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INFORME DE LABORATORIO
I. INTRODUCCION
Todas las bacterias patgenas conocidas vehiculadas por alimentos son mesofilas
y en algunos casos contribuyen con su presencia a los recuentos en placa
encontrados.
II. OBJETIVOS
Determinar el nmero de microorganismos aerobios mesofilos viables por el
mtodo de recuento estndar presentes en una muestra de refresco.
III. METODOLOGIA:
3.1.2 Procedimiento
Ejemplos
Recuento calculado APC
12,700 13,000
12,400 12,000
15,500 16,000
14,500 14,000
N = C .
[(1 x n1) + (0.1 x n2)] x (d)
Donde:
N = Nmero de colonias por ml o g de producto.
C = Sumatoria de todas las colonias en todas las placas contadas.
n1 = Nmero de placas en la primera dilucin contada.
n2 = Nmero de placas en la segunda dilucin contada.
d = Dilucin de la cual los primeros recuentos fueron obtenidos.
Ejemplo
1:100 1:1000
232,244 33,28
= 537/0.022
= 24,409
= 24,000
Ejemplo
Colonias
1:100 1:1000 EAPC/ml (g)
18 2 <2,500
0 0 <2,500
Ejemplo
Colonias
1:100 1:1000 EAPC/ml (g)
TNTC 640 640,000
TNTC, demasiado numeroso para el recuento
EAPC, recuento aerobio en placa estimado
Ejemplo
Colonias/Dilucin
1:100 1:1000 EAPC/ml (g)
TNTC 7,150a > 6,500,000 EAPCb
TNTC 6,490c > 5,900,000 EAPC
a
Basado en el rea de la placa de 65 cm2.
b
EAPC, APC estimado.
c
Basado en el rea de 59 cm2.
a. Agar PCA
b. Agua peptonada
c. Placas petri de 10x100
d. Tubos de ensayo de 15x125
e. Pipetas de 1, 5, 10 y 20 ml
f. Agua destilada
g. Matraz de 200 y 500 ml
h. Mecheros
i. Bombilla de succin
3.2.2 Procedimiento
IV. RESULTADOS
N = C .
[(1 x n1) + (0.1 x n2)] x (d)
Donde:
N = 25 x 1 / d
N = 25 x
N= 250
Al nosotros sembrar tan solo una placa, se ha de tomar el valor obtenido como
el representante de cada dilucin
En este caso, teniendo un rango de colonias aceptables como normales para la
ICMSF se tiene a los valores comprendidos entre 30 y 300 ufc/ml; es asi que
nuestro valor obtenido en la mayor dilucin: 23 colonias, est muy por debajo
del mnimo de colonias segn la ICMSF, es por ello que se procede de la
siguiente manera:
EAPC/ml = 23 x
EAPC/ml = 230
V. DISCUSION
En consecuencia de la muestra tomada de mercado Leoncio Prado de la ciudad de
Tacna, se presentarn todos los resultados de los valores promedio del recuento de
aerbios mesfilos con el mtodo del recuento estndar en placa, del nico muestreo
realizado, en donde todos los materiales se encontraban en condiciones limpias, es
decir, que aun no haban sido utilizados en el proceso, para ser luego sometidos al
anlisis microbiolgico. La tabla N 01 muestra el comportamiento de la formacin de
colonias aerobias mesfilas presentes en las diversas etapas del proceso.
Tras trabajar con dos fuentes bibliogrficas, se han obtenido dos resultados distintos
pero estrechamente relacionado, en donde: la FDA, posee un rango de colonia menor
con respecto a la ICMSF, ya la para la FDA el rango figuran entre 25 a 250 ufc/ml;
mientras que la ICMSF de 30 a 300 colonias. El clculo de los resultados tambin es
para ambas fuentes diferente, ya que mientras la FDA se basa en un formula
preestablecida tomando el mnimo rango de colonias (25 ufc) multiplicado por el factor
de dilucin, la ICMSF toma como resultado al valor obtenido de la multiplicacin de el
numero de colonias obtenidas tras el recuento de la placa donde se sembr la mayor
dilucin por el factor de dilucin, encontrando as que:
Si viene es cierto, son resultados con valores diferentes pero expresan ambos un
numero de colonias aerobias mesfilas dentro del rango normal de ambas fuentes;
es decir que los valores obtenidos expresan que la muestra tomada (refresco casero),
no ha estado sumamente contaminada ya que el numero de ufc obtenido no son
significativamente altos, y adems estn muy por debajo del rango normal de
mesfilos aerobios.
Adems, el recuento de aerobios mesfilos es un prueba que nos permite verificar la
efectividad de los procedimientos de limpieza y desinfeccin, as como determinar si
las temperaturas aplicadas en los procesos fueron las adecuadas en el caso del
refresco seria si el agua ha sido o no hervida, tambin determinar el origen de la
contaminacin durante los procesos de elaboracin de los alimentos, verificar
condiciones ptimas de almacenamiento y transporte, y obtener informacin acerca
de la vida til de los alimentos, as como indicar alteracin incipiente en ciertos
alimentos. (ICMSF, 2000)
Es por ello, que se puede asegurar que la muestra tomada del mercado Leoncio
Prado, no ha presentado signos de haber estado sumamente contaminada, tya que
los valor indicadores de contaminacin se encuentran del rango bajo normal.
Sin embargo, esto valores obtenidos del recuento estndar en placa estimado no son
lo suficientemente exactos como para aseverar si un alimento es apto o no para el
consumo, tan solo un recuento estndar en placa, ofrece valores confiables para
determinar la aceptabilidad o el rechazo de la muestra examinada (ICMSF, 2000)
La ICMSF, y el FDA, son fuentes que establecen parmetros internacionales, sin
embargo internamente en el Per rige una normativa la cual indica si dentro del pas
un alimento es consumible o no, por estar dentro del rango normal de los
microorganismos encontrados en ellos; es as dicha normativa se titula Norma
sanitaria que establece los criterios microbiolgicos de calidad sanitaria e inocuidad
oara los alimentos y bebidas de consumo humano con resolucin ministerial N 591-
2008-MINSA y publicado el 29 de agosto del 2008. En donde figuran para bebidas no
carbonatadas en este caso refresco casero; un rango de aerobios mesfilos entre 10
y 100 por mililitro; es decir, los valores obtenidos de 23 colonias estn dentro del
rango aceptable de estos microorganismos aerobios mesfilos, por lo que se asegura
una vez ms que la muestra obtenida, no ha estado lo suficientemente contaminada
como para declararla no apta para el consumo.
VI. CONCLUSIONES
El recuento estndar en placa, permite determinar el nmero de ufc/ml de
microorganismo contaminantes encontrados en la muestra.
Los microorganismos aerobios mesfilos son indicadores de alteracin segn
la normativa del Peruano, ms no indicadores de la calidad higinica.
La muestra de refresco casero trabajada en laboratorio no ha estado
sumamente contaminada, ya que los valores de ufc/ml obtenidos se encuentran
dentro del rango normal para la normativa que rige en el Per para el consumo
de alimentos.
Existen diferencias en cuanto a las dos fuentes de referencia en la practica, la
ICMSF y el FDA, donde en primer lugar los rangos de contabilizacin de
colonias es distinto 30 a 300 ufc y 25 a 250 ufc respectivamente. En segundo
lugar el procedimiento para la obtencin de resultados mientras que uno se
basa en un promedio y otro emplea una formula. Y en tercer lugar el modo de
expresar los resultados.