EFECTOS BIOQUMICOS METABLICOS EN RATAS WISTAR

HEMBRAS PROVOCADOS POR ERITROPOYETINA Y

LEVOTIROXINA
BIOCHEMICAL EFFECTS - METABOLICS IN WISTAR RATS
FEMALE CAUSED BY ERYTHROPOYETIN AND LEVOTIROXIN
Guzmn Glvez Xianna -Tapia Mucio Jos Antonio
Proyecto de investigacin de Bioqumica de Sistemas.
Universidad Nacional Autnoma de Mxico
Facultad de Estudios Superiores Cuautitln.

Resumen
En el presente artculo, se tiene como fin
relacionar a la administracin exgena de
levotiroxina y Eritropoyetina los efectos
bioqumicos que esta tiene ante en
metabolismo donde se utilizaron 28 ratas
wistar jvenes hembras, las cuales se
sometieron a una dosis diaria de 25 mg de T4
por va oral y 0.01mL de Eritropoyetina cada
tercer da por va subcutnea ambas durante
26 das de induccin; as mismo se les
realizaron pruebas de cuantificacin de:
glucosa, protenas totales, colesterol,
hematocrito y albmina presentes en plasma.
Mismas pruebas que nos permitieron observar
que la Levotiroxina, Eritropoyetina y
T4/Eritropoyetina causa alteraciones notables
en estos parmetros, y que para que se
observe un cambio anatmico notable se tiene
que someter a condiciones especficas ya que
en condiciones saludable (dieta balanceada, y
corto tiempo de experimentacin) As mismo
ya sea individualmente o en conjunto se
visualizan cambios notables como el principal
responsable de alteraciones en estas variables,
o en su defecto de alteraciones en el
metabolismo.
Palabras clave: levotiroxina, eritropoyetina,
colesterol, albumina, peso, glucosa, pruebas
totales.
Abstrac
In this article, it is aimed to relate to the
exogenous administration of levothyroxine and
Erythropoietin the biochemical effects that this
has on metabolism in which 28 young female
wistar rats were used, which were subjected to
a daily dose of 25 mg T4 per Oral and 0.01mL
Erythropoietin every third day subcutaneously
both during 26 days of induction; Likewise,
quantification tests were performed on: glucose,
total proteins, cholesterol, hematocrit and
albumin present in plasma. Same tests that
allowed us to observe that levothyroxine,
Erythropoietin and T4 / Erythropoietin caused
notable alterations in these parameters, and
that for a noticeable anatomical change to be
observed under specific conditions, since in
healthy conditions (balanced and short diet
Time of experimentation) Also, either
individually or as a whole, notable changes are
seen as the main responsible for alterations in
these variables, or in the absence of alterations
in metabolism.
Introduccin
La levotiroxina que es un anlogo a la
hormona tiroidea tetrayodotironina (T4)
secretada por la glndula tiroides en
condiciones fisiolgicas. Esta es muy
importante en nuestro organismo, ya que junto
con otro grupo de hormonas son las

1
encargadas de regular nuestro metabolismo, al
ser una hormona reguladora de la secrecin de
otras.
Este es utilizado comnmente como una
terapia suplementaria o de reemplazo de las
hormonas tiroideas en caso de hipotiroidismo
primario o secundario de cualquier etiologa,
supresin de la TSH por la glndula hipofisaria
y tratamiento de mixedema.
La levotiroxina suprime la secrecin de la
tirotropina en el tratamiento del bocio y de la
tiroiditis linfoctica crnica, y puede ser utilizada
en combinacin con agentes antitiroideos para
prevenir el desarrollo de hipotiroidismo o
goitrogenesis durante el tratamiento de la
tirotoxicosis
La levotiroxina muestra todas las acciones de
la hormona tiroidea endgena. En general, las
hormonas tiroideas influyen sobre
crecimiento y la maduracin de los tejidos,
aumentan el gasto de energa, y afectan la
remodelacin de todos los sustratos. Estos
efectos estn mediados a travs del control de
la transcripcin del ADN y, en ltima instancia,
de la sntesis de protenas. mientras que la
rHu-EPO es una forma de agente
hematopoytico biosinttico de la Eritropoyetina
srica (hormona endgena glicoprotenica). La
deficiencia de Eritropoyetina, acarrea severas
enfermedades hematolgicas. (Fanjul, 1998)
La rHu-EPO estimula la proliferacin,
maduracin y diferenciacin de los precursores
eritrocticos en la mdula sea, en forma
idntica a la eritropoyetina endgena humana.
La eritropoyetina tambin libera reticulocitos al
torrente sanguneo, donde madurarn a
eritrocitos. La administracin intravenosa o
subcutnea de rHu-EPO ha demostrado
estimular la eritropoyesis en voluntarios sanos,
pacientes con insuficiencia renal crnica y
pacientes infectados con VIH con niveles de
eritropoyetina endgena menores a 500 mU/ml.
