Polimorfismo del acetato de acetonida de triamcinolona y su

implicacin para la estabilidad morfolgica del producto

farmacutico acabado

Jian-Rong Wang , Bingqing Zhu , Zaiyong Zhang , Junjie Bao , Gaojin Deng , Qiaoce

Ding y Xuefeng Mei *

Pharmaceutical Analytical & Solid-State Chemistry Research Center, Instituto de Materia Mdica
de Shanghai, Academia China de Ciencias , Shanghai 201203, China
Cryst. Growth Des. , 2017 , 17 (6), pp 3482 - 3490
DOI: 10.1021 / acs.cgd.7b00453
Fecha de Publicacin (Web): 28 de abril de 2017
Copyright 2017 American Chemical Society
* E-mail: xuefengmei@simm.ac.cn .

Sinopsis
Siempre se observan cambios significativos en las formas cristalinas y en la morfologa de las
suspensiones inyectables de acetato de triamcinolona acetona (TAA). Polimorfismo investigacin
en TAA llev a tres nuevos slidos modificaciones obtenidas, incluyendo dos polimorfos (B y C) y
un monohidrato (MH). Los resultados de los ensayos de estabilidad en suspensin muestran que la
forma recin descubierta B tiene una estabilidad morfolgica y de partcula notablemente superior.

Abstracto

El acetato de acetonida de triamcinolona (TAA) es un frmaco ampliamente aplicado para la

artritis reumatoide y para el tratamiento de enfermedades inflamatorias crnicas. El frmaco se
comercializ como una suspensin inyectable con muy baja solubilidad acuosa. Se encontr
que se observaron cambios significativos en forma de cristal, tamao de partcula y morfologa
durante el perodo de vida til, lo que result en un fallo en el lote del producto y en su
recuperacin. TAA fue, por tanto, un tema interesante para el polimorfismo de cribado y
condujo al descubrimiento de mltiples modificaciones slidas, incluyendo tres polimorfos (A,
B y C) y un monohidrato. Estas formas se caracterizaron por difraccin de rayos X en polvo,
espectroscopa infrarroja por transformada de Fourier, anlisis termogravimtrico, calorimetra
de exploracin diferencial, microscopa electrnica de barrido, sorcin dinmica de vapor y
potencial zeta. Las estructuras monocristales de cuatro formas diferentes y las vas de
transformacin entre diferentes modificaciones se discutieron en detalle. Los comportamientos
de transformacin de cristal nico a cristal nico tambin se analizaron y monitorizaron
mediante difraccin de rayos X de polvo de temperatura variable y microscopa en fase
caliente. La estabilidad morfolgica, el cambio de forma y el tamao de partcula en
suspensin tambin se monitorearon estrechamente y los datos se compararon con el
producto comercializado. Se encontr que la seleccin de la forma cristalina desempea un
papel crtico en la estabilidad de los productos de suspensin inyectables. Los resultados
indican que la forma B tiene una mejor estabilidad fsica en una suspensin acuosa de
NaCMC al 0,5% en comparacin con la forma comercializada actualmente. Los
comportamientos de transformacin de cristal nico a cristal nico tambin se analizaron y
monitorizaron mediante difraccin de rayos X de polvo de temperatura variable y microscopa
en fase caliente. La estabilidad morfolgica, el cambio de forma y el tamao de partcula en
suspensin tambin se monitorearon estrechamente y los datos se compararon con el
producto comercializado. Se encontr que la seleccin de la forma cristalina desempea un
papel crtico en la estabilidad de los productos de suspensin inyectables. Los resultados
indican que la forma B tiene una mejor estabilidad fsica en una suspensin acuosa de
NaCMC al 0,5% en comparacin con la forma comercializada actualmente. Los
comportamientos de transformacin de cristal nico a cristal nico tambin se analizaron y
monitorizaron mediante difraccin de rayos X de polvo de temperatura variable y microscopa
en fase caliente. La estabilidad morfolgica, el cambio de forma y el tamao de partcula en
suspensin tambin se monitorearon estrechamente y los datos se compararon con el
producto comercializado. Se encontr que la seleccin de la forma cristalina desempea un
papel crtico en la estabilidad de los productos de suspensin inyectables. Los resultados
indican que la forma B tiene una mejor estabilidad fsica en una suspensin acuosa de
NaCMC al 0,5% en comparacin con la forma comercializada actualmente. Y los datos se
compararon con el producto comercializado. Se encontr que la seleccin de la forma
cristalina desempea un papel crtico en la estabilidad de los productos de suspensin
inyectables. Los resultados indican que la forma B tiene una mejor estabilidad fsica en una
suspensin acuosa de NaCMC al 0,5% en comparacin con la forma comercializada
actualmente. Y los datos se compararon con el producto comercializado. Se encontr que la
seleccin de la forma cristalina desempea un papel crtico en la estabilidad de los productos
de suspensin inyectables. Los resultados indican que la forma B tiene una mejor estabilidad
 fsica en una suspensin acuosa de NaCMC al 0,5% en comparacin con la forma
comercializada actualmente.

