preparacin de la muestra

Materiales
- Cmara de flujo laminar Telstar
- Placas 3M Petrifilm TM
Medios y reactivos
- Agua peptonada bufferada
Protocolo
1. Realizar anlisis microbiolgicos de bacterias cido lcticas, coliformes, enterobacterias,
aerobios mesfilos, mohos y levaduras.
2. Homogenizar 25mL de muestra en 225mL de diluyente (agua peptonada bufferada
estril) correspondiente a la dilucin10-1. A partir de sta realizar las diluciones
sucesivas (10-2 y 10-3).
3. Tomar de cada dilucin una alcuota de 1mL e inocular placas 3M Petrifilm TM para el
recuento.
Los tiempos y condiciones de incubacin, tipos de placas y rangos de aceptacin de recuentos
para cada grupo microbiano se especifica en la Tabla 1.

Anexos
Tabla 1. Tiempos y condiciones de incubacin
Microorganismos Especificaciones de Condiciones de Rangos
Petrifilm incubacin recomendados
Contiene nutrientes
del Agar Standard
Methods, se
complementa con
Bacterias cido 48 horas a 35 grados
medio MRS, misma 25 a 250 colonias
lcticas centgrados
que es mezclada con
caldo de cultivo para
bacterias cido
lcticas.
La placa contiene
nutrientes del Violeta
Rojo Billis (VRB) y un
indicador de
tetrazolio para 48 horas a 35 grados
Coliformes 15 a 150 colonias
facilitar el recuento centgrados
de colonias. El film
superior atrapa el gas
producido por la
fermentacin de la
 lactosa propia de los
coliformes.
El medio para el
recuento de
48 horas a 35 grados
Enterobacterias enterobacterias se 15 a 100 colonias
centgrados
compone de
VRB/Glucosa
Contiene nutrientes
de Sabhi, dos
antibiticos, indicador
de fosfatos (BCIP),
para facilitar la 3 a 5 das, a 25
Mohos y levaduras
numeracin de grados centgrados.
colonias tiene agente
gelificante soluble en
agua fra y un tinte
indicador