Ao del Buen Servicio al Ciudadano

Universidad Nacional San Luis Gonzaga de Ica

Facultad de Ciencias Biolgicas

ADN FORENSE
Curso: Biologa Forense

Docente: Dr. Rafael Prado Prado

Ao: Quinto ao 10mo ciclo

Estudiantes: Carbajal Lvano Aida Brigith

Torres Flix Fiorella del Rosario

Vsquez Cucho Vleri Suzette

ICA-2017
 ADN FORENSE

El ADN se ha convertido en una de las herramientas ms precisas para la identificacin de

individuos y es utilizado por miles de laboratorios para resolver ciertos problemas jurdicos. Los
tipos de pericia ms solicitados al laboratorio de Gentica forense por los tribunales son:

(1) La identificacin de vestigios biolgicos de inters en la investigacin criminal de muy

diversos delitos.

(2) La identificacin de restos humanos y personas desaparecidas.

(3) La investigacin biolgica de la paternidad y otras relaciones de parentesco.

2. TIPIFICACIN DEL ADN:

La tipificacin del ADN de materiales biolgicos es una herramienta de gran alcance para la
identificacin humana en investigaciones forenses y en el establecimiento de bases de datos
nacionales. Otras aplicaciones para la tipificacin del ADN incluyen la determinacin de
paternidad y la investigacin aplicada.

Comparativamente con la eficiencia de los marcadores de protenas, en la identificacin forense

la tipificacin del DNA posee dos ventajas:

Puede utilizarse en el anlisis de muestras pequeas y antiguas

Su nivel de certeza de probabilidad es triple a cudruple que la anterior.
Los laboratorios forenses utilizan distintos mtodos de tipificacin del ADN:

1- Hibridacin con sondas (Southern blot): Bsicamente consiste en la identificacin de una

regin determinada mediante el uso de una sonda, que es un fragmento mono catenario de
DNA complementario a una secuencia de bases conocida. Esta sonda, marcada con un producto
radiactivo o quimioluminescente, se pone en la solucin con el DNA de la muestra y se visualiza
despus de una serie de procesos para separar los diferentes alelos que puedan existir con base
en la longitud de los mismos.

El tipo de sondas utilizadas puede ser de dos tipos:

Sondas Mono-locus (SLP): son especficas para una regin de un determinado cromosoma. El
patrn de bandas obtenido con estas sondas se denomina perfil unilocus de ADN o DNA
profiling
Sondas Multi-locus (MLP): hibridan con secuencias minisatlites presentes en varios loci de
diferentes cromosomas. Este patrn de mltiples bandas se conoce como huella gentica
multilocus o DNA fingerprint.
2- Secuenciacin: Las tcnicas de este grupo van destinadas a revelar el orden de la secuencia
de bases de una determinada regin, normalmente delimitada previamente. Puede hacerse de
forma manual o automtica. En Medicina Forense se aplica, fundamentalmente, para el anlisis
del ADN mitocondrial por sus especiales caractersticas.

3- Reaccin en cadena de la polimerasa: Es un instrumento de anlisis ptimo, puesto que

permite amplificar un pequeo nmero de molculas intactas de ADN antiguo que est
delimitada por una secuencia especfica y complementaria a unas pequeas sondas
denominadas primers que actan como iniciadores de la reaccin de polimerizacin que lleva a
cabo una enzima, habitualmente la Taq-polimerasa. Esta enzima va uniendo desoxinucletidos,
que se incluyen en la reaccin, de forma complementaria a cada una de los fragmentos de las
cadenas que se delimitan por los primers que se los toma como moldes. La repeticin cclica de
este proceso permite la obtencin de mltiples copias de dicha regin en una cantidad suficiente
para ser estudiada. Posteriormente, el ADN amplificado se puede visualizar mediante la
separacin de los alelos de diferente tamao y tincin o estudiando las variaciones de su
secuencia. De este modo es posible que cuando dispongamos de muy escasa cantidad de ADN
en un indicio o est parcialmente degradado, sea posible amplificarlo y obtener una cantidad
suficiente para su anlisis.
4.- Futuras tecnologas: biochips: Desde el anlisis de los primeros polimorfismos de ADN con
fines identificativos, la Gentica Forense ha sufrido una gran evolucin. Los expertos en la
materia han sido testigos de cmo el descubrimiento de la PCR revolucion las tcnicas de
identificacin gentica. Es probable que la prxima revolucin la constituyan los llamados
biochips o microarrays. Los biochips surgen como consecuencia de una combinacin entre
tcnicas microelectrnicas empleadas para la fabricacin de microprocesadores informticos y
materiales biolgicos. En general puede decirse que la principal caracterstica de los chips es su
capacidad para generar informacin en muy poco espacio, ya que posibilitan el procesamiento
de multitud de ensayos simultneamente.