Introduccin

Los frmacos policristalinos pueden someterse a varias transiciones morfolgicas y de fase

durante el proceso de formulacin y fabricacin. (1-4) En particular, las suspensiones
inyectables han recibido mayor atencin ya que proporcionan un sistema de accin
prolongada (5)Y puede ofrecer una liberacin relativamente sostenida cuando se compara con
un sistema de suministro de solucin acuosa. Estas suspensiones contienen usualmente un
frmaco pobremente soluble en agua en excipientes seleccionados, donde las caractersticas
del frmaco -como el cristal, el tamao de partcula y la morfologa- juegan un papel sustancial
en la formulacin de la suspensin y la seguridad asociada en la administracin. Cualquier
transformacin en estado slido de fase tarda puede suponer un riesgo grave para la
solubilidad, estabilidad y fabricacin del frmaco. Tomemos por ejemplo el caso de las
cpsulas semislidas de Ritonavir, donde un segundo polimorfo encontrado ms tarde durante
el desarrollo oblig a Abbott a recordar el frmaco ya liberado, costando un estimado de 250
millones de dlares en ventas en 1998 solamente. (6) Por lo tanto, una investigacin
exhaustiva de cualquier posible transformacin en fase slida para una forma de mercado es
esencial.(7-12) Sin embargo, la transformacin morfolgica y cristalina en los productos de
suspensin sigue siendo en gran parte inexplorada. Por lo tanto, es deseable comprender el
comportamiento en estado slido de los ingredientes farmacuticos activos (API) e investigar
el mecanismo de transformacin de fase en suspensin para seleccionar juiciosamente la
forma slida ptima para el desarrollo.

Los frmacos con aplicaciones teraputicas a largo plazo son los principales candidatos para
las investigaciones de polimorfismo, ya que muchos no tienen una qumica de estado slido
registrada en detalle, especialmente aquellos que experimentan cambios adicionales y
significativos durante el procesamiento. Los frmacos glucocorticoides son una clase de
hormonas esteroides y se prescriben ampliamente para el asma y las enfermedades del tejido
conectivo. (13-16) Nuevas modificaciones polimrficas para estos compuestos, tales como
acetonida de triamcinolona, hidrocortisona, prednisolona y valerato de bethamethasone,
fueron recientemente reportadas por Nther. (17 - 23) acetato de acetonida de triamcinolona
(TAA, Esquema 1) Es un glucocorticoide a largo plazo prescrito clnicamente para el
tratamiento de enfermedades inflamatorias crnicas tales como asma, artritis reumatoide,
enfermedad inflamatoria intestinal y enfermedades autoinmunes. (24, 25) Especialmente para
el tratamiento de la artritis reumatoide, el TAA puede obviamente inhibir la secrecin de
interleucina-1 y TNF- del tejido sinovial articular para reducir la proliferacin de capilares y
fibroblastos. (25) Pertenece a un compuesto de clase II segn el Sistema de Clasificacin
Biofarmacutica (BCS) con una baja solubilidad en agua (0,001 mg / ml) y alta permeabilidad
(log P = 3,2). (26, 27)TAA se encuentra oficialmente en la Farmacopea China como una
suspensin intramuscularmente inyectable para la artritis reumatoide. La formulacin de
suspensin se utiliza para la liberacin sostenible de TAA y proporciona un sistema de accin
prolongada. El tamao de partcula se requiere para ser estrictamente controlado en el rango
de 3-5 m, ya que la partcula ms grande es el principal factor de dolor muscular o incluso
necrosis de tejido. Sin embargo, varios lotes de productos de la suspensin del TAA llevaron
fcilmente a algunas partculas ms grandes en el proceso del almacenaje. Las partculas
controladas de 3-5 m se maduraron en un tamao inaceptable de aproximadamente 40 m
( Figura 1 ), lo que hace que el lote sea inutilizable y no para consumo. Slo se ha informado
de una estructura de cristal (forma A, CSD refcode: IJUTAJ) sin ms datos de caracterizacin
de estado slido. (24) Por lo tanto, es urgente tener una visin completa del estado slido del
TAA y seleccionar la forma superior para el control de la calidad de los frmacos y evitar el
fracaso del lote en sus productos de suspensin.

