SEMINARIO SEMANA N 15

TERAPIA GENICA Y CELULAS MADRE

1. Cules son las 2 caractersticas ms importantes para reconocer una

clula madre? Explquelas.

Las clulas madre son clulas con capacidad de diferenciarse (convertirse

en muchos tipos distintos de clulas en el organismo). Puede producir
clulas de uno o ms tejidos maduros, funcionales y plenamente
diferenciados en funcin de su grado de multipotencialidad.
Este tipo de clulas tienen dos caractersticas muy importantes que las
distinguen de las dems. La primera es que son clulas no especializadas
que se renuevan ilimitadamente. La segunda es que bajo ciertas
condiciones fisiolgicas o experimentales, se puede inducir a que se
conviertan en clulas con funciones especiales (por ejemplo, clulas
musculares cardacas o clulas pancreticas que produzcan insulina).
Se les puede clasificar en clulas madre embrionarias, aquellas que forman
parte de la masa celular interna de un embrin de 4-5 das de edad, y
clulas madre adultas, aquellas no diferenciadas que se encuentran en
tejidos y rganos adultos y que poseen la capacidad de diferenciarse para
dar lugar a clulas adultas del tejido en el que se encuentran.
Hoy en da, se estn realizando muchos estudios acerca de las clulas
madre ya que tienen mucho potencial en muchas reas de la salud y la
investigacin mdica. El estudio de estas clulas puede ayudar a explicar
cmo se producen algunos cuadros serios tales como los defectos
congnitos y el cncer. Algn da, las clulas madre podrn utilizarse para
producir clulas y tejidos para el tratamiento de muchas enfermedades,
inclusive la enfermedad de Parkinson, la enfermedad de Alzheimer, los
traumatismos en la mdula espinal, las enfermedades cardacas, la
diabetes y la artritis.

2. Cules son los tipos de clulas madre que existen (segn clasificacin:
totipotentes, pluripotentes, multipotentes, unipotentes)?.

De acuerdo al tipo de tejido que originan, existen cuatro tipos de clulas madre:
totipotentes, pluripotentes, multipotentes y unipotentes

El trmino totipotencial (del latn totus, que significa completo) hace referencia al
potencial que tienen estas clulas de generar un embrin completo (tejido
embrionario y extraembrionario); es la que puede dar lugar a todo tipo de clulas
del organismo, incluso a las clulas placentarias. Slo el zigoto u vulo fecundado
y los primeros estadios del embrin (cuando se denomina mrula) son clulas
madre totipotenciales.
Pluri (del latn plures, que significa muchos o varios) es utilizado para describirlas
clulas madre pluripotentes que pueden dar origen a progenitores que forman
cualquiera de las tres capas germinales embrionarias: mesodermo, endodermo y
ectodermo. Es importante destacar que para que una clula madre pueda
considerarse como pluripotente tiene que cumplir las siguientes condiciones: en
primer lugar, una nica clula debe ser capaz de diferenciarse a progenitores
especializados procedentes de cualquier capa embrionaria; en segundo lugar,
demostrar la funcionalidad in vitro e in vivo de las clulas en las que se ha
diferenciado, y, finalmente, que se produzca un asentamiento claro y persistente
de stas en el tejido blanco, tanto en presencia como en ausencia de dao en los
tejidos en los cuales se injerta.
Las clulas madre multipotenciales son aquellas que pueden dar origen a
precursores relacionados solamente con una de lastres capas embrionarias; por
ejemplo, clulas madre que dan origen a tejidos derivados exclusivamente del
endodermo como tejido pancretico o pulmonar
las clulas madre unipotenciales, que corresponden a las clulas que solo pueden
generar clulas hijas que se diferencian a lo largo de una sola lnea celular, tal
como su nombre lo refiere (del latn unus: uno) La mayora de las clulas madre
de un tejido especfico que no ha sufrido ningn tipo de agresin o dao son del
tipo unipotencial y son las responsables de la fase fisiolgica de auto-renovacin
tisular, donde la cantidad de clulas perdidas es igual al nmero de nuevas
clulas.

Las clulasmadre embrionarias pueden ser obtenidasa partir de las primeras

etapas de formacin del embrin cuando el vulo fecundado es una esfera
compacta o); stas son entonces precursores totipotenciales con capacidad de
proliferar; Las clulas madre adultas hacen referencia a cualquier clula que se
encuentre en un organismo desarrollado y que tiene dos propiedades: la
capacidad de dividirse y crear otra clula igual a s misma y la de dividirse para
crear una clula diferente de s misma. Tambin es conocida como clula
somtica (del cuerpo). Las clulas madre pueden encontrarse en los nios, as
como los adultos.

