DIRECCIN DE EDUCACIN ABIERTA Y A DISTANCIA Y VIRTUALIDAD

LICENCIATURA EN EDUCACIN BSICA CON NFASIS EN CIENCIAS NATURALES Y EDUCACIN AMBIENTAL

MICROBIOLOGA
MDULO EN REVISIN
 CORPORACIN UNIVERSITARIA DEL CARTBE
. CECAR -

DNISIN DE EDUCACIN ABIERTAY A DISTANCIA

LICENCIATURA EN EDUCACIN BSICA, CON NFASIS EN

CIENCIAS NATUR,ALES

ELECTIVA PROFESIONAL II
(MrcRoBroLocA)
!

Elaborado por:

Roberto Carlos Acosta Pineda.

Bilogo con nfasis en Biotecnologa, Universidad de Sucre.

Especialista en Docenca, Corporacin Universitaria del Caribe

- CECAR-.

Coneo electrnico: asprosucre@vahoo.es, rcientificldvahoo.com

 TABLA DE CONTENIDO

Pg.

10

11

MICROBILOGIA t?
UNIDAD 1:GENERALIDADES DE LA '

1.'1 Presentacin................... 13
1.2 Objeiivos de la unidad.... "" """" " 14
1.3 Auoevaluacin inicial (atrvete a opinar) 15
1 .4 Acciones para construir el conocimiento " -" 16
1.5 Historia d la Microbiologa..'.-........'... 17
1.6 Ciencias derivadas de la Microbiologa. 32
1.7 Clasificacin de la Microbiologa.... .."" 36
1.8 Tcnicas de estudio de los microorganismos "" ' 37
1.9 La Biotecnologa y los Microorganismos "" "" " 57
1.10 Resumen dL ta Unoao 1...... .. ....." 62
1.11 Autoevaluacin Final Unidad 1. ....... 66

UNIDAD 2: ORIGEN, EVOLUCIN Y CLASIFICACIN DE

MICROORGANISMOS...... ... . 68

2.1 Presentacin.................. ' 68

2.2 Objetivos de la unidad...' ."""" "" ' ' 69
2.3 Auioevaluacin inicial (atrvete a opinar) 70
2.4 Acciones para construir el conocimiento " . T l
2.5 Origen y evolucin de los microorganismos " "" 72
2.6 Taxonoma y diversidad microbiana.... " " "" " ""'"" " 78
2.6.'1 Relaciones evolutivas entre microorganismos " ' ''" 79
2.6.2 Microorganismos procariotes.... 81
2.6.3 Microorgansmos eucariotes....... 93
2.6.4 Microorganismos acelulares....... 1O4
2.7 Resumen e la unidad 2. . ... .. """ 112
2.8 Autoevaluacin final unidad 2. . . 119
 4

UNIDAD 3: FTSTOLOGA Y GENTICA MICROBIANA. 122

3.1 Presentacin.................... 122

3.2 Objetivos de la unidad.... .... .........,.......... 123
3.3 Autoevaluacin inicial (atrvete a opinar).......... jZ4
3.4 Acciones para construir el conocimiento....................-. j2S
3.5 Nutricin y crecimiento microbano...... 126
3.6 Gentica microbiana...... ., . . . .... ... 140
3.6.'t Regulacin de la expresin gnica............. . ,...... 141
3.6.2 Conjugacin................. 143
3.6.3 Transformacin........... 1'4S
3.6.4 Transduccin............... 145
3.6.5 Fusin de protoplastos 148
3.7 Resumen de unidad 3...................... 149
3.8 Autoevaluacin final unidad 3.......... 152
UNIDAD 4: 154

154
r
156
'l4-7
'158
159
167
174
182
186
190

GLOSARIO 192

197
 INTRODUCCIN

En nuestro planeta la vida est presente en diferentes formas que constituyen

su biodiversidad, animales, plantas y microorganismos hacen parte de ese

vasto conjunto de seres vivos que habitan cada uno de sus ambentes y que
interactan continuamente para mantener el equilibrio dinmco de Ia
naturaleza. Cada uno de estos seres cumple una funcin importante en los
procesos de flujo de materia y energa en los ecosistemas, sln embargo, hoy en
da el hombre los ha incorporado en sus diferentes actividades cotdanas para
su propio beneficio.

un ejemplo claro de esta situacn guarda relacin con los microorganismos,

seres que slo son posbles de observar a travs de equipos pticos
acondcionados para tal fin. Estos han convivido con el hombre desde sus
orgenes y en la actualidad son utilizados en la industria para la produccn de
sustancias y la transformacin de materias primas en productos terminados. No
obstante, en muchos contextos se asocian estos seres con aspectos negatlvos
como la contaminacin, las infecciones, el deterioro de alimentos, etc.; si bien
es certo que existen microorganismos patgenos, no es prudente hacer
generalzaciones al respecto, ya que hay muchos otros mlcroorganlsmos que,
oor el contrario. viven en smboss con especes superores compartiendo
ambientes comunes y beneficindose mutuamente.

En relacin con lo anterior, la Microbiologa, ciencia encargada del estudio de

los microorganlsmos, ofrece los conocimientos necesarios para comprender el
mundo microbiano desde sus caracterstlcas ms simples hasta las ms
complejas, convrtindose adems, en una henamienta fundamental que ha
permitido al hombre, no solo aprender como evitar y contrarrestar los efectos de
algunos de estos seres en la salud humana, sino como utilizar sus propiedades
en beneficio del desarrollo cientfico{ecnolgico de la sociedad,

Atendiendo a tas apreciaciones anteriores, en el presente mdulo se hace un

recorrido detallado de la importancia que ha tenido la Microbiologa como
ciencia, las caractersticas ms sobfesalientes de los diferentes tpos de
microorganismos y su importancia en determinados campos de la sociedad y en
la naturaleza. As mismo, para lograr una mayor comprensin del conocimiento
en esta matera, el mdulo se ha diseado con el enfoque de aprendizaje
autnomo acorde con la metodologa a distancia, en donde el estudiante debe
actuar como el principal protagonsta de su aprendlzaje mediante la formulacn
de preguntas, la indagacin, la confrontacin analtica de sus presaberes con
las teoras establecidas y con la realidad observada en experiencias prcticas.

En este orden de ideas, se puede decir que este curso est orientado a la
autogestin de los conocimientos tericos necesarios para la comprensin del
mundo microbiano en todos sus aspectos, por parte del estudiante. Se debe
abordar entonces como una herramenta til en la vida profesional y en el
acconar responsable dentro del entorno, como miembro indiscutible de la
naturaleza. Para efectos de precisin de conceptos el estudiante puede
apoyarse en el glosario de trminos, espacio que agrupa definiciones
importantes en busca de una mayor aclaracin.

Por rtimo, er componente prctico ser desarroilado

por ros estudiantes
medante experiencias caseras previamente
apoyadas en guias didc.ticas y se
comprementar con observaciones de cmpo,
con er fin de afianzar en forma
tangible los conocimientos tericos de la microbiologa.
 INSTRUCCIONES DE MANEJO

Para facilitar la apropiacin de los conocimientos presentados en este mdulo

se debe seguir la siguiente serie de pasos que, s ben no son del todo rgidos,
permien un acondicionamiento mental que favorece el desarrollo de un
aprendizaje significtivo y de competencias en los estudiantes. Veamos cules
son:

a. Antes de iniciar el desarrollo del mdulo dispngase al aprendizaje

reflexionando sobre la importancia que tiene para usted y su futuro
profesional los conocimientos aqu presentados.

b. Lea detenidamente los objetivos, las competencias del mdulo y de cada

una de las unidades temticas, confrntelo con sus expectativas a fin de
establecer una orientacin clara sobre hacia dnde se dirige y qu necesita
para lograrlo.

c. Realice las actividades iniciales de autoevaluacin para cada unidad

temtica en forma honesta, solo as podr determnar sus fortalezas y '
debilidades iniciales con respecto al alcance de los obietivos propuestos y
de las competencias a desarrollar.

Lea y analice los contendos temticos confrontndolos

con sus presaberes'
d.
observaciones directas enexperiencias prcticas yotras fuentes
bibliogrficas, saque conclusiones al respecto'

sobre el contenido temtico

e. Es recomendable elaborar mapas conceptuales
oresentadoene|mdu|oy|uegoconstruiftextosapartirdedchosmapas.
 Confronte su produccin con las teoras establecidas, experiencias
realizadas y haga los ajustes respectivos.

f. Apyese en el glosario de trminos para comprender con mayor facilidad los

conceptos.

g. Si tiene dudas o inquietudes sobre un tema, formule preguntas al respecto y

socialcelas en las sesiones presenciales.

h. Realice las actividades propueshs al final de cada unidad igualmente en

forma honesta, verifique el logro de los objetivos propuestos y de
competencias, a travs de la superacin de las debilidades encontradas en
las actividades de autoevaluacin inicial.

i. Participe activamente en las sesiones presenciales de clase a travs de sus

aportes y con mucha responsabilidad y compromiso durante las actividades
de trabajo independiente. Recuerde que todo lo que usted haga a travs del
mdulo debe apuntar como minimo al alcnce de los objetivos propuestos y
al desarrollo de comoetencias.

j. Por ltimo, tenga en cuenta que su esfuerzo se ver reflejado en su

desempeo profesonal futuro y en su accionar dentro del entorno.
 l7

CONTEXTO TEORICO

Anteriormente, se consideraba que el aprendizaje era sinnimo de cambio de

conducta, debido a la perspectiva conductista dominante en la labor educativa;
sin embargo, el aprendizaje humano va ms all de un simple cambio de
comportamento, conduce a un cambio en el significado de la experenca a
travs de la interaccin socialt.

En este sentido, el presente mdulo toma como referencia la teora del

aprendrzaje significativo de Ausubel, y el aprendizale por nteraccin social de

Vygotski, las cuales, se constituyen en un marco terico favorable para el
proceso de enseanza-aprendizaje en la educacin a distancia. Al respecto,
Ausubel (1983)'? plantea que un aprendizaje es significativo cuando los
contenidos: son relacionados de modo no arbitrario y sustancal (no al ple de la
letra) con lo que el estudante ya sabe. Este proceso tiene lugar si el educando
posee en su estructura cognitiva ideas, proposiciones, estables y definidas, con
los cuales la nueva informacin puede interactuar. De igual manera, Vygotski'
citado por Rodrguez y Laros (2005)3, destaca la importancia del contexto
social y cultural donde se desaffolla el aprendizaje como vehculo fundamental
en la construccin del conocmiento. As mismo, tene en cuenta los
planteamientos de Tonado (1995) sobre la necesidad de la interaccin con el
medio ambiente y con la cultura para lograr el desarrollo de competencias.

Esto quiere decir que en el proceso educativo, es importante considerar los

preconceptos del individuo de tal manera que establezca una relacin con
aquello que debe aprender apoyado en el contexto sociocultural donde se
desarrolla.

' pAISSAN. Mara. 2005. Anlisis de Ia teora del aprendizaje significativo de Ausubel. Correo electnco:
infoleducainformatca. com. at
zAusJBELi*id (1983) Ps,cologia Educatva: Un punto de vista cognoscitivo.2" Ed. TRILLAS |Vxico
tRoDRIGUEZ. Esteban y LARIOS, Berenice. feoras del aprendizaje. Ed. Avlmpresos. Sincelejo
 10

OBJETIVOS DEL MODULO

OBJETIVO GENERAL.

Despertar en el estudiante el inters por el conocimiento del mundo microbiano

a travs de la comprensin de los procesos en los cuales intervienen dentro de
la dinmica del equilbrio natural y su importancia en la sociedad, en pro del
mejoramiento y fortalecimiento de su desempeo laboral futuro.

OBJETIVOS ESPECFrcOS.

- Reconocer los diferentes conceptos tericos relacionados con la

microbiologia y su objeto de estudio como base inicial para la apropiacin
del conocmiento.

- Desarrollar habilidades prcticas que permitan demostrar la existencia de

microorganismos y su intervencin en fenmenos de la naturaleza.

- Valorar el conocimiento de los adelantos de la microbiologa a travs de la

reflexin sobre el impacto en las condiciones de vida del ser humano y el
medio ambiente en general.
 11

COMPETENCIAS GENERALES A DESARROLLAR

La Microbrologa como ciencia se deriva de la Biologa y esta a su vez de las

Ciencias Naturales, por lo tanto las competencias unlversales establecidas para
estas ciencias tambin son aplicables a la Microbiologa y han de ser tendas en
cuenta para el desarrollo integral del conocimiento. Estas competencras se
resumen en las siguientes acciones:

- La interpretacin de situaciones. Acciones que tienen que ver con las

maneras de comprender textos, cuadros, esquemas y grficos en relacin con
el estado, las interacciones o la dinmica de una situacin. Se logra esta
competencia cuando se tene claro como ocurren los fenmenos naturales.

- El establecimiento de condiciones. Acciones de tipo Interpretativo y

argumentativo para describir cualitativamente y cuantitativamente el estado, las
interacciones, la dinmica de una situacin problemica y su anlisis. Esta
competencia se alcanza cuando se comprenden las causas o condiciones
necesarias para que un fenmeno se produzca.

- El planteamiento v la aroumentacin de hiptesis v reqularidades.

Planteamiento y argumentacin de relaciones entre variables para que un
evento pueda ocurrir y de regularidades validas para un conjunto de eventos o
situacones aparentemente desconectadas. Se verifica crando se es capaz de
dar explicaciones lgicas y coherentes sobre el porqu de la ocurrencia de un
fenmeno, ya sea con base en suposiciones, en teoras establecidas o en la
realidad observada.

- Valoracin del trabaio cientfico. Actitudes relacionadas con el

reconocimiento de la importancia del conocimiento cientfico para entender la
 12

naturaleza. Se presenta esta competencia cuando hay una reflexin acerca de

los mpactos de las aplicaciones prcticas de las ciencias en el medio ambiente
y en las condiciones de vida del ser humano.

Por otra parte, el ICFES ha establecido para el rea de las ciencias naturales
siete competencias especficas que corresponden a capacidades de accin que
se han considerado relevantes; pero solo tres de ellas, ldentificar, Indagar y
Explicar, son evaluadas. Las otras cuatro competencias: Comunicar, Trabajar
en equipo, Disposicin para reconocer la dimensin social del conocimiento y
Disposicin para aceptar la naturaleza cambiante del conocimiento deben
desanollarse en el aula.

A continuacin se describen las tres competencias especficas evaluadas por el

ICFES.

- ldentificar. Capacidad para reconocer y diferenciar fenmenos,

representaciones y preguntas pertinentes sobre estos fenmenos.

- Indaoar. Capacdad para plantear pregunias y procedmientos adecuados y

para buscar, seleccionar, organizar e interpretar informacin relevante para dar
resplJesta a esas pfeguntas.

- Explicar. Capacidad para construir y comprender argumentos,

representaciones o modelos que den razn de fenmenos.
 IJ

lJlttDAED r.rhrcl
I. GENERALIDADES DE LA MICROBIOLOGIA

1.1 PRESENTACIN.

La Microbiologa se puede definir, sobre la base de su etimologa, como la

ciencia que trata de los seres vivos muy pequeos, concretamente de aquellos
cuyo tamao se encuentra por debajo del poder resolutivo del ojo humano. Esto
hace que el objeto de esta disciplina venga determinado por la metodologa
apropiada para poner en evidencia, y poder estudiar, a los microorganismos.
Precisamente, el origen tardo de la Microbiologa con relacin a otras cencias
biolgicas, y el reconocimiento de las mltiples actividades desplegadas por los
microorganismos, hay que atribuirlos a la carencia, durante mucho tiempo, de
los instrumentos y tcnicas pertinentes. Con la invencin del microscopio en el
siglo )0/ll comenz el lento despegue de una nueva rama del conocimiento,
en da los avances de esta ciencia han
inexistente hasta entonces. Hoy
ayudado a comprender muchos de los procesos de transformacin de la
materia que se desarrollan en Ia naturaleza y la dinmica de las enfermedades
infecciosas en los dems seres vtvos. As mismo, el hombre se ha aprovechado
de estos conocimientos para mejorar la calidad de vida de la raza humana en
diversos asoectos.

El contenido de la presente unidad pretende mostrar un panorama general de la

Microbiologa como ciencia, su evolucin y su impacto en la sociedad desde sus
inicios. Busca, adems, brindar herramientas para entender los diversos
enfoques desde los cuales se aborda el estudio de los microorganismos. De
igual manera se detallan diferentes tcnicas que han permitido aislarlos y
manioularlos a fin de establecer sus caractersticas ms relevantes.
 14

1,2 OBJETIVOS DE LA UNIDAD

OBJETIVO GENERAL.

Reconocer los aspectos ms relevantes que permitieron el surgimiento de la

Microbiologa como ciencia, su evolucin, aplicaciones actuales y tendencia
futura, atravs del anlisis de documentos cientfico-tecnolgicos y de
experiencias propias que faciliten la apropiacin del conocimiento sobre este
tema.

OBJET]VOS ESPECFICOS.

- Determinar los sucesos histricos que dieron paso al descubrimiento de los

microorganismos y al estrablecimiento de la Microbiologa como ciencia.

- ldentificar las diferentes ciencias y/o disciplinas que han surgido como
derivaciones de la Microbiologa y su campo de estudio.

- Reconocer las diferentes tcnicas que han permitido avanzar en el estudio

de los microorganismos.