Esquema 1. Estructura qumica del TAA

Figura 1. Las partculas grandes aparecieron en una formulacin en suspensin de TAA (50 mg / 5 ml).

Este estudio busca caracterizar adicionalmente las propiedades de estado slido de TAA, con
nfasis en entender cmo la forma de estado slido afecta la morfologa, el tamao de
partcula, la solubilidad y la estabilidad fsica de sus productos de suspensin. En este
informe, revelamos tres nuevas formas slidas, incluyendo dos nuevos polimorfos (B y C) y un
monohidrato (MH). Se us difraccin de rayos X de cristal nico para determinar las
estructuras monocristales correspondientes de estas formas. Sus propiedades se
 caracterizaron por difraccin de rayos X en polvo (PXRD), espectroscopa infrarroja por
transformada de Fourier (FT-IR), anlisis trmico (TGA y DSC), microscopa en fase caliente
(HSM), microscopa electrnica de barrido (SEM), sorcin dinmica de vapor (DVS) y el
potencial zeta. Las vas de interconversin de estas formas se discutieron en detalle. Adems,

Resultados y discusin

Preparacin de diversas formas

La forma comercializada de TAA (forma A) se utiliz como materia prima. La cristalizacin de

TAA dio lugar al descubrimiento de tres nuevas formas cristalinas, los polimorfos B y C, y un
monohidrato (MH). Para las tres formas cristalinas, los patrones generados a partir de una
simulacin de los datos de difraccin de un solo cristal y adquiridos a partir del anlisis PXRD
revelaron una coincidencia cercana, lo que confirm la formacin de fases altamente
puras. Todos los picos de cuatro modificaciones slidas son distintas, y se utilizan como
referencia en este estudio ( Figura 2 ].

Figura 2. Patrones PXRD de nuevas formas cristalinas (B, C y MH) en comparacin con la forma A.

Anlisis de morfologa y estructura cristalina

Para la comparacin con las imgenes pticas, las predicciones de morfologa se realizaron
mediante el . (28) Los resultados indican la forma A se convertir en un cristal de bloque con
una (011) cara dominante a lo largo del un eje ( Figura 3 a), la forma B se convertir en un
cristal de tipo aguja con una (001) cara dominante a lo largo de la b eje ( figura 3 b), mientras
MH puede montar en un cristal hexagonal con la ms grande (011) cara a lo largo del un eje
( Figura 2 D). Mientras tanto, la forma C forma preferentemente cristales poligonales. Junto
con el resultado calculado, las imgenes de microscopio de polarizacin ( figura3 ) afirman
que las diversas formas tienen hbitos cristalinos diferentes. La morfologa observada es
consistente con los resultados calculados. Adems, la naturaleza cristalina de estas formas se
confirm con investigaciones exhaustivas de sus interacciones intermoleculares y propiedades
anisotrpicas.
Figura 3. Morfologa de crecimiento pronosticada (a-d) e imgenes pticas de las formas A-C y MH.

La forma A (24) se inform en el grupo espacial ortorrmbico P 2 1 con una molcula de TAA
en la unidad asimtrica. Molculas TAA forman intermolecular a travs de O 3 -H 1
O 4 enlaces para crear un (1D) cadena infinita unidimensional supramolecular lo largo de
la b eje ( Figura 4 ). Las cadenas 1D son paralelas a las adyacentes en
el plano bc ( Figura 5 ).

Figura 4. Red de cadenas de enlace de hidrgeno de las formas A-C.

Figura 5. Empaquetado de cristal 2D de modificaciones slidas de TAA.