Metodologa
Se utilizaron 28 ratas wistar hembras jvenes
las cuales se distribuyeron en 4 grupos de
trabajo, por medio de la distribucin de la
culebra japonesa dndonos como resultado 7
ratas por lote. Estos lotes se nombraron segn
las condiciones del mismo, donde es
importante mencionar que como marca la
literatura en los 4 grupos se manej una dieta
balanceada misma que estuvo compuesta por
20 gr de nutricubos y agua a saciedad; En el
caso de grupo 1 (blanco) mismo que fungi
como nuestro parmetro de referencia, mismo
que solo se mantuvo en condiciones de una
dieta balanceada; Mientras que en el grupo 2
(levotiroxina) se le administro la dieta
balanceada antes mencionada y diariamente
la administracin de las dosis recomendada de
el levotiroxina( 0.25 mg/ Kg).As mismo el lote 3
(eritropoyetina)se le administro una dieta
balanceada acompaada de 0.01mL de
Eritropoyetina recombinante cada tercer da.
Para finalmente en el lote 4 (T4/ Eritropoyetina)
se le administro una dieta balanceada junto con
0.01 mL de EPOrh cada tercer da y .025
mg/Kg de la dosis recomendada de
levotiroxina. Para as los das de induccin
7,14,21 y 28 se pesaron y por medio de una
puncin cardiaca se obtuvieron 3mL de sangre
de los cuales se obtuvo el plasma mismos que
con ayuda de la espectrofotometra, e
utilizacin de curvas patrn nos permiti
cuantificar las protenas totales, Albmina y
colesterol. Con ayuda de un glucmetro se
cuantifico glucosa.
Los das de induccin se llev a cabo la
necropsia misma que permiti hacer
observaciones macroscpicas, obtencin,
extraccin y medicin de tiroides
2
Resultados:
Grafica #1 variaciones en el peso, conforme el
avance de los das de induccin.
Grafica #2 variaciones en la concentracin de
colesterol en plasma, conforme el avance los
das de induccin.
Grafica #3 variaciones en la concentracin de
glucosa, conforme el avance de los das de
induccin.
Grafica #4 variaciones en la concentracin de
protenas totales en plasma, conforme el
avance en los das de induccin.
Grafica #5 variaciones en la concentracin de
albmina en plasma, conforme el avance en los
das de induccin.
Grafica #6 variaciones en la concentracin de
hematocrito conforme el avance en los das de
induccin
Interpretacin de resultados
Peso corporal
Semana 1: Los grupos de trabajo T4, EPO y
T4/EPO con respecto al grupo control
registraron un promedio en peso menor,
notndose un deceso mayor en el grupo T4
dado que el aumento en la concentracin de
hormonas tiroideas en circulacin provoca el
aumento del metabolismo basal repercute esto,
3
en un desgaste corporal mayor y por lo tanto
una disminucin de peso corporal. Sin embargo
en la semana 2 se present un aumento del
peso corporal en todos los grupos de trabajo
igualmente un incremento mayor en el grupo
T4 atribuyndose el incremento al tratamiento
con un cambio de dosis y a factores de la dieta
ya que una concentracin mayor de hormonas
tiroideas circulantes favorece una sobre
alimentacin y el desgaste corporal es mayor.
Y en el tratamiento EPO/ T4 se ve un
decremento bastante notorio ya que al estar
combinadas hay mayor consumo de oxgeno y
ms produccin de eritrocitos lo que conlleva a
un desgaste corporal mayor.
Glucosa
Los niveles de glucosa observados en la
experimentacin tanto para las ratas tratadas
como para las ratas control se encontraban
fuera del rango normal reportado en la literatura
85-133 mg/dL (Charles River . Vol.1, No. 2,
1982) aunque cabe mencionar que las ratas
tratadas se encontraba con niveles dentro del
rango de variacin normal comparadas con la
ratas control probablemente el aumento en las
ratas se debe a los diversos factores que
afectaron, como las ratas sufrieron al ser
sometidas al sustraerlas de la jaula as como
tambin influye que la toma de la muestra se
realiz en el momento de la recuperacin de la
anestesia y por consiguiente se gener un
estrs , el efecto de catecolaminas fue
aproximadamente constante (catecolaminas-
adrenalina) ; por lo que la concentracin de
glucosa circulante aumenta por lo cual se
liber adrenalina la cual estimula la
glucognolisis que es la degradacin del
glucgeno de reserva en hgado y musculo a
glucosa. La causa probable del aumento de
concentracin del nivel de glucosa en la sangre
de las ratas tratadas se debi a que al tener un
metabolismo basal acelerado, por lo cual
ingera una mayor cantidad de alimento, ya
que; las hormonas tiroideas incrementan la
velocidad de absorcin de los carbohidratos en
la vas gastrointestinales por tanto las
concentraciones de la glucosa plasmtica se
incrementan rpidamente despus de una
comida rica en carbohidratos sin embargo
desciende de nuevo con gran rapidez esto por
el aceleramiento del metabolismo basal y hay
un mayor requerimiento de energa. (Ganong,
2002)
Hematocrito.
