Tricromico de Masson

Esta tincin se utiliza para evidenciar fibras de colgeno (que son de estructura proteica) en el
tejido conjuntivo, cuya funcin fundamental es el soporte mecnico; hay de varios tipos que
diferentes en su composicin. El tricrmico de Masson es una tincin diferencial y policrmica. En
todos los mtodos tricrmicos, utilizamos 3 colorantes:

Un colorante nuclear, normalmente una laca de hematoxilina

Un colorante citoplsmico, orange G, ponceau de xilidina, escarlata de Biebrich, azofloxina etc.
Un colorante del conjuntivo (para las fibras de colgeno, el colgeno III se denomina reticulina).

Estos colorantes suelen ser derivados del anillo de trifenilmetano.

Hematoxilina + solucin de escarlata/fucsina cida + solucin de cido
fosfomolbdico/fosfotngstico+ solucin azul de anilina o de verde luz.

COLORANTES

Hematoxilina: Teir los ncleos de azul. Debemos tener precaucin de no sobrecolorear; deben
distinguirse dentro del ncleo los nuclolos o cromatina condensada cuando la clula est en
divisin.
Fucsina de Ponceau o fucsina cida: teir los eritrocitos de fucsia, y se mezclar con los azules en
los citoplasmas dando un color azul-violceo.
Orange G: anaranja los eritrocitos, no forma parte de la tincin tricrmica de Masson.
cido fosfomolbdico: acenta la accin de los dems colorantes.
Azul anilina: dar color azul (ms claro que la hematoxilina).

PROCEDIMIENTO

Desparafinacin
Estufa: 60C 10 minutos
Xilol 3 pasos de 5 minutos

Hidratacin
Etanol 96 1 min
Etanol 80 1 min
Etanol 60 1 min
Lavar con agua corriente

Tincin

1. Hematoxilina de Harris durante 5 minutos

Se lava la muestra con agua de forma que rebose, eliminar el excedente de colorante.
Se da un bao rpido con agua actica (1%)
Se da un bao rpido con agua corriente

2. Fucsina de Ponceau (fucsina cida) durante 5 minutos

Se da un bao rpido con agua corriente
Se da un bao rpido con agua actica (1%) (no lavar despus)
 3. Orange G durante 5 minutos o en CIDO FOSFOMOLIBDICO 1% durante 5 minutos. No
lavar
Se da un bao rpido en agua actica. No lavar

4. Se sumerge en Azul de Anilina durante 10 minutos

Se da un bao rpido con agua corriente (2 sacudidas)
Se da un bao rpido con agua actica (1%)
Se da un bao rpido con agua corriente
Se da un bao rpido en el primer etanol ( 6 sacudidas-etanol 60%)
Se da un bao rpido en el segundo etanol (10 sacudidas-etanol 80%)
Se sumerge en el tercer etanol durante 5 minutos (etanol 100%)
Se sumerge en las distintas cubetas de xilol durante 5 minutos cada una.

RESULTADOS

Ncleos: AZUL OSCURO

Citoplasmas, queratina, fibras musculares, eritrocitos: ROJO (rosado)

Colgeno y fibras de reticulina (colgeno III): AZUL CLARO o verde (depende del colorante)