MTODOS DE DOSEAMENTO

1) Mtodos clssicos de doseamento

Os ensaios de potncia ou doseamento so aqueles que visam quantificar o teor de
substncia ativa em medicamentos;
A crescente demanda por matrias-primas de composio qumica definida, com elevada
qualidade tem levado as indstrias farmacuticas a implantar mtodos adequados para garantir que
essas matrias-primas cumpram com as especificaes de qualidade;
As anlises quantitativas so realizadas para estabelecer a concentrao dos componentes
essenciais em determinada amostra, processo denominado doseamento;
No que se refere determinao do teor podem existir diversos mtodos oficiais ou no,
dependendo do frmaco ou forma farmacutica;
Em relao aos mtodos oficiais, existem diferenas quanto s metodologias, as quais esto
atreladas realidade econmica de cada pas. Entretanto, os mtodos cromatogrficos so os mais
utilizados como mtodos oficiais de doseamento, especialmente de produtos acabados;
A maioria das monografias da Farmacopia Americana traz como mtodo de doseamento os
cromatogrficos;
Outras farmacopias trazem outros mtodos como volumetria em meio no aquoso,
titulaes potenciomtricas, espectrometria no UV-visvel etc;
A escolha do mtodo analtico de doseamento deve ser criteriosa, pois este no pode
apresentar falhas, j que comprometer a segurana e eficcia do medicamento;
Entre os aspectos a serem considerados na seleo de um mtodo de doseamento destacam-
se:

O tempo de anlise;

Custo;

Exatido;

Preciso;

A natureza de informaes que se procura;

A quantidade de amostra disponvel e a porcentagem de constituinte a ser determinado;
Para o doseamento de frmacos, as principais tcnicas empregadas em anlise quantitativa
baseiam-se:

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Na reprodutibilidade de reaes qumicas adequadas, utilizadas para medir as quantidades
de reagentes necessrios para completar a reao ou na determinao da quantidade de
produto obtido na reao;

Nas medidas eltricas como potenciometria;

Na medida de certas propriedades espectroscpicas;

Medidas cromatogrficas.
Os mtodos de doseamento podem ser clssicos e instrumentais:

Mtodos clssicos: baseados em reaes qumicas;

Mtodos instrumentais: baseados no uso de instrumento apropriado.
Apesar das vantagens da utilizao dos mtodos instrumentais, os mtodos clssicos at hoje
so utilizados como mtodos oficiais em um nmero significativo de ensaios de doseamento
descritos nas farmacopias.

1.1) Mtodos volumtricos

A volumetria tambm conhecida como anlise titrimtrica ou titulometria;
Vantagens: simplicidade, preciso e baixo custo;
Nesse mtodo a substncia a ser determinada tratada com um reagente adequado, o qual
adicionado sob a forma de uma soluo padronizada, determinando-se o volume de soluo
necessria para completar a reao;
Para realizar esse tipo de ensaio so necessrios: vidrarias adequadas, soluo titulante
padronizada e padres, alm de balana analtica e soluo indicadora.

Os aparelhos volumtricos utilizados so: provetas e cilindros volumtricos, pipetas
volumtricas, buretas e bales volumtricos;

So instrumentos de medidas exatas;

Para o doseamento utilizada soluo padro;

As substncias utilizadas como padro devem ser de fcil obteno, purificao, secagem e
preservao em estado puro;

No devem ser higroscpicas, no devem se oxidar em presena de ar; durante a estocagem
devem manter as mesmas caractersticas;

O total de impurezas de um padro no deve exceder 0,01 - 0,02 %.
Entre as reaes envolvidas no doseamento de frmacos encontram-se as de neutralizao,
complexao, oxirreduo e precipitao;
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1.1.1) Volumetria de neutralizao
Compreende todos os mtodos de doseamento volumtricos baseados em uma reao de
neutralizao. baseado na utilizao de uma soluo titulada de um cido qualquer para fazer uma
determinao quantitativa de uma base (acidimetria) ou, usando uma soluo titulada de uma base,
dosear quantitativamente os cidos (alcalimetria);
Um nmero considervel de frmacos possuem carter cido ou bsico, dessa forma, as
reaes cido-base so as mais comuns em titulometria;
O ponto de viragem ocorre na condio de equilbrio ou neutralidade, utilizando-se
indicadores de reao, como fenolftalena e vermelho de metila;

1.1.2) Volumetria em meio no-aquoso

Quando frmacos que possuem carter bsico extremamente fraco so titulados em meio
aquoso (neutro), a caracterstica aceptora de prtons da gua muito grande, competindo com o
frmaco pelo titulante cido;
Nesse caso recomenda-se proceder a titulao em meio com cido actico, titulando-se com
cido perclrico.