En la prueba de hematocrito se tuvo un
aumento del paquete celular de la rata tratada
con respecto a los niveles de la rata control;
esto se debe a que la T3 eleva el consumo de
oxgeno y la produccin de calor Na+-K+APTsa
en todos los tejidos excepto en cerebro, bazo y
testculos, esto contribuye al aumento del
metabolismo basal (consumo de oxgeno en
descanso).El incremento en el requerimiento
celular de O2 aumenta la produccin de
eritropoyetina y la eritropoyesis la cual se lleva
a cabo en la medula sea, las clulas basales
4
hematopoyticas se transforman en las clulas
progenitoras y estas a su vez , en la clula
inmadura, el proeritroblasto. Esta clula, se
transforma sucesivamente en eritroblasto
basfilo en eritroblasto policromatofilo,
eritroblasto y finalmente en reticulocito y este
madura y finalmente se convierte en un
eritrocito maduro; sin embargo, el volumen
sanguneo, por lo general, no aumenta debido
a la hemodilucin e incremento del recambio de
eritrocitos. Las hormonas tiroideas elevan el
contenido de 2,3- difosfoglicerato en los
eritrocitos lo que permite un aumento en la
disociacin de O2 de la hemoglobina y, por
tanto, sube su disponibilidad de los tejidos
(Greenspan, 2005).
Y ahora si aumentamos eritropoyetina de
manera exgena se ver aumentado el
hematocrito por lo que la capacidad de
transporte de O2 en sangre se mantiene por la
produccin de eritrocitos. Este proceso est
regulado por la hormona eritropoyetina (epo),
que estimula la proliferacin y la diferenciacin
de clulas progenitoras (lasne and de ceaurriz
2000). La concentracin de hemoglobina es un
factor importante que determina el aporte de
oxgeno a los tejidos y la capacidad aerbica.
Este efecto se acenta con una hipoxia
moderada (calbet, lundby et al. 2006; robach,
calbet et al. 2008) ya que del gen de la epo se
induce en condiciones de hipoxia (semenza
and wang 1992). al administrarse eritropoyetina
exgena a las ratas wistar , los niveles del
volumen que ocupan los eritrocitos en la sangre
aumento debido a un exceso de la hormona,
as que hay una sobreproduccin de estas
clulas sanguneas a comparacin con el lote
control, con ello se aumenta la densidad de la
sangre de manera considerable, y entonces, el
corazn debe aumentar sus esfuerzos para ser
capaz de bombear sangre mucha ms densa
de lo que acostumbra, ese sobreesfuerzo del
corazn puede desembocar, como ya ha
ocurrido, en problemas del sistema
cardiovascular, pudiendo llegar a provocar la
muerte .
Colesterol
Los resultados de colesterol en las ratas control
tienen rango de 105 a 206mg/dL, aprox. Las
ratas tratadas con levotiroxina sdica y EPO
estn dentro de este rango, Mientras que las de
T4 comienzan a disminuir las concentraciones
de colesterol. En el tratamiento EPO se
encuentra al principio dentro del rango normal
posteriormente, se observa un incremento del
colesterol, debido a una modulacin negativa.
Esto se debe a que las hormonas tiroideas
incrementan la formacin de los receptores de
las lipoprotenas de baja densidad (LDL) en el
hgado, toda vez que este incremento se debe
al aumento del retiro de colesterol a partir de la
circulacin. (Ganong, 2002)
Esta hormona tambin promueve las formas de
eliminacin del Colesterol, uno de los
mecanismos es mediante el aumento de la
secrecin del mismo a la bilis y su prdida
consiguiente por las heces. (Miralles , 2001)
5
Los receptores de LDL son regulados por la
concentracin intracelular de colesterol. La
endocitosis de LDL extrae el contenido de
lpidos ricos en colesterol de la sangre y hace
que sea absorbido por las clulas. (Koolman,
2012).
Albumina.
En los resultados de la cuantificacin de
albumina en la sangre, se observ un,
incremento de esta, estando por encima del
valor de protenas totales, esto lo podramos
justificar debido a que el reactivo utilizado para
esta cuantificacin no era de nivel analtico,
aadindole los errores en su preparacin.