3. Cules son los tipos de clulas madre que existen (segn clasificacin por
etapa del desarrollo: embrionaria y adulta)?.

La clula madre por excelencia es el cigoto, formado cuando un vulo es

fecundado por un espermatozoide. El cigoto es totipotente, es decir, puede
dar lugar a todas las clulas del feto y a la parte embrionaria de la placenta.
Conforme el embrin se va desarrollando, sus clulas van perdiendo esta
propiedad (totipotencia) de forma progresiva, llegando a la fase de blstula
o blastocisto en la que contiene clulas pluripotentes (clulas madre
embrionarias) capaces de diferenciarse en cualquier clula del organismo
salvo las de la parte embrionaria de la placenta. Conforme avanza el
desarrollo embrionario se forman diferentes poblaciones de clulas madre
con una potencialidad de regenerar tejidos cada vez ms restringida y que
en la edad adulta se encuentran en "nichos" en algunos tejidos del
organismo.
Las clulas madre son clulas cuyo destino todava no se ha "decidido". Se
pueden transformar en varios tipos de clulas diferentes, a travs de un
proceso denominado "diferenciacin".
En las fases iniciales del desarrollo humano, las clulas madre, en el
embrin, son "diferentes" a todos los tipos de clulas existentes en el
organismo -cerebro, huesos, corazn, msculos, piel,.....
Los cientficos estn entusiasmados con la posibilidad de controlar el
espectacular poder natural de estas clulas madre embrionarias para curar
varios tipos de enfermedades. Por ejemplo, las enfermedades de Parkinson
y de Alzheimer resultan de lesiones en grupos de determinados clulas del
cerebro. Con la realizacin de un transplante de las clulas madre de un
embrin a la parte del cerebro lesionada, los cientficos esperan sustituir el
tejido del cerebro que se perdi.
En un futuro prximo, la investigacin de las clulas madre podr
revolucionar la manera de tratar muchas otras "enfermedades mortales"
como, por ejemplo, las lesiones vasculares cerebrales, la diabetes,
enfermedades cardiacas y hasta, incluso, la parlisis.
Las actitudes en relacin al uso de clulas madre para fines de
investigacin y tratamientos mdicos varan de un pas a otro. En Alemania,
por ejemplo, la extraccin de clulas madre de un embrin humano es
considerada ilegal.
Por otro lado, en Gran Bretaa, esto es legal pero se encuentra bajo una
regulacin rigurosa: los cientficos britnicos pueden utilizar embriones
humanos para la investigacin hasta 14 das despus de la fecundacin del
vulo. En este momento, el embrin es una bola hueca de clulas del
tamao aproximado de un cuarto de una cabeza de alfiler (0,2 mm).
Muchos pases an no poseen leyes explcitas que regulen la investigacin
de clulas madre humanas.
Al ser la utilizacin de embriones una cuestin de gran controversia en
trminos ticos, los cientficos de todo el mundo buscan otras fuentes de
clulas madre. El tipo de clula madre encontrada en la mdula sea de los
adultos parece ser una posibilidad. Estas clulas madre ya presentan la
posibilidad de diferenciarse de una gran variedad de diferentes glbulos
rojos a lo largo del ciclo de la vida.
En el futuro, los cientficos esperan manipular estas clulas madre adultas
para que, en vez de producir nicamente glbulos rojos puedan producir
clulas del cerebro, hgado, corazn y nervios.
Con todo, es probable que las clulas madre embrionarias presenten,
mientras tanto, las perspectivas ms inmediatas para nuevos tratamientos y
curas.
OTRO:
Existen diferentes tipos de clulas madres, aunque las ms empleadas en
biologa son las clulas madres embrionarias y las adultas:
* Clula madre embrionaria (pluripotentes): Se encuentran en la masa
celular interna del blastocisto. El blastocisto est formado por una capa
externa denominada trofoblasto, formada por unas 70 clulas, y una masa
celular interna constituida por unas 30 clulas que son las clulas madres
embrionarias que tienen la capacidad de diferenciarse en todos los tipos
celulares que aparecen en el organismo adulto, dando lugar a los tejidos y
rganos. En la actualidad se utilizan como modelo para estudiar el
desarrollo embrionario y para entender cules son los mecanismos y las
seales que permiten a una clula pluripotente llegar a formar cualquier
clula plenamente diferenciada del organismo.
* Clula madre germinales: Se trata de clulas madres embrionarias
pluripotenciales que se derivan de los esbozos gonadales del embrin.
Estos esbozos gonadales se encuentran en una zona especfica del
embrin denominada cresta gonadal, que dar lugar a los vulos y
espermatozoides. Tienen una capacidad de diferenciacin similar a las de
las clulas madres embrionarias, pero su aislamiento resulta ms difcil.
* Clulas madres fetales: Estas clulas madres aparecen en tejidos y
rganos fetales como sangre,hgado, pulmn y poseen caractersticas
similares a sus homlogas en tejidos adultos, aunque parecen mostrar
mayor capacidad de expansin y diferenciacin. Su procedencia no est del
todo clara. Podran tener origen embrionario o bien tratarse de nuevas
oleadas de progenitores sin relacin con las clulas madres embrionarias.
* Clula madre adulta: Son clulas no diferenciadas que se encuentran en
tejidos y rganos adultos y que poseen la capacidad de diferenciarse para
dar lugar a clulas adultas del tejido en el que se encuentran, por lo tanto
se consideran clulas multipotenciales. En un individuo adulto se conocen
hasta ahora alrededor de 20 tipos distintos de clulas madre, que son las
encargadas de regenerar tejidos en continuo desgaste (como la piel o la
sangre) o daados (como el hgado). Su capacidad es ms limitada para
generar clulas especializadas. Las clulas madre hematopoyticas de
mdula sea (encargadas de la formacin de la sangre) son las ms
conocidas y empleadas en la clnica desde hace tiempo. En la misma
mdula, aunque tambin en sangre del cordn umbilical, en sangre
perifrica y en la grasa corporal se ha encontrado otro tipo de clula madre,
denominada mesenquimal que puede diferenciarse en numerosos tipos de
clulas de los tres derivados embrionarios (musculares, vasculares,
nerviosas, hematopoyticas, seas, etc). Aunque an no se ha podido
determinar su relevancia fisiolgica se estn realizando abundantes
ensayos clnicos para sustituir tejidos daados (corazn) por derivados de
estas clulas.
OTRO:
CLULAS MADRE EMBRIONARIAS Y GERMINALES
