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LA PAZ - BOLIVIA
FEBRERO - 2003
DEDICATORIA
RESUMEN
1
Tesina Facultad de Bioqumica y Farmacia
Zonia Camargo Rodas UMSA
2
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Zonia Camargo Rodas UMSA
1. INTRODUCCIN
La mayora de las infecciones del tracto urinario son debidas a bacilos Gran
negativos (enterobacterias) de los cuales, la mayor frecuencia corresponde a
cerotipo de E. Coli, que son los responsables de ms del 80% de las
infecciones primarias y del 75% de las recurrencias. El grupo Kebsiella
representa del 10 a 15% y Proteus, Enterococos, Stapliy Lococos y especies
de Pseudomonas para los casos restantes.
1
RODRGUEZ, Lanza, IUL. HTM. W.W.W. Geocilios. Com. INTERNET
3
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urinario.
El rin es una glndula tubular compuesta cuyos tbulos son de dos tipos:
flexuosos, incluidos en la corteza renal, y los rectos que forman parte de la
sustancia medular y los corpusculos de Malpighi a travs de los cuales se filtra
el suero
2
RODRGUEZ, Lanza, IUL. HTM. W.W.W. Geocilios. Com. INTERNET
4
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FISIOLOGA RENAL
3
ARGERI, Nelson Jorge, LOPARDO Horacio ngel. Anlisis de Orina Fundamento y Practica,
Editorial Medica Panamericana. Buenos Aires - Argentina. Pg. 13 Y 16
4
VIDAL, Jorge. Anatoma. Buenos Aires 1996. 4va Edicin. Pg. 325-326.
5
GAYTON HALL. Tratado de Fisiologa Mdica. Mxico. 1999. Edit McGraw-Hill
interamericana. Pg. 345
5
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Alrededor del 20% y 30% de las neuronas tienen sus glomrulos situados
profundamente en la corteza renal, cerca de la mdula y se llaman neuronas
6
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6
Idem Pg. 345-347.
7
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COMPOSICIN DE LA ORINA.
7
Idem. Pg. 350.
8
ENCICLOPEDIA DE LA CIENCIA Y DE LA TCNICA, EDICIONES OCANO. Pg.34
8
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COMPOSICIN DE LA ORINA
Agua: 955 ml 95.5%
Cloruro de sodio (sal): 10 ml 10%
Urea: 20 ml 20%
Acido rico: 0.5 ml 0.5%
Otras sustancia: 14.5 ml 14.5%
Total: 1000ml 100%
9
VIDAL, Jorge. Anatoma Fisiologa e Higiene, Editorial Bruo 4ta Edicin. Lima Per.
Pg. 3299
9
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10
http://www.carlosaya.net/biblioteca/contenidos/docs/nefrologa/predialisis/pacodiez
11
ENCICLOPEDIA DE LA CIENCIA Y DE LA TCNICA, EDICIONES OCANO. Pg. 7.
10
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La orina normal es txica en mayor grado segn las distintas horas del da, la
orina de la vigilia presenta un poder ms txico que la del sueo. Su poder
txico de la orina no proviene exclusivamente de la urea que contiene, sino
tambin de otras sustancias como las materias colorantes, sales de potasa y
compuestos nitrogenados no bien determinados. Si estas substancias txicas
quedaran en la sangre, un hombre morira intoxicado a los dos das, Si la
eliminacin es insuficiente, el hombre contrae una enfermedad grave llamada
uremia 12 .
A su salida de los poros urinarios la orina es recogida por los clices, estos son
pequeos tubos que nacen del cuello de cada papila para formar los
conductos colectores ms voluminosos, que desembocan en la pelvis.
En la Pelvis renal desembocan los clices que tienen forma de embudo estos
se comunican con el urter por medio de su vrtice. 13
2.1.7.2 URTERES
Estos conductos forman parte del conducto excretor el que comunica la pelvis
con la vejiga, tienen una longitud aproximada de unos 30 centmetros y un
dimetro aproximado de unos 5 milmetros, los urteres a la salida de la pelvis
se hallan separados por una distancia de 7 centmetros, pero al dirigirse hacia
12
ENCICLOPEDIA DE LA CIENCIA, EDICIONES OCANO. PG. 330 331
13
VIDAL, Jorge. Op. Cit. Pg 328.