Pero se sabe que la albumina tiene un sitio de
fijacin fuerte para T4 y T3 y varios sitios
dbiles; debido a su elevada concentracin
srica, la albumina transporta alrededor de
15% de t4 y t3 circulantes, las rpidas
velocidades de disociacin de T3 y T4 de la
albumina hacen de este transportador una
fuente importante de hormona libre para los
tejidos (Greenspan, 2005)
Referencias.
Dorantes, C., Alicia, Y., (2012).
Endocrinologa clnica. (4ed). Mxico: El
Manual Moderno
Felig, M.D., (1983). Endocrinologa y
metabolismo. Mxico: McGRAW-HILL
Flores, L., Fernando, (2007).
Endocrinologa. (5ed). Mxico: Mndez
Editores
Koolman, J., (2004). Bioqumica: Texto y
Atlas. (3ed). Buenos Aires: Medica
Panamericana
Malacara, J., Manuel., (1990).
Fundamentos de Endocrinologa clnica.
(4ed). Mxico: SALVAT MEXICANA
Nelson, David, L., (2015). Lehninger:
Principios de bioqumica. (6ed). Espaa:
Omega
YTON, C.G. and HALL, J.E. Tratado de
Fisiologa Mdica. 11 Edicin. Elsevier,
2006.
http://scielo.isciii.es/pdf/pap/v11s16/origi
nal4.pdf
https://bioquimicaenlaclinica.wikispaces.
com/Efecto+de+hormonas+tiroideas+sob
re+metabolismo+basal,+respiraci%C3%
B3n+celular+y+fosforilaci%C3%B3n+oxi
dativa
Browder Lazenby Ramona.
(2012).Fisiopatologa. 4ta ed., Editorial
Manual Moderno.
Malgor T .Farmacologa de las hormonas
tiroideas.
http://med.unne.edu.ar/sitio/multimedia/i
magenes/ckfinder/files/files/cap28_tiroide
s.pdf
https://bioquimicaenlaclinica.wikispaces.
com/Efecto+de+hormonas+tiroideas+sob
re+metabolismo+basal,+respiraci%C3%
B3n+celular+y+fosforilaci%C3%B3n+oxi
dativa
Aguilar,S (1998).Estudio bibliogrfico de
hormonas tiroideas T3 y T4 (anlisis
qumico , biolgico y fisiolgico de estas
hormonas).Tesis de Licenciatura.
Universidad Nacional Autnoma de
Mxico.
Schteingart, Mario (1950)
Endocrinologa. Argentina:
Bibliogrfica.
Ganong, W. (2006). Fisiologa Mdica.
18. Mxico: El Manual Moderno.
WEB. Publicado por Blog de Fisiologa
Bsica de Israel Arambur
Lucas. (2014). Recuperado de:
http://fisiologiaisrael.blogspot.mx/2014/0
1/hormonas-tiroideas-en-este-esquema-
se.html
Tepperman J. (1975) Fisiologa
Metablica y Endocrina. 3.
Interamericana, S. A de C.V. Mxico D.F
6
 Esquifino P.A. (1992). Bioqumica
Metablica. Editorial Tebar Flores, S.L.
Devlin M.T. (1998). Bioqumica libro de
texto con aplicaciones clnicas Tomo l.
2. Revert Colombiana S.A.
Rodak, B. (2002). Hematologa
fundamentos y aplicaciones Clnicas.
(2ed.). Argentina, Buenos Aires: Ed
Panamericana.
Alegre, A et al. (2005).Eritropoyetina en
Hematologa. Madrid, Espaa: Ed
Panamericana.
Male, B. (1990) Hematologa. Medicina
de laboratorio. Barcelona, Espaa: Ed.
Revert.
Lorenzo, Velzquez.
(2008).Farmacologa Bsica y
Clnica.Madrid, Espaa: Ed.
Panamericana.
Brown BA. Hematology: Principles and
Production. Baltimore: William and
Wilkins; 1993.
Garca A, Arbelaez M, Mejias G, Henao
JE, Miln HA y Garrigozo A. Dosis
pequeas subcutneas de
Eritropoyetinas en pacientes con
Insuficiencia Renal Crnica en
hemodilisis. Nefrologa 1997; 27(6):
497-503.
Guyton MD, Hall J. Fisiologa Humana y
mecanismos de las enfermedades. 6 ed.
La Habana; 1996.
Muller-Stern (2008), Bioqumica,
fundamentos para medicina y ciencias
de la vida Barcelona, Reverte, 3 ed.
Iglesias, B, G. () Bases de la
fisiologa Madrid, Tebar.
Fanjul, M,L.(1998) Biologa funcional de
los animales, Madrid; Espaa, siglo
veintiuno de Espaa editores, 1 ed.
Devlin Thomas M. (2000). Bioqumica.
(Tercera edicin). Espaa: editorial
Reverte.