3. VARIABILIDAD DEL ADN:

Dentro de la semejanza entre los individuos de una misma especie, estimada en un 99,9% del
genoma humano, existen variaciones individuales en la secuencia del ADN, muchas de ellas
neutras, es decir, sin efecto alguno sobre la informacin gentica, ya que afectan a secuencias
no codificantes ni funcionales del ADN. Este 0,1% de variaciones de secuencias de ADN entre
individuos es lo que se conoce como polimorfismos genticos.

En la dcada de los 80 se consigue un avance espectacular en el campo de la gentica forense a

raz del descubrimiento de las regiones hipervariables del ADN.

3.1. Polimorfismos del ADN nuclear:

Los polimorfismos de ADN de mayor uso en medicina forense se encuentran en el ADN repetido
en tandem y clsicamente se utilizan los denominados minisatlites y microsatlites que
consisten en repeticiones de fragmentos de ADN de nmero variable. La repeticiones en el ADN
microsatlite son de tamao pequeo (de 2 a 6 pares de bases) por lo que se suelen denominar
STRs ("short tandem repeats").

3.2. Polimorfismos de ADN mitocondrial (ADNmt)

El ADNmt posee mltiples aplicaciones en el campo de la Gentica Forense debido

fundamentalmente a su modo de herencia, su elevada tasa de mutacin y a la existencia de
miles de molculas por clula, lo que permite su estudio en condiciones en las que el material
biolgico a analizar se encuentra en mal estado o en cantidad insuficiente para estudiar
cualquier otro marcador nuclear (aunque representa menos del 1% del ADN celular total, posee
un gran nmero de copias).

Hay dos regiones principales en el genoma mitocondrial una gran regin codificante (90%) y una
regin pequea de aproximadamente 1.2 kb conocida como regin control. Esta regin es muy
polimrfica y la identificacin forense mediante ADNmt se basa fundamentalmente en el
estudio de esta regin no codificante.

3.3. Polimorfismos del cromosoma Y

A pesar de representar solo el 2% del componente cromosmico humano, el cromosoma Y

posee unas caractersticas que le diferencian del resto de los cromosomas:

1 La mayor parte del cromosoma Y no recombina durante la meiosis. Esto determina que todas
las secuencias localizadas en esta regin, son heredadas como un bloque de padres a hijos,
constituyendo un grupo de ligamiento.

2 Presenta una baja diversidad a pesar de lo cual se han descrito numerosos polimorfismos. De
todos ellos los ms interesantes a efectos forenses son los microsatlites.

Los microsatlites localizados en el cromosoma Y, han irrumpido con gran fuerza en el panorama
de los marcadores genticos de uso forense, debido a que suponen una ayuda inestimable para
ciertas situaciones forenses especficas como son algunos casos de investigacin de la
paternidad difciles y especialmente casos criminales con mezcla de ADN masculino y femenino.
As, los polimorfismos de cromosoma Y son importantes en el anlisis de muestras en delitos
contra la libertad sexual en las que el esperma u otras clulas del agresor estn mezcladas con
clulas femeninas de la vctima ya que si son utilizados marcadores autosmicos, se obtiene una
amplificacin preferencial del mayor de los componentes (usualmente DNA femenino), que
enmascara el perfil gentico del asaltante.

