Centro Universitrio de Sade, Cincias Humanas e Tecnolgicas do Piau

UNINOVAFAPI

Professora: Alessandra Lages

Disciplina: Microbiologia Clnica

Aluna: Layla Martins

Curso: Biomedicina; 6 bloco

Principais meios de cultura utilizados no laboratrio de microbiologia

Teresina-PI

Setembro de 2013
 Principais meios de cultura utilizados no laboratrio de
microbiologia

Os meios de cultura so um conjunto de substncias, formuladas de

maneira adequada, capazes de promover o crescimento bacteriano, em
condies de laboratrio. Alm da composio qumica, devero ser
consideradas aspectos fsicos relativos a temperatura, aerao e tempo, que
constituem as principais variveis que interferem diretamente no crescimento
bacteriano. Eles podem ser divididos em: meios de enriquecimento, transporte,
seletivo, diferencial e indicador.

Meios de enriquecimento:

So meios, geralmente, lquidos de composio qumica rica em

nutrientes, com a finalidade de permitir que bactrias contidas numa amostra
clnica aumentem em nmero, possibilitando um melhor isolamento.

gar Sangue (AS)

Princpio: O meio de gar sangue,

oferece timas condies de
crescimento a maioria dos
microrganismos. A conservao dos
eritrcitos ntegros favorece a
formao de halos de hemlise
ntidos, teis para a diferenciao de
Streptococcus spp. E Staphylococcus
spp.

Utilidade: Ele usado para o

isolamento de microrganismos no fastidiosos; verificao de hemlise dos
Streptococcus spp. e Staphylococcus spp.; e tambm na prova de
satelitismo para identificao presuntiva de Haemophilus spp..

Interpretao: Cor original do meio: vermelho. Beta hemlise: presena de

halo transparente ao redor das colnias semeadas (lise total dos
eritrcitos). Alfa hemlise: presena de halo esverdeado ao redor das
colnias semeadas (lise parcial dos eritrcitos). Gama hemlise (sem
hemlise): ausncia de halo ao redor das colnias (eritrcitos permanecem
ntegros).

gar Clocolate (CHOC)

Princpio: Meio de gar Chocolate amplamente utilizado para o cultivo de

microrganismos exigentes, embora cresam neste meio quase todos os
tipos de microrganismos. base do meio, adicionado sangue de cavalo,
carneiro ou coelho em temperatura alta, o que faz com que as hemcias
 lisem, liberando hemina e hematina, compostos fundamentais para o
crescimento dos microrganismos exigentes.

Utilidade: Crescimento de microrganismos exigentes Haemophilus spp.,

Neisseria spp., Branhamella catarrhalis e Moraxella spp.
Interpretao: Cor original do meio: castanho escuro (chocolate). Colnias
de tamanho pequeno a mdio, com pigmento amarelo: sugestivo de
Neisseria spp, Branhamella catarrhalis ou Moraxella spp. Colnias
pequenas e delicadas, com pigmento creme claro: sugestivo de
Haemophilus spp..

gar Cled Cystine Lactose Electrolyte Deficient

Princpio: Usado para isolamento e quantificao de microrganismos

presentes em amostras urina. A deficincia de eletrlitos inibe o vu de
cepas de Proteus.

Utilidade: Isolar e quantificar

microrganismos Gram positivos, Gram
negativos e leveduras.

Interpretao: Cor original do meio:

azul claro. Colnias lactose positiva:
cor amarela. Colnias lactose negativa:
cor azul.

Meios de transporte:

Consiste em meios isento de

nutrientes, contendo um agente redutor e uma substncia com poder de
tamponamento. Estes meios geralmente mantm pH favorvel, previne a
desidratao de secrees durante o transporte e evita a oxidao ou a auto-
destruio enzimtica enzimtica dos patgenos presentes.

Meio Stuart

Princpio: A carncia de uma fonte de nitrognio impede consideravelmente

a multiplicao de microorganismos e a composio nutritiva garante a
sobrevivncia deles.

Utilidade: Transporte de diversos materiais e

consequente conservao dos microrganismos.
Conservao de microorganismos patognicos
como: Haemophilus spp., Pneumococcus,
Salmonella spp., Shigella spp. entre outros.
 Interpretao: Cor original do meio: Branco opalescente. Como este um
meio de transporte, no h evidncia de crescimento bacteriano.
Salina Tamponada
Princpio: Meio lquido tamponado que mantm a bactria vivel.

Utilidade: Meio de transporte de fezes.

Interpretao: O crescimento indicado

pela turbidez do meio. Aps incubao
semear 3 a 4 aladas da amostra em uma
placa de SS e/ou MacConkey.

Meios seletivos:

A finalidade desses meios selecionar

as espcies que se deseja isolar, e impedir no
desenvolvimento de outros germes. Isto
conseguido geralmente pela adio de um
componente qumico especfico, como corantes, antibiticos ou outras
substncias com capacidade inibitria para algumas bactrias.

gar Mac-Conkey (MC)

Princpio: O cristal violeta inibe o crescimento de microrganismos Gram

positivos especialmente enterococos e estafilococos. A concentrao de
sais de bile relativamente baixa em comparao com outros meios, por
isso no to seletivo para Gram
negativos como, por exemplo, o gar
SS.

Utilidade: Alm de diferencial esse

meio tambm seletivo. Seleciona o
crescimento de enterobactrias.
Diferencia os enterobactrias
produtoras de lactose positiva das que
no so produtoras de lactose ou
lactose negativa.

Interpretao: Cor original do meio:

rosa avermelhado. Crescimento de bacilos Gram negativos. Colnias cor
de rosa: fermentadoras de lactose. Colnias incolores: no fermentadoras
de lactose. No h crescimento de cocos Gram positivos.

