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UNIVERSIDADE FEDERAL DO PAR

INSTITUTO DE TECNOLOGIA

FACULDADE DE QUIMICA

HUGO ALEX TAVARES NERI

DANIEL RAMOM MAIA VIEIRA

GABRIEL NONATO BARBOSA REBELO

CROMATOGRAFIA DE PAPEL

BELM

2017
HUGO ALEX TAVARES NERI 201310940002

DANIEL RAMOM MAIA VIEIRA 201310940008

GABRIEL NONATO BARBOSA REBELO 201510940007

Cromatografia de papel

Professor: Diego Hildebrando Santos

BELM

2017
Cromatografia: um mtodo fsico-qumico de separao dos componentes de uma
mistura, realizada atravs da distribuio desses componentes em duas fases. Uma das
fases permanece estacionria, enquanto outra se move atravs dela. Durante a passagem
da fase mvel sobre a estacionria, os componentes da mistura so distribudos pelas duas
fases de tal forma que cada um deles seletivamente retido pela fase estacionria,
resultando em migraes diferenciais desses compostos
Cromatografia de Papel
Tcnica simples;
Pequena quantidade de amostra;
Capacidade de resoluo,separao e identificao de compostos polares,
como antibiticos hidrossolveis, cidos orgnicos e ons metlico

O mtodo de cromatografia em papel foi desenvolvido por Martin, A. H. Gordon


e R. Consden. Os resultados deste projeto foram publicados, em 1944, figura 1, uma
tcnica simples que necessidade de uma pequena quantidade de amostra, apresenta uma
boa capacidade de resoluo e mais eficiente na separao e identificao de compostos
polares, antibiticos hidrossolveis, cidos orgnicos e ons metlicos. (Collins e Braga,
1988, pag. 31)
Cromatografia de Papel classificada como de partio lquido-lquido;
Separao e distribuio depende da solubilidade; geralmente gua utilizada como fase
mvel e papel (celulose) como fase estacionria.

Figura 1: Ttulo do primeiro trabalho do A.J.P. Martin e colaboradores sobre cromatografia


em papel. Imagem retirada do trabalho de Collins, 2009.

A cromatografia em papel (CP) uma das tcnicas mais simples e que requer
menos instrumentos para sua realizao, porm a que apresenta as maiores restries
para sua utilizao em termos analticos. (PERES, T. B., 2002)

Neste tipo de cromatografia, uma amostra lquida flui por uma tira de papel
adsorvente disposto verticalmente. O papel composto por molculas de celulose que
possuem uma forte afinidade pela gua presente na mistura de solvente, mas muito pouca
afinidade pela fase orgnica, atuando como suporte inerte contendo a fase estacionria
aquosa (polar). medida que o solvente contendo o soluto flui atravs do papel, uma
partio deste composto ocorre entre a fase mvel orgnica (pouco polar) e a fase
estacionria aquosa. Desta forma, parte do soluto deixa o papel e entra na fase mvel.
Quando a fase mvel alcana uma seo do papel que no contm soluto, o fenmeno de
partio ocorre novamente, s que agora o soluto transferido da fase mvel para a fase
estacionria. Com o fluxo contnuo de solvente, o efeito desta partio entre as fases
mvel e estacionria possibilita a transferncia do soluto do seu ponto de aplicao no
papel, para um outro ponto localizado a alguma distncia do local de aplicao no sentido
do fluxo de solvente. (PERES, T. B., 2002)

Tambm um procedimento tpico desta, a anlise de uma mistura de aminocidos.


Pode-se fazer como segue: alisa-se uma tira de papel de cerca de 1 por 15 cm, coloca-se
uma pequena gota de soluo a ser analisada no centro a aproximadamente 1 cm de uma
das extremidades. Marca-se esse ponto com um lpis para a medida futura. Ento se
evapora o solvente e a tira suspensa pela extremidade mais afastada em um recipiente
alto. Mergulha-se a extremidade inferior em um depsito de uma mistura de gua e
butanol. Cobre-se o topo do cilindro com papelo, de modo que os vapores de ambos os
solventes banhem a tira pendente. Aps repouso, o lquido comea a subir a tira por
capilaridade, arrastando os constituintes da amostra com ele, em vrias velocidades, de
acordo com seus coeficientes de partio entre a gua adsorvida e butanol intersticial.
Quando a frente avanada de solvente se aproxima do toco, remove-se a tira e marca-se
sobre ela o ponto de avano mais afastado. Ento a tira secada ao ar pulverizada com
uma soluo de ninidrina. Algumas manchas se encontraram distribudas ao longo da tira;
deveram ser marcadas a lpis para um registro permanente. (EWING, 1982)

