UNIVERSIDAD NACIONAL

INTERCULTURAL DE LA AMAZONIA

FACULTAD DE INGENIERA Y CIENCIAS AMBIENTALES

CARRERA PROFESIONAL DE INGENIERIA AGROINDUSTRIAL

PROYECTO DE INVESTIGACION

EVALUACION DE LA CAPACIDAD ANTIOXIDANTE Y POLIFENOLES

TOTALES EN LAS HOJAS DE GUAYABA ROJA (Psidium guajava L.) PARA
LA ELABORACIN DE INFUSION

Presentado por:
JUNIOR CORAL TORRES

YARINACOCHA-PUCALLPA
AGOSTO 2017
 I. PROBLEMA DE INVESTIGACION

I.1. Descripcin de la situacin problemtica

Uno de los males endmicos de nuestra region de Ucayali

constituye la desnutricin infantil as como la anemia, el cncer,
dolores estomacales, dolores menstruales entre nios,
adolescentes y ancianos de la amazonia peruana.

Esta situacin se da por dos razones, uno por desconocimiento de

los componentes nutricionales que tienen las plantas medicinales;
y el siguiente por escasez de recursos econmicos.

Una de las grandes tareas que se debe realizar para tratar de

superar esta situacin es la educacin nutricional y por otro lado
la oferta de una variedad de alimentos que permitan su
conservacin en cualquier poca del ao. El estudio de las hojas
de guayaba roja, ha sido muy poco profundizado y no estamos
seguros que se conozcan todas las propiedades nutritivas que
contengan las hojas para nuestro beneficio.

Las hojas de guayaba roja, sirve para usos medicinales,

tonificantes y revitalizantes que han sido descritas en diferentes
publicaciones como aplicaciones curativas de las siguientes
enfermedades. Adicionalmente figura informacin de usos en
casos de anemia, prdida de peso, buena digestin intestinal,
desinflamatoria, hipocolesterolamiante y antidiarreico dentro de
los cuales tambin sirve para la prevencin del cncer y otros. El
cual justifica que las hojas de guayaba roja sirven para varias
enfermedades que existen en nuestra region de Ucayali.

I.2. Enunciado del Problema

Influir capacidad antioxidante y polifenoles en las hojas de

guayaba roja (Psidium guajava L) para la elaboracin de infusin?
II. JUSTIFICACIN

Nuestra Amazona Peruana cuenta con muchas especies vegetales que

es reconocida actividad medicinal y otras muy poco conocidas, urge que
a travs de tcnicas empricas y cientficas modernas de investigacin,
se evale cientficamente los productos naturales procedentes de
plantas medicinales, especialmente la actividad antioxidante y
polifenoles totales, cuya importancia es vital para la prevencin e
interferencia de muchas enfermedades.

Con la presente investigacin pretendemos estudiar los componentes

fitoqumicos que sern determinadas en el presente as evaluar la
capacidad antioxidante y polifenoles totales en las hojas de guayaba
roja (Psidium guajava L) para la elaboracin de infusin, de este modo
deseamos contribuir a reducir en partes las enfermedades de nuestra
region de Ucayali.

Aspiramos a que, sea factible la elaboracin de infusin a partir de

hojas de guayaba roja (Psidium guajava L) donde genere trabajo a los
pobladores de nuestra region de Ucayali, lo cual es una alternativa de
ingreso econmico adicional para nuestra region.

III. OBJETIVOS

III.1. Objetivo general

Evaluar la capacidad antioxidante y determinacin de polifenoles

totales en las hojas de guayaba roja (Psidium guajava L) para la
elaboracin de infusiones.
III.2. Objetivos especficos

Identificar los componentes fisicoqumicos que tiene las hojas

de guayaba roja a travs de pruebas por espectrofotometra.

Evaluar la capacidad antioxidante y determinacin de

polifenoles totales en los extractos de hidroalcoholico y
alcohlico de las hojas de guayaba roja.

IV. HIPOTESIS.

Si es posible evaluar la capacidad antioxidante y polifenoles totales

en las hojas de guayaba roja (Psidium guajava L) para la
elaboracin de infusiones.