En 1998 dos grupos informaron de la obtencin de clulas madre humanas,
reproduciendo lo que ya se haba logrado en ratones:
* El trabajo de Thomson y colegas en la Universidad de Wisconsin,
financiado por Geron: aislamiento y cultivo de clulas madre embrionarias
(ES) a partir de blastocistos sobrantes procedentes de programas de FIV.
* El de Gearhart, en la Universidad John Hopkins obtuvo clulas madre
germinales embrionarias (EG) a partir de fetos abortados.
*
Las posibles aplicaciones de estas clulas madre embrionarias son:
* Estudios bsicos
* Diseo de nuevos medicamentos
* El uso que ms ha llamado la atencin sera el empleo de las clulas
madre o sus derivados para terapias celulares o incluso reparacin de
tejidos daados.
Se ha calculado que se usaran embriones sobrantes de programas de
FIV, en unos cuantos aos se podran establecer unas 1000 lneas distintas
de clulas ES humanas. De los estudios realizados hasta ahora, parece
incluso que la frecuencia de derivacin de ES humanas es alta (25-33%),
superior a la de los ratones, especie en la que, adems, hay variaciones en
la eficiencias de derivacin dependiendo de las razas.
Estas clulas (conocidas con los nombres de Embrionic stem o EScells en
ingls) actualmente se utilizan para analizar el desarrollo embrionario, y
obtener mayor conocimiento sobre los mecanismo y las seales que
permiten a esta clula pluripotente (formador de linaje celular) crear clulas
diferenciadas del organismo.
Son obtenidas de la masa celular interna de un embrin de 4 a 5 das de
edad, y se encargan de formar los tipos celulares de un organismo adulto.
Una de sus cualidades ms importantes es que pueden mantenerse, tanto
en el embrin como en determinadas condiciones de cultivo, de manera
indefinida, y al dividirse forman una clula igual a la que le dio origen.
Asimismo, existen tres maneras de obtener estas clulas:
* Extraerlas de embriones.
* A travs de tcnicas de clonacin.
* Forzar la divisin de vulos sin fecundar (el menos utilizado de los tres).
CLULAS MADRE DE ADULTO
En humanos se conoce desde hace aos, al igual que en ratones, la clula
madre hematopoytica de adultos, que reside en la mdula sea y que da
origen a toda las lneas de clulas sanguneas e inmunes. Aunque se
conocen desde hace tiempo clulas madre en tejidos que, como la sangre o
la epidermis, presentan gran tasa de proliferacin, solo recientemente se
han descubierto clulas madre en rganos que normalmente tienen una
baja tasa de renovacin, como es el caso del cerebro.
As pues, la novedad ha consistido en reconocer la existencia de clulas
madre pluripotentes en otros tejidos y rganos, y an ms interesante, que
algunas de ellas presentan la suficiente flexibilidad como para generar
clulas especializadas de otros linajes.
Esto ha supuesto una sorpresa alentadora, ya que aumenta la perpectiva
de obtener a largo y medio plazo terapias celulares, sin los problemas
ticos asociados a destruir embriones para obtener clulas madre.
Tambin conocidas con el nombre de clulas madre especficas de tejido,
son las que estn alojadas en el organismo de fetos en desarrollo, recin
nacidos, nios y adultos.
Son ms limitadas y especializadas que las clulas madre embrionarias,
debido a su capacidad para formar solamente uno o dos tipos de tejido,
como son las casos de clulas de sangre y del sistema inmunolgico,
clulas musculares, o cerebrales, entre otros.
Asimismo, su capacidad para reemplazarse es ms limitada que las clulas
madre embrionarias. No obstante, en la actualidad se conocen cerca de 20
tipos de estas clulas madre en el individuo adulto, las mismas que se
encargan de regenerar tejidos en situacin de desgaste como la piel y la
sangre, o daados como el hgado.
Las clulas madre hematopoyticas de mdula sea (encargadas de formar
la sangre) son las ms conocidas y empleadas en las clnicas.
OTRO:
Existen dos tipos bsicos:
* Clulas madre embrionarias: stas se obtienen ya sea de fetos abortados
o de vulos fertilizados que han sobrado de una fecundacin in vitro (FIV).
Son tiles para propsitos mdicos o investigativos porque pueden producir
clulas para casi todos los tejidos en el cuerpo.
* Clulas madre adultas: stas no son tan verstiles para propsitos de
investigacin porque son especficas para ciertos tipos de clulas, tales
como sangre, intestinos, piel y msculo. El trmino "clula madre adulta"
puede confundir porque tanto los nios como los adultos las tienen.
OTRO:
CLULAS MADRE EMBRIONARIAS, ADULTAS
La ciencia de clulas madre es una de las reas ms importantes en la
investigacin biomdica actual. Ya ha dado ideas claves sobre la
escurridiza biologa del desarrollo humano y tiene un gran potencial para
aumentar nuestra comprensin sobre enfermedades devastadoras.
Qu es una clula madre embrionaria?
Las clulas madre embrionarias slo existen en las primeras fases del
desarrollo embrionario y son capaces de producir cualquier tipo de clula en
el cuerpo. Bajo las condiciones adecuadas, estas clulas conservan la
capacidad de dividir y hacer copias de s mismas indefinidamente. Los
cientficos estn empezando a comprender cmo hacer que estas clulas
se conviertan en cualquiera de los ms de 200 distintos tipos de clulas del
cuerpo humano.
Qu es un adulto con clulas madre?
Las clulas madre adultas, tambin conocidas como clulas madre
especficas de tejido, estn presentes en los adultos, los nios, los recin
nacidos y fetos en desarrollo. Las clulas madre adultas son ms limitadas
y especializadas que las clulas madre embrionarias porque tienen la
capacidad para hacer slo uno o dos tipos de tejido, como por ejemplo
clulas de sangre y del sistema inmunolgico, clulas cerebrales, o clulas
musculares. Las clulas madre adultas tambin tienen una capacidad ms
limitada para reemplazarse que las clulas madre embrionarias.
Qu es una clula madre pluripotente inducida (iPS por sus siglas en
ingls)?
Las clulas iPS son clulas adultas reprogramadas a comportarse como
clulas madre embrionarias. Si bien las clulas IPS son un descubrimiento
emocionante, estas clulas nunca podran ser utilizadas en los pacientes
porque el uso de virus para reprogramar las clulas adultas predispone las
clulas a cncer. Como resultado, estas clulas no pueden reemplazar el
uso de clulas madre embrionarias. Hay un acuerdo generalizado entre los
investigadores principales de clulas madre, incluidos los cientficos que