3.4. Polimorfismos de nucletido nico (Single Nucleotide Polymorphisms, SNP)

Son la forma ms sencilla de polimorfismo gentico ya que consisten en el cambio de un slo

nucletido en el contexto de una secuencia gentica. Se distribuyen de manera heterognea por
todo el genoma y se encuentran tanto en las regiones codificantes (exones) como no
codificantes (intrones y regin promotora) de los genes as como en las zonas del genoma en
donde no asientan genes conocidos (a veces llamado ADN basura).

Desde la perspectiva de la Gentica Forense su estudio tiene especial inters porque, para
muchos de ellos, las diferentes formas alternativas de los mismos aparecen con mucha mayor o
menor frecuencia en las personas procedentes de determinadas regiones geogrficas o con una
ascendencia determinada. Por eso, su anlisis puede ayudar a determinar si una persona en
estudio procede o no de un determinado origen geogrfico y comparar esta informacin con la
de las otras personas. Adicionalmente, tienen la ventaja de que, al ser estructuralmente tan
sencillos (un solo nucletido), suelen ser identificables incluso en situaciones en las que el ADN
de la muestra est muy degradado (p. ej. restos seos antiguos) y otros marcadores (p. ej. los
STR) no estn conservados.

4. LA OBTENCIN DE LAS MUESTRAS DE ADN

La obtencin de ADN en el mbito penal suele tener al menos dos escenarios y dos momentos
distintos dentro del proceso. Por un lado se trata de obtener el ADN dubitado (la prueba) de la
escena del delito o del cuerpo de la vctima y, por otro, la obtencin del ADN de referencia de
las personas implicadas en el proceso con las que realizar el anlisis gentico comparativo.

Dada la sensibilidad de las tcnicas actuales de anlisis gentico en muestras forenses (cuyo
lmite de sensibilidad est cercano a detectar el contenido de ADN de unas docenas de clulas)
el tipo y el nmero de posibles muestras e indicios biolgicos susceptibles de ser identificados
por ADN (sangre, semen, saliva, pelos, tejidos, restos celulares en objetos tocados, etc.) se ha
ido incrementando en los ltimos aos.

La facilidad con que en la actualidad puede obtenerse una muestra biolgica de referencia para
acceder al perfil gentico de un individuo (sin necesidad de violentar su integridad fsica con una
extraccin sangunea mediante, por ejemplo, una toma de saliva o, incluso sin su participacin
directa, mediante la recogida de indicios abandonados por el imputado o mediante al anlisis
de sus familiares) ha modificado tambin el tipo de intervencin corporal necesaria (a veces
innecesaria) para la obtencin de las muestras de referencia de los imputados.

4.1. Recuperacin y limpieza del material:

Lo esencial en la recuperacin del material es minimizar la contaminacin de las muestras con

DNA extrao. Se debe poner especial cuidado con cada elemento que se encuentre en el lugar
del hecho, y las personas que llegan primero al mismo, gotas de sudor, sangre, saliva, clulas
epiteliales o cabellos de todos los que analizan el sitio o llegaron a l, deben tener total cuidado,
porque pueden ser agentes contaminantes e invalidar las pruebas o los resultados devueltos por
los laboratorios.
Por elemental que parezca, no debemos olvidar nunca que los laboratorios slo estudian aquello
que se remite, y que el anlisis se inicia sobre el indicio en las condiciones en las que llega, no
en las que se manda; de ah la enorme importancia del indicio en el lugar de los hechos.

Durante la recoleccin, conservacin y envo, debe evitarse la contaminacin, ya que cualquier

material orgnico procedente de los manipuladores o ruptura de la cadena de fro puede
imposibilitar el estudio.

4.1.1. Normas generales

En este sentido deben seguirse las siguientes normas generales:

1.- Procurar condiciones de mxima esterilidad, usando guantes de goma -si se entra en la
escena del crimen- e instrumentos esterilizados o adecuadamente limpiados para la obtencin
de materiales (pinzas, tijeras etc.).

2.- Volver a limpiar o utilizar un nuevo instrumento para recoger un indicio diferente. Si se
recoge con guantes, cambiar los mismos si se recoge un elemento diferente.

3.- Usar diferentes recipientes para cada indicio, aunque hayan sido recogidos en lugares muy
prximos o estuviesen juntos.