A ordem de separao das substncias depende das combinaes de solvente


utilizadas. Sob condies constantes de temperatura, sistema de solventes e adsorvente,
qualquer soluto (uma droga, um corante, um esteride etc.) move-se com uma razo
constante em relao frente do solvente. Esta razo conhecida como valor R f (frente
relativa ou fator de reteno) onde:

distncia percorrida pelo componente


Rf =

Pode-se entender essa tcnica pelo uso de grandes quadrados de papel de filtro de
15 a 30 cm de lado. Aplica-se a amostra em um ponto prximo a um canto e suspende-se
o papel de modo que uma extremidade mergulhe no solvente. Os constituintes da amostra
se movem para cima como antes. Aps essa etapa, o papel secado, girado de 90 e
suspenso com a outra extremidade adjacente ao canto contendo a amostra mergulhada em
um segundo solvente, no qual os valores de Rf so diferentes. Isso far com que as
manchas se movam, atravs do papel, em uma direo em ngulo reto em relao ao
primeiro movimento e assim produziram um cromatograma bidimensional
correspondentemente com melhor separao de uma mistura complexa. Recipientes de
vidro retangulares so convenientes para esse trabalho e podem-se tratar vrias folhas
simultaneamente. (EWING, 1982)

Descrevendo-se a tcnica do solvente ascendente; tambm possvel realizar uma


preparao cromatogrfica em papel com solvente descendente. Pendura-se o papel em
um tanque com solvente e monta-se o conjunto todo em um recipiente fechado, onde se
satura o ar com vapor do solvente, para evitar a evaporao. Os cromatogramas em papel
podem-se traduzir quantitativamente em um grfico de absorbncia ptica em funo da
posio da mancha no papel, medindo-se a transmisso de comprimentos de onda
selecionados diretamente atravs do papel. Planejaram-se vrios fotmetros de filtro
especificamente para essa aplicao; alm disso, dispe-se de adaptadores prendedores
de papel para vrios espectrofotmetros comerciais. (EWING, 1982). As aplicaes
descritas esto na figura 2.
Figura 2: Esquema de algumas formas de aplicao do mtodo de cromatografia em papel.
Imagem retirada do trabalho de Collins e Braga, 1988.

CONSIDERAES SOBRE COMATOGRAFIA EM PAPEL

FASE ESTACIONRIA

A fase estacionria na cromatografia em papel so tiras retangulares de papel,


podemos imaginar ela como uma camada fina de celulose. O tipo de papel usado uma
parte essencial neste mtodo os quais podemos utilizar os papeis da seguinte maneira
(Collins e Braga, 1988, pag. 35):
Papel acetilado: til para separar substncias hidrfilas.
Papel impregnado: umedecido com silicone, ou com parafina, ou com
dimetilformamida ou amidas com alto peso molecular. til para separa
substncias moderadamente hidrfobas ou hidrfilas.
Papel carregado: disperso de resinas poliestirnicas, trocadoras de ons com as
fibras de celulose auxiliando na separao de substncias orgnicas e inorgnicas.
Papel tratado: para substncias anfteras ou com muitas hidroxilas.

FASE MVEL

A fase mvel a varivel que mais afeta a separao em cromatografia em papel.


Considerando dois lquidos, o menos polar a fase mvel e o mais polar a fase
estacionria (cromatografia em fase normal). Na separao necessrio conhecer a
natureza qumica das substncias a serem separadas e da fase mvel, tabela 1 tem algumas
caractersticas qumicas de solventes usados em cromatografia (Collins e Braga, 1988,
pag. 36).

Tabela 1: Natureza qumica de alguns solventes ordenado em funo de suas


solubilidades. Tabela retirada do trabalho de Collins e Braga, 1988.

SOLUBILIDADE CONSTANTE VISCOSIDADE


SOLVENTE DA GUA DIELTRICA (MPA.S A
(G/100ML A 20C) (20C) 20C)
ter de petrleo (30-60C) Imiscvel 01.84 0.30
Hexano Imiscvel 01.88 0.32
Benzeno 00.08 02.29 0.65
ter dietlico 07.50 04.34 0.23
Clorofrmio 00.82 04.80 0.57
Acetato de etila 08.60 06.02 0.45
Dicloroetano 00.60 10.40 0.79
Butanol-2 12.50 17.80 4.21
Acetona Imiscvel 21.50 0.32
Etanol Imiscvel 24.60 1.20
Metanol Imiscvel 33.60 0.60
GUA IMISCVEL 80.40 1.00

EFEITOS DA TEMPERATURA

O controle da temperatura necessrio pois esta varivel aumenta a capacidade


da resoluo da tcnica. A temperatura ideal depende da amostra a ser analisada, assim
como, do papel e da fase mvel que sero usadas. Uma temperatura acima da do ambiente
melhora o tempo da anlise, porm diminui a resoluo, o inverso observado a
temperatura menores da do ambiente, (Collins e Braga, 1988, pag. 31).
ANLISE QUALITATIVA

Na cromatografia em papel, a anlise realizada pela identificao de cores aps


o tratamento com reagentes qumicos detectores e seus Rfs. Para isso necessrio ter um
cromatograma padro da amostra como referncia, (Collins e Braga, 1988, pag. 40).