La estructura cristalina para la forma B se determin y refin en el grupo de espacio

monoclnico C2 con dos molculas de TAA en la unidad asimtrica ( Z '= 2) ( Tabla 1 ). En
la Figura 6 se comparan dos molculas independientes . En particular, la principal diferencia
conformacional se encuentra en la cadena lateral sometida a 17. Estas molculas
independientes se conectan de una manera alternante a travs de interacciones
intermoleculares entre los grupos hidroxilo y cetona, formando una estructura de la cadena de
enlace de hidrgeno 1D, O 2 -H 2 O 1 '( d O O = 2,69 ) y O 2 '- H 2 ' O 1( D O O = 2,86 )
como se muestra en la Figura 4 y la Tabla S1(Informacin de soporte). Las cadenas 1D
adyacentes estn dispuestas en la direccin opuesta segn se ve a lo largo del eje b , que es
diferente de la forma A. Comparadas con la forma A, las cadenas 1D en la forma B parecen
disponerse de manera opuesta ( Figura 5 ). En realidad, las cadenas 1D se cruzan y giran en
sentido horario alrededor de 155 en comparacin con la forma A ( Figura 4 ).
Tabla 1. Datos Cristalogrficos y Parmetros de Refinamiento de Estructura
 Formulario B Forma C MH

frmula C 26 H 33 FO 7 C 26 H 33 FO 7 C 26 H 33 FO 7 H 2 O

Temperatura (K) 100 (2) 100 (2) 100 (2)

Sistema de cristal Monoclnico Ortorrmico Ortorrmico

Grupo espacial C2 P212121 P212121

Un () 29,447 (10) 11.1071 (8) 8.3587 (4)

b () 6,202 (2) 15.9298 (13) 15.2343 (8)

C () 29.181 (10) 13.6656 (11) 19.1051 (11)

(grados) 90 90 90

(deg) 117.596 (6) 90 90

 Formulario B Forma C MH

(grados) 90 90 90

volumen celular ( 3 ) 4723 (3) 2417,9 (3) 2432,8 (2)

Z 8 4 4

D Calc (g / cm $ $ ) 1.340 1.309 1.350

0.71073 0.71073 0.71073

S 1.043 0,990 1.034

R1 0,100 0,056 0,031

R int 0,095 0.108 0,030

WR 2 0,212 0,073 0,073

Figura 6. Superposicin de dos molculas nicas en la estructura cristalina de la forma B.

La Forma C cristaliza en el grupo espacial ortorrmbico y no centrosimtrico P 2 1 2 1 2 1 con

una molcula de TAA en la unidad asimtrica ( Z = 4) ( Tabla 1 ). Las molculas estn
conectadas a travs de O 2 -H 2 O 1 ( d O O = 2,86 ) para formar una cadena de enlace de
hidrgeno 1D. Las cadenas 1D son paralelas a las adyacentes en el plano bc , que es la
misma que la de la forma A ( Figura 5 ). Las capas 2D adyacentes en el bcPlano estn
dispuestos en la direccin opuesta para formar una red 3D, que se giran en el sentido de las
agujas del reloj alrededor de 180 en comparacin con la forma A ( Figura 4 ).

MH se cristaliza en el grupo espacial ortorrmbico P 2 1 2 1 2 1 , con una molcula de TAA y

una molcula de H 2 O en la unidad asimtrica ( Z = 4) ( Tabla 1 ). La estructura cristalina y los
motivos de empaque son significativamente diferentes de los de B o C, con la introduccin
de molculas de H 2 O interrumpiendo las interacciones de enlace de hidrgeno. La estructura
cristalina de MH se conect con un H 2 O adicional insertado en el O 2 -H 2 O 1 con respecto
a las formas A-C. Las molculas de TAA interaccionan con H 2O a travs de O 2 -H 2
O 1S ( d O O = 2,82 ) y O 1S -H 2S O 1 ( d O O = 2,75 ) para formar un 1D Cadena de enlace
de hidrgeno ( Figura 5 ). Las cadenas de enlace de hidrgeno estn puenteadas
adicionalmente por O 1S -H 1S O 5 ( d O O = 2,93 ) como se muestra en
la Figura 7 . Estas molculas de H $ $ O son tanto dador como aceptor (patrn DDA) (29) en
enlaces de hidrgeno que conectan molculas TAA en la red 3D.

Figura 7. Red 3D para MH puenteado por enlaces de hidrgeno de molculas de H 2 O.

La estructura qumica de TAA indica que la molcula tiene una cadena

lateral C 17 sustituida flexible y puede formar estructuras cristalinas variables con
conformaciones nicas; Las diferencias entre estas estructuras se resaltan en la superposicin
de los diferentes conformadores en la Figura 8 . En general, cada molcula TAA est
compuesta por cinco anillos condensados, que incluyen tres anillos de seis miembros y dos de
cinco miembros: el anillo A es casi plano, mientras que B y C tienen conformaciones de silla; D
y E son los anillos de cinco miembros y las conformaciones de envolvente de la pantalla. El
ms notable variacin entre estos confrmeros radica en las configuraciones de C 17 de la
cadena lateral sustituida. Adems, la disposicin de los anillos A - D tambin presenta sutiles
ngulos de conexin diferentes.