11
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2.1.7.3 VEJIGA
2.1.7.4 URETRA
14
Idem. Pg 328.
15
Idem. Pg 329.
16
Idem. Pg 329.
12
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Este recipiente deber rotularse con nombres y apellidos, fecha y hora que se
recolecto la muestra y de inmediato llevar al laboratorio para su anlisis 17 .
2.2.2.1 VOLUMEN
2.2.2.2 COLOR
ORINA INCOLORA:
AMARILLO INTENSO:
17
ARGERI, Nelson Jorge y LOPARDO, Horacio ngel. Anlisis de Orina Fundamentos y
Prctica, Editorial Mdica Panamericana Buenos Aires Argentina,
18
Idem. Pg. 26
13
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ORINA NEGRUZCA
a) En la quiluria.
19
Idem. Pg. 26
20
Idem. Pg. 26
21
Idem. Pg. 26
22
Idem. Pg. 26
14
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ORINA TURBIA:
23
Idem. Pg. 26
24
Idem. Pg. 26
25
Idem. Pg. 26
26
FISCHE BACH Manual de Pruebas Diagnsticas. Mxico. 2000. 5ta edicin. Pg 157.
15
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LMPIDA
TURBIA
DENSIDAD DE LA ORINA
27
Idem. Pg. 157
28
Idem. Pg. 157
29
Idem. Pg. 157
30
Idem. Pg. 157
16
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2.2.3.4 CETONURIA
17
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2.2.3.6 UROBILINURIA
18
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37
WALLACH, Jacques. Interpretacin Clnica de las Pruebas de Laboratorio 4ta Edicin. Pg. 495
y 496
38
Idem. Pg 496.
19
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39
ARGERI, Nelson Jorge y LOPARDO, Horacio ngel. Op. Cit. Pg. 57.
20
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Son siempre patognicos, y lo mismo que los epiteliales de los que proceden
por degeneracin celular, significan descamacin y lesin tubular apareciendo
en la orina de los enfermos renales con afectacin parenquimatosa aguda:
glomerulonefritis, nefrosis necrtica, Tiene gran inters para el pronstico
observar la evolucin de la cilindruria. En las formas graves y agudas son
40
DAVIDSON, Todds. Diagnstico y tratamiento clnico por el laboratorio). Espaa. 1998. Pg.
528.
21
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CILINDROS HEMTICOS
41
Idem.. Pg. 529.
42
Idem.. Pg. 529.
43
Idem.. Pg. 530.
22
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CILINDROS LEUCOCITARIOS
44
Idem.. Pg. 531.
45
FISCHE BACH Op. Cit. Pg 210.
23
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URATOS.
LEUCINA Y TIROSINA.
CISTINA.
FOSFATO
46
Idem. Pg 210.
47
Idem. Pg 211.
48
Idem. Pg 211.
49
Idem. Pg 211.
24
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- CLORUROS
- CALCIURIA
La eliminacin diaria normal de calcio por la orina vara entre 2,5 y 20 mEq, o
50
Idem. Pg.212.
51
Idem. Pg 212.
52
Idem. Pg 212.
53
Idem. Pg 212.
25
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2.2.4.6 OSMOLURIA
54
Idem. Pg 212.
55
FISCHE BACH Op. Cit. Pg 210.
56
http://www.geocitis.com/rodriguezlanza/iul.htm
26
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3. Una mayor permeabilidad del urotelio sea por lesin directa, destruccin
de sus uniones celulares o por disminucin de su inmunidad local.
2.3.2 ETIOPATOGENIA
59
Esa falta de manifestaciones de inflamacin puede estar explicada por:
58
http://www.geocitis.com/rodriguezlanza/iul.htm
59
JAWEST, Ernest y MELNICK J.L Microbiologa Mdica. 14va Ed. Mxico D.F. 1992.