No es posible evaluar la capacidad antioxidante y polifenoles totales

en las hojas de guayaba roja (Psidium guajava L) para la
elaboracin de infusiones.

V. REVISIN DE LITERATURA

V.1. ANTECEDENTES

PEREZ PEREZ E. et al (2014). Determinacin de fenoles y

flavonoides totales en hojas de guayabo (Psidium guajava L.).
Determinaron fenoles y flavonoides en las hojas de guayaba, Las
plantas responden a variaciones ambientales, como las causadas
por la poca del ao, la fertilizacin y los daos ocasionados por
plagas y enfermedades, lo cual influye en la produccin de
metabolitos secundarios que regulan la actividad metablica, tal
como los fitoqumicos fenlicos (FF). Igualmente la produccin de
FF se ve afectada por el estado fenolgico de la planta. Con el
objetivo de determinar el contenido de fenoles y flavonoides
totales en plantas de guayabo (Psidium guajava L.), se
muestrearon hojas jvenes y recientemente maduras de la parte
media de los cuatro cuadrantes de la copa de seis plantas
ubicadas en la parcela experimental del Centro Socialista de
Investigacin y Desarrollo Frutcola (CESID-Frutcola y Apcola)
de CORPOZULIA (104946,6LN; 714629,2LO). La
extraccin de los FF se realiz con ultrasonido empleando 0,5g de
muestra seca y una mezcla metanol: agua (80:20% v/v). Para la
cuantificacin por espectrofotometra de absorcin UV-VIS, se
utiliz como estndar cido glico para fenoles totales y catequina
para flavonoides totales. Los resultados mostraron mayor
contenido de fenoles (9.071,46 mg AG.100 g-1 muestra seca) y
flavonoides (2.845,21 mg catequina.100 g-1 muestra seca) en
hojas jvenes en comparacin con las recientemente maduras
[(fenoles (4.663,57 mg AG.100 g-1 muestra seca) y flavonoides
(1.705,83 mg catequina.100 g-1 muestra seca)], destacndose la
hoja joven como el mejor estado fenolgico de la hoja para la
cuantificacin de fenoles y flavonoides totales en plantas de
guayabo.

ORDOES GOMEZ E. et al (2012). Cuantificacin de

polifenoles totales y actividad antioxidante en hojas, corteza,
flores y fruto de dos variedades de guayaba (Psidium guajava L.).
Cuantificaron polifenoles totales actividad antioxidante, En la
Amazona peruana la guayaba es un fruto nativo y no tiene
plantaciones establecidas, el agricultor deja a la guayaba que
crezca en los linderos ya que su madera es cotizada para utilizar
como lea (combustible), las hojas son muy utilizados en la
medicina folclrica y el fruto para el procesamiento de jugos y
rellenos para dulces elaborados de manera artesanal. El objetivo
fue objetivos cuantificar el contenido de polifenoles totales y
evaluacin de la actividad antioxidante medida por la capacidad
de inhibir radicales DPPH en hojas, flores, corteza y fruto de
dos variedades de guayaba (Psidium guajava L.). La hoja (tiernas,
maduras y yemas terminales), corteza, flores y frutos de las
variedades rosada y blanca fueron recolectados, blanqueados en
agua a ebullicin por 30 seg., oreado temperatura ambiente
(25C)/ 2-3 h, secado 65C/ 14- 16 h molido y envasado. En las
muestras se realiz la determinacin de polifenoles totales y la
capacidad de inhibir el radical del radical 2,2-diphenyl-1-
picrylhydrazyl (DPPH). Segn los resultados el mayor contenido
de polifenoles totales correspondi a las hojas tiernas de guayaba
rosada 16,466 0,46 EAG (g/100g) y blanca 15,388 0,24 EAG
(g/100g) y el menor contenido se encontr en el fruto variedad
rosado 1,435 0,01 EAG (g/100g) y blanco 0,363 0,01EAG
(g/100g). La mejor capacidad de inhibicin el radical DPPH lo
present las hojas tiernas de ambas variedades rosada IC
5014,086 0,09 g/mL y blanca IC 5015,463 0,25 g/mL y la
menor capacidad lo presento el fruto. En conclusin,
la guayaba tienen un potencial para ser usado como
neutraceutico a las hojas (tiernas, maduras y yemas terminales), corteza
y flores y como bebida funcional a la fruta procesada.