Figura 8. Superposicin de molculas nicas en la estructura cristalina de las formas TAA A (azul claro),
B (rojo y verde), C (naranja) y MH (azul).

Anlisis espectroscpico
La espectroscopia FT-IR se utiliz para comprender la conformacin molecular y las
caractersticas de enlace de hidrgeno de los diversos polimorfos del estado slido. En
particular, la espectroscopia FT-IR puede distinguir polimorfos que contienen N-H O, O-H
O u otros enlaces de hidrgeno fuerte. (30, 31) La Figura 9 representa una comparacin de
los espectros FT-IR de estado slido TAA. Las diferencias significativas observadas en los
espectros FT-IR se atribuyen al estiramiento de las vibraciones del enlace O-H: 3300 cm -
1
para A, 3380 cm -1 para B, 3462 cm -1 para C y 3593, 3450, 3368 cm - 1Para MH. Los dos
picos adicionales de MH que otras tres formas en la regin de estiramiento de vibracin del
enlace O-H indican la presencia de interacciones de enlace de hidrgeno entre las molculas
de agua de disolvente y las molculas TAA en MH. Adems, el C 20 enlace = O estiramiento de
MH (en la regin de 1800-1650 cm -1 ) se produce a 1755 cm -1 , mientras que en las tres
formas anhidras, las seales anlogas se producen a alrededor de 1750 cm -1 . El hecho de
que la frecuencia de tensin se somete a un desplazamiento al azul sugiere interacciones de
enlaces de hidrgeno adicionales en el grupo carbonilo no conjugado (C 20 = O). La disparidad
entre los modos de vibracin para MH y las formas A-C puede atribuirse a su enlace de
hidrgeno, en el que el enlace de hidrgeno O-H O (Figura 7 ) en A-C se inserta por
una molcula de H $ $ O en MH.

Figura 9. Espectros FT-IR de las formas TAA A-C y MH.

Anlisis trmico
La Figura 10 representa una comparacin de los termogramas TGA para las diversas formas
de estado slido TAA. Los grficos TGA para las formas A - C no muestran prdida de peso
antes de que se descompongan a aproximadamente 280C, lo que indica que estos polimorfos
no contienen disolvente residual. Comparativamente, la trama TGA para MH muestra 3,5% de
prdida de masa antes de la descomposicin, lo que sugiere un H 2 O molcula (TAA y H 2 O
relacin estequiomtrica 1: 1, valor calculado: 3,6%) en la forma que tambin fue confirmado
por un solo cristal estructura. DSC mediciones se realizaron en todas las formas (A-C y MH)
para determinar si alguna de las formas podran transformar en otro ( Figura 11 ]. Slo la
forma metaestable C presenta un pico endotrmico de fusin ( T inicio= 276 C) y est
desprovista de cualquier seal de deshidratacin o transicin cuando se forma calentando la
forma A. La curva DSC para MH revela tres picos endotrmicos: primero, uno amplio entre
100 y 150 C que corresponde a la formacin de la forma B a travs de la prdida de H 2 O
molculas, a continuacin, uno en T inicio = 228 C que corresponde a la formacin de la forma
C de de B, y por ltimo un fuerte pico exotrmico observado a T inicio = 276 C que
corresponde a la de fusin de la forma C. Ambas formas a y B transforma en forma C ( T inicio =
210 C para a y T aparicin= 248 C para B) seguido de fusin de la forma C a aproximadamente
276 C. Estos datos coinciden con las observaciones de microscopa en caliente y la
caracterizacin de VT-PXRD ( Figuras S1 y S2 , Informacin de Soporte).

Figura 10. TGA para las formas A-C y MH, indicando que MH es un monohidrato (la prdida de peso
calculada para una H 2 O molecular es 3,6%).

Figura 11. Curvas DSC a 10 C / min de las formas A - C y MH.