- Reflexionar sobre el impacto que h tenido la Microbiologa en la sociedad y

sus perspectivas futuras.
 14

1.3 AUTOEVALUACIONINICIAL

Atrvete a opinar.
Antes de leer el contenido temtico de la presente unidad, y teniendo en cuenta
los preconceptos que usted pos producto de sus experiencias propias y de
estudios anteriores, conteste el cuestonario de preguntas que se presenta a
continuacin.

a. Qu entiende usted por Microbiologa?

b. Cmo cree usted que surgi la Microbiologa como ciencia?
c. Cules son las ciencias que se han derivado de la Microbiologa?
d. En qu sectores de la sociedad se emplean los conoclmentos de la
Microbiologa?
e. Para usted qu es un mcroorganismo y qu funciones cumplen estos en la
naturaleza?
f . Qu tcnicas conoce usted que se emplean para el estudio de los

microofganismos?
g. Segn su punto de visia, como cree que han incidido los avances de la
Microbiologa en la sociedad y la naturaleza?

Fortalezas y Debilidadas cognoscitivas con respecto a los objetivos de la

unidad

Fortalezas:

Debilidades:

Acciones para superar debilidades:

 16

1.4 ACCIONES PARA CONSTRUIR EL CONOCIMIENTO

Para facilitar la apropiacin del conocimiento en esta unidad se sugiere realizar

las siguientes acciones:

- Compare las respuestas dadas por usted a las preguntas de la

autoevaluacin inicial (Atrvete a opinar) mn los objetivos de la unidad,
determine y anote sus fortalezas y/o debilidades cognoscitivas encontradas.

- Anote las acciones a las que usted se compromete realizar para superar las
posibles debilidades y as alcanzar los objetivos propuestos.

- Haga una lectura analtica y reflexiva en forma individual sobre cada uno de
los tpicos aqu presentados, haciendo ms nfasis en aquellos aspectos
donde usted presenta mayores debilidades.

- Elabore un mapa conceptual sobre los aspectos mas relevantes de la unidad

y luego con sus propias palabras construyan un texto a partir de dicho mapa.
Puede indagar sobre el tema de esta unidad en Internet o en otras fuentes
bibliogrficas que puedan servir de refuezo a las lecturas realizadas.
Socialice en plenaria su trabajo.

- Realice las actividades que se encuentran dentro de la unidad y socialcelas

en plenaria.

- Realice en forma individual la autoevaluacin final de la unidad y compare

sus resultados con los obtendos en la autoevaluacin inicial, determine el
estado de la apropiacin del conocimiento y el alcan de los objetivos
propuestos.
 17

1.5 HISTORIA DE LA MICROBIOLOGA

Documento de Enrique laez Pareja'

La Microbiologa, considerada como una cienca especalizada, no aparece

hasta finales del siglo XlX, como consecuencia de la confluencia de una serie
de progresos metodolgicos que obligaron a una revisin de ideas y prejuicios
seculares sobre la dinmica del mundo vivo. Siguiendo el ya clsico esquema
de Collard (1976), podemos distinguir cuatro etapas o periodos en el desarrollo
de la Microbiologa:

- Primer periodo, eminentemente especulativo, que se extiende desde la

antigedad hasta llegar a los primeros microscopisas.

- Segundo periodo, de lenta acumulacin de observaciones (desde 1675

aproximadamente hasta la mitad del siglo XIX), que arranca con el
descubrimiento de los microorganismos por Leeuwenhoek (1675).

- Tereer periodo, de cr.ltivo de microorganismos, que llega hasta finales del

siglo XlX, donde las figuras de Pasteur y Koch encabezan el logro de
cristalizar a la Microbiologa como ciencia experimental bien asentada.

- Cuarto periodo (desde principios del siglo XX hasta nuestros das)' en el que
los microorganismos se estudian en toda su complejidad fisiolgica,
bioqumica, gentica, ecolgica, etc., y que supone un extraordinario
crecimiento de la Microbiologia, el surgimiento de disciplinas microbiolgicas
especializadas (Virologa, Inmunologa, etc), y la estrecha imbricacin de las
ciencias microbiolgicas en el marco general de las Ciencias Biolgicas

o IAES, Enrique. 1998. concepto e Hiloria de la Mcrobologfa. curso de Microbologa general.

Hpertelitos de rea de Bologfa. Oisponible en www.biologfa-edu.ar
 '18

A continuacin se realiza un breve recorrido histrico de la disciplina

microbiolgica, desglosando los perodos 3o y 4o en varios apartados temticos.

1.5.I PERIODO PREVIO AL DESCUBRIMIENTO DEL MICROSCOPIO.

Si bien el descubrimiento efectivo de seres vivos no visibles a smple vista debi

aguardar hasta el ltimo tercio del siglo )0/ll, sus aciividades son conocidas por
la humanidad desde muy antiguo, tanto las beneficiosas, representadas por las
fermentacones implcadas en la produccin de bebidas alcohlicas, pan y
productos lcteos, como las perjudiciales, en forma de enfermedades
infeccosas.

Diversas fuentes escritas de la antigedad griega y romana hablan de

grmenes invisibles que transmten enfermedades contagiosas. Lucrecio (96-55
a.C.), en su "De rerum natura" hace varias alusiones a "semillas de
enfermedad". En el Renacimiento europeo, Girolamo Frascatorius, en su libro
"De contagione et contagon s" (1546) dice que las enfermedades contagosas
se deben a "grmenes vivos" que pasan de diversas maneras de un individuo a
otro. Estos inicios de explicacin que renuncaban a invocar causas
sobrenaturales fueron probablemente catalzados por la introduccin en Europa
de [a sfils, una enfermedad en la que estaba clara la necesidad de contacto
para su contagio. Pero la "cosa" que se transmite en la enfermedad sigui
siendo objeto de conjeturas durante mucho tiempo.

1.5.2 EL PERIODO DE LOS PRIMEROS MICROSCOPISTAS.

Ya en el siglo XlV, con la invencin de las primeras lentes para corregir la

visin, surgi una cierta curiosidad sobre su capacidad de aumentar el tamao
aparente de los objetos. En el siglo )0/l surgieron algunas ideas sobre aspectos
de la fsica ptica de las lentes de aumento, pero no encontraron una aplicacin
inmediata. Se dice que Galileo hizo algunas observaciones "microscpicas"
 't9

invirtiendo su telescopio a partir de lentes montadas en un tubo, pero en

cualquier caso est claro que no tuvieron ninguna repercusin.

La primera referencia segura sobre el microscopio (1621 ) se debe a Constantijn

Huygens, quien relata que el ingls Cornelis Drebbel tena en su taller un
instrumento magnificador, que recibi el nombre de microscopium en 1625, en la
Accademia dei Lincei, de Roma.

El progreso y el desarrollo de la ciencia de la microbiologa tuvieron que esperar A

la disponibilidad de herramientas, tcnicas y procedimientos que pudieran
aplicar al estudio de estas pequeas formas de vida. Aunque se sospechaba la
existencia de organismos minsculos su descubrimiento estuvo relaconado con
la invencin del microscopio. Los hermanos Jansen inventaron en 1590 el
llamado microscopio @mpuesto. Constaba de un tubo con dos lentes convexas
en cada extremo y ampliaba ms que las lupas, que existan desde la Edad
Media, aunque daba una imagen borrosa. En 1660 Robert Hooke publica su
obra Micrografa, en la que hay reproducciones de sus observaciones hechas
con microscopio compuesto, del tipo inventado por los hermanos Jansen.

En 1664 Robert Hooke descubri los mohos, pero la primera persona que
observ microorganismos en detalle fue Antonie van Leewenhoek. En el siglo
XIX se pudo disponer de microscopios mejorados ampliando su uso y
distribucin.

En 1676 Antony van Leeuwenhoek, contemporneo de Hooke un paero

holands sin formacin cientfica, gran pulidor de lentes, consigue hacer del
microscopio simple dotado de lente esfrica una herramienta til, describe las
bacterias, a los que llama "animculos" o pequeos animales. Escribi ms de
300 cartas a la Royal Society de Londres y recibi la visita de Leibniz, que
tambin crea en la vida microscoica.
 tn

Durante el siglo XVlll, se introducen mejoras mecnicas y pticas y se utilizan

lentes acromticas. Aparecen los primeros portaobjetivos tipo revolver' En este
perodo los microscopios conjugan funcionalidad y diseo. A esta poca
pertenecen el "Microscopio variable" de George Adams y el "Microscopio
compuesto".

En el Siglo XIX Louis Pasteur (1822-95) se ayuda del microscopio para

demostrar que las infecciones son producidas por microbios. lmpuls el
concepto de vacunacin preventiva y estudi tambin los microorganismos
positivos para la vda humana. En 1848 se describen las partes constitutivas del
ncleo de la clula. En 1874 R. B. Tolles introdujo el uso de objetivos de
inmersin que posibilitaron importantes descubrimientos. En 'l 882 Koch
descubre el bacilo de la tuberculosis y en 1884, el vibrin del clera. En 1884
Nicolaier descubre el bacito del ttanos y Schaudinn el treponema de la sfilis.
Durante las dos ltimas dcadas del siglo e inicios del siguiente Santiago
Ramn yCajal realiza importantes descubrimientos sobre las neuronas. En
1906 en compaa de Camilo Golgi reciben el Premio Nobel por trabajos
cientficos fundamentados en observaciones microscpicas realizadas mediante
el teido de muestras.

Durante el siglo XX Se introducen tcnicas especiales: contraste de fase y

ultramcroscopio y, utilizando ptica especial, se usan microscopios de luz
ultravioleta en los que la menor longitud de onda mejora el poder resolutivo.
Emst Ruska y Max Knoll construyen en 1931 el primer microscopio electrnico.
Funciona medante bombardeo de electrones sobre la muestra' La imagen
resultante an es inferior a la que ofrecen los microscopios convencionales.
James Hillier consigue un microscopio electrnico que supera a los

convencionales en 1937. Se pasa de 2000 aumentos a 7000. Con los aos, el

propio Hillier contribuira a construir aparatos con una capacidad de 2 millones
de aumentos. Una dimensin totalmente fuera de las posibilidades de los

microscooios tradicionales. 1965. Se desanolla el microscopio electrnico de

 zl

barrido. 1981. G. Binnig y H. Rother, desarrollan el llamado microscopio de

efecto tnel. Con esta tecnologa se observan los tomos individualizados por
primera vez. 1985. G. Binnig y H. Rother, desarrollan el llamado microscopio de
fueea atmca. 1998. S. Chou y P. Krauss consguen, mediante el efecto tnel,
rcalizar la grabacin de datos de mayor densidad conocida: 65 gigabits por
cntmeiro cuadrado.

1,5.3 EL DEBATE SOBRE LA GENERACIN ESPONTNEA.

La autoridad intelectual de Aristteles por un lado, y la autoridad moral

representada por la Biblia, por otro, junto con las opiniones de escritores
clsicos mmo Galeno, Plinio y Lucrecio, a los que se citaba como referencias
en la literatura mdica en la Edad Media y Renacimiento,
ncontrovertibles
dieron carta de naturaleza a la idea de que algunos seres vivos podan
originarse a partir de materia inanimada, o bien a partir del aire o de materiales
en putrefaccin. Esta doctrina de la "generatio spontanea" o abiognesis, fue
puesta en entredcho por los experimentos de Francesco Redi (162i-1697),
quien haba acuado la expresin "Omne vivum ex ovo,'(1668), tras comprobar
que los inseclos y
nematodos procedan de huevos puestos por animales
adultos de su misma especie. Demostr que si un trozo de carne era cubierto
con gasa de forma que las moscs no podan depostar all sus huevos, no
aparecan "gusanos", que l correctamente identific como fases larvarias del
nsecto. Los descubrimientos de Redi tuvieron el efecto de desacreditar la teoria
de la generacin espontnea para los animales y plantas, pero la reavivaron
respecto de los recin descubiertos "animlculos", de modo que aunque se
acept la continuidad de la vida en oanto a sus formas superiores, no todos
estaban dispuestos a admitir el ms amplio "Omne vivum ex vivo" aplicado a los
microorganismos.

Hubo que esperar un siglo ms hasta que una serie de naturalistas

recomenzaran el ataque a la teora preformacionista. Lazzaro spallanzani
(1729-1799) sostuvo una disputa con J.T. Needham (1213-1291lr en la que el
 22

primero demostr que los "infusorios" no aparecan en muestras de

maceraciones animales o vegetales sometidas durante tiempo suficiente a
ebullicin en frascos hermticamente cenados, pero volvan a aparecer si se
practicaban agujeros en el recipiente. sin embargo los preformacionistas no se
daban por vencidos; el mismo Needham, recogiendo una idea ya expresada por
Huygens, amigo de Leeuwenhoek, replic -con argumentos vitalistas muy
propios de la poca- que el calor haba destruido la 'Tuerza vegetativa" de las
infusiones y haba cambiado la "cualidad" del aire dentro de los frascos'

Durante el primer tercio del siglo XIX la doctrina de la arquegnesis o

generacin espontnea recibi un ltimo refuerzo antes de morir, debido por un
lado a razones extracientficas (el auge del cncepto de transmutacin
producdo por la escuela de la filosofa de la naturaleza), y por otro al

descubrimiento del oxgeno y de su importancia para la vida, de modo que los

experimentos de spallanzani se interpretaron como que al calentarse las
infusiones, el oxgeno del aire se destrua, y por lo tanto desapareca la'Tuerza
vegetativa" que originaba la aparicin de mcrooganismos'

Para complicar ms las cosas, la publicacin de "Sobre el origen de las

para
especes', por Danivin en 1859, fue utilizada por algunos preformacionistas
apoyarsusargumentos.Fue,efectivamenteLouisPasteur(,1822-1895)e|que
asestelgolpedefinitivoyzanj|acuestinafavorde|ateorabiognica.En
un informe a la Acadmie des sciences de Pars, en 1860 (" Expriences
rlatives aux gnrations difes sponfaned') y en escritos posteriores comunica
sussenci||osye|egantesexperimentos:ca|entinfusionesenmatracesde
y
vidrio a los que estiraba latealmente el cuello, hacndolo largo, estrecho
sinuoso, y dejndolo sin cerrar, de modo que el contenido estuviera en contacto
con el are; tras esta operacin demostr que el lquido no desarrollaba
microorganismos,con|oqueelimin|aposibi|idaddequeun..airealterado.
que los
fuera la causa de la no aparicin de grmenes Antes bien, comprob
grmenesdelairequedabanretenidosasupasopore||argocue||osinuoso'en
 z5

las paredes del tubo, y no alcanzaban el interior del recipiente donde se

encontraba la infusin, quedando sta estril indefinidamente. Slo si se rompa
el cuello lateral o si se inclinaba el frasco de modo que pasara parte de lquido a
la porcin de cuello, los grmenes podan contaminar la infusin y originar un
rpido crecimiento.

En 1861 Pasteur publica otro informe en el que explica cmo se pueden

capturar los "cuerpos organizados" del aire con ayuda de un tubo provisto de un
A
tapn de algodn como fltro, y la manera de recuperarlos para su observacin
microscpica. De esta forma quedaba definitivamente aclarado el origen de los
microorganismos, y se abra la Edad de Oro del estudio cientfico de las formas
de vida no observables a simple vista.

Los ltimos escpticos quedaron silenciados cuando en 1B7l John Tyndall

(1820-1893) aplic su sistema de esterilizacin por calentamiento discontinuo
(hoy conocida precisamente como tindalizacin), gue evidenci la existencia de
formas microbianas de reposo muy resistentes al calor, lo cual fue confirmado
poco ms tarde por Ferdinand Cohn al descubrir las esporas bacterianas.

f .5.4 EL DEBATE SOBRE LOS FERMENTOS.

un segundo factor contribuyente al nacimiento de la ciencia microbiolgica fue

el establecimiento de la relacin que une ciertas transformaciones qumicas que
se dan en las infusiones con el crecimiento de los grmenes en ellas existentes.
Fue Pasteur (que, desde sus primeros estudios sobre las propiedades pticas
de los cristales de tartrato, vena suponiendo que estos compuestos tenan un
origen orgnico) quien de nuevo intervino en el debate de forma decisiva. En
1857 demostr que los agentes de ra
fermentacin rctica eran
mlcroorganismos, trabajando sobre un problema que haba surgido entre los
 .rA

destiladores de Lille cuando en sus cubas ia fermentactn alcohllca se vio

sustituida por una indeseable fermentacin lctica. Este fue el nicio de una
larga sere de estudios que habra de durar hasta 1876, en los que pasteur
identific distintos microorganismos responsables de diferentes clases de
procesos fermentativos. Asi, en 1860 adscribe inequvocamente la fermentacin
alcohlica a ciertos tipos de levaduras, y en 1866, en sus fudes sur le vin
resume sus hallazgos al respecto, inaugurando la Microbiologa Aplicada, una
de las primeras derivaciones prcticas no empricas emanadas de la Biologa. A
finales del siglo XIX eminentes bilogos como Hansen, en Copenhague, y
Beijerink, en Delft, desarrollaban su actividad en industrias v destileras.

Trabajando sobre los agentes de la fermentacin buirica, pasteur descubri la

presencia de microorganismos que se desarrollaban en ausencia de oxgeno, lo
cual desmentia la creenca de que todas las formas de vida necestan are Dara
crecer. Acu los trminos aerobioss y anaerobiosis para denominar,
respectvamente, a la vida en presencia y en ausenca de oxgeno.