ENCISO GUTIERRZ J.et al (2011). Actividad antioxidante del

extracto hidroalcoholico de cuatro plantas medicinales y
estimulacin de la proliferacin de fibroblastos. Evaluaron el
efecto de los extractos hidroalcohlicos de las plantas: Bixa
Orellana (achiote), Eupatoriumtriplenerve (asmachilca), Physalis
peruviana (aguaymanto) y Equisetum arvense (cola de caballo)
sobre la proliferacin de cultivos primarios de fibroblastos.
Asimismo, evaluaron la capacidad antioxidante y los contenidos
de polifenoles y flavonoides. La Bixa orellana y la Physalis
peruviana mostraron la mayor capacidad antioxidante,
correspondindole a la Bixa orellana las mayores concentraciones
de polifenoles y flavonoides. Todas las plantas estimularon
diferencialmente la proliferacin de fibroblastos, habiendo
mostrado el Equisetum arvense la mayor estimulacin, pero baja
capacidad antioxidante y bajos contenidos de polifenoles y
 flavonoides; mientras que la Bixa orellana y la Physalis peruviana
estimularon moderadamente, correspondiendo la ms baja
estimulacin de la proliferacin de fibroblastos al
Eupatoriumtriplenerve.

V.2. MARCO TEORICO

V.2.1. Guayaba roja.

La guayaba roja de nombre cientfico (Psidium guajava L) es un

miembro importante de la familia dicotilednea de las mirtceas, que
se origin en Amrica central y en la parte meridional de Mxico,
pero en la actualidad crece en todas las regiones tropicales y
subtropicales del mundo (Somogyi et al. 1996). Es un rbol o un
arbusto de 2 a 8 m de altura, que posee una copa amplia y extendida
que se ramifica cerca del suelo. El tronco es corto con ramas bajas,
de color verde a caf claro y est cubierto de una corteza lisa y
escamosa (Malo y Campbell, 1994). Las ramitas son cuadrangulares.
Las flores son hermafroditas, axilares que se presentan solitarias o
en pequeos racimos; que dan origen al fruto por autofecundacin o
polinizacin cruzada (Baraona y Sancho, 1992). La fruta puede ser
redonda como una manzana, o puede estrecharse en un extremo
como una pera (Teubner et al, 1990). Posee una cascara de textura
rugosa de color amarillo, de aroma intenso y muy persistente (Garca
Rivas, 1991).

V.2.1.1. Clasificacin taxonmica

Segn ALVAREZ E, (2010), afirma que para la clasificacin se ha

tenido en cuenta la informacin obtenida de (Garca, 1995)), quienes
reportan que la especie est ubicada en la siguiente clasificacin:

Cuadro N 01. Clasificacin taxonmica de la Guayaba roja

Divisin Embriofita

Reino Vegetal
Divisin Spermatophyta
Subdivisin Angiospermas
Clase Dicotilednea
Orden Mirtales
Sub orden Myrtineae
Familia Myrtaceae
Gnero Psidium
Especie Guajava L
Fuente: lvarez E, 2010.

V.2.1.2. Composicin Qumica.

Segn ALVAREZ, 2010. En la Guayaba roja se han identificado

los siguientes componentes.

Cuadro N 02: Composicin Qumica de la Guayaba roja

Componentes Cantidad %
Caloras 33.0
 Hidratos de carbono (g) 6.7
Fibra (g) 3.7
Potasio (mg) 290.0
Magnesio (mg) 16.0
Provitamina A (mcg) 72.5
Vitamina C (mg) 273.0
Niacina (mg) 1.1

Fuente: lvarez E, 2010

Las hojas: Son lanceoladas de color verde oscuro,

con abundante pubescencia en el envs y glndulas
oleferas, se desarrollan en pares en cada nudo y
estn dispuestas en forma opuesta. Las hojas
tiernas se encuentran en posicin vertical con lo que
reducen el dao a la exposicin solar, y cuando
maduran se vuelven a exposicin solar, y cuando
maduran se vuelven horizontales para tener una
mayor exposicin al sol.

