Discusin:

Posterior a ello se recurre al anlisis de la tabla 9 en la cual nos proporciona informacion acerca de
cada metodo, pero que en primer lugar se tiene que analizar cada metodo, para esto se elabor su
curva tipo de cada metodo respectivamente la cual cumple con la Ley de Bouger y Beer que deben
de ser lineales o proporcionales cada recta; ya que hay una relacin exponencial entre la
transmisin de luz a travs de una sustancia y la concentracin de dicha sustancia. Ademas hay
que tener en cuenta los valores obtenidos de R 2 de cada recta pues de acuerdo a la definicin
estadstica, el coeficiente de correlacin de Pearson es una medida de la relacin lineal entre dos
variables aleatorias cuantitativas, en donde una correlacion de <1 indica que hay una relacin lineal
directa (positiva) entre las dos variables, dicho de otro modo la concentracin de protena se asocia
a la absorbancia. Por lo tanto en cuanto a los valores obtenidos de R 2: Lowry 0.9706 y Bradford
0.9755; mientras el valor de R2 este mas cercano a la unidad, mayor ser la correlacin directa de
las seales emitidas en funcin de la concentracin, lo que nos explica el porque son unos de los
mtodos mas utilizados para la cuantificacin de protenas.

Basandonos en la bibliografia nos proporciona que para practicas adecuadas en el laboratorio se

debe tener al menos un valor de 0.98 para que los datos sean proporcionales, pero que para este
punto es critico la forma de pipetear por parte del analista.

El segundo criterio a valorar es en cuanto al anlisis estadstico que si bien analaizando en un

inicio los valores obtenidos para las replicas en cuanto a sus medias respectivas de Bradford y
Lowry, se observa que la media de Lowry equivalente a 87.63 y de Bradford es igual a 74.75 por lo
que la media de Lowry al estar mas alejada del valor estandar que es de 75 g de hemoglobina
correspondiente al tubo numero 3, solo no indicara que hay diferencia en la exactitud pero que no
nos habla de que metodo es mas exacto. Tambien otro factor importante es el limite de confianza
que obtuvimos para cada caso segun la tabla 3 y 7. Para Lowry (83.92-91.34) en su mayoria los
resultados de las replicas entran en este intervalo de confianza, lo mismo ocurre para los datos de
Bradford y sus respectvias replicas casi todas entra en el intervalo (69.88-79.62).

Aquellos valores que no entran en este intervalo de confianza se debe a errores por parte del
analista como lo indica la bibliograf de la FAO, que va relacionado con el coeficiente de variacion
en un studio de repetibilidad y reproducibilidad debe estar entre 1.5-2.5 %. De la misma manera
resultados mayores o menores a este intervalo se debe a una repetibilidad baja por parte del
analista como fue en el caso de Lowry (%C.V.=5.93) y para Bradford (%C.V.=9.11); mientras mas
bajo sea el coeficiene de variacion Habra mas homogeneidad en los datos que por lo tanto los
datos estaran menos dispersos. Cabe mencionar que valores altos en cuanto a la table 3 y 7 nos
indica que hay mayor imprecision y que en su mayoria stos valores altos si se presentan se debe
a la ineficiencia por parte del analista.

Por ultimo se realize la interferencia de sustancias no proteicas para el metodo de Lowry y Bradford
se observa que en el metodo de Bradford es afectado por el glicerol y acido tricloroacetico ya que
estan por arriba del limite de confianza, pudiendo interferir en la formacion del complejo al
reaccionar con la proteina, algo que cabe recalcar es que los resultados para Lowry no son los
mismos aunque se trato las mismas 5 interferencias y la misma proteina; para este caso el
detergente y glicerol de la misma forma fueron los que interfierieron positivamente en el metodo. Si
bien la bibliografia seala que Bradford es mas sensible que Lowry; por lo que algunas
interferencias de Bradford son reactivos como Tris, acido actico, mercaptoetanol, EDTA, sacarosa,
detergentes, SDS entre otros, tienen algunos ligeros efectos en la determinacin de protenas asi
como buffers alcalinos presentaran interferencia.

Para finalizar en base a la t-student y que nos proporcionar informacion sobre la exactitud, se
obtuvo una t calculada de -4.47 y la t de de tablas que va de un rango de -2.262 hasta 2.262,
evidentemente el valor de t calculada esta por debajo del rango indicando que no es tan exacto
comparado como Lowry.

Para la precision se us F de fisher que la F calculada fue de 1.71 y la F de tablas es de 4.03, para
ello se sabe que hay un rango que va desde -4.03 a 4.03 y que por lo tanto el valor de F calculada
entra en ste rango indicando que el metodo de Bradford es preciso con forme a sus resultados.

En general aquellos valores erroneos o inesperados se debieron principalmente al analista, que

ste tuviera una mayor capacitacion y realizara ambos metodos, tambien el uso del material en
malas condiciones como las pipetas o las celdas, asi como al momento de aforar que no sea
homogeneo para cada caso, asi como tambien la concentracion de reactivos, si se agrego de mas
o de menos afecta a cada valor.