MEDIOS DE CULTIVO

Y
TCNICAS DE INOCULACIN

Dra. Josefina Prez Vargas

GENERALIDADES

El crecimiento de

microorganismos en

sustancias alimenticias

artificiales es una de las

tcnicas ms importantes

usadas en el laboratorio.
GENERALIDADES

Permite reconocer las

caractersticas

culturales de las

bacterias.

A partir de estas se

puede obtener cultivos

puros
GENERALIDADES
 MEDIO DE CULTIVO
Conjunto de nutrientes,
factores de crecimiento y
otros componentes.
Se crean condiciones
adecuadas de desarrollo y
reproduccin de manera
artificial.
No existe un medio universal
comn.
 Para su ptimo crecimiento es necesario dar condiciones ambientales

adecuadas para su desarrollo en medios artificiales.

Estas son: temperatura, pH, humedad, presin de oxgeno, grado de acidez o

alcalinidad del medio

 Las caractersticas ms importantes de los microorganismos a ser

consideradas al momento de preparar un medio de cultivo son:

Tipo trfico: auttrofos, hetertrofos, quimiotrofos, fottrofos.

Tipo respiratorio: aerobios, anaerobios, anaerobios facultativos,

microaerfilos.

Temperatura: psicrfilos, mesfilos y termfilos.

pH: acidfilos, neutrfilos, basfilos.

COMPOSICIN QUMICA - MACROELEMENTOS
FUENTE DE CARBONO:
Pueden ser CO2 o compuestos carbonados orgnicos.
Se utilizan en la construccin de innumerables molculas necesarias para la
clula.
Los carbohidratos se consideran fuente de carbono y energa.
COMPOSICIN QUMICA - MACROELEMENTOS
FUENTE DE NITRGENO

Es metabolizado para proveer protenas, cidos nucleicos y polmeros de

pared.

Algunos microorganismos pueden incorporar nitrgeno en forma de

aminocidos, bases purnicas o pirimidnicas.

En ciertos medios de cultivo, el aporte de nitrgeno es realizado por las

peptonas
COMPOSICIN QUMICA - MACROELEMENTOS
FUENTE DE FSFORO FUENTE DE AZUFRE

Se agrega fosfatos de sodio o Se adiciona como SO4, cistena

potasio. o metionina.

El fsforo se incorpora a cidos En la clula se incorpora a

nucleicos, fosfolpidos, polmeros aminocidos y diferentes

de membrana, ATP, y sustancias coenzimas.

de reserva.
COMPOSICIN QUMICA - MACROELEMENTOS
FUENTE DE K+ , Mg2+ , Ca2+ FUENTE DE Na
Son cationes que estabilizan Contribuye a equilibrar la
macromolculas aninicas. presin osmtica del medio
K+ acta como coenzima y extracelular.
estabilizador de RNA. Se suele suministrar como
Mg2+ se integra a la clorofila en NaCl.
organismos fotosintticos.
Ca2+ abunda en esporas como
dipicolinato de calcio.
COMPOSICIN QUMICA FACTORES DE
CRECIMIENTO
Son compuestos orgnicos requeridos en muy bajas concentraciones.

No pueden ser sintetizados por la propia clula.

Deben ser agregados al medio de cultivo

Pueden ser aportados en forma de:

Extracto de carne

Extracto de levadura

Extracto de malta
COMPOSICIN QUMICA AGENTES SOLIDIFICANTES

Su uso es opcional y el ms usado es el agar.

Se le adiciona en diferentes

concentraciones.

1.5 2 % en medios slidos

0.2 0.3% en medios semislidos

5% en medios de consistencia firme

COMPOSICIN QUMICA AGUA

Representa del 80-90% del peso total de una

clula.

Es fundamental para la realizacin de todos los

procesos metablicos, funciones enzimticas .

Los medios de cultivo se preparan en el

laboratorio con agua destilada.

TEMPERATURA
pH
HUMEDAD
PRESIN OSMTICA
LUZ
CLASIFICACIN DE LOS MEDIOS DE
CULTIVO
Composicin

Finalidad
POR SU COMPOSICIN
MEDIOS LQUIDOS

Llamado tambin caldo.

USO:

diluciones

homogenizar mezclas

enriquecer cultivos

rehidratar cepas liofilizadas

POR SU COMPOSICIN
MEDIOS SLIDOS
Llamado tambin agar.
Se le aade 2% de agar.
En cajas petri o en tubos
USO:
Para separar
microorganismos
Para favorecer el desarrollo
de colonias aisladas
 POR SU COMPOSICIN
MEDIOS SEMISLIDOS
Consistencia leve o
gelatinosa.
Medio lquido al que se
adiciona agar (0.4 a 0.8%).
USO:
Para determinar la movilidad
de los microorganismos
microaerfilos.
POR SU FINALIDAD
Contiene los nutrientes
mnimos necesarios para
MEDIO COMN el desarrollo de bacterias
poco exigentes: caldo
comn, caldo carne, etc.
POR SU FINALIDAD

MEDIO DE
ENRIQUECIMIENTO

Son medios lquidos que

favorecen el crecimiento
de un tipo de
microorganismo en
particular.

Permite aumentar el
nmero de
microorganismos de ese
tipo.
POR SU FINALIDAD

MEDIO
ENRIQUECIDO

Se le agrega una
sustancia que
aumenta el poder
nutritivo.

Aporta algn factor

de crecimiento
necesario para el
microorganismo que
el medio no lo posea.
POR SU FINALIDAD
MEDIO SELECTIVO

Favorece el crecimiento de
un grupo de
microorganismos e inhiben
el crecimiento de otros.

tiles en muestras mixtas.

Al medio se le adiciona
sustancias inhibitorias
como antibiticos o
ciertos colorantes.
POR SU FINALIDAD

MEDIO DIFERENCIAL

Permite diferenciar
bioqumicamente a las
bacterias por su
actividad metablica.

Revela caractersticas
fisiolgicas de los
microorganismos.
POR SU FINALIDAD
MEDIO SELECTIVO
DIFERENCIAL

Contiene sustancias
inhibidoras y sustancias
diferenciales.

El medio Sal Manitol

para Staphylococcus
POR SU FINALIDAD
MEDIO DE
TRANSPORTE

Medio lquido o
semislido.

Permite el
mantenimiento de
muestras clnicas

Contiene agua y
amortiguadores del
pH.
PREPARACIN MEDIO DE CULTIVO

Pesar Aadir agua Someter a Colocar en

bao mara cajas Petri o
tubos