Manual moderno S.A. de CV. Pg. 13
28
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60
La entrada de los grmenes en el aparato urinario puede hacerse:
2.3.3 ETIOLOGA
60
Idem Pg. 13
61
Idem Pg. 13
29
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Si la uretra o la vejiga estn infectadas, tal vez sienta dolor o ardor cuando
orina, tenga dolor o sensacin de que la vejiga est llena, o quizs necesite
orinar con frecuencia. Si tiene los riones infectados, tal vez tenga dolor de
espalda o en los costados justo encima de la cintura. Tambin puede tener
escalofros que le hacen temblar, fiebre o sudores, o sentirse enfermo del
estmago. La orina puede tener olor fuerte o hasta presentar sangre o pus. Si
las bacterias invaden la uretra, de all pueden pasar a la vejiga y los riones. Si
las bacterias no salen al orinar, pueden multiplicarse y causar una infeccin.
Las bacterias que causan estas infecciones generalmente provienen de las
heces o de la piel que est alrededor de la abertura de la uretra. Las
infecciones de las vas urinarias son ms comunes en mujeres que empiezan
su vida sexual, estn embarazadas o acaban de pasar la menopausia. Son
tambin ms comunes en los hombres y en las mujeres que tienen diabetes o
clculos renales. Los nios tambin pueden contraer infecciones de las vas
urinarias. 62
Las infecciones urinarias son muy frecuentes y, debido a que los agentes
causales son a veces idnticos o semejantes a las bacterias de la flora normal
(por ejemplo, Escherichia coli), hay que ser muy cuidadosos en el anlisis
bacteriolgico. Puesto que la orina es capaz de mantener un importante
crecimiento bacteriano en muchas condiciones, en infecciones urinarias
frecuentemente se encuentran altas cantidades de clulas. En el mayor de los
casos, la infeccin se presenta como consecuencia de un microorganismo que
asciende de la uretra y que proviene del exterior. Ocasionalmente, aun la vejiga
puede llegar a infectarse, las infecciones del tracto urinario son las que ms se
adquieren en los nosocomios (hospitales). Poblaciones mayores a 100.000
bacterias por mililitro pueden dar pautas de infeccin urinaria. Lo ms frecuente
son los miembros de las bacterias enterales, constituyendo la E.coli cerca del
62
http://www.geocitis.com/rodriguezlanza/iul.htm
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recuento de las colonias. Una de las placas tendr agar sangre y la otra azul de
metileno con eosina para detectar gram negativos. 64
2.3.5.1 NUCLEOIDE
Todas las clulas, tanto las eucariticas como las procariticas, estn rodeadas
por la MEMBRANA CITOPLASMTICA o celular. sta membrana se compone
primariamente de fosfolipidos dispuestos en dos capas. Acta como barrera
64
http://www.geocitis.com/rodriguezlanza/iul.htm
65
JAWEST, Ernest y MELNICK J.L Op. Cit. Pg. 14
32
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2.3.5.3 FUNCIN
66
Idem. Pg. 15
67
Idem. Pg. 17
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como un primordio para su propia biosntesis. Varias capas de la pared son los
sitios de importantes determinates antignicos y un componente (el
lipopolisacrido de las paredes celulares gram negativas) es responsable de la
actividad inespecfica de endotoxina de la bacteria gram negativa. En general,
la pared celular tiene permeabilidad inespecfica; sin embargo, una capa de la
pared de las clulas gram negativas, la membrana externa impide el paso de
molculas relativamente grandes
35
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70
Idem. Pg. 20
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Tambin puede estar presente una cpsula como envoltura mas externa. El
espacio entre las membranas interna y externa se denomina espacio
periplsmico.
71
Idem. Pg. 22
37
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72
Idem. Pg. 22
73
Idem. Pg. 23
74
Idem. Pg. 23
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este lpido; los otros cidos grasos, junto con los grupos sustitutos en los
fosfatos, varan segn la especie bacteriana.
No todas las bacterias gram negativas tienen membranas externas del LPS
conformadas por un nmero variable de unidades repetidas de oligosacridos;
2.3.5.7 TINCIONES
TINCIN EN GRAM
75
Idem. Pg. 24
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4. JUSTIFICACIN
76
Idem. Pg. 25.
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5. HIPTESIS.
6. OBJETIVOS DE INVESTIGACIN
6. 1 OBJETIVO GENERAL
6. 2 OBJETIVOS ESPECFICOS
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7. METODOLOGA
MATERIAL BIOLGICO
MATERIAL DE VIDRIO
REACTIVOS
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MTODOS
Cubrir el porta objetos con el colorante primario por un minuto cristal violeta
luego lavar con agua corriente.
