DETERMINAR LA ESPECIFICIDAD ENZIMTICA:

Analisis de Resultados

En este experimento utilizamos almidn, sacarosa, cloruro de sodio, amilasa salival y amilasa
artificial. La enzima para poder realizar sus funciones necesita de ciertos activadores llamados
COFACTORES en este caso el cofactor es el cloruro de sodio , un activador inorgnico , que al
ser colocado junto con el almidn , un polisacrido de maltosas unidas por el enlace alpha 1, 4
unida a la amilasa salival extrada de nuestra compaera se espera que exista una actividad
enzimtica , ya que por teora sabemos que la amilasa salival puede romper enlaces 1,4 esto
se evidencia cuando finalmente le agregamos lugol a la solucin despus de someterla a la
temperatura normal de nuestro cuerpo que es la de 37 grados centgrados en bao mara
durante 20 minutos, entonces nos damos cuenta que el almidn que debera colorearse de
azul, no lo hace , la solucin permanece incolora casi amarillenta , es decir ya no hay existencia
de sustrato , por lo tanto ha habido actividad enzimtica, sin embargo, en la solucin de
sacarosa, esto no sucede, la coloracin azul si se evidencia al colocar lugol a la solucin ,
justamente porque la amilasa salival no tiene actividad enzimtica en la sacarosa , porque esta
posee enlaces 1,2, por lo tanto se va a evidenciar aun el sustrato en la solucin.

Luego a las mismas soluciones en lugar de agregarle lugol le agregamos el reactivo de fehling
para poder evidenciar la presencia de carbohidratos reductores

EFECTO DE LA TEMPERATURA

Para poder evidenciar el efecto de la temperatura en las reacciones enzimtica colocamos un

ph adecuado (buffer 6,8) con un COFACTOR o ACTIVADOR ENZIMATICO ( Clorurp de sodio ) , la
amilasa salival( la enzima) , pero a distintas temperaturas una en hielo, otra en la temperatura
de 37 grados y otra en fuego a 100 grados durante 10 minutos, con todo eso listo colocamos el
sustrato (ALMIDON). Para poder evidenciar si hubo o no activdad enzimtica le agregamos dos
gotas de lugol a la solucin , con esto se observo en el experimento que realizamos que la
solucin expuesta a una temperatura de 0 grados no fue colorada por el lugol, es decir si hubo
actividad enzimtica, PERO esto no debio haber pasado ya que a esa temperatura la enzima
permanece inactiva hasta que pueda alcanzar una temperatura optima y exista una actividad
enzimatica , es por eso que expuesta a la temperatura de 37 grados (la temperatura normal en
nuestro cuerpo), si debe haber una actividad enzimtica y efectivamente los resultados
coinciden con la teora, la solucin no se coloreo azulina, por la no presencia del sustrato que
evidencia una actividad enzimtica. Finalmente cuando la solucin esta expuesta a una
temperatura de 100 grados , esta se torna de un color negro , lo que indica que las molculas
de la enzima se han desnaturalizado por lo tanto no hubo actividad ezimatica porque esta
perdi su estructura terciaria.

EFECTO DEL PH

Para poder evidenciar el efecto del ph en las reacciones enzimticas , vertemos cloruro de
sodio y almidon en los tres tubos de ensay pero con diferentes PHs en cada uno de ellos, uno
de ellos fue el Ph 6,8 , el ph optimo de la amilasa salival segn teora , y en los otros dos tubos
un Ph acido(3,8) y uno bsico de 8,9 . al colocar la amilasa salival en los tres tubos y despus de
someterlo a bao maria a una temperatura optima, agregamos el lugol para observar la
presencia de sustratos en las diferentes soluciones. Se pudo observar que en la solucin con
ph 6,8 el color fue un amarillo claro, es decir si hubo actividad enzimtica

DETERMINAR COLABORADOR DE ACTIVIDAD ENZIMATICA:

En este experimento utilizamos dos tubos de ensayo en los cuales se virtieron los mismos
sustratos (ALMIDOSN) el mismo pH (el Ph optimo de 6,8) , la misma enzima (LA AMILASA
SALIVAL) y se sometio a una temperatura aecuada de 37 grados , con la diferencia de
colaboradores, uno con cloruro de sodio y otro con Sulfato de Cobre. Al reaccionar con el
cloruro de sodio se puede obervar que al momento de agregar el lugol la solucin es incolora
casi amaillezca