desarrollaron clulas IPS, que la investigacin debe continuar en todos los
tipos de clulas madre incluidas las derivadas de embriones.
Se realizaron algunos de los trabajos anunciados en noviembre de 2007 en
la Universidad de Wisconsin por James Thomson. Las primeras etapas de
este trabajo utilizan clulas madre embrionarias procedentes de embriones
restantes de fecundacin in Vitro (FIV). Esta labor habra sido ilegal en
Michigan, que ilustra cmo las restricciones bajo la ley del estado de
Michigan sofocan el descubrimiento y les impiden a los cientficos de
Michigan la capacidad de participar en investigacin crtica.
CLULAS MADRE EMBRIONARIAS
Las clulas madre embrionarias pueden ser de 3 tipos de acuerdo con su
procedencia: clulas madre embrionarias propiamente dichas, clulas
madre germinales y clulas madre de tumores de clulas germinales
(teratomas y teratocarcinomas).
Las clulas madre embrionarias propiamente dichas, o simplemente clulas
madre embrionarias, derivan del embrin de los mamferos en su etapa de
blastocisto y poseen la capacidad de generar cualquier clula diferenciada
en el organismo.
Despus de la penetracin del espermatozoide, el vulo fecundado
adquiere la condicin de cigoto, en el que durante su recorrido por la
trompa de Falopio, se van produciendo sucesivamente distintos perodos
de divisin celular, lo que se conoce como proceso de segmentacin, y que
aumenta rpidamente el nmero de sus clulas, que reciben el nombre de
blastmeras. Aproximadamente a los 3 das el embrin tiene el aspecto de
una esfera compacta que se denomina mrula, que en su evolucin pasa
por una fase de 16 blastmeras, otra de 32 y una final de 64 blastmeras.
Si en cualquiera de las fases de segmentacin se extrae una blastmera,
esta puede dar lugar a otro embrin. Alrededor de los 5 das comienza a
introducirse lquido en el interior de la mrula para formar una cavidad: el
blastocele. En esta etapa, el cigoto se llama blastocisto y posee en uno de
sus polos una agrupacin celular que recibe el nombre de masa celular
interna o embrioblasto, que forma una prominencia dentro del blastocele.
Las clulas que la integran dan origen a todos los tipos celulares, sistemas,
tejidos y rganos del individuo en formacin. Adems, tiene una capa
celular aplanada que recubre la cavidad del blastocisto y la parte exgena
del embrioblasto, y que se denomina masa celular externa o trofoblasto, de
donde deriva la placenta. Hacia el final de la primera semana del desarrollo,
el blastocisto humano ha comenzado su anidacin en la mucosa uterina
mediante la introduccin en esta de las clulas trofoblsticas que recubren
el polo del embrioblasto.
Un aspecto que debe quedar bien esclarecido es que las clulas de la masa
interna no mantienen indefinidamente in vivo su capacidad de generacin
de cualquier tipo celular, pues ellas se van diferenciando progresivamente
en los diversos tipos celulares durante la fase intrauterina del desarrollo. Sin
embargo, cuando se extraen de su ambiente embrionario natural y se
cultivan in vitro, s son capaces de proliferar ilimitadamente y a su vez
mantener su potencial de generar clulas capaces de diferenciarse en
cualquiera de los tejidos del organismo. En este estado es que se califican
como clulas madre embrionarias.
Algunos cientficos plantean 2 etapas en el desarrollo embrionario y utilizan
el trmino preembrin para referirse al embrin humano en la primera etapa
de su desarrollo, calificada como etapa preembrionaria o del embrin
preimplantatorio. Esta etapa abarcara desde la primera divisin celular
hasta el inicio de su diferenciacin celular, aproximadamente 7 das
despus de la fecundacin, perodo en que comienza a anidarse en la
pared uterina, o bien hasta su implantacin completa que se produce hacia
el da 14, momento que coincide con la formacin de la lnea primitiva o
cresta neural, esbozo del sistema nervioso. Despus de la formacin de la
cresta neural, el preembrin pasara a ser conocido como embrin, que ya
en este estado no se puede subdividir sin que esto cause su muerte.
Sin embargo, otras personas no aceptan esta clasificacin y refieren que la
etapa embrionaria debe ser una sola, que se extendera desde la
fertilizacin hasta los 90 das de gestacin, situacin en que el embrin
pasa a ser llamado feto.
Las clulas madre germinales se localizan en la cresta germinal de los
fetos, lugar donde se produce la diferenciacin de la lnea germinal. Las
clulas germinales no inician la diferenciacin sexual hasta la mitad de la
gestacin. Se conoce que hasta ese momento mantienen capacidad de
diferenciacin hacia diferentes lneas celulares. Tal como ocurre con las
clulas madre embrionarias, ellas poseen una gran capacidad proliferativa,
que se hace evidente cuando se someten a cultivo. Se ha sealado que en
estas condiciones las clulas madre germinales se mantienen viables solo
durante 70 a 80 pases, pero tienen la ventaja que no forman teratomas
cuando se inyectan en ratones, por lo que pudieran representar una fuente
ms segura de material trasplantable.
Las clulas madre de los teratomas y teratocarcinomas se localizan en
estos tipos de tumores gonadales. Dichas clulas derivan de clulas
primordiales germinales del embrin despus de su implantacin; estos
tumores estn conformados por una gran variedad de estructuras celulares
que incluyen clulas musculares, cartlagos, huesos, dientes, epitelio y
otras derivadas del endodermo, mesodermo y ectodermo embrionario.
CLULA MADRE SOMTICA O ADULTA
Clsicamente se ha definido como una clula especializada dentro de la
organizacin de las clulas de un tejido especfico de un organismo ya
formado, que est restringida en su capacidad de diferenciacin y es capaz
nicamente de generar clulas del tejido que representa, a las que debe
recambiar de forma natural. Se ha sugerido que en su evolucin, el
organismo sita en los tejidos clulas madre somticas como parte de los
mecanismos que emplea para su renovacin en condiciones fisiolgicas o
ante un dao hstico.
Diversas informaciones han sealado la existencia de clulas madre
adultas en varios sitios del organismo, entre ellos mdula sea, sangre
perifrica, sangre del cordn umbilical, cerebro, mdula espinal, grasa,
 pulpa dentaria, vasos sanguneos, msculo esqueltico, piel, tejido
conjuntivo, crnea, retina, hgado, conductos pancreticos, folculo piloso,
tejido