Cuadro N 03: Composicin qumica de las hojas de Guayaba

roja
Componentes

Carotenoides como provitamina A

Vitamina C
Niacina
Taninos
Piridoxina
Capacidad antioxidante
Flavonoides

Fuente: lvarez E, 2010

En sus flores: En algunos de los nudos adems de la

hoja y la yema vegetativa aparece una yema floral,
esto ocurre exclusivamente en ramas tiernas. Son
flores hermafroditas reunidas en inflorescencias
racimosas. El aparato reproductor femenino est
formado por un ovario nfero, plurilocular, pudiendo
 tener de tres a cinco lbulos, formado por cinco
carpelos sincarpos, con estilete simple, de 1.2 a 1.5
centmetros de longitud y presenta un color verde
claro en el estigma, el cual es subcapitado, las flores
de guayabo no presentan glndulas nectarferas. El
estigma permanece receptivo glndulas nectarferas.
El estigma permanece receptivo por 40 horas
despus de la apertura de la flor. El aparato
reproductor masculino, est formado por un
promedio de 350 estambres libres, la liberacin de
polen inicia antes de que la flor se abra, lo que
provoca una autopolinizacin de 26%, el resto es
fecundado por polinizacin cruzada, principalmente
por abejas, la viabilidad del polen es de 33 horas en
promedio.

V.3. TIPOS DE GUAYABA

a. Tai-kuo-bar: Es una fruta grande, redondeada, con un peso

de 400 a 800 gramos en promedio, con pulpa de color blanco,
jugosos y crujientes; es una fruta para consumo fresco.
b. Pai-bar: rbol fuerte y resistente a enfermedades; su fruta es
de color amarillo plido cuando madura y tiene forma de pera,
pesa en promedio 180 gramos, su pulpa es blanca y es un
rbol de gran produccin.
c. Lay-a-bar: Fruto alargado, color verde amarillento, de pulpa
verde acuosa, tamao promedio 300 gramos, con un
agradable olor y sabor.
d. Am-a bar: Fruto ovalado y alargado, de color amarillo plido,
de pulpa blanca y aromtica, con pesos de 300 gramos en
promedio; se utiliza esencialmente para jugo.
e. Siglo XX: Similar a Tai-kuo-bar, forma de pera y grande, color
verde plido, con un peso promedio de 450 gramos.
f. Taiwan-yeh-bar: Produce todo el ao, es de color verde
plido, con un peso promedio de 300 gramos y es usado para
la agroindustria.
V.4. Usos medicinales de la Guayaba roja