,:: n*'.,t",:1 s de/ sc1nn.enro de /.as mic.m.orv.anisnos

ry*:Y* do,s en Ia concepcin qrc impe,ba sobre et origen & la vkla.

1.5.5 LOS AVANCES TCN|COS

La doctrina del pleomorf ismo, vigente durante buena parte del siglo XlX,
mantena que los microorganismos adoptaban formas y funciones cambiantes
dependiendo de las condiciones ambientales. A estas ideas se ooonan
frontalmente investgadores como Koch, pasteur y Cohn, que estaban
convencidos de la especificidad y constancia morfolgica y fisiolgica de cada
tipo de microorganismo (monomorfismo). La solucin definitiva a esta cuestin
dependa, de nuevo, de un desarrollo tcnico, que a su vez iba a suministrar
una de las herramientas caractersticas de la nueva ciencia: los mtodos de
cultivo puro.
Los primeros culivos puros fueron obtenidos por el miclogo Brefeld, quien
logr aislar esporas de hongos y cultivarlas sobre medios slidos a base de
gelatina_ Por su menor tamao, este mtodo se haca inviable para las
bacterias, por lo que se recurri a un mtodo basado en diluciones: Lister, en
1878 realiz diluciones secuenciales de cultivos mixtos, hasta lograr muestras
en las que exista una sola clula. Pero la tcnica era larga y tediosa y, adems,
normalmente slo se lograban aislar clulas del tipo bacteriano ms abundante
en el culttvo original; sn embargo, el expermento sirvi para confirmar la

naiuraleza "particulada" de los agentes de las fermentaciones'

En 1887 Petri, un ayudante de Koch, sustituy |as engorrosas bandejas de

vidrio cubiertas con campanas, usadas hasta entonces para los cultivos slidos'
por un sistema manejable de placas de cristal planas, que se conoce como
cajas de Petr.

El de los medos selectivos y de enriquecimienio fue una

desarrollo
consecuencia de las investigaciones llevadas a cabo por Beijerinck
y

Winogradsky entre 1 888 y los primeros aos del siglo XX, sobre bactefias

imp|icadasenprocesosbiogeoqumicosyposeedorasdecaractersticas
fisiolgicas distintivas (quimioauttrofas, fijadoras de nitrgeno, etc.). Estos
se
medios, donde se aplica a pequea escala el principio de seleccin natural,
disean de forma que su composicin qumica definida favorezca slo el
de
crecimiento de cedos tipos fisiolgicos de microorganismos, nicos capaces
usar ciertos nuirientes del medo.

otra importante aportacin a este "perodo de cultivo" dentro del desarrollo de la

Microbiologa surgi del uso de medios diferenciales, en los que se manifiesta
algn rasgo bioqumico o metablico, lo que contribuye a la identificacin
pH,
microbiana. Fue Wrtz quien, en 1892, introdujo el uso de indicadores de
Incorporados en tos medios, lo cual permita revelar la produccin de

acdficaciones por fermentacin en ciertas bacterias'

 26

En 1875 Carl Weigert ti bacterias con pirocarmn, un colorante que ya vena

siendo usado desde haca unos aos en estudios zoolgicos. En aos
sueesivos se fueron introduciendo el azul de metileno (Koch, 1877), la fuchsina,
y el violeta crstal. En 1882-'1883 Ziehl y Neelsen desanollan su mtodo de
cido-alcohol resistencia para teir Mycobacterium tuberculosis. En 1884 el
patlogo dans Christian Gram establece una tincin de contraste que permite
distinguir dos tipos bacterianos en funcin de sus reaccin diferencial de tincin
y que, como se vera mucho ms tarde, reflejaba la existencia de dos grupos de
bacterias con rasgos estructurales distintivos. En 1890 Loeffler logra visualizar
flagelos bacterianos por medio de su tcnica de impregnacin argntica. Como
veremos ms adelante, la msma industria de colorantes alemana previa a la
primera guerra mundial fue decisiva tambin para los comienzos de la
quimioterapia.

Estas innovaciones tcnicas (mtodos de cultivo, microscopa y tinciones)

fueron fundamentales para la consolidacin de la Microbiologa como ciencia,
permtiendo eliminar las grandes doss de especulacin que hasta entonces
haban predominado.

1.5,6 EL PAPEL DE LOS MICROORGANISMOS EN LAS ENFERMEDADES,

Durante el siglo XIX la atencin de muchos naturalistas se haba dirigido hacia

las diversas formas de animales y plantas que vivan como parsitos de otros
organismos. Este inters se redobl tras la publicacin de los libros de Danrin,
estudindose las numerosas adaptaciones evolutivas que los distntos parstos
haban adquirido en su peculiar estilo de vida. Sin embargo, la adjudicacin de
propiedades de parsitos a los microorgansmos vino del campo mdico y
veterinario, al revalorizarse las ideas sobre el origen germinal de las
enfermedades infecciosas.

En 1835 Agostino Bassi (1773-1856) demostr que cierta enfermedad del

gusano de seda (mal di segno), que haba hecho su aparicin en Lombarda, se
 27

deba a un hongo (Botrytis bassr'ana). Cuatro aos ms tarde J.L. Schnlen

descubri Ia asociacin de un hongo con una enfermedad humana de la piel En
1840 Henle, de la escuela fisiolgica de Johannes Mller, plante la teoria de
que las enfermedades infecciosas estn causadas por seres vivos invisibles,
pero de nuevo la confirmacin de estas ideas tuvo que esperar a que la
intervencin de Pasteur demostrara la existenca de microorganismos

especficos responsables de enfermedades.

Hacia mediados del siglo XIX otra enfermedad infecciosa (pebrina) comenz a
diseminarse por los criaderos de gusano de seda de toda Europa, alcanzando
finalmente a china y Japn. A instancas de su maestro Jean Baptiste Dumas,
Pasteur acept el reto de viajar a la Provenza para investigar esta enfermedad
que estaba dejando en la ruina a los industriales sederos, a pesaf de que nunca
hasta entonces se haba enfrentado con un problema de patologa. Es ms que
probable que Pasteur viera aqu la oportunidad de confirmar si sus estudos
previos sobre las fermentaciones podan tener una extensin haca los procesos
fisiolgicos del hombre y de los animales. Es sorprendente que, al principio no
se mostrara dispuesto a aceptar la idea de que la pebrina fuera una enfermedad
ocasionada por un agente extrao, creyendo durante los dos primeros aos que
se trataba de alteraciones meramente fisiolgicas. Tras una sere de tanteos, y
en medio de una ntensa actividad intelectual que Ie obligaba a repasar
continuamente los experimentos y las conclusiones extradas, tnmerso en el
drama personal de la muerte de su padre y de dos de sus hijas en un corto
lapso de tiempo, Pasteur llega finalmente, en 1869, a identificar al protozoo
Nosema bombycis como el responsable de la epidemia, y por medio de una
serie de medidas de control, sta comienza a remitir de modo espectacular.

La intervencin de bacterias como agentes especficos en la produccin de

enfermedades fue descubierta a raz de una serie de investigaciones sobre el
carbunco o ntrax, enfermedad que afecta a ganado y que puede transmitirse a'
hombre' C. Davaine, entre 1863 y 1868, encontr que en |a sangre de Vacas
 28

afectadas aparecan grandes cantidades de microorganismos a los que llam

bacteridios; adems, logr inducir la enfermedad experimentaimente en vacas
sanas, inoculndoles muestras de sangre infectada. En 1872 el mdico alemn
C.J. Eberth consigui aislar los bacilos filtrando sangre de animales
carbuncosos. Pero fue Robert Koch (1843-1910), que haba sido alumno de
Henle, quien con su reciente tcnica de cultivo puro logr, en 1876, el primer
aislamiento y propagacin in vitro del bacilo del ntrax lBacillus anfhracis),
consiguiendo las primeras microfotograf as sobre preparaciones secas, fijadas y
teidas con azul de metileno. Ms tarde (1881 ), Koch y sus colaboradores
confirmaron que las esporas son formas diferenciadas a partir de los bacilos, y
ms resistentes que stos a una variedad de agentes. Pero ms fundamental
fue su demostracin de que la enfermedad se poda tfansmitir sucesivamente a
ratones sanos inoculndoles bacilos en cultivo puro, obtenidos tras varias
transferencias en medios louidos.

Este tipo de estrategias para demostrar el origen bacteriano de una enfermedad

fue llevado a una ulterior perfeccin en '1882, con la publicacin de 'Die
Athiologie der Tuberkulose", donde se comunica por primera vez la aplicacin
de los criterios que Henle haba postulado en 1840. Estos criterios, que hoy van
asociados al nombre de Koch, son los siguientes:

1. El microorgansmo debe de estar presente en todos los individuos

enfermos.
2. El microorganismo debe poder aslarse del hospedador y ser crecido en
cultivo ouro.
La inoculacin del microorganismo crecido en cultivo puro a animales
sanos debe provocar la aparicin de sntomas especficos de la
enfermedad en cuestin.
4. El mcroorgansmo debe poder ser reaislado del hospedador infectado de
forma experimental.
 ,o

Fue asimismo Koch quien demostr el principio de especificidad biolgica del

agente infeccioso. cada enfermedad infecciosa especfica est causada por un
tipo de bacteria diferente. Estos trabajos de Koch abren definitivamente el

campo de la Microbiologa Mdica sobre firmes bases cientficas

Durante las dos dcadas sguientes la Microbiologa experiment una autntica

edad de oro, en la que se aislaron y caracterizaron muchas bacterias
patgenas. La Alemania del Reich, que a la sazn se haba convertido en una
potencia poltica y militar, se decidi a apoyar la continudad de los trabajos del
equipo de Koch, dada su enorme importancia social y econmica, creando un
Instituto de investigacin, siendo Koch su drector en el Departamento de Salud-
De esta forma, en la Escuela Alemana se aislaron los agentes productores del
clera asitico (Koch, 1883), de la difteria (Loeffler, 1884)' del ttanos
(Nicolaier, 1885 y la neumona (Fraenkel, 1 886)' de la
Kitasato, 1889), de
menngitis (Weichselbaun, 1887), de la peste (Yersin, 1894), de la sfilis
(Schaudinn y Hotfman, 1905), etc. lgualmente se pudieron desentraar los
ciclos infectivos de agentes de enfermedades tropicales no bacteranas que la
potencia colonial se encontr en ultramar: malaria (Schaudinn, 1901-1903)'
enfermedad del sueo (Koch, 1906), peste vacuna africana (debida al ingls
Bruce, 1895-1897), etc.

Por otro lado, la Escuela Francesa, nucleada en el lnstituto Pasteur' se

concenir en los estudios sobre los procesos infectivos, la inmunidad del
hospedador, y la obtencin de vacunas, sobre todo a raz de la vacuna
antirrbica ensayada por Pasteur (1885), contribuyendo al nacimiento de la
Inmunolog a.

1.5.7 DESARROLLO DE LA ANTIBIOTERAPIA

En 1874, elmdico ingls W. Roberts habia descrito las propiedades

antibiticas de ciertos cultivos de hongos (Penicillium glaucum) contra las
bacterias, e introdu.o en Microbiologa el concepto de antagonismo. Otros
investigadores de finales del siglo XIX realizaron observaciones similares, pero
fue Flemino quien, en 1929, logr expresar ideas cfaras sobre el tema, al
atribuir a una sustancia qumica concreta {la pencilna) la accjn inhibidora
sobre bacteras producida por el hongo Penicillium notatum. Fleming desarroll
un ensayo crudo para determinar la potencia de la sustancia en sus filtrados,
pudiendo seguir su produccin a lo la(go del tiempo de cultivo, y mostrando que
no todas las especies bacterianas eran igualmente sensbles a la penicilina. Las
dificultades tcncas para su extraccin, junto al hecho de que el inters de la
poca an estaba cenlrado sobre las sulfamidas, impideron una pronta
purificacin de la penicilina, que no lleg hasta los trabajos de Chain y Florey
(1940), comprobndose entonces su gran efectividad contra infeccones
bacterianas, sobt'e todo de Gram-positvas, y la ausenca de efectos txicos
para el hospedador.

Inmediatamente comenz una bsqueda sistemtica de microorganismos del

suelo que mostraran actividades antibiticas. En 1944 A. Schatz y S. Waksman
descubren la estreptomicina, producida por Streptomyces griseus, siendo el
primer ejemplo de antbitco de amplio espectro. Los diez aos que sgueron al
trmino de la segundad guerra mundial vieron la descripcin de 96 antibiticos
distintos producidos por 57 especies de microorganismos, principalmente
Actinomicetos.

En la dcada de los 60 se abri una nueva fase en la era de los antibiticos al

obtenerse compuestos semisintticos por modi{icacin qumica de antibiticos
naturales, palindose los problemas de resistencia bacteriana a drogas que
haban empezado a aparecer, disminuyndose en muchos casos los efectos
secundarios, y amplindose el espectro de accin.
 31

1.5.8 Objeto de estudio de la Microbologa. Ei objeio de estudio de una

ciencia, en este caso de la Microbiologa, se puede desglosar en dos apartados:
objeto maierial y objeto formal.

- Objeto Material: Los Microorganismos. La Microbiologa es la ciencia que se

ocupa del estudio de los microorganismos, es decir, de aquellos organismos
demasiado pequeos para poder ser observados a simpte vista, y cuya
visualizacin requiere el empleo del microscopio. Esta definicin implica que el
objeto material de la Microbiofoga viene delimitado por el tamao de los seres
que investiga, lo que supone que abarca una enorme heterogeneidad de tipos
estructurales, funcionales y taxonmicos; desde partculas no celulares como
los virus, viroides y priones, hasta organismos celulares tan diferentes como las
bacterias, los proiozoos y parte de las algas y de los hongos. De esta manera la
Microbiologa se distingue de otras disciplinas organsmicas (como la Zoologa y
la Botnica) que se centran en grupos de seres vivos definidos por conceptos
bolgicos hornogneos, ya que su objeto de indagacin se asienta sobre un
criterio artificiai que obliga a incluir entidades sin ms relacin en comn que su
pequeo tamao, y a excluir a diversos organismos macroscpicos muy
emoarentados con otros microscpicos.

A pesar de esto (o incluso debido a ello), la Microbiologa permanece como una

disciplina perfectamente asentada y diferenciada, que deriva su coherenca
interna del tipo de metodologas ajustadas al estudio de los organismos cuyo
tamao se sita por debajo del lmite de resolucin del ojo humano, aportanclo
un conjunto especfico de conceptos que han enriquecido la moderna Biologa.

Podemos definir, pues, a los microorganismos como seres de tamao

sencilla,
microscpico dotados de individualidad, con una organizacin biolgica
presentarse como
bien sea acelular o celular, y en este ltimo caso pudiendo
unicelulares,ceociticos,colonialesopluricelulares,perosindiferenciacinen
propa y
iejidos u rganos, y que necesrtan para su estudio una metodologa
adecuada a sus pequeas dimensiones. Bajo esta denominacin se engloban
tanto microorganismos celulares como las entidades subcelulares.

- Objeto Formaf. Todos los aspectos y enfoques desde los que se pueden
estudiar los microorganismos con{orman lo que denominamos objeio formal de
la Microbiologa: caractersticas estructurales, fisiolgicas, bioqumicas,
genticas, taxonmicas, ecolgicas, etc., que conforman el ncleo general o
cuerpo bsico de conocimientos de esia ciencia. Por otro lado, la Microbiologa
tambin se ocuoa de las distintas actividades microbianas en relacin con los
intereses humanos, tanto fas que pueden acarrear consecuencias perjudiciales
(y en este caso estudia los nichos ecolgic,os de los correspondientes agentes,
sus modos de transmisin, ios diversos aspectos de la microbiota patgena en
sus rnteracciones con el hospedador, los mecanismos de defensa de ste, as
como los mtodos desarrollados para combatirlos y controlarlos), como de las
que reportan beneficios (ocupndose del estudio de los procesos microbanos
que suponen la obtencn de materias primas o elaboradas, y de su
modificacin y mejora racional con vistas a su imbricacin en los flujos
productivos de las sociedades).

Finalmente, la Microbiologa ha de ocuparse de todas las tcnicas y

metodologas destinadas al estudio experimental, manejo y control de los
microorganismos, es decir, de todos los aspectos relacionados con el modo de
trabajo de una ciencia emprica.

1.6 CIENCIAS DERIVADAS DE LA MICROBIOLOGA

El desarrollo de la Microbiologa ha dado paso al nacimiento de cencias ms

especficas en cuanto a su campo de estudio. Segn PlA 20075, entre estas
ciencias se mencionan:

" PINA LOPEZ, Cafmen. 2007. Mdulo de Microbiologa. Facultad de Ciencias Bsicas e Ingeniera.
Unversidad Naconal aberta v a distaneia.
- La bacteriologa. Encargada Cel estudio del mundo de las bacterias y sus
relaciones con otfos organismos y con el medo ambiente.

- La micologa. Cuyo estudio abarca todo lo relacionado con los hongos

microscpicos y macroscPicos.

- La virologa. Que se enfoca en el estudio de los virus desde el punto de

vista morfolgico, fisiolgico, taxonmico y ecolgico.

- La inmunologa. constste en el estudio de las respuestas de defensa que

han desanollado los animales frente a la invasin por microorganismos o
partculas extraos.

- La protozoologa. su objetivo es el estudio de los protozoarios en todas sus

dimensiones.