Anlisis de transformacin de cristal nico a cristal nico (SCTSC)

Inicialmente se observaron transformaciones de cristal nico a cristal nico durante
experimentos de microscopa en etapa caliente y implicaron forma A para formar
transformaciones C. Los cristales para la forma A se aislaron evaporando el disolvente a partir
de una solucin saturada de metanol y se confirmaron puros mediante mediciones de
difraccin de rayos X de un solo cristal. Los monocristales se calentaron a 5 C / min bajo
microscopa en caliente y, aunque no hubo cambio significativo de forma en el rango de
temperatura examinado, se produjo un ligero cambio de color a 220 C
( Figura 12un). Despus de mantenerse a esta temperatura durante 30 min, la muestra se
examin de nuevo por difraccin de rayos X de un solo cristal. El anlisis revel, junto con la
rpida determinacin celular, que la clula unidad haba sido cambiada y que la muestra
estaba ahora en forma C. Tenga en cuenta que esta es la nica manera de cristales
individuales adecuados para la estructura de determinacin de la forma C se obtuvieron en
nuestros experimentos de cribado. Para analizar ms a fondo las caractersticas de la forma A
para formar la transformacin de fase C, se realiz una difraccin de rayos X de polvo a
temperatura variable (VT-PXRD), y los resultados se muestran en la Figura S1(Informacin de
soporte). La muestra se mantuvo durante 5 min en cada punto de temperatura. Es evidente
que la posicin de los picos de forma A permanece intacta en el intervalo de temperatura de
25 a 190C. A 200 C, aparecieron picos adicionales a 2 = 11,7, 14,0, 15,1, 16,0 y 26,4 ,
que se identificaron como los picos caractersticos de la forma C, indicando que la
transformacin de fase estaba en curso. A medida que la temperatura aumentaba, los picos
caractersticos de la forma A a 2 = 8,2, 10,2, 12,6, 13,8, 16,4 y 17,3 gradualmente se
debilitaban, mientras que los nuevos picos se fortalecan. A 220 C, los picos caractersticos
de la forma A han desaparecido, y hasta ahora la transformacin en forma C ha
terminado. Como se muestra en la Figura 4 , las estructuras cristalinas de las dos formas son
bastante diferentes: las capas 2D adyacentes en laBc estn dispuestas paralelas en la forma
A, mientras que las capas son opuestas en la forma C. El cambio significativo en la estructura
cristalina sugiere que el mecanismo de este proceso de transformacin de fase SCTSC
incluye la nucleacin y el crecimiento gradual de la red de fase hija. (32)

Figura 12. Instantneas microscpicas en caliente de la transformacin monocristal a cristal nico (a) de
A a C y (b) de MH a B.

Los mismos mtodos de HSM, VT-PXRD y SCXRD se llevaron a cabo en MH. Tanto HSM
( Figura 12 b) y VT-PXRD ( Figura S2 ), la informacin de apoyo) experimentos indicaron que
el proceso de transformacin de fase de MH a la forma B pertenece a la transformacin
SCTSC. El nico cristal de MH se calent a 155 C, y la calidad del cristal final era todava lo
suficientemente alta para el anlisis SCXRD. La determinacin de clulas mostr que la clula
unitaria es la misma que la de la forma B. El anlisis de la similitud de los rellenos puede
arrojar cierta luz sobre los posibles movimientos moleculares durante la transformacin de
fase. El grupo hidroxilo del TAA interactu con el tomo de O 2 de grupo carbonilo conjugado
en el proceso de eliminacin del H 2 O molculas por calentamiento (Figura 13 ). El H 2 O
eliminacin de H 2 O-TAA unidad de enlace de hidrgeno en MH dio como resultado la
transformacin estructural de una arquitectura de red de enlace de hidrgeno 3D a la
interaccin 1D en forma B. Adems observacin de la estructura cristalina revela diferencias
conformacionales notables en relacin con el ngulo diedro entre Forma B y MH de la
molcula TAA. La conformacin de la C 17 cadena lateral sustituida y la disposicin de los
anillos A y B tambin presentes ngulos de conexin diferentes (el diagrama de superposicin
se presenta en la Figura 8 ).

Figura 13. Transicin de fase de MH a la forma B en calentamiento.

Interconversin entre diferentes formas de TAA

Los experimentos de cristalizacin revelan que a RT, la forma A es la ms
termodinmicamente estable, mientras que las formas B y C se pueden clasificar como
metastables. Especialmente en experimentos en suspensin a RT, las formas B, C y MH se
transformaron exclusivamente en forma A en muchos disolventes orgnicos, tales como
acetato de etilo, isopropanol, acetonitrilo y nitrometano. Sobre la base de los experimentos con
suspensin y anlisis de transformacin DSC, la relacin de interconversin de diversas
modificaciones slidas se resume en el Esquema 2 , donde las flechas rojas son
representativas de los procesos de transformacin SCTSC de A a C y de MH a B,
respectivamente.

