Instrucciones de Uso

Solamente para uso diagnstico in vitro

IFCC: International Federation of Clinical Chemistry

HbA1c Kit DCCT: Diabetes Control and Complications Trial
NGSP: National Glycohemoglobin Standardization Program
HEMOGLOBINA GLICOSILADA HbA1c
CONCENTRACIONES DE HBA1C Y DE GLUCOSA MEDIA
MS 80115310145 Gracias a la correlacin lineal existente entre la hemoglobina A1c y las
concentraciones medias de glucosa, los valores de HbA1c se pueden
convertir en valores medios estimados de glucosa mediante las
INFORMACON DE PEDIDO ecuaciones siguientes:
N de pedido Presentacon
4190045K R1 2 x 15mL + R2 1 x 10mL + R3 1 x 5mL Concentracin media de glucosa [mg/dL] = 28,7 x HbA1c* 46,7
4190090K R1 3 x 20mL + R2 2 x 10mL + R3 1 x 10mL Concentracin media de glucosa [mmol/L] = 1,59 x HbA1c* 2,59
4190090K
Resumen [1,2] *valores HbA1c en % NGSP
RESUMEN Hemoglobina A1c (HbA1c) es una hemoglobina
No se observan diferencias significativas en la ecuacin de regresin para
Hemoglobina A1c (HbA1c) glicada
es unaquehemoglobina
se glicada que se origina a
las variables existentes en la poblacin estudiada (sexo, presencia o
partir de una reaccin noorigina a partir
enzimtica de unacom
de glucosa reaccin no enzimtica
hemoglobina nativa. de
ausencia de diabetes, tipo de diabetes, edad, raza u origen tnica).
Este proceso se produce glucosa con
constantemente mientras se encuentre un
Aunque esta ecuacin puede emplearse em la mayora de individuos, cada
eritrocito en la circulacinhemoglobina
sangunea (Lanativa. Estede
vida media proceso se produce
los eritrocitos es de
laboratorio tiene que asegurarse de que la ecuacin de regresin es vlida
100 a 120 das). El grado de glicacin es directamente proporcional a la
constantemente para su grupo de pacientes.
concentracin de glucosa en sangre.
mientras La proporcin
se encuentre de HbA1c
un eritrocito en laen la
hemoglobina total integra el nivel medio
circulacin de glucosa
sangunea (la en sangre de las
ADVERTENCIAS Y MEDIDAS DE PRECAUCIN
ltimas 6 a 8 semanas (debido a la cintica del volumen de eritrocitos, el
vida media de los eritrocitos es de 100 a 120 1. Reactivos S25: Evtese el contacto con los ojos.
nvel de glucosa en sangre se manifiesta ms durante este periodo que
das). El grado de 2. Consultar las fichas de seguridad de los reactivos y observar todas las
durante las semanas anteriores). Por este motivo, la HbA1c sirve como
glicacin es directamente proporcional a la medidas de precaucin necesarias para el uso de reactivos de laboratorio.
parmetro de glucemia a largo plazo para el seguimiento retrospectivo en
casos de diabetes mellitus. concentracin
Los estudiosde clnicos han demostrado que un
3. Se necesita purificar las cubetas inmediatamente despus de una
ajuste adecuado del glucosa en sangre.puedeLa impedir
proporcin de HbA1c lasen la
medicin del HbA1c. Para la purificacin de las cubetas, por favor,
valor HbA1c o retrasar
hemoglobina
consecuencias diabticas a largo plazo. Debido a que la cantidad de
empleen la solucin alcalina de lavar recomendada por el fabricante del
sistema de anlisis.
HbA1c tambin dependetotal de laintegra
cantidadeltotal
niveldemedio de glucosa
hemoglobina, en sangre
se indica la
parte proporcional de HbA1c de lasen ltimas 6a
la hemoglobina total. En enfermedades
8 semanas (debido a laeritrocitos
cintica (determinadas
del volumen de CONSERVACIN Y ESTABILIDAD DE LOS REACTIVOS
relacionadas con una vida media reducida de ls
A una temperatura de 2 a 8 C, los reactivos se conservan hasta el final del
enfermedades hematolgicas) eritrocitos,
o porelprdidas
nivel de sangre considerables
mes de caducidad indicado en el envase siempre que se evite la
de glucosa
durante las semanas anteriores en sangre
(proporcin mayorse de
manifiesta
eritrocitosms durante
jvenes),
contaminacin y la evaporacin.
se pueden presentar valores este periodo que (HbA1c baja a pesar de un
bajos falsos
porcentaje alto de glucosa durante las semanas
en sangre). Se hananteriores). Por este
observado valores motivo,
altos
ELIMINACIN DE RESIDUOS
