MATERIALES Y MTODOS

1. Obtencin de extracto etanlico.

El material vegetal empleado para la obtencin del extracto etanlico
consisti en pesar 30 g hojas aparentemente sanas y totalmente
desarrolladas de Schinus molle molle, colectadas en la ciudad
universitaria, las cuales se lavaron con 5 mL leja al 4% y con 100 mL agua
destilada, se le volvi a enjuagar con agua destilada para eliminar el exceso
de leja. Posteriormente, se mezcl con mL de alcohol etlico y se dej
macerar por .. das en un frasco de vidrio de 500 mL totalmente sellado con
papel aluminio. Pasado los ... se realiz la extraccin del crudo a presin
reducida en un rotavapor, el extracto resultante se llev a centrifugar y el
sobrenadante se guard en un frasco totalmente cubierto y se guard a 8C
en una refrigeradora.

2. Obtencin del extracto acuoso.

El material vegetal empleado para la obtencin del extracto acuoso
consisti en pesar 5 g. de Schinus molle en 100 mL de agua destilada, una
vez que pas a ebullicin se esper 10 minutos a temperatura de ebullicin
y luego se dej enfriar. Posteriormente se filtr y se agreg la diferencia en
agua destilada para la obtencin de 100 mL de extracto acuoso de molle
al 5%.

3. Preparacin del medio Agar-papa-dextrosa (PDA)

Se procedi a cortar la papa, luego de pesarla se puso a cocinar con 500 ml
de agua destilada en un vaso de precipitacin de 1 L hasta que la papa
comenz a deshacerse. Pasando un tiempo prudente se filtr lo obtenido en
un matraz de Erlenmeyer de 1 L, en donde se le agrego el agar y el azcar,
y se puso a calentar para que se disuelva todo. Una vez disuelto se tap
con ayuda de una torunda de algodn y gasa, y se calent para que se
pueda disolver todo. Ya al tener todo disuelto se distribuy el contenido en
4 matraces de 250 ml, en donde el contenido fue de 100 ml (testigo), 95 ml
(tratamiento 1), 90 ml (tratamiento 2), y 85 ml (tratamiento 3). En los
tratamientos 1, 2 y 3 se igualo a 100 ml con la solucin del decocto
obtenido siendo agregados, 5 ml, 10 ml, y 15 ml respectivamente. Ya con
los matraces perfectamente sellados se les puso en la autoclave para su
esterilizacin. Despus de terminar la autoclave, se esper un tiempo
prudente para su enfriamiento y poder manipularlo para su dispersin en las
placas petris esterilizadas. Ya con el medio coagulado se pudo cultivar el
hongo.
4. Ensayo de actividad antifngica:
El ensayo se llev a cabo envenenando el medio Agar-papa-dextrosa
(PDA) con concentraciones de 5 mL, 10 mL y 15 mL del decocto de
extracto de molle igualando todo a 100 mL. El medio envenenado fue
distribuido en distintas placas petris y se espero que coagulara. Ya con el
medio de cultivo listo se dispuso a cultivar el hongo y a continuacin se
espero al 4to dia su primera revisin de la actividad.