ANLISE QUANTITATIVA

Para efetuar a anlise quantitativa necessrio conhecer a anlise qualitativa, ter


uma fase mvel bem definida. Com isso podemos verificar a quantidade da amostra pela
intensidade da cor, comparando com a amostra padro com concentrao conhecidas, ou
por densitometria, determina-se diretamente sobre o papel com um equipamento de
densitomtro, (Collins e Braga, 1988, pag. 41).

RESUMO DE ARTIGOS QUE UTILIZAM O MTODO

TTULO: Coupling shell-isolated nanoparticle enhanced Raman spectroscopy


with paper chromatography for multi-components on-site analysis: Otimizao de
espectroscopia Raman com cromatografia em papel na anlise de multi componentes pelo
uso de nanopartcula isolada com casco.

RESUMO: Atravs do acoplamento da espectroscopia Raman com nanopartculas


isoladas e com cromatografia em papel, foi desenvolvido um mtodo para a separao
simultnea na deteco ptica de mltiplos componentes. O mtodo estabelecido
apresenta alta sensibilidade nas estratgias de deteco plasmticas e resoluo temporal
e espacial das tcnicas de cromatografia planar.
Este artigo foi publicado em 04 outubro de 2016 na revista Talanta(Oxford), seu
fatro de impacto em qumica A2.

TTULO: Paper-based chromatographic chemiluminescence chip for the


detection of dichlorvos in vegetables: Chip de quimioluminiscncia cromatogrfica
baseado em papel Para a deteco de diclorvos em vegetais.

RESUMO: A cromatografia em papel foi um grande avano no incio do sculo XX, mas
raramente usada devido ao longo tempo de separao e difuso nos pontos de amostra.
Neste trabalho, pela primeira vez, desenvolveu-se um dispositivo analtico de
quimioluminiscncia em papel combinado com cromatografia em papel para
determinao de diclorvos em vegetais sem pr-tratamento espcifico da amostra. O
procedimento de separao por cromatografia em papel pode ser realizado em 12 min em
um suporte de papel (0,8x7,0 cm2) utilizando uma amostra de 5 L. Aps o
desenvolvimento da amostra, a rea de deteco (0,8x1,0 cm2) foi cortada e inserida entre
duas camadas de fitas adesivas impermeveis. O chip em papel foi fabricado anexando a
camada intermediria de papel na camada inferior. Em seguida, foi coberto por outra
camada de fita, que foi padronizada pelo mtodo de corte para formar um orifcio
quadrado (0,8x1,0 cm2) nele. Uma soluo mista de luminol de 0,1 L e o H2O2 foi
descartado na rea de deteco para produzir quimioluminiscncia. Foi obtida uma
relao linear entre a intensidade quimioluminiscncia e as concentraes de DDV na
faixa entre 10,0 ng mL-1 e 1,0 gmL-1 e o limite de deteco foi de 3,6 ng mL-1. Os ons
e vitaminas metlicos solveis em gua podem ser desenvolvidos em diferentes locais
espaciais em relao ao diclorvos, eliminando a interferncia com diclorvos durante a
deteo. O chip cromatogrfico baseado em papel pode ser usado com sucesso para a
determinao de diclorvos sem preparao espcfico de amostra vegetais. Este estudo
deve, portanto, ser adequado para a deteco rpida e sensvel de nveis de trao de
pesticidas organofosforados em amostras ambientais e alimentares..
Este artigo foi publicado em 24 agosto de 2013 na revista BIOSENSORS &
BIOELECTRONICS, seu fatro de impacto em qumica A1.
Referencias:

COLLINS, Carol H.; BRAGA, Gilberto Leite. Introduo a mtodos cromatogrficos. In:
Introduo a mtodos cromatogrficos. Unicamp, 1988

COLLINS, Carol H. IV. O Desenvolvimento da Cromatografia em Papel. 2009.

EWING, Galen W. Mtodos instrumentais de anlise qumica. Ed. da Universidade


de So Paulo, 1982. 2v ilust.

PERES, T. P.; Palestra, Noes bsicas de cromatografia, Centro de pesquisas e


desenvolvimento de proteo Ambiental Instituto Biolgico, v. 64, n 2, p. 227 -
229, jul/ dez, So - Paulo SP, 2002

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