falsos (HbA1c alta a pesar la del
HbA1c sirve normal de glucosa en sangre) en
porcentaje
Obsrvese la normativa legal al respecto.
anemias por dficit de hierro
como(mayor proporcin
parmetro de eritrcitos
de glucemia viejos).
a largo Este
plazo para el
tipo de enfermedades debe tenerse en cuenta en la interpretacin clnica
seguimiento PREPARACIN DE LOS REACTIVOS
de los valores de HbA1c.retrospectivo en casos de diabetes mellitus. Los
Los reactivos son listos para usar. En caso de utilizacin en sistemas que
estudios clnicos no pueden emplear trs reactivos, los reactivos 2 y 3 tienen que ser pr
MTODO
han demostrado que un ajuste adecuado del valor mezclado antes del uso. Transferir 5 mL del R3 en el envase del R2,
Test inmunoturbidimtrico con partculas de refuerzo. La determinacin de
HbA1c puede entonces bien mezclar inmediatamente. La estabilidad de R2/R3 pre
HbA1c se produce directamente sin medicin de hemoglobina total.
impedir o retrasar las consecuencias diabticas a mezclado es 1 mes de 2 a 8 C.
PRINCIPIO largo plazo.
La hemoglobina total y Debido a que la cantidadsedeunen HbA1ccon tambin
EQUIPO ADICIONAL NECESARIO
la HbA1c en hemolizado la misma
Equipo usual de laboratrio.
afinidad a las partculasdepende
en R1. El degrado
la de unin es proporcional a la
concentracin relativa de cantidad total de hemoglobina,
ambas sustancias en el sangre.se El indica la parte
anticuerpo
proporcional MUESTRAS
monoclonal HbA1c anti-humano (ratn)de (R2) se une a la HbA1c unida por
Sangre entera EDTA
partculas. El anticuerpo HbA1c
policlonalenIgGla hemoglobina
antiratn (cabra) total.
(R3) reacciona con
Desechar las muestras contaminadas.
el anticuerpo monoclonal En enfermedades
HbA1c anti-humanorelacionadas con una vida
produciendo unamedia
aglutinacin. La absorbanciareducida
medida deeslosproporcional a la HbA1c unida por
Para la preparacin de muestras se requiere la solucin hemolizante.
partculas que, a su vez, eritrocitos (determinadas
es proporcional enfermedades
al porcentaje de HbA1c en la
Preparacin de muestras:
muestra. hematolgicas) o por Solucin hemolizante 1000 L
prdidas de sangre considerables durante las Muestra/calibrador/control 20 L
REACTIVOS semanas anteriores Mezclar y dejar reposar 5 min. o hasta que se haya completado la
Componentes y Concentraciones
(proporcin mayor de eritrocitos jvenes), se hemlisis.
pueden presentar
R1:
valores bajos falsos (HbA1c baja a pesar de un CONSERVACIN DE LAS PRUEBAS
Solucin amortiguadora 20 mmol/L
porcentaje alto de Sangre entera 1 semana a 2 a 8 C
Ltex 0,14 %
glucosa en sangre). Se han observado valores Hemolizante 10 horas a 15 a 25 C
R2:
Solucin amortiguadora altos falsos (HbA1c
Hemolizante 10 das a 2 a 8 C
10 mmol/L
Anticuerpo monoclonal HbA1c alta aantihumano
pesar del porcentaje normal de glucosa en
de ratn sangre) en 5,5 mg/mL
ESQUEMA DE LA PRUEBA
anemias por dficit de hierro (mayor proporcin de Hay disponibles, a peticin, aplicaciones para sistemas automticos.
R3:
Solucin amortiguadora eritrocitos 10 mmol/L
Longitud de onda 660 nm
Anticuerpo policlonal IgGviejos).
anti-ratnEste
de tipo de enfermedades debe tenerse
Paso ptico 1 cm
Cabra en cuenta en la 67 mg/dL
Temperatura 37 C
Estabilizadores interpretacin clnica de los valores de HbA1c.
Mtodo de medida Respecto al aire
ESTANDARIZACIN
Sistema con 3 componentes listo para usar
La prueba ha sido estandarizada a partir del mtodo de referencia
aprobado IFCC. Tambin es posible calibrar segn DCCT/NGSP. Los Muestra o calibrador 20 L
valores correspondientes de calibracin se indican en la tcnica del set Reactivo 1 750 L
calibrador TruCal HbA1c lquido. Los valores NGSP muestran una relacin Mezclar, incubar por 2 minutos y aadir:
linear a los del IFCC. Por l tanto se pueden calcular mediante la siguiente Reactivo 2 250 L
frmula: Mezclar, incubar por 3 minutos y andir:
HbA1c (IFCCb) = (HbA1c (NGSPa) 2,15) / 0,0915 Reagente 3 125 L
HbA1c (NGSPa) = 0,0915 x HbA1c (IFCCb) + 2,15 Mezclar, leer la absorbncia exactamente despus de 2 min.
a: Valores NGSP en %
b: Valores IFCC en mmol/mol