1.6.1 Relaciones entre la microbiologa y otras ciencias biolgicas. El

auge de la microbiologa desde finales del siglo XIX se plasm, entre otras
cosas, en el aislamiento de gt"an variedad de cepas silvestres de
microorganismos, lo que sumnistr un enorme volumen de nuevo material
biolgico sobre el que trabajar, aplicndose una serie de enfoques que efan ya
habituales en las ciencias naturales ms antiguas; as, haba que crear un
marco taxonmico (con sus normas de nomenclatura) para encuadrar a los
organismos recin descubiertos, era factible desarrollar trabajos sobre
morfologa y fisiologa compafadas, sobre variabilidad y herencia, evolucin
ecologa, etc. De este modo la joven Microbiologa fue objeto, en pocos aos'
de la utilizacin, a un ritmo acelerado, de los mtodos taxonmicos y

experimentales que haban ido surgiendo y madurando desde el siglo )0/lll en

los mbitos de la "Historia Naiural" clsica.

Los avances de Taxonoma Microbiana, vale la pena resear aqu los esfuerzos
y
tempranos para lograf una clasificacin bacteriana por parte de cohn (1875)
Migula(1894),queSustentabansuconceptodeespeciepredomnantemente
sobre caracteres morfolgicos. Pero hacia 1900 era evidente la arbitrariedad e
 34

insuficiencia de este tipo de clasificaciones, de modo que los intentos

posteriores hicieron uso de caracteres bioquimicos (Orma Jensen, 1909), o de
una mezcla de rasgos morfolgicos, bioqumicos, patognicos y de tincin
(Buchanan, 1915). El sistema de taxonoma bacteriana adquiri un nuevo
impulso a partir de la 1u edicin del "Bergey,s Manual of Determinative
Bacteriologf' (1923), y de las propuestas de Kluyver y van Niel (,,prospecfs for a
natural system of classification of bacteria", 1 936) En cuanto a la nomenclatura,
no fue hasta 1 958 en que cuaj un Cdigo Internaconal de Nomenclatura
Bacteriolgica, aunque ya se vena aplicando desde haca tiempo el
procedimiento tipolgim para los microorganismos, con criterios similares a los
de la Zoologa y la Botnica.

El establecimiento de relaciones taxonmicas precis el recurso a miodos

cada vez ms amplios y afnados de anlisis gentico, estructural o fisiolgico.
En un apartado anterior ya vimos las conexiones tempranas entre la Bioqumica
y la Microbiologa a propsito del descubrimiento de la base enzimtica de las
fermentaciones, lo cual abri el camino para dilucidar el metabolismo energtico
microbiano, y para demostrar su similitud qumica con rutas metablicas de
organsmos superiores. Otro paso importante en la percepcin de la unidad
bioqumica del mundo vivo deriva del descubrimiento de las vitaminas (trmino
acuado por Funk em 1), al establecerse que determinados factores de
191
crecmiento requeridos por algunos microorganismos eran qumicamente
similares a las vitaminas necesarias en la dieta de los animales, y que este tipo
de compuestos representa precursores biosntticos de coenzmas del
metabolismo celular. As pues, este tipo de investigaciones sent claramente la
idea de la unidad qumica de los seres vivos, independientemente de su
encuadre taxonmico, y encauz una buena parte de los trabajos bioqumicos
hacia los microorganismos, dadas sus cualidades de faclidad de manejo y
cultivo en laboratorio.
 -{E

En cuanto a las conexiones de ia Microbiologa con la Gentca, ya Beijerink, en

1gCC, tras anaiizar la teora de la mutacin de De vries, haba ptedicho
que los

mcroorganismos podran convertrse en objetos de investigacin ms

adecuados que los sstemas animales o vegetales. Pero las prlmeras
conexiones entre ambas ciencias arfancan de la necesidad que hubo, a
principiosdelsigloXX,dedeterminarlasexualidaddeloshongosconfines
.1905 Maire demostr la exrstencia de meiosis en la formacin
taxonmicos. En
deascosporas,yClaussen(1907)evidencifusindenc|eosenAscomcetos,
mientras que Kniepp, hacia finales de los aos 30 haba recogdo un
gran

volumen de informacin sobre procesos sexuales en Basidromicetos.

El sueco
de
Lindegren ('1936) reallza las primeras cartograf as genticas en cromosomas
Neurospora, ourante Su estanc|a en e| |aboratorio ca|ifornano de
Morgan; este

|timo,propugnadorde|a'.teoradelosgenes',(,1926),confiabadesdehaca
aos en ampliar sus xitos, logrados en Drosophla, hacia el estudio de
la
y
gentica microbiana. En 1941, otros dos discpulos de Morgan' Beadle Tatum'
aslan mutantes auxotrficos de Neurospora, con lo que se inicia
el estudio de

la base bloqumica de Ia herencia' y converten a este hongo en una vallosa

herramienta de trabajo en esta lnea de investigacin'

por Luria y
Las estrategias disedas por Beadle y Tatum fueron aplicadas
De|bfck(1943)acultivosbacte'ianos,investigandolaaparicindemutactones
espontneas resistentes a fagos o estreptomicina La conexin de
estos

expermentos con las observaciones previas de Grffth 928)

(1 sobre la
transformacin del neumococo, llev a Avery y colaboradores
(l 944) a
gentica
demostrar que el "principio transformante" portador de la informacin
ese|ADN'Enlg4gEnrvinChargaffdemuestrabioqumicamente|atransmisin
y
gentica mediante ADN en Echenchia cot , y en 1952 Alfred Hershey Martha
ponen un
Chase. en experimentos con componentes marcados de fagos'
elegante colofn a la confirmacin de la funcin del ADN' con
lo que se
que hasta
derribaba el antiguo y asentado "paradigma de las protenas"
medadosdesig|ointentabaexplicarlabasede|aherencia.Deestaforma,|a
 36

Microbiologa experimental se sita en pleno ceniro del nacimiento de la

Gentica molecular, de Ia mano de los avances paralelos en Boqumca
(anlisis por ryos X de la estructufa del ADN debido a Maurice Wrlkins y
Rosalind Franklin, modelo de Watson y Crick de la doble hlice del ADN, etc.),
dando origen esta @nfluencia a lo que se ha llamado la "edad de oro" de la
Biologa Molecular.

1.7 CLASIFICACIN DE LA MICROBIOLOGA

La relacin de la Microbiologa con otras disciplinas ha generado el desanollo

de otros campos del conocimiento. PlA 20076 establece los siguientes:

- La microbiologa de alimentos. Estudia los microorganismos como

productores de alimentosy como agentes de deterioro de alimentos, En el
primer caso selecciona, mantiene, y mejora microorganismos tiles en la
generacin de productos alimenticios, con nuevas caractersticls sensoriales:
texturas, olores o sabores, en el segundo caso se encarga de desarrollar
mecansmos para prevenir y controlar el contacto con los alimentos.

- La microbiologa industrial. Se encarga de estudiar y manipular los

microorganismos a gran escala para que produzcan compuestos o realicen
funciones tiles como la produccin y transformacn de alimentos, frmacos,
vacunas, disolventes orgnicos. Por ejemplo la protena unicelular utilizada en
la alimentacin animal y producida por microorganismos cultivados sobre
desechos industriales da rendimientos muchsimo ms elevados que la
producda en las csechas.

- La microbiologa mdica. Estudia e identifica los agentes causantes de

enfermedades y su proceso infercioso, as como la respuesta inmunolgica del
paciente (sistema inmune y proteccin ante agresiones externas), y la seleccin
del tratamento antimcrobiano.

i lbid.
 ..7

- La microbiologa agrcola Estudia los procesos microbianos tiles para el

crecimiento de las plantas, adems de las enfermedades de las plantas
causadas por hongos, bacterias, virus, viroides entre otros.

- La microbiologa sanitaria. Desanolla procesos de ingeniera a gran escila

para el tratamiento de residuos.

- La microbiologa del agua potable. Investiga y aplica mtodos pafa eliminar

las bacterias patgenas en redes de agua.

- Gentica microbiana. Estudia la funcin de los genes, su expresin y

regulacin.

- La lngeniera gentica. con importante aplicacin tanto en la en la parte

clnica y en la agricultura. Mediante tcnicas de ADN recombinante se han
producido protenas como la insulina, la hormona del crecimento, el interfern,
el factorvlll de coagulacin, las beta-endorfinas que suprimen el dolor, vacunas
contra microorganismos causantes de enfermedades

- La biotecnologa microbiana. se conoce como el manejo, modificacin

gentica y propagacin microorganismos vivos mediante el uso de
de
tecnologas como el cultivo de tejidos y la ingeniera gentica, que dan como
resultado la obtencin de microorganlsmos nuevos o mejorados'

TCNICAS DE ESTUDIO DE LOS MICROORGANISMOS.

7'
PlA LPEZ. carmen.

La diversidad microbiana implica la utilizacin de equrpos y medios de cultivo

apropiados para identificar y observar el ciclo de crecimiento y reproduccin de
cada tipo de microorganismo.

' Ibid.
 38

Adems se requiere una estandarizacin de los mtodos de siembra en cada

medio de cultivo y de las tcnicas de recuento microbiolgico para lograr
sistemas efectivos de manejo y control del crecimiento microbiano.

Existen metodologias estandarizadas para el cultivo de microorganismos, los

cuales constituyen protocolos especializados segn el tipo de microorgansmo y
permiten el avane del conocimiento socalizado en comundad acdmca de
investigadores.

Para que los microorganismos crezcan adecuadamente en un medio de cultivo

artificial ste debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura,
grado de humedad y presin de oxgeno adecuadas, as como un grado
correcto de acidez o alcalinidad. Un medio de cultlvo debe contener los
nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo
microorganismo contaminante.

La mayora de las bacterias patgenas requieren nutrientes comple.ios similares

en composicin a los liquidos orgnicos del cuerpo humano. Por eso, la base
de muchos medios de cultivo es una infusin de extractos de carne y Peptona a
la que se aadirn otros ingredientes. Los hongos microscpicos requieren de
medios de cultivo menos estrictos, debido a que toleran rangos ms amplios de
variaciones ambientales. Los virus entre tanto, requieren de condiciones
ptimas para su reproduccin, como lo son la disponibilidad de clulas
hospederas, temperatura, humedad, presin y nutrientes necesarios para
mantener a las msmas.

1.8.1 Tipos bsicos de medios de cultivo por consistencia. El tipo de

medio de cultivo a utilizar depende del microorganismo de inters y de la
necesidad de realizar ese cultivo. Los medios se pueden utilizar para el
crecimiento de una especie o para diferenciar entre cepas o especies

Segn su consistenca o estado fsico pueden ser:

 JY

- Lquidos o
caldos: se empiean fundamentalmente para cultivar los
microorganismos y obtener grandes cantidades de los mrsmos o bien la
produccin de metabolitos especficos, estimular y promover la seleccin de
algn o algunos microorganismos e impedir que otros se multipliquen, identificar
al microorganismo esiudiado mediante pruebas bioqumicas.

- Semislidos Se utilzan para dentjficaciones bioqumicas y averiguar si el

germen estudiado es mvil. Los medios semislidos tienen una consistencia
blanda.

- Slidos o Agares Se utilizan para obtener colonias aisladas de

microorganismos. A diferencia de los lquidos se les agrega Agar. El agar es un
polisacrido acdico producido por ciertas algas rojas, es un elemento
solidificante gue se licua completamente a la temperatura del agua hirviendo y
se solidfica al enfriarse a 40 grados. EI agar Se usa a una concentracin del
1,5%. Con mnimas excepciones no tiene efecto sobre el crecimiento de las
bacteras y no es atacado por aquellas que crecen en 1. La Gelatina es ott"o
agente soidficante pero se emplea mucho menos ya que bastantes bacterias
provocan su licuacin.

1.8.2 Tpos de medos de cultivo por utldad prctica.

- No selectvos o generales: permiten el cultivo y crecimiento de una amplia

gama de microorganismos. Por ejemplo, Caldo nutritivo, Agar nutritivo, Agar
Soya Tripticasa (TSA), Agar marino 2216 o Zobell. A menudo estn
enrquecdos con materales como: sangre, suero, Hemoglobina, Factor X,
Factor V, glutamina, u oiros factores accesorios para ei crecimiento de las
bacterias {Agar Sangre, Schaeadler, etc. ).

- Selectivos: (pueden ser de moderada o de alta seiectivrdad) permiten el

aislamiento y crecimiento del microorganismo o grupo de microorganismos de
inters, para lo cual se manipulan factores ya sean de tipo nutricional o de tipo
 40

ambiental. Algunos medos son selectivos porque conienen un pi-oducto

oumico. como la azida sdica, el teluriio potsico o el crtstal violeta, que
inhiben el desarrollo de algunos microorganismos pero no de otros. En el caso
de factores nutricionales se aaden al medio sustancias que inhiban el
crecimiento de ciertos grupos de microorganismos, permitendo a la vez el
crecimiento de otros.

Los antbticos, el cloruro sdico en alias concentraciones, colofantes y

algunas sustancias qumicas son ejemplos de agentes selectivos que se
aaden a los medios para inhibir el crecimiento de otros microorganismos
diferentes al de inters. El agar sPS (denominado de esta forma porque
contiene sulfadiacna y sulfato de polimixina) se utiliza para identificar
clostndium botulinum, agente eausal de una gtave rnloxicacin alimentaria. El
medio sPS permite el crecimento de esta bactera, pero nhbe el de otras
especies de Clostridium.

Por ejemplo, los colorantes, que se aaden al Agar, inhiben selectvamente

determinados microorganismos, es el caso del verde brillante (Agar verde
brillante) utilizado para determinar la presencia de Salmonella en heces fecales
yaqueinhibelasbacteriasGram-postivas,y|amayoradelasbacteras
ntestnales.

Para el caso de factores ambientales se manipula la temperatura, el grado de

humedad, el pH, la concentracin de oxgeno o la intensidad de la luz' As el
Agar glucosado de Sabouraud ajustado a pH 5,6, se usa para el aislamiento
de

hongos, que a ese pH crecen meior que las bacterias' Son ejemplo de este tlpo
para cultvo
de medios: Agar Tiosulfato, citrato, sales de bilis, sacarosa (TCBS)
de Vibrio y Agar Cetrimida para cultivo de Pseudomonas'

- Enriquecidos: suprimen el crecimiento de la flora competitiva normal

potenciando el cultivo y cfecimiento deseado (selenito, medio con Vitamina K).
 41

- Para aislamientos especializados: formulaciones nutritivas esoeciales oue

satisfacen requerimientos de grupos especficos de microorganismos, ayudando
a su identificacin (Lowenstein). En los dferentes medios de cultivo se
encuentran numerosos materiales de enriquecimento como hidratos de
carbono, suero, sangre completa, bilis, etc. Los hidratos de Carbono se
adicionan por dos motivos fundamentales: para incrementar el valor nutritivo del
medo y para detectar reacciones de fermentacin de los microorganismos que
ayuden a identificarlos. El suero y la sangre completa se aaden para promover
el crecimiento de los microorganismos menos resisientes.

- Diferenciales: permiten distinguir unos microorganismos de otros por las

caractersticas que presentan las colonias. se elaboran con base en las
caracterstcas fisiolgicas especficas de los microorganismos, por ejemplo,
nutrcin, respiracin entre otras. Algunos medios diferenciales llevan ncluido
un indicador de pH, que pone de manifiesto la degradacin de un nutriente
especfico (generalmente un azcar) por ei cambio de color que se origina
cuando ste es metabolizado, como en el caso del medio CLED. Los colorantes
que se aaden a estos medios actan como indicadores para detectar, por
ejemplo, la formacin de cido. un ejemplo es el Rojo Fenol es de color rojo en
pH bsico y amarillo en pH cido. A travs del cultivo en medio diferencial se
puede distinguir las bacterias que fermentan la lactosa (con produccin de
cido) de las no fermentadoras. otros colorantes actan como inhibidores del
crecimiento de unos microorganismos y no de otros, por ejemplo la Violeta de
Genciana inhibe el crecimiento de la mayora de las bacterias Gram-positivas).