Esquema 2. Relacin de Transformacin de Formas Slidas TAA

Desde el hecho de que las transiciones de A a C y B a C son endotrmicas ( Figura 11 ),

podemos concluir claramente que la forma C est enantiotropicamente relacionada con ambas
formas A y B, de acuerdo con Burger y Ramberger "calor de la regla de transicin" . (33) Sin
embargo, debido a que los puntos de fusin y entalpas de fusin para las formas A y B no
pueden medirse, es difcil determinar la relacin termodinmica relativa de A y B. Es claro que
la forma A es el polimorfo termodinmicamente estable a RT o inferior Temperatura y las
formas B y C son metastables.
Solubilidad y disolucin en polvo
Las mediciones de solubilidad en condiciones de producto (solucin acuosa de NaCMC al
0,5%) mostraron que MH es la menos soluble (3,2 g / mL para MH, 5,8 g / mL para A, 7,4
g / mL para B y 9,3 g / mL para C) . El anlisis de PXRD confirm que no haba
transformaciones de forma observadas para las formas A y MH a lo largo de los experimentos
de solubilidad. Las muestras de las formas B y C se transformaron en MH por slurring durante
24 h ( Figura S3 , Informacin de apoyo). La Forma A tambin se cambi a MH si las muestras
se suspendieron durante ms de 3 das ( Figura S4 , Informacin de Soporte). Por lo tanto, se
puede concluir que en una solucin acuosa, MH es la forma ms estable, y que los polimorfos
puros A - C tienden a transformarse en MH menos soluble.

Debido a que las formas B y C se transformaron fcilmente en MH en el experimento de

suspensin, se llev a cabo la velocidad de disolucin del polvo para investigar su
comportamiento de disolucin. Figura 14Muestra los perfiles de disolucin de las formas TAA
A-C y MH en agua desionizada con la presencia de Tween 80 al 0,5%. La figura demuestra
que, cuando se compara con MH en las mismas condiciones de disolucin, el valor mximo de
solubilidad para la forma C es de aproximadamente 2,5 Veces tan grande. En particular, la
mayor concentracin puede mantenerse durante un perodo de tiempo considerable (al menos
5 h). La cantidad disuelta para la forma C parece reducirse con el tiempo despus de un
mximo a 15-30 minutos. Esta disminucin en la solubilidad puede atribuirse a un reequilibrio
entre la forma C existente saturada en solucin y la MH recin formada, lo que fue confirmado
por anlisis PXRD ( Figura S5, Informacin de soporte). El anlisis de los formularios A y B no
revel ninguna transformacin de la forma. La tendencia a la solubilidad aparente es tambin
indicativa de la estabilidad termodinmica relativa de las tres formas polimrficas (C <B <A),
ya que la mayor solubilidad corresponde a una menor estabilidad.

Figura 14. Perfiles de disolucin en polvo de las formas TAA A-C y MH.

Estabilidad Morfolgica en la Suspensin Inyectable

Para suspensiones acuosas, la forma cristalina y el tamao de partcula se deben monitorear y
controlar estrechamente, ya que es ms probable que los cambios en la forma o morfologa
ocurran en comparacin con las suspensiones de aceite. (34) Durante la vida til y el
almacenamiento del producto, las variaciones de temperatura y ciclismo pueden causar
cambios en el tamao de partcula, especficamente en la maduracin de Ostwald, donde
partculas ms pequeas pueden agregarse en estructuras ms grandes. (35)Otra posibilidad
es una transformacin en forma polimrfica o solvatada, lo que probablemente alterar la
velocidad de disolucin. Los excipientes juegan un papel importante en la estabilidad de la
suspensin: la adicin de excipientes puede retardar o prevenir la transformacin de fase o la
maduracin de Ostwald. Para suspensiones de TAA, es una prctica comn agregar NaCMC
al 0,5% en el producto. Se estudiaron las estabilidades morfolgicas y de distribucin del
tamao de partcula de TAA en condiciones de suspensin mediante SEM, junto con PXRD
para monitorizar la forma de estado slido. Se encontr que la forma metaestable C cambia a
MH en 2 semanas cuando se dispersa en un medio acuoso de suspensin, mientras que otras
formas permanecen la misma modificacin slida durante todo el experimento. La
figura 15 muestra las partculas de las formas A, B y MH a los tiempos de almacenamiento t=
0, 3 y 6 meses. Los cristales de la forma A presentaron un cambio de morfologa, en el que
partculas ms pequeas se agregaron en estructuras de bloques irregulares. Se observaron
algunos cristales de MH de acuerdo con su morfologa hexagonal caracterstica. Y el mayor
tamao de partcula se registr en ms de 20 m en el sexto mes. Sorprendentemente, los
cristales de forma B mantuvieron su morfologa de prisma y tamao de partcula uniforme sin
agregacin o maduracin de Ostwald.