4. En la mdula sea existen una gran variedad de clulas madre. Describa

las Hematopoyticas, Mesenquimales y VSEL.

Hematopoyticas:
Se definen como aqullas capaces de repoblar a largo plazo todos los linajes
hematopoyticos cuando son trasplantadas a receptores sometidos a un
tratamiento mieloablativo que permita su injerto.
Las clulas madre hematopoyticas (CMH) son las precursoras de todas las
clulas que componen nuestra sangre y nuestro sistema inmunitario. En los
adultos, esas clulas progenitoras se hallan en la mdula sea, un complejo tejido
blando que ocupa los espacios huecos del interior de los huesos, en particular de
los huesos largos y planos.
Durante toda nuestra vida, un gran nmero de CMH se diferencia continuamente
para llenar los rganos hematopoyticos y linfticos con clulas maduras y
reemplazar las clulas que llegan al final de su vida til o bien son eliminadas o se
pierden por otros motivos. As, pues, las CMH son esenciales para nuestro
crecimiento y supervivencia. La capacidad de las CMH para repoblar la sangre y el
sistema inmunitario es una propiedad extremadamente til para tratar algunos
trastornos. De hecho, la infusin de CMH puede salvar al individuo de un fracaso
medular derivado de un trastorno medular o de la exposicin a radioterapia o
quimioterapia, generando una progenie de nuevas clulas sanas. En
experimentos, una sola CMH logr repoblar la sangre de un ratn que recibi una
dosis de radioactividad que le habra ocasionado la muerte.
La primera evidencia de la existencia de clulas madre hematopoyticas en el ser
humano surgi en 1945, cuando se observ que algunos individuos que haban
sido expuestos a dosis letales de radiacin podan ser rescatados mediante un
trasplante de mdula sea de un donador sano, el cual permita la regeneracin
del tejido sanguneo. En 1960, McCulloch y Till notaron que ratones radiados
letalmente, a los que se haba inyectado clulas extradas de la mdula sea de
ratones no radiados, podan sobrevivir y comenzaron a analizar los tejidos
hematopoyticos de estos animales con la finalidad de encontrar los componentes
causales de la regeneracin sangunea. De esta manera, hallaron masas
tumorales en el bazo de los ratones que, una vez examinadas, resultaron ser
colonias de hematopoyesis, capaces de generar
las tres estirpes celulares, de donde naci el concepto y definicin de la clula
madre como aquella capaz de autorrenovarse, diferenciarse y proliferar
extensamente.