Algunos medios pueden ser a la vez selectivos y diferenciales. El agar Mac

conkey es un ejemplo de medio selectivo y diferenqal. La presencia de sales
biliares y cristal violeta inhiben el crecimiento de bacterias no entricas (accin
selectva); la fermentacin de lactosa con liberacin de productos cidos hace
virar un indicador de pH incorporado en el medio {accin diferencial). El agar
sangre es un agar que contiene hemates y permite reconocer los
 42

pafa aislar la bacterta

microorgansmos que producen hemlisis por ejemplo
colonias de
que causa la escarlatina, se utiliza el medio de agar sangre' Las
y
esta bacteria producen nemlisis, es decir, muerte lisis
de los hemates
eosina-azul de
generando una zona transparente a su alrededor' El Agar
de coliformes y E coll Este
metileno (EAM) permite identificar el crecimiento
eosina y azul de metileno En
medio contiene peptona, tactosa y los colorantes
bacterias' pero no el de las
dicho medio se inhibe el crecimiento de otras
coliformes (stas desarrollan colonias tpicas)'
E coli muestra colonias grandes'
con brillo metlico verdoso causaoo
oscuras, negro-azuladas, centro casi negro'
como Enterobacler se manifiesta
por la luz reflejada. La presencia de coliformes
y
plido' mucosas' con centro oscuro sn
en colonias grandes, de color rosado
relacionadas con ella se
brillo metlico Eschencnia co/i y las bacterias
.
identifican en medios con un indicador
de pH porque originan productos
color del indicador y por tanto de
sus
metablicos cidos, que cambian el
colonias.
de casi
se puede llegar a la identificacin
Seleccionando los medtos adecuados
cualquier bacteria (Oxidacin-Fermentacin)'

generales para el cultivo de microorganismos' El

1.8.2 Condiciones
de ros microorganismos en un medio de cultivo se ve
desarro*o adecuado
algunos casos'
de gran importancia y que' en
afectado por una serie de factores
propio medio'
son ajenos por completo al

de nutrientes adecuados: Un medio de cultivo adecuado

- Disponibitidad carbono'
ha de contener' como mnimo'
para la investigacin microbiolgica
inorgnicas En muchos casos
sern
nitrgeno' azufre, fsforo y sales
inductoras del crecimiento'
necesarias ciertas vltaminas y otras sustancias
sustancias a los medios
la forma ms extendida de aporiar estas
Actualmente' asequible de
peptona que' adems' representa una fuente fcilmente
es utilizar que no suelen
y carbono ya que la mayora de los microorganismos'
nitrgeno de atacar los
naturales' tienen capcidad
utilizar directamente las protenas
 aminocidos y otroscompuestos ms simpres de ntrgeno presentes en ra
peptona. ciertas bacterias tienen necesidades
nutritivas especficas por ro que
se aade a muchos medios sustancias como suero, sangre,
rquido asctico,
etc. lgualmente pueden ser necesarios ciertos carbohdratos
y sares minerares
como las de calcio, magnesio, manganeso, sooro potasto
o y sustancias
promotoras der crecimiento, generarmente
de naturaeza vitamnica.
- consistencia adecuada der medio partiendo
de un medio rquido podemos
modficar su consistencia aadiendo productos
como abmna, geratina o agar,
con ro que obtendramos medios en estado
semisrido o srido. Los medios
soridificados con geratina tienen er gran inconveniente
de que muchos
mrcroorganismos no se desarrotan
adecuadamente a temperaturas inferiores
al
punto de fusin de este soridificante
y de que otros trenen ra capacidad oe
lcuarra Actuarmente ros medios sridos
son de uso unversar, por su
versatiridad y comodidad, pero hay
tambin gfan cantdad de medios rquidos
cuyo uso est ampliamente extendido
en el laboratoro.

- Presencia (o ausenca) de oxgeno y otros gases

Gran cantidad de
bacterias pueden q.ecer en una
atmsfera con tensin de oxgeno
normar.
Algunas pueden obiener er oxgeno
directamente de variados sustratos. pero
ros microorganismos anaerobios
estrictos sro se desa'orarn
adecuadamente
en una atmsfera sin 6igs9 ambientar.
En un punto intermedio, ros
microorganismos microaerfios
crecen mejor en condcones
parciarmente anaerobas atmosfricas
(tensin de oxgeno muy reducda),
anaerobios facultatvos tie
mientras ros
n un metabolismo capaz de
adaptarse a cualquiera
de las citadas condiciones

- Condiciones adecuadas
de humedad Un nivel mnimo
de humedad, tanto

,:' ff T;H ": :'lT3:fJ T;'::i.:H;:"

::
mantenmiento de estas condcones mnimas
il"lilT*f :i
en ras estufas de curtivo a 35_
 44

37oC proporcionando una fuente adecuada de agua que mantenga la humedad

necesaria para el crecimiento de los cultivos y evitar as que se deseque el
medio.

- Luz ambiental La mayora de los microorganismos crecen mucho mejor en la

oscuridad que en presencia de luz solar. Hay excepciones evidentes como sera
el caso de los microorgansmos fotosntticos.

- pH La concentracin de iones hidrgeno es muy importante para el

crecimiento de los microorganismos. La mayora de ellos se desanollan mejor
en medios con un pH neutro, aunque los hay que requieren medios ms o
menos cidos. No se debe olvidar que la presencia de cidos o bases en
cantidades que no impiden el crecimiento bacteriano pueden sin embargo
inhibirlo o ncluso alterar sus orocesos metablicos normales.

- Temperatura Los microorganismos mesfilos crecen de forma ptima a

temperaturas entre 15 y 43C. Otros como los psicrfilos crecen a OoC y los
termfilos a 80oC o incluso a temperaturas superiores (hipertermfilos). En
lneas generales, los patgenos humanos crecen en rangos de temperatura
mucho ms cortos, alrededor de 37oC, y los saprfitos tienen rangos ms
amolios.

- Esterilidad del medio. Todos los medios de cultivo han de estar

perfectamente estriles para evitar la aparicin de formas de vida que puedan
alterar, enmascarar o incluso impedir el crecimiento microbiano normal del o de
los especimenes inoculados en dichos medios. El sistema clsico para
esterilizar los medios de cultivo es el autoclave (que utiliza vapor de agua a
presin como agente esterlzante)

1.8.3 Cmo se realiza el cultivo? Sembrar es colocar una muestra de

inculo, en un medio de cultivo para obtener el crecimiento de los
 45

microorganismos. Para ello se extiende la muestra sobre caja de Petrt, que

contiene un gel (Agar) al que se han aadido las substancias que necesitan los
microorganismos para crecer. A esto lo llamamos medio de cultivo. A veces se
aaden otras clases de sustancias; por ejemplo, para impedir el crecimento de
otras bacterias que podran contaminar el cultivo. La siembra se puede hacer en
otros tipos de medios de cultivo, como tubos de vidrio con gel, frascos con
lquidos nutritivos para los mcroorgansmos.

A continuacin se procede a la "incubacin" del medio ya sembrado En cada

caso se hace en condiciones partculares de presin de oxgeno, temperatura'
agitacin, duracin, etc. Muchas de las bacterias patgenas crecen ben a
temoeraturas cercanas a los 37oC habituales de nuestro organismo

Si el cultivo bacteriano tiene xito, crecern "colonias" de bacterias en el medio

de cultivo. Estas colonias tenen caractersticas de color, forma, tamao etc'
propias de cada bacteria y esto nos ayuda a dentifcarlas. Tambin se puede
someter a las bacteras de las colonas a pruebas bioqumicas o de otro tpo
para lograr su identificacin. Algunas bacterias son muy difciles de cultivar,
otras tardan mucho tiempo en crecer y algunas, finalmente, no se han
conseguido cultlvar.

- Sistemas de Siembra. Antes de iniciar la siembra se deben cumplir

determinadas condiciones

.Esterilizacin de los instrumentos de trabajo y de los medios de cultivo. Los

medios de cultivo se esterilizan con calor hmedo en la autoclave y los
materiales de vidrio se esterilizan con calor seco en el horno Pasteur. En el
caso de objetos metlicos, como el asa de sembra, que se esterilizan en el
momento de su utilizacin, se mantienen en la llama hasta que se pongan al
rojo, tenendo la precaucin de enfriarlos antes de su uso.
 46

. Que el inculo no se contamine, modifique o destruya para lo cual se utiliza

calor directo, flameando las bocas de los tubos de ensayo, mataces, la pipeta y
dems elemenlos antes y despus de su utilizacin.

.Esterilizacin del rea de trabajo para evitar contaminaciones durante el

manejo del instrumental y de los medios de cultivo. Se utilizan la cmara de
flujo laminar. Si no se dispone de ella, se utiliza un mechero Bunsen que,
debdo a que fuerza la circulacin del aire en sentido vertical y hacia arriba, es
capaz de crear un ambiente semiestril en la zona inmediata alrededor y debajo
de la llama, de forma que los rresgos de contaminacin disminuven
considerablemente.

- Siembra de medio slido a medio lquido. Retire el asa, flamee la boca del
tubo y tape. Esterlice el asa en el mechero despus de usarla. lncube los tubos
a 37oC por 24 horas. Observar el crecimiento obtenido. Si no hav crecimiento el
caldo queda transparente.

- Siembra de medio lquido a slido, Se procede en ia misma forma que en la

siembra anterior pero con el asa de argolla. Si la siembra es en tubo recuerde
hacer puncin y estra. Si es en cEa de Petri puede ulilizar diferentes sistemas
como estra, agotamiento, rejilla con el fin de lograr un cultivo puro.

- Siembra de medio slido a slido. Se realiza de la misma forma que en la

siembra anterior pero utilizando el asa recta. Los medos slidos contienen agar
en proporcin de 1.5 a 2.0% y se emplean para obtener colonias aisladas. Las
placas de agar se pueden inocular mediante varios mtodos: como estras,
agotamiento y rejilla con el fin de lograr un cultivo puro.

- Siembra en rejilla. Realice una estra gue atraviese el centro del agar. Luego
realice estras en ngulo recto con respecto a la estra inicial. Voltee el agar en
ngulo de 90 grados y reaiice estra hasta cubrir todo el agar.
 47

- Siembra por agotamiento. Tome una placa de agar, marque la base de la

caja de petr con los nmeros 1, 2 y 3. Coloque la muestra a sembrar en el
nmero 1, realice estras hasta la mitad de la caja. Esterilice el asa y gire Ia caja
hasta el nmero 2, tome las dos ltimas estrias y siga estriando hasta el
nmero 3. Gire la caja y termine de estriar, tenga cuidado de no tocar las estras
ya hechas.

- Siembra por estras. Marque la caja en 6 puntos- Coloque la muestra en el

punto nmero uno, realice estras hasta el nmero 2. Esterilice el asa, tome las
dos ltimas estras y extindalas hasta el nmero 3, tome las dos ltimas
estras y extindalas hasta el nmero 4 y as sucesivamente hasta llegar al

nmero 6.

- Siembra masiva. Tome un hisopo estril e introdzcalo en el tubo que

contiene la muestra a sembrar, luego frote toda la superficie del agar. Le
evaluacin del crecimiento en las placas de agar se hace a travs de la
observacin de colonias en la superficie.

- Siembra en agar inclinado. Esta se realiza por puncin y por estra Por
ouncin: lntroduzca el inculo con el asa reca hasta el fondo del medio con un
solo movimiento y teniendo cuidado de hacer el mismo trayecto de entfada que
de salida. Por estra: Extienda el inculo sobfe el agar inclinado deslizando
suavemente el asa por la superficie en forma de zigzag.

No olvide flamear la boca del tubo antes y despus de la slembra. Evalu la

presencia de crecimiento en el agar por la formacin de una pelcula o por el
crecimiento de colonias en la superficie.

- siembra en profundidad. Marque la caja de petri estril con el nmero de

grupo, la fecha y siembra en profundidad. Abra ligeramente la caja de Petri
cerca del mechero.
 48

o Abra un tubo con cultivo de bacterias y con ayuda de una prpeta de Pasteur
plstica, transfiera 1 ml de s1e cultivo a 1a base de la caja de petri estril.
Descarte la pipeta en el frasco de boca ancha con clorox.

o
Vierta un poco de agar nutritivo en la caja de Petri, tape la caja y luego realice
movimientos suaves sobre el mesn, en el sentido de las agujas del reloj, luego
al contrario, en forma de L y L invertida' y por ltimo en forma de 8 Esto
garantiza una distribucin homognea de las bacterias en todo el agar para
facilitar su posterior recuento.

o Envuelva las cajas de Petri y los tubos con cinta de enmascarar, mrquelos
con el nmero de grupo, la fecha. Luego incube 37o cpor 48 horas'

- Tcnica del microcultivo. Esta tcnica se utiliza en micologa para el estudio

de estructuras de los hongos (conidias, ascas, hifas, conidiforos, entre otras)
quesonmuyfrgitesysedeterioranfcitmente,alserobtenidasparasu
observacin a partr de un macrocultivo comn y corriente'

1.8.4 Observacin de microorganismos' MATEOS, 20058' plantea que la

observacin microscpica se constltuye en una tcnica de gfan importanca
para el estudio de los microorganismos ya que permite conocer algunas de sus
caractersticas, como son: forma, disposicin o agrupacin,
presenca o

ausenca de estructuras (cpsulas, espofas, flagelos), movilidad, entfe

otfas El
equipomasutiiizadopara|aobservacindemicroorganlsmosese|microscopio
el cual se describe a continuacin.

y.ela.m:n
microorgansmos: el microscoPo' preparaclon
" MATEoS, Pedro F. 2005. observacin de los y getca. Facultad de Farmaca. Universidad de
de muestras. Departamento O" rf4i"ioOrlogi"
Salamanca. EsPaa.
 49

- El Microscopio. EI microscopio es un instrumento ptico que ampf ifica la

imagen de un objeto pequeo, Es el instrumento que ms se usa en los
laboratorios que estudian los microorganismos. Mediante un sistema de lentes y
fuentes de iluminacin se puede hacer visible un objeto microscpico. Los
microscopios pueden aumentar de 100 a cientos de miles de veces el tamao
original. Actualmente existen dos tipos de microscopios: el ptico y el
electrnico. En el microscopio ptico ei aumento del objeto se consigue usando
un sstema de lentes que manipula el paso de los rayos de luz entre el objeto y
los ojos. El microscopio elecirnico utrliza un rayo de electrones controlado por
un campo magntico.

- Microscopio Optco. Los microscopios de este

tpo generalmente producen un aumento de 1000
veces el tamao original. El lmite lo tienen en unas
2000 veces. Las lentes de un microscopio ptico
son el condensador, el objetivo y el ocular. La luz
ObjeiiYos
que entra en el sistema debe enfocarse sobre la
preparacin y para esto se utiliza el condensador.
Elevando o bajando el condensador puede
alterarse el plano del foco de luz y elegirse una
!_igura I E$fuctllfa de r mioscDpio
posicin que consiga el foco preciso. El objetivo es opco

la lente situada cerca del objeto que se observa. El aumento primario del objeto
es producido por la lente objetivo y la imagen se transmite al ocular, donde se
realiza el aumento final. Figura l. Los microscopios que se usan normarmente
en mcrobiologa estn eguipados con tres objetivos: bajo poder, alto poder y
objetvo de inmersin. Estos objetivos estn montados sobre una pieza que se
llama revolver que puede rotarse para alinear el objetivo deseado con el
condensador.

La imagen formada por el objetivo es finalmente aumentada por el ocular. El

aumento total de un microscopio compuesto es el producto del aumento de su
objetivo y de su ocular. El microscopio compuesto es capaz de conseguir
aumentos considerablemente mayores que el microscopio construido con una
sola lente. Este ltimo, llamado microscopio simple, se usa principalmente como
lupas y cristales de aumento.

Adems del aumento, una propiedad importante de un microscopio es su poder

resolutivo; esto es la capacidad de mostrar distintos y separados dos puntos
muy cercanos. Cuanto mayor sea el poder resolutivo, mayor ser la definicin
de un objeto. Los microscopios de gran poder resolutivo son especialmente
buenos para ver pequeas estructuras. El poder resolutrvo de un microscopio
compuesto depende de la longitud de onda utilizada y de una propiedad ptica
de la lente conocida como apertura numrica. Como los microscopios pticos
utilizan luz vislble, la longitud de onda est fijada y es por lo que la resolucin
de un objeto es funcin de la apertura numrica; cuanto mayor sea la apertura,
el objeto resuelto ser ms pequeo.

0.5 L

Nsena

d: poder resolutivo; L: longitud de onda; a: mitad del ngulo de la lente objetivo;

N: ndice de refraccin del medio; N sen a: apertura numrica.

Un factor que afecta a la apertura numnca, adems de la construccin de la

lente, es el medio a travs del cual pasa la luz. Mientras que el objetivo est
separado del objeto por el aire, su apertura numrica nunca ser mayor de 1,0;
para conseguir aperturas numricas mayores que sta, el objetvo debe estar
inmerso en un lquido de mayor ndice de refraccin que el aire. A estos lguidos
se les denomina aceites de inmersin que se utilizan con tos objetivos de
nmersin obtenendo una apertura numrca entre 1,2 y 1,4. An asi, al
utilizarse la luz visible (longitud de onda) estos mcroscopos llegan a tener un
poder de resolucin de aproximadamente 0,25 .rm, lo que significa que las
 cl

partculas con un tamao ms pequeo de 0,25 pm no pueden distinguirse

unas 0e otras.

- Microscopio Electrnico. Los microscopios electrnicos utlizan rayos de

electrones en lugar de la luz, lo que les permite tener un poder de resolucn
muy elevado. La longitud de onda de los rayos de electrones es de o,005 -
0,0003 nm, muy corta comparada con la de la luz visible (426 - 750 nm, violeta -
rojo). Es posible con el microscopio electrnico resolver objetos separados por
una distancia de 0,003 pm, comparado con los 0,25 Um de uno ptico Los
aumentos pueden llegar a ser de un milln de veces

A cusa de la naturaleza de este instrumento slo pueden examinarse objetos

muy delgados; incluso una sola bacteria es demasiado gruesa para ser
observada directamente. Por lo que, para preparar muestras para el
mcrgscopio electrnico se necesitan tcnicas especales de cortes ultrafinos.
Para seccionar las clulas primero deben ser fijadas y deshidratadas (etanol o
y
acetona). Despus de la deshidratacin, la muestra se incluye en una resina
es aqu donde se realzan cortes finos con un ultramicrotomo, por lo general
equipado con una cuchilla de diamante. una sola clula bacteriana puede
cortarse en cinco o seis secciones muy finas, S slo tiene que observarse el
contorno de un organrsmo, no son necesarias seccones finas por lo que se
montan clulas enteras que se recubren de una capa fina de un metal pesado
(oro). El rayo de electrones es dirigido sobre la preparacin y los electrones
dispersadospore|meta|pesadoactivanunapanta||adeobservacin
pfoduciendo una imagen. A la primefa tcnica se la denomina Microscopa
Electrnica de Transmisin (MET) y a la segunda Microscopa Electrnica de
Barrido (MEB).