Figura 15. Microfotografas SEM de A, B y MH, para t = 0, 3 y 6 meses.

Otro mtodo para evaluar la solubilidad y estabilidad de las formas slidas en suspensin es
considerar el potencial zeta (). es un parmetro que proporciona una manera efectiva de
considerar la atraccin y la repulsin de las partculas y, a su vez, la estabilidad de la
suspensin inyectable TAA.

El TAA en todas las formas tena una alta carga superficial negativa, y cuando se pona en
solucin acuosa, tena un potencial zeta negativo. Cuando se ordenan por potencial zeta
(valor absoluto), los formularios TAA siguen los siguientes: MH (-27,4 mV)> B (-22,2 mV)> A (-
19,5 mV)> C (-11,1 mV). Las partculas con una densidad de carga superficial ms alta y, a su
vez, un mayor valor absoluto del potencial zeta, se agregan mal debido a una alta repulsin y
estabilidad electrosttica. Lo contrario es cierto cuando las partculas con menor densidad de
carga superficial y potencial zeta pueden agregarse mejor. (36) En consecuencia, para las tres
formas investigadas (A, B y MH, la Figura 15), Se observ que el polimorfo A ms
termodinmicamente estable, con el valor lowest ms bajo, se agregaba obviamente junto con
el crecimiento de maduracin de Ostwald a los 6 meses. Aunque MH presenta el valor ms
alto, los cristales con redes de enlace de hidrgeno 3D son ms propensos a sufrir Ostwald
 maduracin crecimiento, en comparacin con las capas 2D de las tres formas
polimrficas. Los cristales de forma B con valores perfectos (valor absoluto entre 20-25 mV)
para los productos en suspensin, mantuvieron su morfologa original y tamao de partcula
uniforme sin agregacin o maduracin de Ostwald.

En general, la agregacin de partculas y la maduracin de Ostwald ocurren en suspensiones

debido a la inestabilidad termodinmica inherente. A menudo se hacen formulaciones para
optimizar la estabilidad fsica y la funcionalidad utilizando la forma slida apropiada y el
tamao de partcula. Otras estrategias en el desarrollo de la formulacin incluyen controlar el
tamao de las partculas, monitorear la morfologa y prevenir la transformacin de la forma. La
mayora de las formulaciones comercializadas prefieren usar el polimorfo slido ms estable,
ya que otras formas pueden considerarse metastables y finalmente transformarse en la forma
estable. (37)Para TAA, la muestra comercial estaba en la forma A, que es el polimorfo ms
estable a RT. En solucin acuosa, MH es la fase ms estable, mientras que los polimorfos A-C
tienden a transformarse en MH menos soluble. Sin embargo, en este estado, tanto la forma A
como la MH sufren fcilmente agregacin y maduracin Ostwald,
respectivamente. Curiosamente, la forma metaestable B puede sobrevivir varios aos
mediante la adicin de NaCMC al 0,5%, lo que aumenta la barrera de energa de activacin
necesaria para ser superado para formar la MH menos soluble. Por lo tanto, los cristales tipo
aguja de forma B presentan una estabilidad superior en suspensiones acuosas de NaCMC al
0,5% y parecen ser una mejor opcin para los productos de suspensin TAA.

Conclusiones

Los slidos de TAA usados para suspensiones de accin prolongada e inyectables se

examinaron bajo condiciones de almacenamiento. Se observaron cambios significativos en la
forma cristalina y morfologa, incluyendo el tamao y la forma de las partculas. La
investigacin del polimorfismo en TAA condujo al descubrimiento de tres nuevas
modificaciones slidas, incluyendo dos polimorfos (B y C) y un monohidrato (MH). La Forma B
presenta un tamao medio inferior (<5 m) y mayor estabilidad en comparacin con las formas
A, C y MH en una suspensin acuosa de NaCMC al 0,5%. Los resultados obtenidos en este
estudio pueden ayudar a mejorar la seguridad y la aplicacin del TAA en situaciones clnicas,
 as como proporcionar consideraciones adicionales para la investigacin industrial y el
desarrollo de suspensiones.

informacin de soporte

La informacin de apoyo est disponible de forma gratuita en el