Meio Diferencial:
 Possibilita a distino entre vrios gneros e espcies de
microrganismos por possuir, em sua composio, substncias que permitem
uma diferenciao presuntiva, evidenciada por mudanas de colorao ou na
morfologia ou na morfologia das colnias. A maioria dos meios diferenciais
tambm seletiva, possuindo desse modo, vrios tipos de agentes inibidores de
crescimento.

gar Salmonela-Shigella (SS)

Princpio: gar SS possue componentes (sais de bile, verde brilhante e

citrato de sdio) que inibem microrganismos Gram positivos. A
incorporao de lactose ao meio permite diferenciar se o microrganismo
lactose positiva (bactrias que fermentam a
lactose produzem cido que na presena do
indicador vermelho neutro resultando na
formao de colnias de cor rosa), e bactrias
que no fermentam a lactose formam colnias
transparentes. Tissulfato de sdio e o citrato
frrico permitem a deteco de HS
evidenciado por formao de colnias de cor
negra no centro.

Utilidade: Selecionar e isolar espcies de

Salmonella e Shigella, em amostras de fezes,
alimentos e gua. Diferencia se o microrganismo lactose positiva.

Interpretao: Cor original do meio: vermelho alaranjado. Colnias com

centro negro (HS) ou colnias incolores: suspeita de Salmonella. Colnias
incolores: suspeita de Shigella spp. Colnias cor de rosa ou vermelho:
suspeita de Escherichia coli ou Klebsiella spp. As bactrias no
fermentadoras de lactose so incolores. As bactrias fermentadoras de
lactose aparecem na cor rosa.

Meio indicador:

utilizado no estudo das propriedades bioqumicas das bactrias,

auxiliando assim sua identificao. O tipo mais simples de meio indicador
aquele usado nos estudos de reaes de fermentao ou utilizao de certos
compostos. Incorporam-se ao bsico um carboidrato e uma substncia
indicadora. A partir da mudana de colorao, detecta-se a positividade da
reao pela produo de compostos finais de pH definitivo.

gar DNase

Princpio: Cepas de alguns microrganismos produzem DNase e

endonuclease termoestvel.
Estas enzimas hidrolisam cido
desoxirribonuclico (DNA) contido
no meio de cultura aps um
perodo de incubao.
Posteriormente este meio
acidificado com HCl 1N para a
revelao da prova.

Utilidade: Prova de identificao

que separa os principais
microrganismos de importncia
clnica, entre eles: DNase
positivos: Staphylococcus
aureus, Serratia spp. e Proteus
spp., Stenotrophomonas maltophilia, Cryseobacterium meningosepticum,
Moraxella catarrhalis. DNase negativos: Staphylococcus coagulase
negativa, demais enterobactrias, demais bacilosGram negativos no
fermentadores.

Interpretao: Revelao com HCl 1 N: Cor original do meio: amarelo

claro; colocar sobre o crescimento bacteriano HCl 1 N at banhar
totalmente a superfcie do meio; aguardar aproximadamente 3 minutos ou
at que o meio fique opaco.Positivo: Presena ntida de halo claro na parte
inferior e em volta da colnia. Negativo: Ausncia de halo claro em volta da
colnia. Revelao com azul de toluidina o: Cor original do meio: azul
claro. Positivo: Presena de colorao rosa na parte inferior e em volta da
colnia. Negativo: Ausncia de cor rosa. O meio permanece com a cor
original, azul.

gar Citrato Simmons

Princpio: Verifica a capacidade da

bactria de utilizar o citrato de sdio
como nica fonte de carbono,
juntamente com sais de amnia,
alcalinizando o meio.

Utilidade: Diferenciar gneros e espcies

de enterobactrias e no fermentadores.

Interpretao: Cor original do meio:

verde. Positivo: cor azul ou crescimento
no local do inculo. Negativo: no h
crescimento e a cor permanece inalterada. Se houver crescimento visual
na rea do inculo sem mudana de cor, o teste pode serconsiderado
positivo, reincubar por 24 at 72 horas, a incubao poder mudar a cor do
meio paraalcalino (azul).
Meio Bsico:

Contm nutrientes menores que o meio enriquecido e serve de base para a

composio de outros meios, servindo tambm para o teste de sensibilidade
aos antimicrobianos (antibiograma).

gar Mueller Hinton

Princpio: gar padronizado por Kirby e

Bauer e pelo NCCLS que oferece
condies de crescimento das principais
bactrias.

Utilidade: Meio utilizado para a realizao

do teste de avaliao da resistncia aos
antimicrobianos pelos mtodos de difuso
em disco e E-test para enterobactrias,
no fermentadores, Staphylococcus,
Enterococcus sp.

Interpretao: Cor original do meio: amarelo palha. A zona do dimetro

particular para cada droga e organismo, sendo comparado com dimetros
padronizados pelo NCCLS, que determina cada microrganismo sendo
sensvel, intermedirio ou resistente.
 Referncias Bibliogrficas

1. Lauro Santos Filho. Manual de Microbiologia Clnica. 4 ed. Joo

Pessoa. Editora Universitria/ UFPB, 2006. Pg 320.

2. Meios de Cultura. Biomedicina Brasil. Disponvel em <

http://www.biomedicinabrasil.com/2010/09/meios-de-cultura.html> Data
de acesso: 12/09/2013.

3. Descrio dos Meios de Cultura Empregados nos Exames

Microbiolgicos. Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria. Disponvel
em: <
www.anvisa.gov.br/servicosaude/.../microbiologia/mod_4_2004.pdf>
Data de acesso: 12/09/2013.