MANUAL DE

PRCTICAS DE
LABORATORIO

INGENIERA EN BIOTECNOLOGA

BIOQUMICA MICROBIANA
 MANUAL DE PRACTICAS DE LABORATORIO ITA-IBT

FICHA TECNICA

FICHA TCNICA
BIOQUMICA MICROBIANA

Fecha:
Nombre del catedrtico: Guillermina Snchez Martnez

Nombre de la prctica: Enzimas

Clave:

Nmero de prctica: 1 Duracin en horas: 2

Justificacin: La aplicacin de tcnicas para la identificacin de enzimas en

diferentes compuestos y los factores que afectan la actividad
enzimtica, proporcionar a los alumnos herramientas que
incrementarn su competitividad como ingenieros biotecnlogos.

Objetivos/Resultados de Que el alumno comprenda los fundamentos de los mtodos de

aprendizaje: identificacin de enzimas y sus aplicaciones en la industria e
investigacin.
Laboratorio donde se desarrollo de la prctica:

Laboratorio II de Biotecnologa
Actividades a desarrollar:
Identificar la presencia de enzimas en diferentes tejidos biolgicos.
Identificar factores que afectan la actividad enzimtica.

Evidencia a generar en el desarrollo de la prctica:

Reportes por equipo de trabajo.

COMPETENCIAS HABILIDADES
Utilizar tcnicas de anlisis para Al finalizar la prctica, el alumno debe ser
determinar las caractersticas de los capaz de:
productos biotecnolgicos mediante Analizar muestras biolgicas para la
parmetros fsicos, qumicos. identificacin de enzimas.

Realizar el informe de los resultados de Comprender la utilidad de la tcnica

los anlisis que permitan caracterizar el para el anlisis de enzimas de inters
producto con base a sus propiedades biotecnolgico
fsicas, qumicas y biolgicas

Elabor: Flor de Mara Garca Paz Revis:

2
 MANUAL DE PRACTICAS DE LABORATORIO ITA-IBT

INTRODUCCIN
1. Qu son las enzimas?
2. Cmo funcionan las enzimas?
3. Qu factores afectan la actividad enzimtica?
4. En qu alimentos se encuentra la enzima catalasa?
5. En qu forma se encuentra la catalasa en cada uno de los alimentos en los que se
encuentra en mayor cantidad?
6. En qu unidades se reportan?
7. Cul es la temperatura optima de la catalasa?
8. Cul es el pH ptimo de la catalasa?
9. A qu temperatura se desnaturaliza la catalasa?
10. En qu alimentos se encuentran en mayor cantidad y como se encuentran?
11. De qu manera acta la catalasa? y por qu libera oxigeno?
12. La catalasa de las muestras est en las mismas concentraciones?
13. Cul es la diferencia entre las catalasas animales y vegetales de las muestras que
trabajaron?
14. Qu tipo de polmeros contienen las muestras que trabajaron?
15. Qu tipo de azucares tienen estas muestras?

OBJETIVO
Que el alumno adquiera competencias para identificar enzimas de diferentes muestras
biolgicas.
Que el alumno adquiera las competencias para tratar correctamente muestras de enzimas
a analizarse posteriormente.
Que el alumno analice los efectos en el funcionamiento de las enzimas, como resultado de
cambios fisicoqumicos presentes en las soluciones de reaccin enzimtica

MATERIALES REQUERIDOS POR EQUIPO (Cristalera)

CANTIDAD MATERIAL ESPECIFICACIONES
1 Gradilla para tubos de ensayo

10 Tubos de ensayo
1 Bulbo para pipeta
4 Pipeta 5ml
1 Mechero
2 Pipetas Pasteur con bulbo
1 Pinzas para tubo de ensayo
1 Termmetro
1 Placa de porcelana
Goteros
2 Morteros

3
 MANUAL DE PRACTICAS DE LABORATORIO ITA-IBT

EQUIPO REQUERIDOS
NOMBRE ESPECIFICACIONES
Bao Mara

OTROS MATERIALES REQUERIDOS

(No suministrados por el Laboratorio)
CANTIDAD MATERIAL ESPECIFICACIONES
1 Papa
1 Hgado de pollo
1 Hongo (setas)
1 Hoja de espinaca
5 Gasas
Hielo

REACTIVOS REQUERIDOS
NOMBRE CANTIDAD S I R O
Perxido de Hidrgeno 50ml
Solucin 3M de HCl 20ml
Solucin 3M de NaOH 20ml
S: Riesgo a la Salud I: Riesgo de Incendio R: Riesgo de reactividad O: Riesgo Especifico

Manejo y disposicin de los reactivos requeridos:

Manejo de residuos no peligrosos y peligroso y en qu tipo de recipiente ponerlo

En este espacio se pone la manera en que se manejan y la disposicin que se le

dar a cada uno de los desechos (qumicos y biolgicos) que se generen durante la
prctica.