- Microscopia ptica. Adems del microscopio de campo claro existen otros

microscopios ptcos como son el de campo oscuro, fluoresc,encia y contraste

de fases.
 52

una
claro: usa como fuente de luz directa bien
Microscopio de campo transparentes es
que los microorganismos son
Ya
bombilla bien la luz solar' teir'
de microscopa y es por lo que se suelen
distinguirlos con este
tipo
difcil
ptico equipado con un
de campo oscuro: usa un mcroscopio
Microscopio
los microorganismos en
la
que iluminan
condensador y obietivo
especial
para visualizar
a un fondo oscuro Este mtodo se utiliza
muestra frente
sin teir'
microorganismos vivos
muestra se tie con una
sustanqa
Microscopio de fluorescencia: la
las ondas cortas de
la luz (azul) y emte
la energa de
fluorescente que absorbe (verde)' se
utiliza en
de ondas ms rargas
ra luz de rongitudes
sustancia fluorescente
se une a un
tcnica en la cual una
inmunof luorescencia' anticuerpo fluorescenre
de ciertos mic'roorganismos Si el
antianerpo especficl fluorescencia y se
puede
emite
este microorganismo
se une al microorgantsmo'
se usa en clnica'
identificar. Esta tcnica
que
es un microscopio ptico modificado
de fases:
Microscopio de contraste grosor o densidad' Mediante
un
de diferente
permte contrastar sustancias de tal manera que
especial se controla la iluminacin
condensador y un oUetiuo partes de una clula El
a travs de las distintas
vaya en diferentes rutas de brillo y oscuridad
con este
con diferentes grados
resurtado es una rmagen que las partes de la clula
denso aparec brillante' mientras
mtodo, el material aparecen oscuras'
Se
cercana al H2O (citoplasma)
que tienen una densldad de usar @lorantes o
sin necesidad
estructuras celulares
utiliza para visualzar
matar microorganismos'
 53

' Preparacin de muestras para

observacin de ros microorganismos.
Todos fos microorganismos, excepto
ros virus, pueden ser observados
mediante
m'croscopos pticos, por ro que
nos vamos a limitar a describir ras
tcnicas
ms comnmente usadas para realizar
preparaciones para microscopios
pticos.

Preparacin en fresco: para poder observar la

microorganismo es preciso que
movilidad de
un
no est fijado. consiste en suspender
una gota,
tomada directamente de la
muestra, sobre un portraobjetos y
cubrindola, sin
formar burbujas de aire, con un portaobjetos
se ooserva al mcroscopio oe
contraste de fases.

Tcncas de tincin: En general,

el proceso segudo en todas ls
tinciones
conlleva las siguientes etapas:
extensin, fijacin, tratamiento
con colorantes y
observacin_

a. Extensin: se realiza
ha de estr totarmente
rimpio si ra muestra .. l,*",11'"1"rffi":j:fi":ue
e y, si es slida, hay que
resuspenderla previamente en
una gota de H2O.

b' Fijacin: tiene por objeto adherir

la muestra al portaobietos y
desnaturalizar
las protenas para facrtar ra
accin der cororante. Normarmente
se realiza con
calor' pasando ra muestra repedamente
a 10 cm de ra tama der mechero.

c' Tincin: se reariza aadiendo ros

cororantes sobre ros microorganismos
sometidos a los procesos
anteriores. puede ser de vanos
tipos:
- Negativa: Los colorantes no
ten el mcroorganismo, sino
aumentando de este modo
el entomo,
su contraste. La muestra se
extiende sobre una gota
ctel colorante (nigrosina).
 54

- Simple: Se utiliza un solo colorante que puede ser de cualquier tipo Al igual
que la tincin negativa, slo nos permite observar la forma, el tamao y el tipo
de agrupacin de las clulas.

- Diferencial: Intervienen dos o ms clorantes y cada uno diferencia una

estructura. El colorante que se usa en segundo lugar es de color diferente al del
primero, denominndose colorante de contraste.

- Tincin de Gram. Es la tcnica de tincin diferencial ms importante que se

utiliza en bacterias. El primero en describirla fue el dans Christian Gram.
Consiste bsicamente en aadir lo siguiente: Cristal violeta (colorante azul)
Lugol (mordiente, sustancia no colorante que refuerza la accin de un
colorante) Etanol 96' (decolorante que remueve el colorante de ciertas
bacterias) Safranina (colorante de contraste, rojo)

Esta tincin distingue entre dos amplios grupos de bacterias segn la

composicin de la pared celular; las Gram (-) que no retienen el complejo cristal
violetalugol despus de la decoloracin con alcohol y aparecen teidas de rojo,
y las Gram (+) que s lo retienefl y aparecen teidas de azul oscuro.

- Tcncas de Recuento Bacteriano. Para el recuento de microorganismos

presentes en una muestra de agua, suelo, aire, alimento, cultivos, entre otros,
existen diferentes mtodos o tcnicas: Algunas tcnicas son directas y permten
un recuento de todas las lulas. tanto las vivas como las muertas. Las medidas
directas incluyen los recuentos directos al microscopio o recuento electrnico, el
recuento en placa, o el clculo del nmero ms probable (NMP).

Otras son medidas indirectas y miden una propiedad de la masa de las clulas
como son la turbidez, el peso seco, o una actividad metablica.
- Recuento de colonias o recuento estndar en placa. se basa en contar las
colonias de microorganismos que se desarrollan despus de inocular en un
medio de cultivo adecuado e incubar a una temperatura y tiempo determinados
un volumen determinado de muestra. Se utiliza oara determinar el nmero de
clulas aisladas o microorganismos unicelulares viables como bacterias,
levaduras, tambin se utiliza para el conteo de esporas fngicas presentes en la
muestra.

La muestra a inocular debe ser homognea y no contener conglomerados de

clulas. Despus de la incubacin cada microorgansmo o clula viable formar
una masa visible de organismos, o sea una colona. De esta manera el nmero
de colonias permitr a su vez determinar el nmero de organismos viables en
la muestra sembrada. Se pueden utilizar sistemas de siembra en superficie, o
en profundidad.

Generalmente la muestra original se diluye para que el nmero de colonias

desarrolladas en la placa se encuentren entre 30 y 300 colonias y as permitir
un ptimo crecmiento y facilitar la lectura. Cuando la muestra se diluye el
clculo del resultado se realiza cpntando las colonias en aquellas placas que
tengan entre 30 y 300, se promedia y se multiplica por el factor de dilucin. Los
resultados se expresan en colonias por ml. Los resultados tambin pueden
expresarse en unidades formadoras de colonias (UFC), el valor de UFC es un
valor que expresa el nmero relativo de microorganismos de un taxn
determinado en un volumen de un metro cbico de muestra. En el caso de
alimentos el resultado se considera como un indicador de las caractersticas
higinicas generales del alimento

- Recuento celular microscpico directo: Se basa en colocar un volumen

y realizu el conteo utilizando microscopa
determinado de clulas sin fijar de
fase. Para ello se utiliza la cmara de recuento de Petroff-Hauser o de
Neubauer consstente en un portaobjetos con una excavacin de 0.02 mm de
profundidad en un rea de 1 milmetro cuadrado, con una rejilla dividida en 25
 56

cuadrados grandes los cuales a su vez se subdividen en 16 cuadrados de 4X4

o sea que la muestra se distribuye en 40O celdillas.

'il ' t'

' .' l,
...

Figura 2. Esquema de la cmara de Neubauer'

La muestra, se coloca en la excavacin del portaobjeto y se cubre con el

cubreobjetos se de,ia reposar sobre la platina del microscopio durante unos
mnutos, y se proceoe a contar el nmero de clulas en varias celdillas
(generalmente en 16, equivalentes a uno de los cuadros grandes)' Se anota el
nmero n de clulas observadas en esas 16 celdillas'

clulas/ml.
El recuento celular se calcula: n x 25 x 50 x 1000 = concentracin en
Esunmtodomuyrpidoysenci||operonopermitedistinguir|u|asvivas
inmviles de clulas muerias. se utiliza en suspensiones concentradas

-Recuentodectulasbacterianasutilizandosl.sfemaselectrniasdeltipo
contador un
coutter counter. El mtodo consiste en colocar en una cmara del
hace pasar a
volumen determinado del cultivo (suspensin bacteriana) luego se
a otra cmara'
travs un tubo capilar entre dos polos de una corriente elctrica
El poro un pequeo orificio de unos 15 pm de dimetro forma parte de un
crcuto elctrico, de manera que cada vez que pasa una
clula a travs del

mismo, la conductividad del circurto disminuye y la presencia de

la clula es

detectada electrncamente en el c,ontador'

 - Turbidez. se basa en la medida de la turbidez de los medios de cultivo en los
que crecen mcroorganismos unicelulares. La turbidez es proporcional a la
masa de las clulas en suspensin y su medida nos permite estimarla. para ello
se utilza un espectrofotmetro que mide la cantidad de luz que transmite una
solucin o un cultivo lquido de clulas microbianas. A mayor masa de clulas
en un cultivo, mayor ser su turbidez, y menor la cantidad de luz que se
transmitir de manera que la lectura en el espectrofotmetro ser mayor. se
utilza en cultivos densos. Permite medir el crecmento de poblaciones. para
medr la masa o el nmero de clulas con un espectrofotmetro, se debe
preparar una curya patrn, o grfica en la que se relacionan las medidas del
espectrofotmetro con la masa celular o el nmero de clulas en un cultivo de
un determinado y se expresa en unidades de absorbancia.

1.9 LA BIOTECNOLOGA Y LOS MICROORGANISMOS.

Tomado de documenos COIEC soDre o4tunidades Ecnolgicase.

La biotecnologa se ha definido como el conjunto de tcnicas que utiliza

ofgansmos vivos (o partes de ellos) para obtener o modificar productos,
mejorar plantas o animales, o para desanollar microorganismos con usos
determnados.

La definicin de biotecnologa aplicada a la agricultura y alimentacin es an

ms complicada y libre que en otros sectores. La aplicacin de la agricultura
biologica y de la biodiversidad aumenta la potencialidad de ros usos del
conocimiento biolgico, toda la biologa aplicada, en estos sectores. sin
embargo, en ro gue sigue el tema se centra en ras posibilidades que ofrece el
desarrollo de la
moderna bioroga, microbiologa, bioqumica, bioroga
molecular, biologa cerurar, principarmente, aunque se reconozca que ra

' COTEC. 2008. I-a biotecnologi Documentos sobe uportuni.latlcs iecnolpics.

 58

y que estn
agricultura biolgica y la biodiversidad son interesantes altefnaiivas
en el candelero del debate ms actual.

Por otra parte, el sector almentario ha sido el primero que ha visto la

llegada de
pasado
innovaciones biotecnolgicas (algunas en los aos setenta) y, hasta un
de
reciente, las nuevas biotecnologas estaban ms introducidas en el mercado
estesectofqueenotros.E||oestaba|igado,dehecho,con|aexistenciade
biotecnologastradicionales,fermentacionesyaplicacionesenzimticasque
estabanyabienestab|ecidasenvariosSectoresde|osa|tmentosyde|as
bebidas. Los modernos procedimientos de transformacin
que utilizan estas

biotecnologiaseranoesarrollados,utilizadosyaceptadosporlosconsumidores
yporlareg|amentacnantesdelabio|ogamolecu|ary|arevo|ucin',gentica',.
Las nuevas posibilidades de la biotecnologa, derivadas
de progresos recentes

de la gentica estn, con seguridad, muy influencradas por las

profundas

transformacionesde|osmercadosa|imentarios,particularmenteenrelacincon
la proteccin de los consumidores, con la seguridad alimentaria con
y las
y el etiquetado de
exigencias reglamentaras relacionadas con la composicin
|osa|imentos.Entrelasnuevasbiotecno|ogasa|imentariasactua|menteene|
mercado se Pueden citar:

La utilizacin de enzlmas para la bioconversin del almidn en

productos

edulcorantes;losaromasyacentuadoresdelsabor;laelabOracindejugosde
frutas;|osaminocidosyotrasmolcu|asnutritivas;losa|imentosfermentados
con nuevas texturas, las enzimas de quesera y los
productos lcteos

deslactosados; las levaduras hbridas'

son ya explotadas con

En el sector vegetal, algunas nuevas biotecnologas
finescomerciales,pore.emplo:losmaterialesparaetdiagnsticoenlasplantas;
de tejidos; las tcnicas de
los insecticidas mcrobianos; |as tcnicas de cultivo
gentica' En el sector de las
micropropagacin; las tcncas de cartografa
uti|izacionesnoa|mentariasdelaproduccinagrco|a.variosproductosy
 59

procedimientos basados en las biotecnologias estn disponibles en el mercado:

la conversin de biomasa en energa por la fermenlacin anaerobra para
producir etanol o metano; la seleccin y ros mtodos de propagacin para
rboles y piantas ornamentales; las tcnicas de cuitivo de clulas vegetales; las
tecnologas enzimticas para la elaboracin y la extraccin de producios (a
partir def midn, de aceites vegetales, etctera) y la f abricacin de sustancas
af

tiles en agroqumica.

De forma prctica, la primera aproximacin ha tenido por objeto transferir un

solo gen, normalmente procedente de una bacteria o de una levadura. Entre los
prmeros xitos hay que mencionar la adquisicin de resistencia
a una molcula
-
-el glifosato que ntegra una gran variedad de herbicidas. Esta sustancia
acta inhibiendo un enzima esencial para el metabolismo de malas hierbas.
Desgraciadamente este proceso es poco serectivo, por ro que puede
resurtar
noclvo para las plantas cultivadas.

otra gran lucha de intereses se ha puesto en marcha arrededor de otro

herbicida de amprio espectro, ra fosfinotricina. Er empreo masivo de prantas
modificadas selectivamente para resstr a esta morcura, inofensiva
oara el
hombre y ros anmares y perfectamente biodegradable, podra convertir
esta
sustanca en el "arma dear" contra las malas hierbas y reducir
ros gastos de los
agricurtores que desemborsan en herbicidas serectivos cantidades
dos o tres
veces superiores a ros que dispensan para semias. posteriormente,
ra
sociedad Plant Genetic systems consigui transferir a todo un conjunto
de
ptantas - remolacha, patta, tabaco, tomate, alfaifa _
un gen procedente del
streptomyces higroscopicus que codifica para un enzma que
convierte la
fosfinotricina en un derivado desprovisto de toxicidad para pranta
ra transgnica.
se han rrevado a cbo dversos ensayos en Francia, ensayos autorzados por
ia
comisin de Ingeniera Biomorecurar, responsable de evaruar
ros perigros
potenciales asociados al empleo de plantas transgnicas.
 60

De rgual forma, se consgu incorporar ef gen formador de una toxina

bacteriana con intensa actrvidad frente a las larvas de insectos. Esta toxina de
nafwaleza proteica se acumula en las esporas de un bacilo comn e inofensivo,
Bacillus thuringiensis. Tres plantas (patata, tabaco y tomate) han incorporado el
gen de esta toxna natural y numerosos ensayos han sido llevados a cabo en
diversos pases, gozando del aval de agencias tan rigurosas como la Agencia
de Proteccin Medioambiental esladounidense {EPA) o la Comisin francesa
mencionada anteriormente, que son celosos guardianes de los valores
ecolgicos. F. Gros recoga en su libro que se esperaban los resuitados de los
experimentos llevados a cabo en Espaa a partir de 1980 de los que no
-
disponemos personalmente de informacin - o en Carolina del Norte.

Entre tanto, el duro combate contra los virus vegetales encontr una salida al
descubrirse que el gen responsable de la envoltura de los virus transferidos al
tomate o al tabaco transformaba estas plantas en insensibles a los virus del
mosaico (experiencias llevadas a cabo por Monsanto en colaboracin con
investigadores de la Universidad Washington de Saint Louis, Missouri). Los
ejemplos se multiplican en la tarea de incorporar a las plantas nuevos
caracteres que tratan de modificar las propedades de los productos:
consstenca, conservacin, gusto y valor nutritivo. La sociedad Calgene,
ubicada en California, ha conseguido producir tomates que mantienen tersura
constante, impidiendo el proceso de maduracin al incorporar un gen que nhbe
la formacin de pectinaza, enzima que se activa en el curso Cel envejecimiento
del fruto y que consiguientemente disuelve la cuberta externa de los tomates
aunque stos se conserven en fro.

Otro de los campos en los cuales se aplica la biotecnologa microbiana est

relacionada con la medicina gentica, ya que se ha demostrado que es posible
corregir la secuencia de un gen defectuoso causante de una enfermedad
utilizando la terapia gnica, la cual se basa en la ntroduccin de un virus
 61

modificado genticamente en el organismo y cuya funcin es la de detecar la

alteracin genca y volverla a su esado normal.

A pesar de todos los avances biotecnolgicos que utilizan microorganismos en

el mejoramiento de procesos, plantas, animales y en la obtencin de sustancias
tiles a la industria, exsten tambin mltiples riesgos, ya que de ser utilizada
esta tecnologa en forma inadecuada se podrla alterar el equlbrio de la
naturaleza y afectar gravemente la supervivencia del los seres vivos.
 62

I.1O RESUMEN DE LA UNIDAD 1.