Cubrir el porta objetos con solucin de lugol un minuto (mordiente) lavar con
agua corriente.
Cubrir el porta objeto con alcohol-acetona 10seg (de colorante) lavar con agua
corriente.
Para la tincin Gram adicionada con cido actico 0.1N se siguen los mismos
pasos hasta el inciso C y en el paso de la coloracin del contraste de
safranina se le agrega 50UL de cido actico de 0.1N durante un minuto se
procede con el lavado.
43
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R E D D E L A B O R A T O R IO S D E D IS T R IT O U R B A N O N O R T E
2 5 6 .6 3 4 H A B IT A N T E S S A N F R ASN aC nI S CFO. D D
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H O S P IT A L M IL IT A R C O S S M IL
IN S T IT U T O N A C IO N A L D E T R A X .
H o s p ita l d e C ln ic a s
44
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DETERMINACIN MICROSCOPICA
DE BACTERIAS T. GRAM
ADICIONADO CON ACIDO ACETICO
EFICACIA DE LOS
RESULTADOS POR EFICACIA ENTRE LOS
ANALISIS CLINICO Y RESULTADOS
LOS RESULTADOS OBTENIDOS POR TINCIN
OBTENIDOS CON GRAM Y TINCION GRAM
TINCION GRAM ACETICA AL 0.1N
ACTICA
8. ANLISIS DE RESULTADOS
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TABLA N 1
RESULTADOS GENERALES DE LA DETERMINACIN DE BACTERIAS
GRAM POSITIVAS Y GRAM NEGATIVAS EN MUESTRAS DE
SEDIMENTO URINARIO DE MUJERES EMBARAZADAS DURANTE
LOS MESES DE OCTUBRE NOVIEMBRE Y DICIEMBRE DEL 2002
MUESTRAS PROCESADAS 269
MUESTRAS CON INFECCIN URINARIA 94
MUESTRAS SIN INFECCIN URINARIA 175
MUESTRAS CON BACTERIAS GRAM POSITIVAS 105
MUESTRAS CON BACTERIAS GRAM POSITIVAS A. ACETICO 137
MUESTRAS CON BACTERIAS GRAM NEGATIVAS 82
MUESTRAS CON BACTERIAS GRAM NEGATIVAS A. ACTICO 109
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300
250 Pacientes
200 DX Clinico +
150 T.G.P.+
T.G.P.A.+
100
T.G.N. -
50
T.G.N.A.-
0
1
REFERENCIAS
GRFICO 2
Pacientes
DX Clinico +
T.G.P.+
T.G.P.A.+
T.G.N. -
T.G.N.A.-
47
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TABLA 2
DETERMINACIN DE LA EFICACIA DE LA TINCIN
GRAM ACTICA
POSITIVOS T.GRAM ACTICA VP 138
CONVERSION NEGATIVA FP 27
CONVERSION POSITIVA FN 71
NEGATIVOS T.GRAM ACETICA VN 131
SENSIBILIDAD 66%
ESPECIFICIDAD 83%
GRFICO 3
EFICACIA DE LA TINCIN GRAM ACTICA
140
120
100 VP
80 FP
60 FN
40
VN
20
0
VP FP FN VN
GRFICO 4
PORCENTAJE EFICACIA TINCIN GRAM ACTICA
VP
FP
FN
VN
48
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GRFICO 5
SENSIBILIDAD Y ESPECIFICIDAD
100
80
60 S
40 E
20
0
S E
GRFICO 6
PROPORCIN DE LA SENSIBILIDAD Y ESPECIFICIDAD
S
E
TABLA 3
DETERMINACIN DE LA EFICACIA DE LA TINCIN
GRAM POSITIVA ACTICA
POSITIVOS T. GRAM ACTICA VP 137
CONVERSION NEGATIVA FP 2
CONVERSION POSITIVA FN 32
NEGATIVOS T. GRAM ACTICA VN 132
SENSIBILIDAD 81,06%
ESPECIFICIDAD 98,5%
49
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GRFICO 7
EFICACIA TINCIN GRAM POSITIVA ACTICA
140
120
100 VP
80 FP
60 FN
40
VN
20
0
VP FP FN VN
GRFICO 8
EFICACIA TINCIN GRAMPOSITIVA ACTICA EN PORCENTAJE
VP
FP
FN
VN
GRFICO 9
SENSIBILIDAD Y ESPECIFICIDAD
100
80
60 S
40 E
20
0
S E
50
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GRFICO 10
PROPORCIN DE LA SENSIBILIDAD Y ESPECIFICIDAD
S
E
GRFICO 11
EFICACIA GRAM NEGATIVA ACTICA
150
100 VP
FP
50 FN
VN
0
VP FP FN VN
51
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GRFICO 12
EFICACIA GRAM NEGATIVA ACTICA EN PORCENTAJE:
VP
FP
FN
VN
GRFICO 13
SENSIBILIDAD Y ESPECIFICIDAD:
100
80
60 S
40 E
20
0
S E
GRFICO 14
PROPORCIN DE SENSIBILIDAD Y RESISTENCIA
S
E
52
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9. CONCLUSIONES
53
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http://www.geocitis.com/rodriguezlanza/iul.htm
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ANEXOS
59
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ANEXO 1
REACTIVOS
CIDO ACTICO CH3-COOH
PESO MOLECULAR 60
SOLUBILIDAD X.