Nombre del reactivo Datos importantes de la ficha tcnica

Incendio: combate,
derrame

Salud
Ambiente

Datos de la ficha de seguridad de cada uno de los reactivos que se

utilizarn en el laboratorio.
Datos de la ficha de seguridad de cada uno de los reactivos que se
utilizarn en el laboratorio
Datos de la ficha de seguridad de cada uno de los reactivos que se
utilizarn en el laboratorio

4
 MANUAL DE PRACTICAS DE LABORATORIO ITA-IBT

PROCEDIMIENTO O METODOLOGA
Preparacin de las muestras:

1. Corte en pedazos por separado las muestras de papa, hgado, setas y espinaca.
2. Usando una licuadora o mortero, muela el material con un poco de agua hasta diluir parte
de la muestra; no muela excesivamente para que no queden pedazos muy pequeos del
material.
3. De ser necesario, filtre el macerado con una gasa.

Funcionamiento de la enzima catalasa en diferentes organismos:

1. Rotule cinco tubos de ensayo con las letras A a la E.
2. Ponga 3ml de cada muestra en los tubos como se muestra:
A Hgado
B Papa
C Setas
D Espinaca
E - Agua
3. Marque el nivel hasta donde llega cada muestra.
4. Ponga 3ml de perxido de hidrgeno en cada tubo de ensayo.
5. Observe la reaccin que sucede en cada tubo y marque el cambio en el nivel del lquido.
6. Tabule los resultados en la tabla:
TUBO REACCIN AL AGREGAR PERXIDO VOLUMEN FINAL EN EL TUBO
A
B
C
D
E

Efecto de la temperatura sobre el funcionamiento de las enzimas:

1. Rotule cinco tubos de ensayo del 1 al 5 y caliente un bao de agua hasta 37C y otro
hasta 80C.
2. Aada 5ml de muestra de hgado a cada tubo.
3. Mantenga los tubos a las siguientes temperaturas:
Tubo 1: 80C por 15 minutos
Tubo 2: 37C por 15 minutos
Tubo 3: Temperatura ambiente
Tubo 4: Hielo por 30 minutos
Tubo 5: Refrigerador a 4C por 30 minutos
4. Aada 2ml de perxido de hidrgeno al tubo 1.
5. Mida el tiempo transcurrido desde que aadi el perxido hasta que se comienzan a
producir burbujas y antelo en la tabla.
6. Repita con los dems tubos.
7. Compare sus resultados en trmino de tiempo de reaccin Vs temperatura.

5
 MANUAL DE PRACTICAS DE LABORATORIO ITA-IBT

Tubo Temperatura Tiempo Observaciones

1 80C
2 37C
3 Ambiente
4 Hielo
5 Refrigerador

Efecto del pH sobre la actividad enzimtica:

1. Rotule tres tubos de ensayo A, B y C.
2. Aada 3ml de la muestra de hgado a cada tubo.
3. Aada 3ml de HCl y 3ml de NaOH a los tubos como se muestra, y agite suavemente hasta
mezclar:
Tubo A 3ml de 3M HCl
Tubo B 3ml de 3M NaOH
Tubo C Control (sin cido ni base)
4. Aada 3ml de perxido de hidrgeno a cada tubo.
5. Observe y anote las reacciones en la tabla:
Tubo Tiempo que toma la Descripcin comparativa
reaccin en completarse de las reacciones
A
B
C

REPORTE DE LA PRCTICA

EVIDENCIAS DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS DURANTE LA PRCTICA

En este espacio se ponen las observaciones, graficas, clculos matemticos dibujos,
datos, esquemas, tabla de datos, etc. Que se generaron durante el desarrollo de la
prctica.

DISCUSIN
1. Qu ocurri al aadir el perxido?
2. Ocurri lo mismo en todas las muestras?
3. Por qu se forman burbujas?
4. Qu otros organismos podran usarse para esta prueba?
5. Por qu no se aadi el perxido directamente a los tejidos sin macerarlos?
6. Explique por qu la gran mayora de las especies de plantas y de animales producen la
enzima catalasa.
7. Cmo se relacionan la temperatura y la actividad enzimtica?

6
 MANUAL DE PRACTICAS DE LABORATORIO ITA-IBT

8. Qu le sucede a las enzimas cuando se exponen a temperaturas extremas (muy fras o

muy calientes)?
9. Cmo se relacionan el pH y la actividad enzimtica?
10. Las enzimas del estmago funcionan ptimamente a un pH de 2. Cmo se afectara
la digestin si el pH aumenta a 4?
11. Puede mencionar otras enzimas que actan en nuestro cuerpo?
12. Qu efecto podra tener una fiebre alta prolongada sobre el funcionamiento de las
enzimas?
CONCLUSIN

BIBLIOGRAFA
Consultada por el maestro y por el alumno