BL0202 / REV02 01/2014 Pg. 1 Inserto Hemoglobina Glicosilada HbA1c

Instrucciones de Uso
Solamente para uso diagnstico in vitro

Sistema con 2 componentes (R2/R3 pre-mezclado)
Muestra o calibrador 30 L
Reactivo 1 1000 L
Mezclar, incubar por de 5 min y andir.
Reagente 2/3 500 L
Mezclar, leer la absorbncia exactamente despus de 5 min.
CALIBRACIN Y CALCULACIN
La concentracin de HbA1c de muestras desconocidas se calcula
mediante una curva de calibracin y empleando un modelo matemtico
adecuado, por ejemplo Spline. La curva de calibracin se establece con
cuatro calibradores de diversa concentracin y con solucin de NaCl (9
g/L) para determinar el punto cero.
Estabilidad de la calibracin:
Sistema con 3 componentes 8 semanas
Sistema con 2 componentes 6 das
CARACTERSTICAS / RANGO DE MEDIDA
El test tiene un rango de medida de 15 - 150 mmol/mol de HbA1c segn
IFCC (3 16 % segn NGSP) y llega por lo menos hasta la concentracin
del calibrador ms alto. El test est indicado para una concentracin total
de hemoglobina de 6 26 g/dL.
ESPECIFICIDAD / INTERFERENCIAS
Debido a los anticuerpos que contiene, HbA1c es um inmunoensayo
especfico para HbA1c humana. No se presentan interferencias con cido
ascrbico hasta 60 mg/dL, con bilirrubina conjugada y no conjugada hasta
60 mg/dL, con lipidemia hasta 2000 mg/dL de triglicridos y con FR hasta
250 lU/mL. El anticuerpo monoclonal de ratn no demuestra ninguna
reactividad cruzada con hemoglobina carbamilada o acetilada. No se
presentan interferencias por uremia ni intermedios dbiles (base de Schiff).
El alcoholismo y la ingestin de una dosis elevada de Aspirina pueden
influir los resultados. Las variantes de la hemoglobina poderan provocar
resultados errneos:
1. Thomas L. Clinical Laboratory Diagnostics. 1st ed. Frankfurt: TH-Books
Verlagsgesellschaft; 1998. p. 142-48.
2. Sacks DB. Carbohydrates. In: Burtis CA, Ashwood ER, editors. Tietz
Textbook of Clinical Chemistry. 3rd ed. Philadelphia: W.B. Saunders
Company; 1999. p. 790-6.
3. Jeppsson JO, Kobold U, Barr J, Finke A et al. Approved IFCC reference
method for the measurement of HbA1c in human blood. Clin Chem Lab
Med 2002; 40: 78-89.
4. Hoelzel W, Weykamp C et al. IFCC Reference System for Measurement
of Hemoglobin A1c in Human Blood and the National Standardization
Schemes in the United States, Japan, and Sweden: A Method-Comparison
Study. Clin Chem 2004; 50 (1): 166-74.
5. The Diabetes Control and Complications Trial Research Group. The
effect of intensive treatment of diabetes in the development and
progression of long-term complications in insulin-dependent diabetes
mellitus. N Engl J Med.1993; 329: 977-86.
6. Little RR, Rohlfing CL, Wiedmeyer HM, Myers GL et al. The National
Glycohemoglobin Standardization Program: A Five- Years Progress
Report. Clin Chem 2001; 47: 1985-92.
7. Data on file at DiaSys Diagnostic Systems GmbH.
8. Pantheghini M, John WG on behalf of the IFCC Scientific Division.
Implementation of haemoglobin A1c results traceable to the IFCC
reference system: the way forward. Clin Chem Lab Med 2007; 45(8): 942 4.
9. Nordin G, Dybkr R. Recommendation for term and measurement unit
for HbA1c. Clin Chem Lab Med 2007; 45(8): 1081-2.
10. Sacks DB. Translating Hemoglobin A1c into Average Blood [Glucose:
Implications for Clinical Chemistry. Clinical Chemistry 2008; 54: 1756-8.
INFORMACIN PARA EL CONSUMIDOR