Mesenquimales:
Las clulas madre mesenquimales son clulas pluripotentes y adultas con
morfologa fibroblastoide y plasticidad hacia diversos linajes celulares como
condrocitos, osteocitos y adipocitos entre otros. Estas clulas pueden ser aisladas
principalmente de mdula sea, sangre de cordn umbilical y tejido adiposo de
donde se han logrado establecer cultivos que han permitido estudiar sus
propiedades funcionales y fenotpicas.
Las diferencias entre los trminos de clulas madre mesenquimales y clulas
mesenquimales para que estos no sean utilizados indistintamente:
El tejido mesenquimal o mesnquima es el tejido conectivo embrionario que
procede del mesodermo y tiene una gran variedad de tipos celulares. A partir de
este tejido, por diferenciacin celular y regulacin diferencial, se originan patrones
de desarrollo diferentes que provocan la aparicin de tejidos ms especializados.
Desde un punto de vista estricto, las clulas que se encuentran en el
mesnquima son las denominadas clulas mesenquimales, pero este trmino no
es lo suficientemente descriptivo, ya que se utiliza sin ningn rigor para tambin
hacer referencia a las clulas madre mesenquimales (CMMs), que son un tipo de
clulas pluripotenciales a partir de las cuales pueden originarse los diferentes tipos
de tejidos conectivos.
As, mientras que las clulas del mesnquima no se diferencian en clulas
hematopoyticas, las CMMs s que pueden hacerlo. Esto implica que las CMMs
son clulas mesenquimales, pero no todas las clulas mesenquimales son CMMs.
Caractersticas
Las CMM son un blanco prometedor como teraputico biolgico para un amplio
rango de necesidades mdicas no resultas. Las razones para esto son muchas e
incluyen: fcil aislamiento y expansin en cultivo, multipotencia, efectos
paracrinos, propiedades inmunomoduladoras, conducta migratoria y
consideraciones ticas.
VSEL:
VSEL, que puede movilizarse internamente y se pueden recoger de la sangre
perifrica para luego diferenciarse en clulas de las tres capas germinales.
Aunque los beneficios de la tecnologa VSEL son an tericos, se piensa que
podra haber aplicaciones clnicas para la regeneracin cardaca, la degeneracin
macular, los accidentes cerebro vasculares y la enfermedad vascular perifrica en
un periodo de tan slo tres a cinco aos.

Las clulas VSEL, como su propio nombre indica, tienen un tamao pequeo de
entre 3 y 5 micras. Lo interesante de estas clulas es que expresan antgenos
embrionarios y ciertos marcadores de clula germinal primordial. Estas clulas
VSEL se encuentran presentes tambin en la sangre del cordn umbilical, lo cual
aade un inters adicional a su conservacin privada. El gran inters de este
subtipo celular radica en que conserva la pluripotencialidad propia de las clulas
embrionarias, mientras que al estar presentes en la sangre del cordn y en la
sangre perifrica, su obtencin no requiere la manipulacin ni destruccin de
embriones.
Slo la sangre completa almacena las VSELs Un importante avance ha
descubierto las VSELs (Very Small Embryonic-Like Stem Cells o clulas madre
muy pequeas que se comportan como embrionarias). Se cree que estas VSELs
se liberan a la sangre si hay una lesin de tejido u rgano. Las VSELs contienen
varias caractersticas tpicas de las clulas madre embrionarias. Estas
propiedades indican que las VSELs son herramientas poderosas del cuerpo para
reparar daos.
Con el mtodo de reduccin de volumen se pierden las VSELs Las VSELs se
encuentran en el mismo gradiente de densidad que los glbulos rojos y se pierden
al centrifugar las clulas madre antes de su almacenamiento, es decir, se
desechan como son las hormonas y los factores de crecimiento.
Las VSELs tambin se pueden encontrar en otros tipos de tejidos como ocurre con
las clulas madre adultas. Este hallazgo fue descubierto durante la investigacin
llevada a cabo por la Universidad de Louisville. En sta tambin se afirm que el
50% de estas VSELs se pierde con el mtodo de volumen reducido debido a su
morfologa nica.

5. Qu es un marcador celular? Explicar brevemente la Protena verde

fluorescente (GFP).

Los marcadores celulares se encuentran en todas las celulas somaticas ,son

antigenos (proteinas) de superficie de todas las celulas, algunas de estas
proteinas se encuentran solo en ciertos tipos de celulas, por ejemplo el CD16 es la
proteina que se expresa especficamente en neutrfilos, clulas NK y macrfagos.
Proteina verde fluorescente

La protena verde fluorescente (o GFP, por sus siglas en ingls, Green

Fluorescent Protein) es una protena producida por la medusa Aequorea victoria,
que emite bioluminiscencia en la zona verde del espectro visible. El gen que
codifica esta protena, que ya ha sido clonado, se utiliza habitualmente en biologa
molecular como marcador1. El descubrimiento y estudio de GFP represent un
enorme avance para los investigadores, ampla la capacidad del microscopio
ptico, y otorga una nueva dimensin visible al ojo humano.
Los descubrimientos relacionados a la GFP de Osamu Shimomura, Martin Chalfie,
y Roger Y. Tsien merecieron el Premio Nobel de Qumica 2008, otorgado en
partes iguales a los tres, "por el descubrimiento y desarrollo de la protena verde
fluorescente.
A pesar que la llamada qumica "verde" est de moda en la comunidad de
qumicos, ningn esfuerzo de los mismos ha podido igualar las reacciones que
coordina un solo gen de esta medusa.
Las protenas fluorescentes, entre las cuales se encuentra la GFP, son muy
verstiles y se utilizan en diversos campos como la microbiologa, ingeniera
gentica y fisiologa. Permiten ver procesos previamente invisibles, como el
desarrollo de neuronas, cmo se diseminan las clulas cancerosas, el desarrollo
de la enfermedad de Alzheimer, el crecimiento de bacterias patognicas, la
proliferacin del virus del SIDA, entre otros.
Por ejemplo, clulas cancerosas permite seguir la evolucin comparativa de las
metstasis en presencia o ausencia de distintos frmacos.
La GFP tambin tiene una importancia especial en la biologa del desarrollo: si se
introduce en un estadio temprano de un embrin, se puede seguir la evolucin de
las primeras clulas, estructuras y rganos.