ESTADO FISICO SOLIDO INCOLORO
PUNTO DE FUSIN + 167o
DENSIDAD 1049
EBULLICIN 1188o
PROPIEDADES
APLICACIONES
60
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ANEXO 2
PREPARACIN DE COLORANTES Y REACTIVOS
VIOLETA DE GENCIANA
Violeta de genciana..............................................1 g.
Alcohol 96..........................................................20cc
Agua destilada.....................................................80cc
LUGOL
Yodo metlico......................................................1 g.
Ioduro de potasio.................................................2 g.
Agua destilada.................................................300 cc
SAFRANINA
Safranina colorante..............................................1 g.
Alcohol 95.........................................................20 ml
Agua destilada...................................................80 ml
Alcohol 95.........................................................70 ml
Acetona...............................................................30 ml
61
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ANEXO 3
PREPARACIN DE MATERIAL
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ANEXO 4
FOTOS
63
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NDICE DE CONTENIDO
RESUMEN...................................................................................................................... 1
1. INTRODUCCIN .................................................................................................. 3
2. ANTECEDENTES DEL PROBLEMA DE ESTUDIO............................................. 4
2.1 ANATOMA FUNCIONAL DE LOS RIONES ................................................ 5
2.1.1 ORGANIZACIN GENERAL DE LOS RIONES Y DE LAS VAS
URINARIAS.............................................................................................................. 5
2.1.2 RIEGO SANGUNEO RENAL ..................................................................... 5
2.1.3 LA NEFRONA EN LA UNIDAD FUNDAMENTAL DEL RIN .................. 6
2.1.4 FORMACIN DE LA ORINA COMO RESULTADO DE LA FILTRACIN
GLOMERULAR, LA REABSORCIN TUBULAR Y LA SECRECIN TUBULAR. . 7
2.1.4.1 FILTRACIN REABSORCIN Y CREACIN DE LAS DISTINTAS
SUSTANCIAS ....................................................................................................... 8
2.1.5 CONCEPTOS GENERALES DE ORINA .................................................... 8
2.1.6 TOXICIDAD DE LA ORINA....................................................................... 11
2.1.7 VAS DE EXCRECIN DEL RIN ......................................................... 11
2.1.7.1 PELVIS RENAL................................................................................. 11
2.1.7.2 URTERES....................................................................................... 11
2.1.7.3 VEJIGA ............................................................................................. 12
2.1.7.4 URETRA ........................................................................................... 12
2.2 EXAMEN GENERAL DE LA ORINA ............................................................. 12
2.2.1 RECOLECCIN ADECUADA DE LA ORINA ........................................... 12
2.2.2 EXAMEN FSICO ...................................................................................... 13
2.2.2.1 VOLUMEN ........................................................................................ 13
2.2.2.2 COLOR ............................................................................................. 13
2.2.2.3 OLOR DE LA ORINA ........................................................................ 15
2.2.2.4 ASPECTO DE LA ORINA ................................................................. 16
2.2.3 EXAMEN QUMICO DE LA ORINA .......................................................... 16
2.2.3.1 REACCIN Y PH DE LA ORINA ...................................................... 16
2.2.3.2 PROTENAS EN ORINA O ALBIMINURIA ....................................... 17
2.2.3.3 GLUCOSA EN ORINA ...................................................................... 17
2.2.3.4 CETONURIA ..................................................................................... 17
2.2.3.5 PIGMENTOS BILIARES COLURIA (bilrrubinuria) ............................ 18
2.2.3.6 UROBILINURIA................................................................................. 18
2.2.3.7 HEMATURIA (eritrocituria) ................................................................ 18
2.2.3.8 PRESENCIA DE NITRITOS EN LA ORINA ...................................... 18