Se usa las Hojas, flor, corteza, fruto, raz para medicinas y

curaciones de enfermedades, La planta tiene las siguientes
propiedades y acciones: febrfuga, antisecretoria, antimicrobial,
bactericida, cicatrizante, emenagoga, hipoglicmica, laxativa,
nutritiva, espasmoltica. Esta planta tiene un uso muy antiguo y
actualmente es importante para tratar casi medio centenar de
padecimientos en casi todo el pas. Es utilizada con frecuencia en
enfermedades gastrointestinales como diarrea, escalofros y dolor
de estmago, mediante la infusin de las hojas tres veces al da o
como agua de uso; tambin puede tomarse con leche,
bicarbonato, azcar y hojas de hierbabuena. En la regin del
sureste se emplea en cocimiento para tratar la debilidad y vmito;
y en la zona de la Huasteca, la coccin de las hojas sirve para la
disentera y los clicos. En padecimientos de la piel, las hojas
solas o mezcladas con otras hierbas, se ponen a hervir y despus
se aplican de forma local en lavados o cataplasmas. Por otro lado,
se recomienda para la caries, hinchazn, bilis, escarlatina,
hemorragia vaginal, heridas, fiebre y deshidratacin. Las hojas
estrujadas se usan para curar heridas, lceras y reuma y
masticadas para curar las heridas en la boca. Las hojas del
guayabo junto con las hojas de Loranthus beengwess, Citrus
limon y Jatropha curcas han sido utilizadas en el tratamiento de
diabetes melitus como un efectivo hipoglucmico. La coccin de
las hojas alivia el malestar de pecho y garganta. En Venezuela el
cataplasma de hojas en el vientre se usa para combatir
obstruccin del bazo y para hinchazones. Los extractos fenlicos
(guaverina, cido psidiolico, quercetina) de hojas y flores han
demostrado actividad antibitica (G-) contra Eschericia coli,
Salmonella enteriditris y Shigella flexneri. Corteza: se usa para
cicatrizar heridas de la piel (llagas y lceras). El t de hojas y/o
corteza se usa como un tratamiento efectivo para desordenes
gastrointestinales (disentera, dispepsia, diarrea, dolores de
 estmago), vrtigo, nausea y para regular los perodos
menstruales. La raz, corteza, hojas y frutos verdes son muy
astringentes y se emplean contra disenteras atnicas y tambin
como remedio para la sarna y la picazn. Raz: para curar
hidropesa. El fruto fresco es laxante y tiene propiedades
hipoglicmicas. (Espinosa J, 1991)

V.5. Capacidad antioxidante

Se encontr que los extractos de fenoles obtenidos a partir de la

guayaba se determinaron su capacidad antioxidante por cuatro
mtodos diferentes (bloqueo de radicales ABTS, DPPH, FRAP,
decoloracin de -caroteno), con el fin de predecir su
comportamiento ante las ROS. Por el mtodo de ABTS, se
determin que la guayaba Palmira ICA-1 presenta la mayor
actividad antioxidante en todos los estados de maduracin
(Espinal M, 1998). El extracto de guayaba roja tiene carotenoides
con actividad antioxidante; por ejemplo, se ha evaluado los
efectos de la norbixina sobre la lesin de las clulas de
Escherichia coli DNA-inducido por radiacin ultravioleta, perxido
de hidrgeno (H2O2) y aniones superxidos, y se encontr que la
norbixina protege a las clulas contra estos agentes,
incrementando su sobrevivencia en por lo menos 10 veces.
Tambin se ha encontrado que tiene propiedades antimutagnicas
con un mximo de inhibicin de la actividad mutagnica H2O2-
inducida de 87%, segn la prueba de mutagenicidad en
salmonella (Jnior A. y col., 2005). El cncer y las enfermedades
cardiovasculares son las principales causas de muertes en la
civilizacin occidental. Numerosas investigaciones
epidemiolgicas y estudios experimentales han demostrado que el
aumento en el consumo de frutas y legumbres ayuda en la
prevencin de muertes por estas enfermedades. El efecto
 beneficioso de los alimentos vegetales se atribuye principalmente
a sustancias con actividad antioxidante, como los compuestos
polifenlicos, el cido ascrbico (vitamina C), los carotenoides y la
vitamina E, (BLOCK G., et al, 1992)
Se ha sugerido que estas sustancias aumentan la defensa
antioxidante del organismo, contra el estrs oxidativo,
responsable de diferentes tipos de daos celulares. Los
antioxidantes polifenlicos se encuentran comnmente en
vegetales, pero sus concentraciones son ms altas en las
frutas.32 El vino tinto, el arndano (Vaccinium corymbosum) y la
uva de mesa (Vitis vinifera) se han promovido mucho como
alimentos que previenen la arterosclerosis y el cncer, por su alto
contenido de compuestos polifenlicos. En las regiones tropicales
no es costumbre consumir vino y no se cultiva la uva ni el
arndano, pero existen muchas variedades de frutas que se
consumen directamente o como jugo, (Murillo E, 2002).