Histricamente se consdera que la microbiologa comienza desde la aparicin

de mtodos que incluan la manipulacin de microorganismos por el hombre;
bajo este crterio, puede considerarse que sus inrcios se remontan a las pocas
de Babilonia y el Egpto Antiguo. Sin embargo, dado que anteriormente los
seres humanos no saban que existan organismos microscpicos y en
consecuencia ignoraban tambin que estaban utriizando seres vivos para
producir pan, cerveza y otros productos, se considera que la microbiologa
comenz slo un par de sglos atrs de nuestra poca. Datos histricos revelan
que la intuicin de que existan organismos vivos tan pequeos que eran
invisibles para los ojos del hombre datan desde el 200aC. Antes de esto ya
haba personas que crean algo parecido, pero con la gran diferencia de que no
se imaginaban que estuvieran vivos.

Con la invencin del microscopio por Leewenhoek (1632-17 23), la existencia

de los microorganismos dej de ser intuicin pura y se convrt en una
cerleza, sin embargo pocos fueron los que mostraron fascinacin en lo que los
microscopios revelaban. En realidad, el tema cobr inters para la comunidad
cientfica cuando Pasteur (1822-1895) rompi con la teora de la Generacin
espontnea mostrando cmo un medio puede permanecer estril an
permaneciendo comunicado con el exterior usando los frascos "cuello de
ganso", cuyas protuberancias impiden el paso a los microbios. Pasteur
demostr tambin que esos organismos eran los causantes de las
enfermedades y no los fermentos de los medos en putrefaccin, as como que
los microorganismos presentan tipos especficos de fermentacin como medio
anaerbico para obtener energa. Jhonn Tyndall complement las ideas de
Pasteur al observar que los microorganismos presentan diferencias
considerables en la capacidad para resistir altas temperaturas.
 63

Los problemas ms importantes a los que se enfrentaron los primeros

investigadores {ueron. el origen de los microorganismDs, la clasificacin y su
relacin con organismos superiores, causas de la fermentacin y cura de
enfermedades-

En 1838, Erenberg fue el primero en disear el primer criterio de clasificacin

de bacterias: dependiendo de la forma, las bacterias podan ser catalogadas
como bastones, espiroquetas (espiral) cocos (esfricos). Se considera que la
microbiologa moderna comenz con los trabajos de Joseph Lister {1827-
1 912); Lister fue el primero en curar heridas infectadas af notar que lo que

llamamos putrefaccin en los objetos no es sino lo mismo que lo que

reconocemos como infeccin en los seres vivos. En el mtodo antisptico de

Lister se usaba cido fnico como desnfectante al aplicarlo drectamente
sobre las heridas, y es el modelo seguido por el mtodo asptico propuesto
por Morlon en '1846 que se usa hoy en da; la tcnica es desnfectar primero
los utensilios que entrarn en contacto con la herida.

Los grandes avances en la construccin de microscopios desarrollados por

Ernest Abel, permitieron a Koch (1843-1910) realizar grandes aportaciones
como el aislamiento de cultivos puros de microorganismos reproduciendo
microbios en una placa de gelatina slda "mtodo de placa" (base del mtodo
actual), as como la caracterizacin del Mycobacterium tuberculosis,
Staphyloccocus ureus, el espirilo del clera, etc, por medio de lo que
conocemos como los Postulados de Koch (lo que le vali el premio Novel).
Koch acfara que para caraclerizar un microorganismo se requiere la presencia
del mismo en todos los casos de enfermedad, despus se debe extraer una
muestra para realizar un cultivo puro, y que al entrar en @ntacto el cultivo con
un organismo sano debe producir la misma enfermedad; finalmente, el
microorganismo se asla y debe comprobarse que es ldntico al original.
 64

Los estudios preliminares realizados en el campo de la microbiologa han

permitido establecer con certeza su objeto de estudio, el cual est dividido en
el objeto material y el objeto formal. El primero est relacionado con el tamao
de los seres que investiga (microorganismos), mientras que el segunclo se
refiere a todos los aspectos y enfoques desde los que se pueden estudar los
microorganismos.

Actualmente, a partir del conocimiento microbiolgico se han derivado otras

ciencias como la bacteriologa, que estudia las bacterias; la virologa, los virus;
la micologa, los hongos microscpicos; la ficologa, las algas microscpicas y
la protozoologa, los protozoarios. lgualmente se ha especializado en
diferentes enfoques dependiendo de su aplicacin: la microbiologa mdica
estudia los microorganismos patgenos y la
posible cura para las
enfermedades que producen; la inmunologa averigua las causas de la
aparicin de las enfermedades desde una perspectiva inmunolgica, la
microbiologa ecolgica estudia el nicho que le corresponde a los
microorganismos en el medio; la microbiologa agrcola las relaciones
existentes entre plantas y microorganismos; la microbiologa de alimentos
estudia los microorganismos como productores de alimentos y como agentes
de deterioro de alimentos, la microbiologa industrial que se encarga de
estudiar y manipular los microorganismos a gran escala para que produzcan
compuestos o realicen funciones tiles como la produccin y transformacin
de alimentos, frmacos, vacunas, disolventes orgnicos, la biotecnologa los
posibles beneficios que puede llevar para el hombre la explotacin de
microbios, entre otras.

De igual manera, la microbiologa guarda relacin con otras ciencias que le

sirven de apoyo para comprender an ms el mundo mcrobiano y sus
relaciones con otros organismos y el medio ambiente.
Por otra parte, en cuanto al estudio de los microorganismos en la prctica, se
han desanollado diferentes tcnicas que han permitido su aislamiento,
observacin y manipulacin. Los cultivos microbianos, por ejemplo, permiten
aislar al microorganismo en un medio nutrtivo que lo provee de los elementos
necesarios para su mantenimiento y reproduccin (humedad, pH,
disponibilidad de nutrientes, etc.). As mismo, los medios de cultivo pueden ser
selectivos, ya que permiten cultivar microorganismos especficos sin que se
@ntamine el medio con otras esoecies.

En relacin a la observacin de los microorganismos, el equipo ms utilizado

es el microscopio ptico, que utiliza la luz visible para identificarlos y
caracterizarlos. Sin embargo, su poder de aumento no puede exceder las
2000 veces debido a que la longitud de onda de la luz es muy grande, por lo
que microorganismos ms diminutos no se veran. Otros microscopios utilizan
un rayo de electrones cuya longitud de onda en muy pequea y logran detallar
con mucha resolucin las estructuras de los microorgansmos.

Para facilitar la observacin de los microorganismos se requiere hacer

montajes microscpicos que pueden ser en fresco para observar sus
caractersticas en vivo o a travs de tinciones que permiten una mayor
resolucin. Entre estas ltimas, la ms utilizada es la tincn de Gram, la cual
se compone de una mezcla de sustancias colorantes que se fijan al
microorganismo (Bacterias) dependendo de la constitucn de su pared
celular. A partr de las observaciones microscpicas de microorganismos, se
pueden hacer conteos ya sea de colonas o de recuento de clulas con el fin
de determinar densidad ooblacional.
 66

AUTOEVALUACIN FINAL UNIDAD I

Luego de haber ledo los apartes de esta unidad, responda el siguiente

cuestionario de preguntas.

1. Uno de los debates ms significativos que impuls el desarrollo de la

microbiologa como ciencia fue el de la generacin espontnea de la vida,
planteada por Aristteles. Sin embargo, siglos despus surgieron muchos
contradictores que lograron refutar estia teora gracias a:

a. El descubrimiento de un principio vital en la naturaleza.

b. Los aportes de Lus Pasteur sobre la presencia de microorganismos en el
arre.
c. Los argumentos de los preformacionistas.
d. Los planteamientos de la doctrina de la arquegnesis.

2, El descubrimiento de la fermentacin contribuy a explicar con mayor

claridad el debate sobre:

a. La relacin que une ciertas transformaciones qumicas que se dan en las

infusiones y los microorganismos presentes en ellas.
b. La veracidad del origen de los organsmos a partir de materia inanimada y de
una fuerza vegetativa.
c. La evolucin de las especies planteada por Charles Darwin.
d. el efecto de los cultivos sobre el desarrollo de los mcroorgansmos.

3. Los avances de la microbiologa fueron posibles gracias, entre otras cosas, a

su relacin con otras ciencias. La clasificacin de los microorganismos, por
ejemplo, permiti estudiarlos con mucha facilidad segn sus caracterstcas. La
ciencia que facilta la clasificacin de las especies de microorgansmos se
conoce hoy en da como:

a. Protozoolog a.
b. Bacteriologa.
c. Taxonoma microbiana.
d. Gentica microbiana.

4. La tincin de Gram es una de las tcnicas mas utilizadas en la identificacin

de bacterias. Gracias a esta tcnica estos microorganismos se han clasficado
en Gram (+) y Gram (-), pudindose diferenciar debido a que:
 2.2 OBJETIVOS

OBJETIVO GENERAL.

Reconocer algunas caractersticas evolutivas, taxonmicas y estructurales

de los microorganismos a travs de anlisis tericos, esquemas, grficos
explicativos y experiencias prcticas, con el fin de establecer y comprender
sus relaciones, diferencias, funcionamento y comportamiento en la :

naturaleza.

OBJETIVOS ESPECFICOS.

- Determinar las caractersticas filogenticas y taxonmicas que permten la

clasificacin de los microorganismos.

- ldentificar las caractersticas morfolgicas y las estructuras que conforman

los microorganismos y sus funciones dentro del metabolismo.

- Reflexionar acerca del valor que tiene para el ser humano el conocimiento
sobre las caractersticas de los microorganismos.
 TU

2.3 AUTOEVALUACION INICIAL

Atrvete a opinar.
Conteste el siguiente cuestionario de preguntas atendiendo a sus
conocimientos previos y a sus experiencias cotidianas. Anote al final del
cuestionario sus fortalezas y debilidades al respecto y las actividades a las
que usted se compromete realizar para superar las posibles debilidades
encontradas.

1 . Cmo cree usted que se originaron los microorganismos en la

naturaleza?
2. Qu caractersticas se pueden tener en cuenta para clasificar
microorgansmos?
3. Cules son los tipos de microorganismos que existen en la naturaleza?
4. Qu diferencias exsten entre microorganismos procariotes y eucariotes?
5. Por qu los virus son considerados como microorgansmos no celulares?

Fortalezas y Debilidades cognoscitivas con respecto a los objetivos de la

unidad

Fortalezas:

Debilidades:

Acciones para superar debilidades:

 71

2.4 ACCIONES PARA CONSTRUIR EL CONOCIMIENTO

con el fin de facilitar la construccin del conocimiento en esta unidad se suoiere

realizar las siguientes acciones:

- Tenga en cuenta sus debilidades encontradas en la autoevaluacin inicial de

esta unidad y realice las acciones a las que usted se comprometi realizar
para superarlas y as alcanzar los objetivos propuestos.
:
- Lea cada uno de los apartes de la unidad en forma analtica y reflexiva,
haciendo nfasis en aquellos aspectos donde usted presenta mayores
debilidades. Apyese en el glosario o en un diccionario enciclopdico para
buscar el significado de los trminos que no conoce.

- Observe en el entomo fenmenos que tengan que ver con los temas
tratados y compare con la teora.

- Realice las actvidades gue se encuentran dentro de la unidad y socialcelas

en plenaria.

- Formlese preguntas sobre los temas tratiados y las observaciones

realzadas, respndalas y socialcelas en las sesiones presenciales para
mayor claridad.

- Realice la autoevaluacin final de la unidad y compare sus resultados con el

alcance de los objetivos propuestos.
 72

2.5 ORIGEN Y EVOLUCTN DE LOS MICROORGANISMOS

Alan Woods y Ted Granlo .

Para entender el origen de los microorganismos, es necesaro hacef un

recuento sobre el origen de la vida, partiendo del conocimiento de la
composicin de la atmsfera y el medio ambiente primtivos de la tierra. Dado el
escenario probable de que la tierra se formase a partr de una nube de polvo, su
composicin habra sido pflncpalmente hidrgeno y helio, que son los ms
abundantes entre los elementos pesados. Hoy en da la tierra contene grancles
cantidades de elementos ms pesados, como el oxgeno y el hierro. De hecho
contiene aproximadamente un 800/6 de nitrgeno y un 20o/o de oxgeno. La
razn para esto es que el hidrgeno y el helio, ms ligeros escaparon de la
atmsfera de la tierra en la medida en que la fuerza gravitatoria no era lo
suficientemente fuerte como para atraerlos. Los planetas ms grandes con una
gravitacin mayor, como Jpiter y satumo, han mantenido una atmsfera densa
de hidrgeno y helio. En contraste, la luna, que es mucho ms pequea' ha
perdido su atmsfera.

Los gases volcnicos que formaban la atmsfera primitiva deban de haber

contenido agua juntamente con metano y amonaco. suponemos que estos
y
fueron liberados del nterior de la tiena. Esto sirvi para saturar la atmsfera
provocar lluvia. con el enframiento de la superficie terrestre empezaron a
formarse mafes y lagos. se cree que estos mares constituyeron la "sopa"
prebitica (anterior a la vida) en la que los elementos qumicos presentes, bajo
el impacto de los rayos ultravioletas del sol, se sintetizaron para producir
compuestos orgnicos de nitrgenos complejos, como los aminocidos. Este
efecto de la radiacin ultravioleta fue posible por la ausencia de ozono en la
atmsfera. Esta es la base de la hiptesis Oparin-Haldane.

,o
wooDs, A y GRANT, T. 2004. Razn y revolucin. cmo surgi la vida? Fundacn Fedefico Engels
Documento electrnco.
Cmo surgieron las primeras clulas vivas de la sopa primordial de
aminocidos y otras molculas simples hace unos cuatro mil millones de aos?
La teora estndar, expresada en 1953 por el premio Nbel de qumica Harold
Urey y su estudiante Stanley Miller, era que la vida surgi espontneamente en
una atmsfera primitiva de metano, amonaco y otras sustancias qumicas,
actvada por relmpagos. Ms reacciones qumicas hubieran permitido el
desarrollo de los simples compuestos vivientes en molculas ms complejas,
llegando a producir una molculas de doble hlice de ADN, o la de ARN de un
slo ramal que tienen, las dos, la capacidad de reproducirse.

La posibilidad de que esto suceda por accidente es realmente remota, como les
gusta remarcar a los creaconstas. Si el origen de la vida fuese un
acontecimiento realmente casual los creacionistas tendran un fuerte argumento
a favor. Realmente sera un mlagro! Las estructuras bsrcas de la vida y de la
actividad gentica en general dependen de molculas increblemente complejas
y sofisticadas, ADN y ARN. Para hacer una sola molculas de protena habra
que combinar varios cientos de los aminocidos que las forman en un orden
concreto. Esto es un atarea formidable, incluso en un laboratorio con el equipo
ms avanzado. Las posibilidades de que esto ocurra por accidente en una
pequea charca tibia son astronmicamente remotas.

Esta cuestin ha sido abordada recientemente desde el punto de vista de la

complejidad, uno de los productos de la teora del caos. Stuart Kauffman, en su
trabajo sobre gentica y complejidad plantea la posibilidad del surgmiento de
un tpo de vida como resultado de la emergencia espontnea del orden en el
caos, a travs del funcionamiento natural de las leyes de la fsica y la qumica.
Si la sopa primordial era suficientemente rica en aminocidos no sera
necesario esperar reacciones casuales. Se podra haber formado un entramado
coherente y aulo reforzado de reacciones a partir de los compuestos en la sopa.
Mediante la accin de catalizadores, diferentes molculas podan interaccionar
y fusionarse entre ellas para formar lo que Kauffman denomjna un ,,complejo
 74

autocataltco". De esta manera el orden emergente a partir de un sistema de

caos molecular se manifestara en forma de un sistema que crece.

Esto no es todava la vida tal y como la conocemos hoy en da. No tendra ADN,
ni cdigo gentico ni membrana celular. Y sin embargo s tendra algunas de las
propiedades de la vida. Por ejemplo podra crecer. Tendra una especie de
metabolismo, absorbendo de forma contnua "alimento" molecular en forma de
aminocidos y otros compuestos simples que ira agregando a s mismo.
Tendra inclusive un sistema primitivo de reproduccin, extendindose para
cubrir un rea ms amplia. Esta idea, que representa un salto cualitavo, o una
"transicin de fase" en el lenguaje de la complejidad, signficaria que la vida no
habra surgido como un acontecimiento casual, sino como resultado de una
tendencia hacia la organizacin inherente a la naturaleza.

Los primeros organismos animales eran lulas cpaces de absorber la energa

almacenada en las clulas vegetales. El cambio en la atmsfera, la
desaparicin de la radiacin ultravioleta, y la presencia de las formas de vida ya
exstentes descarta la creacin de nueva vida actualmente, a no ser que se
consiga por medios artificiales en un laboratorio. Ante la ausencia de rivales o
predadores en los ocanos, los primeros compuestos se habran expandido
muy rpidamente. Llegados a cierto punto se dara un cambo cualitativo con la
creacin de las primeras clulas cido nucleicas capaces de reproducirse a si
mismas: un organsmo viviente. De esta manera la matera orgnica surge de la
materia inorgnica. La vida misma es el producto de la materia inorgnica
organizada de determinada manera. Gradualmente y a lo largo de un periodo
de miffones de aos empezara a aparecer la mutacin dando lugar a nuevas
formas de vida.

