Generalidades del gnero:

El gnero Shigella (Familia: Enterobacteriaceae) est compuesto por cuatro especies: Shigella
sonnei, Shigella flexneri, Shigella boydii y Shigella dysenteriae causa la enfermedad al invadir
y replicarse en las clulas que tapizan el colon. Las protenas de los genes estructurales
intervienen en la adherencia de los microorganismos a las clulas, as como en su invasin,
replicacin intracelular y diseminacin de una clula a otra. Estos genes se hallan en un gran
plsmido de virulencia, pero su regulacin corresponde a genes cromosmicos. Las shigelas
lisan la vacuola fagoctica y se replican en el citoplasma de la clula del hospedador. Con la
reorganizacin de los filamentos de actina en las clulas del hospedador, las bacterias son
empujadas a travs del citoplasma hasta las clulas adyacentes, donde tiene lugar el paso de
una clula a otra, de este modo los microorganismos de Shigella disfrutan de proteccin frente
a la destruccin inmunitaria. Las shigelas sobreviven a la fagocitosis al inducir la muerte celular
programada (apoptosis).
La enfermedad endmica en adultos es frecuente en varones homosexuales y en los contactos
domsticos de los nios infectados. Se producen brotes epidmicos en guarderas, centros de
da e instituciones de acogida. La shigelosis se transmite de persona a persona por va fecal-
oral, principalmente a partir de personas con manos contaminadas y con menos frecuencia a
travs del agua o los alimentos. Dado que basta con 100-200 bacterias para provocar la
enfermedad, la shigelosis se transmite con rapidez en las comunidades en las que los niveles
de higiene personal y las normas sanitarias son bajas.
La shigelosis se caracteriza por la presencia de espasmos abdominales, diarrea, fiebre y heces
sanguinolentas. Los signos y sntomas clnicos de la enfermedad aparecen entre 1 y 3 das tras
la ingestin de las bacterias. Las shigelas colonizan inicialmente el intestino delgado y
comienzan a multiplicarse en las primeras 12 horas. El primer signo de infeccin (una profusa
diarrea acuosa sin indicios histolgicos de invasin mucosa) se relaciona con la accin de una
enterotoxina. Sin embargo, la caracterstica fundamental de la shigelosis son los espasmos
abdominales y el tenesmo (esfuerzos de defecacin), con abundante pus y sangre en las heces.
Es consecuencia de la invasin de la mucosa colnica por las bacterias. En las heces se
observan numerosos neutrfilos, eritrocitos y mucosidad. La infeccin suele resolverse de forma
espontnea, aunque se recomienda el tratamiento antibitico con el fin de reducir el riesgo de
diseminacin secundaria a los miembros de la familia y a otros contactos; la amoxicilina, el
cotrimoxazol, las fluoroquinolonas y la furazolidona suelen ser muy eficaces.. La colonizacin
asintomtica del colon por los microorganismos se produce en un pequeo nmero de pacientes
y configura el reservorio para nuevas infecciones. 1
 Resultados:

Tincin de Gram: Gram negativa

Cepa: Shigella flexneri

Prueba: Resultado prctico Resultado terico Interpretacin de la

prueba
1. cido a partir
de:

-Manitol - + Amarillo (+)

Rojo (-)

-Sacarosa - - Amarillo (+)

Rojo (-)

-Glucosa + + Amarillo (+)

Rojo (-)

2. IMViC

-Indol - Variable Anillo rojo en la superficie

(+)
Sin color (-)

-Rojo de metilo + + Rojo (+)

Amarillo (-)

-Voges-Proskauer - - Rojo en superficie (+)

Amarillo (-)
-Citrato - - Crecimiento/Crecimiento
y medio color azul
intenso (+)
No se observa
crecimiento/Medio color
verde (-)

3. Degradacin
de
aminocidos

-LIA K/A K/A K/K= Azul/Azul

Desaminacin
oxidativa/Descarboxilacin

K/A= Azul/Lila No desamina

-Descarboxilacin + - Prpura en el medio (+)

ornitina
Amarillo en el fondo (-)

-Desaminacin - - Verde en el pico (+)

fenilalanina
Amarillo (-)

4. Hidrlisis de:

-Urea - - Rosa mexicano (+)

Amarillo (-)

5. Movilidad: - - Los organismos migran

desde la lnea de
siembra a las paredes
provocando turbiedad (+)
Crecimiento solo en la
lnea de siembra (-)
6. Produccin - - Precipitado negro (+)
H2S
Sin precipitado (-)

7. Reduccin de - - Rosa a rojo (+)

nitratos
Amarillo (-)

8. Catalasa + + Produccin burbujas (+)

Sin burbujas (-)
Morfologa colonial

Medio de cultivo Agar Sangre de Agar Salmonella Agar Mac Conkey

Carnero 5% Shigella
Forma Irregular Puntiforme Irregular
Tamao Grande Mediano Grande
Color Blanco/Gris Blanco/Transparente Blanco/Transparente
Borde Continuo Continuo Continuo
Elevacin Elevada Plana Plana
Luz reflejada Mate Mate Mate
Luz transmitida Opaco Translucida Translucida
Consistencia Cremosa Gelatinosa Cremosa
Otras Alfa hemlisis Olor rancio /

ndice de similitud por asociacin simple:

1. Manitol
2. Sacarosa
3. Glucosa
4. Indol
5. RM
6. VP
7. Citrato
8. LIA
9. Ornitina
10. Fenilalanina
11. Urea
12. Movilidad
13. H2S
14. Nitratos
15. Catalasa

Shigella flexneri 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15

PBQ + - + - + - + - - - - - - - +

Experimental - - + - + - - - + - - - - - +

ISAS= ( )

ISAS = 80.00%
Anlisis de resultados:
A la cepa desconocida se le realiz una tincin de Gram, resultando un microorganismo de
forma bacilo, Gram (-). Al adicionar perxido de hidrgeno form burbujas en el medio,
confirmando catalasa positiva y no fermentadora de lactosa, debido a que el crecimiento en
agar Mac Conkey presenta colonias transparentes e incoloras. Las colonias sospechosas de
Shigella crecidas en agar Salmonella-Shigella son transparentes, translcidas/opacas y planas,
lo cual ayud a diferenciar del gnero Salmonella.
El gnero Shigella no fermenta la lactosa rpidamente, caracterstico de enterobacterias
patgenas como Salmonella y Shigella, pero si otros carbohidratos, como manitol y glucosa,
pruebas bioqumicas que se llevaron a cabo. En este caso, solo ferment glucosa tanto en las
pruebas de carbohidratos como en la prueba rojo de metilo, pero no manitol, por lo tanto,
fermenta solo carbohidratos de composicin sencilla. En la prueba Voges-Proskauer tambin
reporta un resultado negativo, por lo cual el microorganismo en incapaz de producir acetona a
partir de la fermentacin de la glucosa.
Fue negativo a la hidrlisis de la urea, por lo tanto carece de la enzima ureasa: un resultado
negativo es caracterstico de las bacterias Escherichia coli, Salmonella y Shigella. Para la
prueba SIM, no produce cido sulfhdrico, debido a que no se presenta ningn tipo de
precipitado o ennegrecimiento del medo, no presenta movilidad debido a que solo hubo
crecimiento acentuado en la lnea de siembra ni cambio de color al agregar reactivo de Kovacs,
por lo cual es indol negativo.
En el caso de la prueba MIO, se confirma que no hay movilidad ni produccin de indol, pero si
descarboxilacin de la ornitina, por lo cual se produce putresina que alcaliniza el medio y
sobrepasa la acidez producida por la fermentacin de la glucosa, resultando un color morado
en el fondo.
LIA evala la capacidad enzimtica de un microorganismo para descarboxilar un aminocido y
por consiguiente producir alcalinidad, la prueba present una pequea fraccin de pico de flauta
color azul de Prusia, y el fondo morado, por lo cual se report como K/A, indicando que no se
dio ninguna desaminacin.
El caldo nitrato result negativo, indicando que los nitratos no han sido reducidos o que se
redujeron a otros productos, como amoniaco, nitrgeno molecular, xido ntrico o nitroso. Los
reactivos de prueba solo detectan nitritos, lo cual podra llevar a una lectura falsa-negativa, que
se podra evitar adicionando una pequea cantidad de polvo de zinc, el cual reduce nitratos a
nitritos y formara la reaccin positiva.
La prueba de la fenilalanina desaminasa result negativa pues no hubo ningn cambio al
adicionar el color, lo cual indica que el microorganismo en incapaz de desaminar la fenilalanina
en cido fenil pirvico.
El microorganismo fue negativo a citrato de Simons, por lo que no es capaz de utilizar al citrato
como nica fuente de carbono, prueba que es diferencial para Salmonella (resultado positivo)
de Shigella (resultado negativo).
Basado en las siguientes tablas especficas para el gnero Shigella, as como algunos reportes
en los cuales se utiliza Shigella como control de calidad, se pudo determinar el gnero y especie.

Tabla 1. Pruebas bioqumicas para el gnero Shigella

Listado 1. Microorganismos utilizados para el control de calidad para SIM.

Listado 2. Microorganismos utilizados para el control de calidad para medios KIA/TSI.

Conclusin:
De acuerdo a los resultados obtenidos, la bacteria #8 identificada, corresponde a Shigella
flexneri.

Bibliografa:
1. Murray PR, Baron EJ, Pfaller MA, Tenover FC, Yolken RH. Microbiologa Mdica de
Murray. 6 ed.: ASM Press, Washington DC 1995.
2. Mc Faddin J.F., Pruebas bioqumicas para la identificacin de bacterias de importancia
clnica, 3a edicin, Mxico, Editorial Mdica Panamericana, 2003.
3. Brock D. T, 1996, Microbiologa, Sexta edicin, editorial Hispanoamericana, Mxico.