LMITE DE DETECCIN DEL TEST/LMITE DE PRUEBA

El lmite inferior de prueba es de 10 mmol/mol de HbA1c.

PRECISIN (HITACHI 917, SISTEMA DE 3 COMPONENTES)

Valores segn IFCC

Coeficiente
Variacin
Valor mdio de
Em La serie estndar
(VM) variacin
n = 20 [mmol/mol]
[mmol/mol] (CV) (%)

Amostra 1 35.0 0.48 1.37

Amostra 2 80.7 1.09 1.36
Amostra 3 114 2.04 1.80

Coeficiente
Valor medio Variacin de
De un dia a
(VM) estndar variacin
otro
[mmol/mol] [mmol/mol] (CV)
n = 20
[%]

Amostra 1 36.5 0.66 1.82

Amostra 2 83.3 1.39 1.67
Amostra 3 116 1.83 1.58

COMPARACIN DE MTODOS FABRICANTE

En la comparacin HbA1c Kovalent (y) con otro test inmunoturbidimtrico
(x) se obtuvieron los siguientes resultados (NGSP) para 109 muestras: Kovalent do Brasil Ltda.
y = 1,083 x 0,560 %; r = 0,987. Rua Cristvo Sardinha, 110 Jd. Bom Retiro
En la comparacin de HbA1c (y) con un test HPLC (x) se obtuvieron los So Gonalo RJ CEP 24722-414 - Brasil
siguientes resultados (NGSP) para 109 muestras: www.kovalent.com.br
y = 0,968 x + 0,199 %; r = 0,995. CNPJ: 04.842.199/0001-56
Farm. Resp.: Jorge A. Janoni
VALORES DE REFERENCIA CRF: 2648-RJ
Cada laboratorio debera comprobar o determinar por s mismos los rangos
de referencia con pacientes adecuados y no diabticos. Valores de SAC: sac@kovalent.com.br - (++ 55 21) 3907-2534
referencia recomendados para HbA1c:
Fecha de caducidad y Cd. de Lote: CONSULTAR EL RTULO
mmol/mol IFCC % NGSP
Pacientes no diabticos 20 42 46
Objetivo de terapia < 53 <7
Modificacin de terapia > 64 >8

BIBLIOGRAFA

BL0202 / REV02 01/2014 Pg. 2 Inserto Hemoglobina Glicosilada HbA1c