V.6. Los radicales libres y la oxidacin

La respiracin en presencia de oxgeno resulta esencial en la vida

celular de nuestro organismo, pero como consecuencia de la
misma se producen unas molculas, los radicales libres, que
ocasionan a lo largo de la vida efectos negativos para la salud por
su capacidad de alterar el ADN (los genes), las protenas y los
lpidos o grasas. En nuestro cuerpo hay clulas que se renuevan
continuamente (de la piel, del intestino) y otras que no (clulas del
hgado, neuronas). Con los aos, los radicales libres pueden
producir una alteracin gentica sobre el ADN, aumentando as el
riesgo de padecer cncer, y reducir la funcionalidad de las
segundas (las clulas que no se renuevan), lo que es
caracterstico del envejecimiento. Hbitos tan comunes como
practicar ejercicio fsico intenso, el tabaquismo, el consumo de
dietas ricas en grasas y la sobreexposicin a las radiaciones
solares, as como la contaminacin ambiental, aumentan la
produccin de radicales libres, (wang, s. Jiao h. 2000)
V.7. Estrs oxidativo y defensa antioxidante

Existen muchas evidencias de que la oxidacin de molculas

biolgicas, membranas y tejidos, inducida por el oxgeno activo y
mediada por radicales libres, se relaciona con un aumento en la
incidencia de las principales enfermedades degenerativas de los
seres humanos. Por otro lado, tambin se ha acumulado
abundante informacin sobre la capacidad de algunos
componentes de los alimentos para disminuir o prevenir los
procesos de oxidacin celular. El metabolismo oxidativo, proceso
biolgico normal, es capaz de generar radicales libres
oxigenados, altamente reactivos. Esas especies con oxgeno
activo incluyen el radical superxido (O2), el perxido de
hidrgeno (H2O2), el radical xido ntrico (NO) y el oxgeno
singlete (1O2). Adems, el ser humano est permanentemente
expuesto a radiaciones electromagnticas que rompen el agua
generando radicales OH. Debido a que los radicales libres se
producen constantemente in vivo, los humanos han desarrollado
diversos mecanismos de defensa antioxidante, como medio de
proteccin. La enzima superxido dismutasa remueve el (O2),
convirtindolo en H2O2, el cual es transformado por las enzimas
catalasa y glutatin peroxidasa en agua (H2O). Nuestro
organismo tambin posee molculas que remueven los radicales
libres por reaccin directa (no cataltica), tales como el glutatin
reducido, los tocoferoles (vitamina E) y el cido ascrbico
(vitamina C).

V.8. Compuestos polifenlicos

Los compuestos polifenlicos constituyen una clase de

metabolitos secundarios biosintetizados por el reino vegetal,
encontrados en alimentos derivados de fuentes vegetales. Los
polifenoles comprenden un amplio rango de sustancias que
poseen uno o ms anillos aromticos con por lo menos un grupo
hidroxilo. Entre ellos podemos mencionar a los flavonoides,
isoflavonoides, antraquinonas, antocianidinas y xantonas, a los
 cidos fenlicos, fenoles simples, cidos hidroxicinmicos,
fenilpropenos, ligninas, entre otros, los cuales actan
generalmente como capturadores y estabilizadores de radicales
libres, pudiendo producir que la accin de metales aquellos que
poseen grupos carboxlicos en su estructura. Tambin han sido
reportados trabajos que atribuyen su accin antioxidante a la
inhibicin de enzimas prooxidantes como la lipooxigenasa. El
mecanismo de proteccin de los polifenoles (representado por
AOH) ocurre en el estado inicial y ms efectivamente durante el
estado de propagacin de la oxidacin, por captura de los
radicales libres (R), inhibiendo de esta manera la reaccin en
cadena. R + AOH RH + AO
La transferencia de electrones desde el radical libre (R)
determina que el antioxidante se transforme en una molcula
radical activa y este radical as formado debe ser lo
suficientemente estable para que la funcin antioxidante sea
efectiva. A su vez el radical formado puede ser recuperado por
otras sustancias antioxidantes (reductoras), como el ascorbato
(Universidad nacional del nordeste 2003).