2.2.4 SEDIMENTO URINARIO .......................................................................... 19
2.2.4.1 LEUCOCITOS Y PIOCITOS ............................................................. 20
2.2.4.2 CLULAS EPITELIALES .................................................................. 21
2.2.4.3 PRESENCIA DE CILINDROS EN LA ORINA ................................... 21
2.2.4.4 PRESENCIA DE CRISTALES EN SEDIMENTO URINARIO............ 23
2.2.4.5 IONOGRAMA URINARIO ................................................................. 25
2.2.4.6 OSMOLURIA..................................................................................... 26
2.3 EXAMEN MICROBIOLGICO DE LA ORINA .............................................. 26
2.3.1 BACTERIURIA E INFECCIN URINARIA................................................ 26
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Tesina Facultad de Bioqumica y Farmacia
Zonia Camargo Rodas UMSA
2.3.2 ETIOPATOGENIA..................................................................................... 28
2.3.3 ETIOLOGA............................................................................................... 29
2.3.4 INFECCIONES URINARIAS EN MUJERES EMBARAZADAS................. 30
2.3.5 ESTRUCTURA DE LA CLULA PROCARIOTA ...................................... 32
2.3.5.1 NUCLEOIDE ..................................................................................... 32
2.3.5.2 ESTRUCTURA CITOPLSMICA ...................................................... 32
2.3.5.3 FUNCIN .......................................................................................... 33
2.3.5.4 ENVOLTURA O PARED CELULAR.................................................. 34
2.3.5.5 ENVOLTURA CELULAR GRAM POSITIVA ..................................... 36
2.3.5.6 COMPONENTES ESPECIALES DE LAS PAREDES CELULARES
GRAM NEGATIVAS............................................................................................ 37
2.3.5.7 TINCIONES....................................................................................... 39
3. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA................................................................. 40
4. JUSTIFICACIN................................................................................................. 40
5. HIPTESIS......................................................................................................... 41
6. OBJETIVOS DE INVESTIGACIN..................................................................... 41
6. 1 OBJETIVO GENERAL ................................................................................. 41
6. 2 OBJETIVOS ESPECFICOS......................................................................... 41
7. METODOLOGA ................................................................................................. 42
7.1 ESTANDARIZACIN DEL MTODO DE GRAM ADICIONADO CON CIDO
ACTICO AL 0.1 N ................................................................................................... 42
7.2 MTODOS, TCNICAS Y MATERIALES .................................................... 42
7.3 PROCEDIMIENTO Y TCNICA ................................................................... 43
7.4. APLICACIN DEL MTODO ESTANDARIZADO EN MUESTRAS
OBTENIDAS.............................................................................................................. 44
7.5 TIPO DE ESTUDIO Y MUESTREO .............................................................. 44
7.6. POBLACIN Y MBITO DE ESTUDIO ........................................................ 44
8. ANLISIS DE RESULTADOS ............................................................................ 45
8.1 RESULTADO GENERAL DEL MTODO EMPLEADO ................................ 46
8.1.1 RESULTADOS GENERALES................................................................... 46
8.1.2 RESULTADOS EFICACIA TINCIN GRAM ACTICA ............................ 48
8.1.3 RESULTADOS EFICACIA TINCION GRAM POSITIVA ACTICA .......... 49
8.1.4 RESULTADOS EFICACIA TINCION GRAM NEGATIVA ACTICA......... 51
8.1.5 RESULTADOS DE LA MORFOLOGA ENCONTRADA........................... 53
9. CONCLUSIONES ............................................................................................... 53
10. COMENTARIOS Y RECOMENDACIONES FINALES........................................ 55
11. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS .................................................................. 56
ANEXOS....................................................................................................................... 59
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