4.- Etiquetar perfectamente cada uno de los recipientes haciendo referencia a:

fecha y hora;
identificacin de la vctima;
localizacin del indicio;
 tipo de indicio;
nmero del mismo;
nombre de la persona que lo recoge;
referencia al caso judicial.

5.- Enviar lo ms rpidamente posible al Juzgado o laboratorio, asegurando que si hay muestras
con cadena de fro, esta se mantenga.

6.- Es fundamental y bsico tomar muestras testigo de la vctima y sospechoso. De ser posible
extrayndole sangre, o en su defecto con frotis de la cavidad bucal (siempre con autorizacin de
la persona implicada).

7.- Tomar la filiacin de todas las personas que han intervenido o colaborado en la recogida de
las evidencias por si se produce algn problema de contaminacin cruzada.

4.1.2. Normas generales en casos especiales:

Estas normas generales se completarn con aquellas que son especficas a determinados
vestigios orgnicos y a su forma de presentacin.

Indicios lquidos. Se deben recoger con una jeringa estril; la sangre debe mantenerse
anticoagulada con EDTA, pero sirve con cualquier otro producto. Tambin se pueden
utilizar algodn, gasa, o hisopos estriles, para la recoleccin, dejndolos secar antes de
almacenar.

Indicios hmedos. Se debe dejarlos secar a temperatura ambiente, sin aplicar ninguna
fuente de calor. No deben guardarse en estado hmedo, ya que la humedad favorece el
crecimiento de bacterias y hongos que puede afectar a la calidad del indicio (las enzimas
restrictoras pueden degradar el DNA de los microorganismos).

Manchas secas. Las podemos encontrar sobre objetos transportables (cuchillo, bolgrafo,
armas, elementos de limpieza, etc.) o sobre objetos no transportables (muebles, paredes,
sanitarios, etc.). Dentro de los primeros debemos incluir aquellos que se pueden cortar
(cortinas, alfombras, etc.). En el caso de que se puedan transportar enviaremos el objeto o
el trozo cortado del mismo, excepto si se trata de alguna prenda de vestir que la
remitiremos sin cortar. Cuando el objeto no es transportable (suelo, muebles,)
 procederemos a raspar la mancha con un instrumento estril o lo ms limpio, depositando
el raspado en un papel de similares caracteres, que se doblar e introducir en un recipiente
hermtico limpio para mantener el indicio. En el caso de que se localicen pequeas gotas,
como consecuencia de salpicaduras, se debe raspar o tratar de recuperarlas aplicando
sobre ellas una cinta adhesiva.

Restos slidos. Con la misma precaucin, procederemos a su recoleccin y

almacenamiento. Cuando sean antiguos podremos tomarlos directamente usando guantes,
pero sin son recientes, frgiles o maleables debemos usar pinzas.

Pelos. Siempre se mantendr el cuidado que las normas generales aconsejan, debiendo ser
recogidos con pinzas. Debe evitarse un fallo muy frecuente al manejar pelos, ya que hay
que almacenar cada pelo en un recipiente diferente, pese a que aparezcan todos juntos e
incluso parezcan, macroscpicamente, proceder de una misma persona.

Huesos. Deben ser manipulados con guantes de ciruga para evitar la contaminacin con
clulas epiteliales o sudor, como se dijo previamente. En lo posible trabajar con los huesos
recientemente desenterrados, sin lavar. El lavado, el secado y posterior almacenamiento
estando hmedo pueden enmohecerlo y acelerar el proceso de degradacin. El exceso de
tierra o ceniza se elimina con escalpelo y el hueso se limpia en un chorro abrasivo de arena
fresca de xido de aluminio. Posteriormente, se elimina el polvo del hueso y el xido de
aluminio del hueso limpio utilizando una brocha suave.
Una vez recogido el indicio debe conservarse en fro (+4C) o congelarlo a la mnima temperatura
posible y llevarlo al laboratorio para realizar los anlisis correspondientes. Se debe tener en
cuenta que al conservar de esta manera, muy posiblemente se invalide las muestras para otros
anlisis diferentes a la identificacin de DNA.