1.1.3) Volumetria de complexao

Baseia-se na formao de complexos em reaes que envolvem um on metlico e um agente
ligante;
O agente ligante mais utilizado o EDTA, pois vrios ons metlicos reagem
estequiometricamente com ele;

1.1.4) Volumetria de oxirreduo

Entre as anlises volumtricas que utilizam reaes de oxirreduo na rea farmacutica
destaca-se a iodometria;
Nessa tcnica procede-se a adio de um excesso conhecido de soluo volumtrica de iodo,
com posterior titulao com soluo padronizada de tiossulfato de sdio, utilizando soluo
indicadora de amido;
O doseamento do cido ascrbico pode ser realizado por esse mtodo.
Ex.: Doseamento do cido ascrbico: pesar exatamente 0,2000 g de cido ascrbico, em
mistura de gua descarbonatada e 25 mL de cido sulfrico 10 %. Titule a soluo com iodo 0,1 mol
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L-1 usando amido como indicador, at cor azul persistente. Cada mL de soluo de iodo 0,1 mol L-1
equivale a 8,806 mg de C6H8O6.

1.1.5) Volumetria de precipitao

Entre as tcnicas titulomtricas a menos precisa;
Ex.: titulao de cloreto com soluo volumtrica de nitrato de prata e dicromato de potssio
como indicador;
Nesse mtodo, as reaes qumicas utilizadas levam a formao de produtos pouco solveis.
A principal reao utilizada baseia-se em dosear substncias que precipitam em presena de nitrato
de prata;

2) Mtodos instrumentais de doseamento

Destacam-se pela maior sensibilidade, trabalhando-se em escala da ordem de microgramas;

2.1) Mtodos espectroscpicos

So caracterizados pela interao entre matria e energia eletromagntica;
A sensibilidade e seletividade desses mtodos dependem tanto da concentrao da amostra
como da estrutura qumica e intensidade ou freqncia de energia utilizada;
Em relao concentrao tem-se, geralmente, uma relao direta e proporcional;

2.1.1) Espectrometria de absoro no UV-visvel

Nessa tcnica so empregadas as propriedades dos tomos e molculas em absorver e emitir
energia eletromagntica;
utilizada na determinao quantitativa de substncias por meio da incidncia de luz;
Uma soluo quando iluminada por luz branca apresenta cor que resultante da absoro
dos vrios comprimentos de onda. Essa absoro depende da natureza da substncia, da
concentrao da soluo e do caminho ptico percorrido pela luz;
No entanto, vrias solues de frmacos sem cor podem absorver energia eletromagntica,
em comprimentos de onda menores. Essas substncias absorvem energia no UV;

Fotometria

Segundo a Lei de Lambert-Beer:
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 A = a.b.c
A lei correlaciona a intensidade de energia com o caminho ptico percorrido e a
concentrao da soluo. Onde:
A = absorbncia;
b = caminho ptico percorrido;
c = concentrao da soluo.

Curva analtica

Anteriormente denominada reta de calibrao;

Para obteno de uma curva analtica faz-se o uso de solues padres e brancos. A soluo
padro apresenta a concentrao exata de uma substncia, servindo como referncia na
determinao espectrofotomtrica; usa-se branco em espectrofotometria para estabelecer
o zero de absorbncia ou 100 % de transmitncia;

Prepara-se uma srie de solues com padro em vrias concentraes de forma a cobrir a
faixa de trabalho desejada;

Procede-se ao doseamento das solues contendo padro conforme o mtodo
recomendado. So feitas leituras usando o branco no comprimento de onda recomendado
pela literatura;

Nos equipamentos utilizados pode-se optar pela leitura em T ou A;

Deve-se plotar em um grfico os resultados de absorbncia (ordenada) com as
concentraes dos padres (abscissa);

Verificar a linearidade dos pontos, sendo que a curva deve ser interpolado entre os pontos;

A curva analtica deve ter ngulo o mais prximo possvel de 45 em relao ao ponto de
origem;

Procede-se regresso linear da curva, obtendo-se a equao da reta (y = ax + b) e o
coeficiente de determinao da reta (R2);

Por meio dessa equao pode-se verificar uma proporcionalidade entre os valores de y
(absorbncia) e x (concentrao), conseguindo-se determinar a concentrao de
determinada soluo.

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2.2) Mtodos cromatogrficos
So os mais aplicados pelas indstrias farmacuticas no doseamento de frmacos, sendo o
mais utilizado o HPLC;
O HPLC apresenta boa sensibilidade e baixa vulnerabilidade a interferentes, j que se trata de
uma tcnica de separao acoplada a um sistema de deteco;
Basta que o produto seja solvel em algum solvente cromatogrfico ou mistura de solventes
e detectvel por algum dos diversos sistemas de deteco para que se possa aplicar esse mtodo;
Os mtodos cromatogrficos geram grficos com picos que representam a passagem do
analito pelo detector em determinado instante da anlise;
Esse pico pode ser relacionado com a concentrao desde que seja construda uma curva
analtica com padres. Para estabelecer essa correlao pico/concentrao preciso determinar a
altura ou a rea dos picos obtidos;
As curvas analticas, tambm chamadas de grficos de calibrao, estabelecem uma relao
entre a resposta do instrumento e uma certa concentrao de analito. A linearidade determina at
que ponto essa relao se mantm linear;
A construo da curva analtica requer a anlise de alquotas de soluo padro, realizada em
replicata. As alturas ou reas dos picos registrados so plotadas no eixo das ordenadas e as
respectivas concentraes no eixo das abscissas. Por meio de regresso linear a melhor reta obtida
para os dados.