6. Describa brevemente la tcnica de FISH.

HIBRIDIZACIN IN SITU FLUORESCENTE (FISH)
La tcnica de Hibridizacin In Situ Fluorescente (FISH) consiste en la deteccin de
secuencias de ADN con sondas marcadas con fluorescencia sobre cromosomas o
ncleos celulares fijados sobre un portaobjetos, usando para ello un microscopio
de fluorescencia y un sistema de captura y procesamiento de imgenes.
La ventaja de la prueba radica en la rapidez de la misma al no necesitar cultivo de
clulas, lo que reduce el nivel de ansiedad de los padres.
Tras la hibridacin de las sondas con ncleos en interfase o en metafase es
posible observar la presencia de ganancias, prdidas o fusiones entre genes. Esta
metodologa se usa cada vez ms en el diagnstico de las hemopatas y tambin
es de extraordinaria importancia en el estudio de las alteraciones cromosmicas
en el lquido amnitico, vellosidades coriales, material de abortos espontneos y
en sangre de individuos en los que se sospecha la existencia de una alteracin
cromosmica.
Diagnstico Gentico Preimplantacin
El diagnstico gentico preimplantacin se presenta como un nuevo campo que,
unido a las tcnicas de reproduccin asistida, ofrece la posibilidad de analizar la
presencia de alteraciones cromosmicas y genticas en embriones antes de ser
transferidos al tero y, por tanto, antes de que se haya producido la implantacin.
Para utilizar esta tcnica la pareja debe someterse a un tratamiento de
fecundacin In Vitro (FIV). En estas condiciones, despus de la fecundacin, el
cigoto humano se divide aproximadamente cada 24 horas de manera que, 3 das
despus de la obtencin de los vulos, los embriones tienen una media
aproximada de 8 clulas o blastmeros. En este momento, se realiza la biopsia
embrionaria, tcnica mediante la cual podemos extraer 1 2 blastmeros para su
anlisis posterior, mientras que el embrin se mantiene en cultivo hasta que se
obtienen los resultados y se realiza la transferencia. Estas tcnicas de anlisis
cromosmico o gentico permiten un diagnstico muy rpido, que oscila entre las
24 horas y las 48 horas, segn los casos, compatible con el tiempo mximo de
desarrollo embrionario In Vitro. De esta manera, podemos mantener los embriones
en cultivo hasta que se obtienen los resultados y as seleccionar embriones
normales para la transferencia al tero materno.
Se realiza una seleccin muy precoz, previa a la implantacin, lo cual representa
una gran ventaja frente a las tcnicas de diagnstico prenatal (amniocentesis,
biopsia corial) en las que en caso de diagnosticar un feto como afectado, se
plantea la opcin de un aborto teraputico.
Es la estrategia de diagnstico ms temprana que existe para asegurar a la pareja
un beb sano.
FISH en Espermatozoides
Mediante esta tcnica se puede calcular el porcentaje de espermatozoides
cromosmicamente alterados permitiendo enumerar la cantidad de cromosomas
por espermatozoide. Las sondas fluorescentes utilizadas son de dos tipos, sondas
centromricas para los cromosomas X, Y, y 18; y sondas especficas de loci para
los cromosomas 13 y 21.

Quien se realiza este estudio?

Las indicaciones bsicas de la FISH en espermatozoides han sido
oligoastenoteratozoospermia, abortos de repeticin; baja tasa de fecundacin (
50%) y fallo de implantacin. Un semen con un alto porcentaje de
espermatozoides cromosmicamente alterados dar lugar a embriones anormales.
El resultado de este estudio permite aconsejar a la pareja cual es la tcnica de
reproduccin asistida adecuada a seguir.

HER2/neu
El HER2/neu es un oncogn que produce una protena que constituye un receptor
en la membrana de la clula, al que se unen sustancias que favorecen el
crecimiento de la clula (factor de crecimiento). Cuando el gen HER2 est
alterado, la protena produce encuentra en cantidad mayor de la normal, se dice
entonces est incrementada su expresin e indica un grado mayor de proliferacin
y divisin de la clula, confiriendo al cncer de mama una mayor agresividad, as
como resistencia a la quimioterapia y hormonoterapia.
Entre el 25 y el 30% de las mujeres con cncer de mama diseminado presentan
una alteracin del gen HER2. Esta alteracin se asocia a peor pronstico (mayor
tasa de recurrencia y mortalidad) y mltiples estudios han demostrado su valor
predictivo para sensibilidad o resistencia a distintos regmenes de terapia
sistmica.El inters primordial de este gen reside en su papel como diana
teraputica del trastuzumab (Herceptin), anticuerpo monoclonal humanizado
capaz de bloquear la accin del receptor HER2. Esta nueva terapia fue aprobada
por la FDA en 1998, limitndola inicialmente a pacientes con enfermedad
diseminada. Ms recientemente se ha demostrado que el empleo de trastuzumab
en estados iniciales de la enfermedad, como agente nico o en regmenes
combinados, reduce significativamente tanto el riesgo de recurrencia como la
mortalidad. La Hibridacin In Situ Fluorescente (FISH) es uno de los mtodos
utilizados para el estudio de HER2/neu, en donde se evala el nmero de copias
del gen en el ncleo celular para detectar su amplificacin. La prueba utilizada en
el Centro de Gentica Punta Pacfica se llama PATHVYSION y esta aprobada por
el Food and Drug Administration de Estados Unidos.

7. Describa y grafique brevemente el estudio: Cell differentiation:

Hepatocytes from non-hepatic adult stem cells Malcolm R. Alison, Richard
Poulsom, Rosemary Jeffery, Amar P. Dhillon, Alberto Quaglia, Joe Jacob,
Marco Novelli, Grant Prentice, Jill Williamson and Nicholas A. Wright
Nature 406, 257 (20 July 2000) doi:10.1038/35018642.