V.9. Infusin

Las infusiones son bebidas preparadas con agua a punto de

hervir que se le agrega a hojas secas, partes de flores o hierbas
aromticas, la diferencia consiste en que se le denomina t a la
bebida hecha con una planta llamada Camelia sinensis pero
bsicamente un t es una infusin, esta bebida se puede
consumir caliente pero ltimamente se ha adquirido el gusto por
los consumidores de consumirlo frio.
 VI. MTODOS

VI.1. Ubicacin Y Descripcin del rea de Estudio

La investigacin se realizara en las instalaciones de la universidad

nacional intercultural de la amazonia ubicada en la Carretera a
San Jos km 0.5, Puerto Callao, Coordenadas: 82058S
743517O (mapa), se empleara los ambientes del laboratorio de
calidad de aguas. El proyecto de investigacin tiene un periodo
de seis meses para su respectiva ejecucin, contando con la
disponibilidad de materiales y equipos necesarios para su
ejecucin.

VI.2. Identificacin y descripcin del material experimental

VI.2.1. Equipos

Micro pipetas (10 100 y 100 - 1000) l

Tubo de ensayo
Gradillas
Balanza gramera de 2 decimales
Espectrofotmetro Genesys 6 (Thermo Electrn
Corporation) U. S. A.
Centrifuga modelo MIKRO R22 (Hettich Zentrifugen)
Germany.
Homogenizador modelo VORTEX GENIE-2 (Scientific
industrias SITM) U. S. A.
Microtubos (1.5 2.0 mL.)
Vasos de precipitacin (100 mL., 50 mL., 10 mL.).
Fiolas (1000 mL., 500 mL., 100 mL., 50 mL., 10 mL.).

VI.2.2. Reactivos
1,1 diphenyl-2-picryl-hydrazyl (DPPH)
Alcohol etanol al 96%
Agua destilada
Carbonato de sodio al 20%
Folin ciocalteus, merk
cido glico.

VI.2.3. Material biolgico

Hojas de Psidium guajava L, GUAYABA ROJA

VI.3. Variables

VI.3.1. Variable independiente

Hojas de guayaba roja
temperatura
VI.3.2. Variable dependiente
Capacidad antioxidante
Polifenoles totales

VI.4. Poblacin y muestra

Poblacin vegetal: las hojas de guayaba roja (Psidium guajava L).,

que se encontr y se encuentra hasta el da de hoy en la
Universidad Nacional Intercultural de la Amazonia, que se ubica
en el distrito de Yarinacocha, provincia de Coronel Portillo,
departamento de Ucayali, carretera San Jos, Km.0.5.

Muestra vegetal: Se emplearon aproximadamente 120 gramos de

las hojas de Guayaba roja (Psidium guajava L). que fueron
recolectadas de la Universidad Nacional Intercultural de la
Amazonia, ubicado en el distrito de Yarinacocha departamento de
Ucayali para almacenarlas luego ser lavados, donde luego las
hojas fueron secadas en estufa a 60 y 70C por 5 das,
posteriormente se pas a moler con una moledora manual y se
obtuvo un polvillo que fue utilizado para los extractos respectivos
realizados.

VI.5. Tratamiento
Factor 1: secado
Niveles: 60 y 70C
Factor 2: temperatura
Niveles: 60 y 70C
Factor 3: mtodo del DPPH

VI.5.1. Metodologa experimental

Figura 01: Diagrama para la extraccin de actividad
antioxidante y polifenoles totales de las hojas de Guayaba
roja.

Hojas frescas

T=60C T=70C
 Extraccin Extraccin
Hidroalcoholico Alcohlico

R2 R3 R1 R2 R3
R1

FUENTE: Elaboracin propia

Mtodo de DPPH

Figura 02: Diagrama de flujo para la elaboracin de infusin de hojas de

Guayaba roja.
Recepcin M. P
Hojas de G.R

Hipoclorito de Lavado y
sodio desinfectado

T = 50, 60 y 70C
Secado
t = 5 dias

Molino manual Molido

Balanza analtica Pesado

gramera

Bolsas de papel filtro Envasado

FUENTE: Elaboracin propia

VI.5.2. Determinacin de la capacidad antioxidante y polifenoles

totales.

