18/07/2017 Identificando metilao de DNA | NEB

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Identificando metilao de DNA

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Atualmente, existem trs mtodos principais para identificar e quantificar a metilao do DNA. Estes so: converso e sequenciao de
bisulfito de sdio, clivagem enzimtica diferencial do DNA e captura de afinidade do DNA metilado (1). A limitao da diviso diferencial
baseada em enzimas limitadas do DNA metilado especfica do locus. No entanto, a converso de afinidade e a converso de bisulfito
seguidas de mtodos de sequenciao foram utilizadas tanto para anlise de genes especficos quanto para o genoma (2). O mtodo de
captura de afinidade de DNA mais comummente relatado a imunoprecipitao de DNA metilado (Me-DIP) que usa anticorpos especficos
de DNA de metila ou captura de metilo usando protenas de domnio de ligao de metil-CpG (MBD). Cada abordagem sensvel, mas tem
sua prpria limitao, como a reao cruzada de anticorpos ou a dependncia de densidade de metilcitena (3). Existem tambm outros
reagentes para estudar a metilao do DNA. Por exemplo, a metiltransferase de ADN de CpG til para estudos de expresso de genes
metilados com CpG num sistema de cultura de clulas. Da mesma forma, os controles de DNA metilados so teis para o PCR especfico
de metilao aps a converso de bisulfito do DNA.

Referncias
1. Laird PW. (2010) Nat. Rev. Genet . 11: 191-203. PMID: 20125086
2. Beck, Stephan. (2010) Nature Biotechnology , 28, 1026-1028. PMID: 20944589
3. Nair, Shalima S. et al. (2011) Epigentica , 6: 1, 34-44. PMID: 20818161

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https://www.neb.com/applications/epigenetics/identifying-dna-methylation 1/1