Diferenciacin celular: hepatocitos de adultos no las clulas madre

hepticas
Las clulas madre son clulas indiferenciadas de larga duracin que son
capaces de muchas rondas de divisin. Aqu mostramos que las clulas del
hgado humano adulto se pueden derivar de las clulas madre procedentes
de la mdula sea o de circulacin fuera del hgado, aumentando la
posibilidad de que las clulas madre de sangre del sistema podran ser
utilizadas clnicamente para generar hepatocitos para reemplazar el tejido
daado.
 8. Describa y grafique brevemente el estudio Chimerism of the transplanted
heart. De Quaini F, Urbanek K, Beltrami AP, Finato N, Beltrami CA, Nadal-
Ginard B, Kajstura J, Leri A, Anversa P. N Engl J Med 2002 Jan 3;346(1):5-15.

Articulo
The interaction between donor and recipient cells after transplantation has
received great attention in an attempt to identify the basis of

9. Describa y grafique brevemente el estudio: Allogeneic mesenchymal stem cells

restore cardiac function in chronic ischemic cardiomyopathy via trilineage
differentiating capacity PNAS 2009 106 (33) 14022-14027;
doi:10.1073/pnas.0903201106, vol. 106 no. 33, p. 1402227.

10. Cules son las diferencias entre:

a. Terapia Regenerativa: Regeneracin rganos y tejidos
b. Ingeniera de Tejidos: Reemplazo de rganos y tejidos slidos
c. Terapia Gnica: Implante clulas manipuladas genticamente?
Explique brevemente cada una.

TERAPIA REGENERATIVA
La terapia celular o terapia de regeneracin celular, es un tratamiento mdico
especializado en regenerar las clulas daadas, disfuncionales, desvitalizadas ya
sea por enfermedad o por el proceso de envejecimiento.
Es un tratamiento que se basa en la utilizacin de clulas madre fetales de origen
bovino, con la funcin de reparar todos las afecciones microcelulares del
organismo, as dando como resultado bienestar, aumento de la energa fsica,
mental y sexual, adems de corregir la gran mayora de los padecimientos, al igual
que brindar un efecto como tratamiento anti-envejecimiento.

7. INGENIERIA DE TEJIDOS

La Ingeniera de tejidos, es considerada como un campo de la medicina

regenerativa , es la rama de la bioingeniera que se sirve de la combinacin de
clulas, mtodos de ingeniera de materiales, bioqumica y fisicoqumica para
mejorar o reemplazar funciones biolgicas. Mientras la mayora de definiciones de
la ingeniera de tejidos cubre un amplio rango de aplicaciones, en la prctica el
trmino esta ntimamente relacionado con las aplicaciones de reparar o
reemplazar parcial o totalmente tejidos . A menudo, los tejidos implicados
requieren ciertas propiedades mecnicas y estructuras para su propia funcin.
Esta ingeniera es una especialidad que aplica los principios de la ingeniera y las
ciencias de la vida a la fabricacin de sustitutos biolgicos que mantengan,
mejoren o restauren la funcin de rganos y tejidos en el cuerpo humano. De
naturaleza eminentemente interdisciplinaria, la ingeniera de tejidos incluye
conceptos de ramas tan diversas como la biologa celular, la microfabricacin, la
robtica y la ciencia de los materiales para disear partes de reemplazo del cuerpo
humano.

8. TERAPIA GENICA
Terapia gnica implica la transferencia de material gentico a una clula, un tejido
o un rgano con el fin de curar una enfermedad o al menos mejorar el estado
clnico de un paciente, asimismo trata de curar enfermedades hereditarias,
debidas a genes defectuosos, insertando genes sanos en las clulas. Es una
terapia an en desarrollo y experimentacin, pero con un futuro prometedor, sobre
todo para tratar enfermedades que actualmente se consideran incurables.
Los componentes esenciales de la terapia son: un vector capaz de introducirse
eficiente y selectivamente en las clulas que constituyan el foco de la enfermedad,
y un gen teraputico que represente un remedio gentico para la patologa.
La finalidad principal de los estudios sobre terapia gnica en el mbito de la
medicina es conseguir los mejores resultados tanto en prevencin como en
investigacin, diagnstico y terapia de las enfermedades hereditarias; sin
embargo, esta manipulacin del material gentico puede ser utilizada en ingeniera
gentica, con el fin de mejorar determinadas caractersticas de los seres vivos.

Conclusiones:
La terapia gnica se erige en la actualidad mdica como una de las formas ms
promisorias de teraputica pero todava hace falta encontrar la respuesta a
muchos interrogantes conceptuales y tcnicos para que esta sea un arma til
contra la amplia gama de patologas que enfrentamos los seres humanos. Los
avances en genoma humano y en regulacin gnica seguramente van a traer los
elementos necesarios para hacer de la terapia gnica la nueva forma de manejar
la salud en el mundo.
Conclusion:
Las Celulas Madre, junto con la manipulacion genetica, van a constituir dos pilares
basicos de la Medicina de los proximos aos.
La tecnologia genetica impedira la aparicion de muchas enfermedades inscriptas
en nuestros genes.
La Celula Madre, por su parte, proveera de tejidos y organos de repuesto a
medida que los nuestros se vayan deteriorando.
Por supuesto que esto no es tan simple....se debe tratar de conseguir el beneficio
sin necesidad de sacrificar vidas humanas.