Preparacin de los extractos hidroalcoholico y alcohlico

Se pes 2 g del polvo seco de cada estadio de hoja; se aadi
10 ml de alcohol a 96 y 10 ml agua destilada respectivamente
y se acondiciono a temperatura ambiente; luego se filtr para
as obtener los extractos hidroalcoholico y alcohlico.
Acondicionamiento del extracto antes de su anlisis
 Una vez obtenido el extracto de las muestras, se filtr con un
papel filtro Watman N 42., luego se centrifugo a 10000 rpm a
4 C por 5 minuto.
Para la determinacin de la capacidad antioxidante por el
mtodo del DPPH mtodo descrito por Brand - Williams et
al., (1995). Se us el reactivo 1,1 diphenyl-2-picryl-hydrazyl
(DPPH) el que se disolvi en metanol al 96%, este radical libre
(DPPH) es estable y se utiliz como indicador para medir la
capacidad de secuestro de cualquier compuesto que posea
actividad antioxidante. La reaccin se gener en una cubeta
de poliestireno (1 cm x 1 cm x 4,5 cm), con un volumen de 25
l de muestra y 975 l de radical DPPH. Luego
inmediatamente se procedi a la lectura de absorbancia en un
espectrofotmetro, las lecturas se registraron a 515 nm por
espacio de 5 minutos.
Para la cuantificacin de polifenoles totales: se utiliz la
muestra (60 mg/ml) del extracto hidroalcoholico y alcohlico.
En un tubo de ensayo se coloc 1580 l de agua destilada, 20
l de muestra, 100 l de solucin de fenol folinCiocalteu y
finalmente 300 l de Carbonato de Sodio (Na2CO3) al 20%;
para completar la reaccin se dej reposar 2 horas a
temperatura ambiente. Luego se monitoreo la absorbancia a
700 nm.

VI.5.3. Preparacin de infusin de hojas de guayaba roja

Recepcin de materia prima: La materia prima (hojas
de guayaba roja) fue recolectada en buen estado, para
luego ser llevados al laboratorio para realizar los
anlisis correspondientes.
Lavado y desinfectado: se lavaron con agua potable e
hipoclorito de sodio.
Secado: el secado se realiz en estufa a temperatura
de 60 y 70 C durante 5 das.
Molido: se realiza en molino manual hasta obtener un
polvo. Para as poder envasar con mayor facilidad.
 Pesado: el pesado se realiza en balanza gramera ya
que se pesara pequeas cantidades.
Envasado: se realiza en bolsas de papel filtro, para
luego ser sellado y embalado.

VI.6. Recoleccin de los datos

VI.6.1.Fuentes de informacin
Ficha de registro o localizacin: Internet, bibliografas
Informacin de laboratorio: cmara fotogrfica, libreta
de apuntes.

VI.6.2.Tipo de muestreo
Se realizara un muestreo por anlisis organolptico donde
se elaborara l te filtrante en las proporciones de 0.5, 1, 1.5
gr evaluados por los alumnos del X ciclo del curso de
tecnologa de plantas medicinales de la Universidad
Nacional Intercultural de la Amazonia.

VI.7. Procesamiento de datos

Se procesara mediante programas ANOVA estadsticos stapgrifs
lo cual ayuda a evaluar la capacidad antioxidante y polifenoles
totales. Tambin se realizara mediante diagramas, clculos, etc.
 VII. CRONOGRAMA

El cronograma de trabajo que inicia en Agosto 2017 y concluye en

Febrero del 2018, lo cual se muestra a continuacin.

ACTIVIDAD MESES
1 2 3 4 5 6
Recopilacin de informacin X X X X X X
Elaboracin del proyecto de investigacin X X X
Revisin de literatura X X X X X X
Presentacin, revisin y aprobacin de X X X
proyecto
Adquisicin insumos (Hojas) X X X
Preparacin de la muestra. X X X X
Evaluacin de capacidad antioxidante y X X X X
polifenoles
Procesamiento de datos X X X X X
Redaccin X X
Presentacin y aprobacin X X X
Sustentacin X

VIII. BIBLIOGRAFA

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