As podemos llegar a una edad mnima para la vida en la tierra. Uno de los
principales obstculos para la evolucin de la vida tal y como la conocemos era
la ausencia de una pantalla de ozono en la atmsfera exterior en los tiempos
 75

arcacos. Esto permita la penetracin en las capas superficiales de los ocanos

de la radiacin universal, incluyendo los rayos ultravioletas que desactivaban
las molculas de ADN, inductora de la vida. Los primeros organismos primitvos
vivientes ! !
las clu/as procarotas eran uncelulares pero les faltaba un
ncleo y eran ncapaces de llevar a cabo la divisin celular. Sin embargo eran
relativamente resstentes a la radiacin ultravioleta, o, segn una teora,
dependan de ella. Estos organismos fueron la forma predominante de la vida
en la tiena durante un periodo de unos 2.400 millones de aos.

Las criaturas procariotas unicelulares se reproducan asexualmente a travs de

brotes y fisiones. Generalmente la reprodurcin asexual crea seres dntcos, a
no ser que se desarrolle una mutacn, lo cual es bastante poco frecuente. Esto
explica la lentitud del cambio evolutivo en este periodo. Sin embargo la
aparicin de clulas nucleadas (eucaiotas) dio lugar a la posibilidad de una
mayor complejidad. Parece ser que la evolucin de las eucariotas surgi de una
colonia de procariotas. Por ejemplo algunos procariotas modernos pueden
invadir y vivir dentro de lulas eucariotas. Algunos organelos (rganos) de
eucariotas tienen su propio ADN que podra ser un resto de una existencia
previa independiente. La vida tiene toda una serie de rasgos principales,
incluyendo el metabolsmo (la totalidad de cmbios qumicos que se dan en un
organismo) y la reproduccin. Si aceptamos la continuidad de la naturaleza los
organismos ms smples que existen hoy en da tienen que haber evolucionado
a partir de procesos cada vez ms simples. Adems, Ias bases materiales de la
vida son los elementos ms comunes del Universo: hidrgeno, carbono,
oxgeno y nitrgeno.

Una vez que ha aparecido la vida esta por si misma consttuye una barrera que
impide el resurgimiento de vida en el futuro. El oxgeno molecular, un
subproducto de la vida, surge del proceso de fotosntesis (en el que la luz se
transforma en energa). "La vida que tenemos en la tierra hoy en da de hecho,
se divide en dos grandes categoras reconocidas desde hace tiempo por la
 t6

especie humana, los animales que respiran oxgeno y las plantas fotosintticas
o que crecen por la luz", plantea Bernal. "Los animales pueden vivir en la
oscuridad pero necesitan aire para respirar, ya sea aire libre u oxgeno disuelto
en agua. Las plantas no necesitan oxigeno de hecho lo producen a la luz del
da ! pero no pueden creer durante largo tiempo en la oscuridad. Por lo tanto,

cules de ellos aparecieron primero? O les precedi alguna forma de vida?

Esta alternativa parece ahora prcticamente cierta. Estudios detallados de las
historias de la vida, la anatoma celular intema y el metabolismo tanto de
plantas como animales demuestran que son dependientes divergentemente
especializados de algn zoo-fito. Este tiene que haber sido parecido a algn
tipo de bacteria de hoy en da que puede llevar al msmo tiempo funcones de
animales y plantas, y actuar tanto como agente oxidante y como fotosinttico".

Por otra parte, los virus se encuentran entre las protenas ms grandes
conocidas, y ya se han preparado bastantes de ellos en forma cristalina pura.
Incluso despus de repetidas cristalizaciones, un tratamiento al que obviamente
ninguna sustancia viva ha sido nunc crpaz de sobrevivir, los virus retoman sus
actividades y se multiplican cuando se les devuelve a condiciones favorables.
Aunque hasta ahora nadie ha conseguido cultivarlos en ausencia de matera
viva, est claro que los virus ayudan a llenar el eslabn que anteriormente se
crea que exista entre seres vivos y no vivos. Ya no se puede decir que existe
una distincin misteriosa y brusca entre lo vivo y Io no vivo, sino que ms bien
parece existir una transicin gradual en complejidad.

"Si imaginamos que las primeras sustancias auto?ropagantes eran algo

parecidas a los virus, no es difcil suponer que una agregacin de protenas del
tipo de los virus podran llevar al desarrollo de organismos mayores tipo
bacterias, independientes, creando su pfopa comida a partir de sustancias
simples, y utilizando la energa del sol.
 77

"Este nivel de organizacn puede compararse con las formas actuales de

bacfenas independienfes, algunas de las crales realizan la Jotosntesis sin
clorofila, utilizando diferentes pigmentos verdes o prpura en su lugar_ Otras
utilizan la energa derivada de la oxidacin de lminas smples de nitrgeno,
sulfuro o hieno. Estas por ejemplo, pueden oxidar amonaco en nitratos, o
sulfuros de hidrgeno en sulfatos, con la liberacin de energa que se utiliza
para formar carbohidratos"

El periodo relativamente breve entre la formacin del planeta y el enfriamiento

de su corteza superficial signific que el surgimiento de la vida tuvo lugar en un
espaco de tiempo sorprendentemente corto. Stephen Jay Gould explica que "la
vida, con toda su complejidad, probablemente surgi rpidamente en seguida
que pudo". Los micro fsiles de hace 3.500 millones de aos son, tal y como
era de suponer, clulas procarotas, es decir sin ncleo (metanogenes,
bacterias y algas verdea'r'[es). Se consideran las formas de vida ms simples
sobre la tierra, aunque incluso en ese momento haba diversidad- Lo que
significa que hace 3.500 o 3.800 miflones de aos emergi nuesiro ancestro
comn a la vez que otras formas que se extinguieron.

En ese momento haba muy poco, por no decir ninguno, oxgeno molecular en
la en la medida en que los organismos que la habitaban no
atmsfera,
necesitaban oxgeno, de hecho les hubiese matado. Crecan oxidando el
hidrgeno y reducendo el dixido de carbono a metano. Se ha sugerido que
este organismo tena que haber sido similar a las clulas eocitas gue habitan
los ambientes muy calientes de los respiraderos de los volcanes. Obiienen su
energa no del oxigeno sino convirtiendo sulfuro en sulfito de hidrgeno.
 79

2.6 TAXONOMA Y DIVERSIDAD MICROBIANA

Pia, Carmen E-11

La taxonoma de los mcroorganismos se refiere a las formas de clasificacin

con sus respectvos mtodos. La taxonoma se encarga de la clasificacin,
identificacin y nomenclatura de los organismos. As mismo, la clasificacin se
relaciona con la grupacin de los organismos en grupos o taxones en funcin
de semejanzas mutuas o del parentesco evolutivo -filogenia-, entre tanto, la
nomenclatura se ocupa de la asignacin de nombres a grupos taxonmicos de
acuerdo con normas establecidas. Por ltimo, la identificacin determina a que
taxn pertenece un determinado organismo.

La base en que se fundamenta la taxonom ia microbiana se origina en la

investigacin de las relaciones filogenticas resultantes de la evolucin, la cual
desemboc en las tres grandes categoras o dominios denomnados por Carl
Woese:

* Eubacteria o Bacteria comprende las cianobacterias, los micoplasmas y las

llamadas "bacterias verdaderas"

* Eucariota o Eukaria a este domino pertenecen los microorganismos de los

reinos Protisto: protozoos y algas y del reino Fungi: los hongos filamentosos y
los unicelulares como las levaduras y los organismos del reino Plantas y del
reino Animal.

Estos dominios agrupan a los microorganismos conocidos a excepcin de los

microorganismos acelulares como los virus, viroides y priones. La distancia
entre cada uno de los grupos incluidos en cada dominio indica el grado de
parentesco entre ellos. A contnuacn se muestra un rbol propuesto para
explicar las relaciones evoluvas entre los microorgansmos.

" PlA carmen E. 2007. ob.cit.

 79

Figura 3. Relacones logenticas enlre los microorgsosmos

2.6.1 Relaciones evolutivas entre organismos vivos.

Adaptado de : hftp ://es.geocities.com[oakinicu/apartadol e. htm

En la actualidad se pueden determinar relaciones filogenticas (evolutivas)

entre los microorganismos. Para establecer estas relaciones se utilizan una
serie de mtodos basados en comparaciones de la secuencia de cidos
nuclecos, particularmente en la secuencia del ARN ribosmico (ARNr), esto es,
el ARN estructural del ribosoma que constituye la estructura clave de la clula
implicada en la traduccin del ARN. De hecho, uno de los descubrimientos
recentes ms importantes en biologa es que los cambios en la secuencia
nucleotdica del ARN ribosmico (determinados en definitiva por mutaciones en
el ADN que codifica el ARN ribosmico) pueden ser usados como una medda
para estableeer relaciones evolutivas entre clulas. A partir de estudios sobre
 80

secuencias de ARN ribosmico se pueden definir tres linajes celulares

evolutivamente diferentes, dos de los cuales presentan estructura procaritica y

uno que es eucaritico. Los grupos o dominios se llaman Eubacteria, Archaea o
Arqueobactera y Eukarya o Eucarota.

Pese al hecho de que a nivel molecular tanto Eubacteria como Afqueobactera

son procariotas, |os dos grupos difieren evo|utivamente entre s tanto como de|
grupo Eucariota. Se piensa que los tres grupos se originaron muy pronto en la
hstoria de la vida sobre la Tiena por divergencias a partir de un organismo
ancestral comn, el "antepasado universal". Eubacteria y Arqueobacteria
representan ramas evolutivas que nunca evolucionaron ms all del nivel
microbiano.

Adems de comprender y valorar los orgenes filogenticos de los organismos

celularesresulta importante, ser capaz de identifcar y
clasificar los
oe
microorganismos. una identificacn rpida de un mcroorganismo causante
enfermedades en humanos o animales es esencial para establecer el
tratamiento adecuado del paciente. se han usado varios criterios
para

aracteriza microorganismos y, en la actualdad, se tienen en cuenta tnto

caractersticas celulares como filogenticas para la clasmcacin'

Trasunestudioprofundode|aestructurayfuncindeunmicroorganismo,
incluyendo su gentica, metabolismo, comportamiento y otras
propiedades
nicas en
distintivas, es posible reconocer un certo nmero de caractersticas
unmicroorganismodado'Unavezqueelorganismohasidodefinidoenfuncin
de esa serie de caractel"sticas propias, recibe un nombre'
 8l

Los microbilogos usan el sistema binomial de nomenclatura establecido

inicialmente por Linneo para designar animales y plantas. El sistema binomial
consta de dos nombres: el gnero y la especie. El gnero es un nombre que se
aplica a ciertos organismos relacionados; dentro del gnero, cada tipo de
organismo recibe un nombre de especie. Los nombres de gnero y especie se
usan siempre juntos para describir un tipo especfico de organismo, ya sea una
clula aislada o un grupo de clulas. La primera palabra corresponde al nombre
cientfico del gnero y se escribe la primera letra con mayscula y en cursiva,
mientras que la segunda palabra corresponde a la especie, la cual se escribe
en minsculas y en cursiva. Por ejempro, ra bacteria Escheichia cori, o
abreviadamente E col, tiene una designacin de gnero, Escheichia, y un
nombre de especie, col.

En microbiologa la unidad taxonmica bsica es la especie microbiana, cepa o

esfrrpe. A continuacin se presenta un ejemplo de crasificacin compreta
de un
Microorgan ismo: la bacieria Ner'ssen'a m e n i ng itis:

laxonmica de un microoeanismos

2.6.2 Microorganismos procariotes.

D@umento adaptado de CARRILLO, Leonorl2 . lpm

La clula procaritica, figura 4, tiene

solamente dos sistemas internos principales:
una molcula circular de ADN con cadena
helicoidal doble y un citoplasma no paed celular

diferenciado donde se halla inmerso ese ribosottlds

ADN, La longtud del anillo de ADN que membrana celula
Figura 4. estuctura de
una bacteria.
'' CARRILLO, Leonor. 2003. Miqobiologa agricola. Capituto 1.
 l

codifica toda la informacin gentica de la clula apenas es superior a un

milmetro. Elcitoplasma contlene gran nmero de ribosomas, grnulos

constrtuidos por ARN Y Protenas, que curnplen la funcin de enlazar los
amnocidos formando Proteinas. Los rtbosomas procaritcos son ms
pequeos que los eucariticos

La replicacin del ADN comienza cuando ambas cadenas se separan,

permitiendo la sntesis de una cadena complementafia a cada una de ellas
mediante la ADN polimerasa. La nueva hlice es un hbrido consstente de una
cadena original y una recin formada (replicacin conservativa). La duplicacin
def cromosoma de Escherichia coli en condiciones favorables tarda 20 minutos.
un gen, o unidad de informacin gentica, est representado por una secuencia
especfica del ADN y determna fa estructura de un polipptido. El conjunto de
genes se denomina genoma. La informacn contenda en la secuencia del ADN
es transferida al ARN mensajero (ARN-m) durante la transcripcin. Los
aminocidos son reunidos en una cadena polipeptdica segn la secuencla
determinada por el ARN-m en un proceso de tradurcin que implca la
participacin del ARN-I (ARN que transfiere los aminocidos), los rbosomas,
varias enzimas y ATP. Los microorgansmos procariticos poseen una cubierta
celular muy diferente de la de los eucariotas.

Las paredes celulares de muchos de los procariotas poseen un componente

qumico comn, el pptidoglucano (murena), que es el responsable de la forma
y consistencia de la pared. El pptidoglucano es un extenso polimero que se
halla ntegrado por b-subunidades alternas de N-acetilglucosamna (que es
tambin el constituyente de la quitina en los eucariotas) y el cido N-
acetilmurmico. Esta ltima molcula es similar a la N-acettlglucosamina, pero
tiene una unidad de cido lctico unida al tercer tomo de carbono de la
glucosa. El cido lctico sirve como punto de unin de una cadena lateral lneal
constituida por cuatro aminocidos D o L. Las molculas de pptidoglucano que
rodean la clula estn entrelazadas por puentes formados por los aminocidos.
Algunas bacterias fiiamentosas forman una envoftura tubular constituida por
heteropo{isacridos que se conoce como vaina. La flexibilidad metablica de
una bacteria es enorme. Debido al pequeo tamao, una bacteria esfrica tiene
espaco para no ms que cien mil molculas de protenas. Las enzimas no
estn corrientemente dentro de la clula, sino que su sntesis es inducida por la
presencia del substrato en el ambiente.

- Eubacterias. La cantidad de pptidoglucano de la pared de las clulas

bacterianas vara enormemente, desde el 90o/o en la pared de algunas bacterias
Gram-positivas hasta menos del 10% en las bacterias Gram-negativas. El
trmino Gram-postivo hace referencia a la capacidad de ciertas bacterias de
retener ei colorante violeta cristal en presencia de yodo cuando se agrega
alcohol, al hacer la coloracin de Giam sobre un portaobjetos con las bacterias
fijadas. Las bacterias negativas no retienen a este colorante. La penicilina y
otros antbticos b-lactmicos que interfieren con la biosntesis de la pared
celular llevan a la produccin de protoplastos carentes de pared bajo
condciones osmtcas apropiadas. El trmino esferoplasto se usa para los
casos en que persisten restos de pared.

La pared celular de ias bacterias Gram-postivas contiene pequeas cantidades

de protenas y polisacridos, a menudo tambin cidos teicoicos (polmeros de
ribitol-fosfato o gliceroljosfato unidos mediante enlaces fosfodister) o de
cidos teicournicos. Estos cidos estn unidos al pptido-glucano por los
fosfatos. En las proteobacterias (Gramnegativas) la capa interna de la pared
celular es pobre en pptidoglucano y la capa externa rica en lipoprotena y
lipopof isacridos,
los cuales constituyen ms del BO% del peso seco de la
pared. El espacio entre la membrana extema y la capa de pptidoglucano,
llamado periplsmico, contiene un gran nmero de protenas enzimticas La
capa de pptido-glucano est rodeada por una membrana externa compuesta
de lpido A y fosfolpidos con protenas en tnel {porinas) que la atraviesan El
 84

lpido A consiste de un disacrido de giucosamina cuyos grupos hidroxilo estn

esterificados mn cidos grasos de 12, 14 616 calbonos.

Entfe tanto. Ios micoplasmas son bacterias carentes de pared celular y parecen
protoplastos, pero son ms resistentes a la iisis osmtica debdo a la naturaleza
de su membrana ctoplasm lica, la que contiene esteroles en un grupo y
carotenoides u otros compuestos en los dems.

La membrana citoplasmtica bacteriana coniiene alrededor del 70-90% de los

lipidos celulares mientras que la membrana consttuye solamente 8-15% del
peso celular seco. La membrana, con un grosor de 5 nanmetros, consiste de
una doble capa lpdica con los extremos hidrofbcos de los fosfolpidos en el
interior y las cabezas hidrof licas expuestas sobre ambas superficies. Tambin
tiene incorporadas protenas que la atraviesan o estn inmersas parcialmente
en ella. Otras protenas unidas a la membrana son conocdas como protenas
perifrcas. Las substancias hidrofbcas difunden fcilmente pero no los ones.
Las protenas de la membrana ntervienen en la entrada y salida de substancias
de la clula, y son especficas para un grupo de molculas estrechamente
relaconadas,

La membrana citoplasmtica se extiende y repliega hacia el interior del

citoplasma formando los sitios de la generacin de energa respiratoria
(mesosomas) y fotosinttica (tlacoides y cromatforos) en las bacterias que
posean tales actividades metablicas. Otras bacterias (por ejemplo Nitrobacter,
Nitrosomonas, Nrlrosococcus) tienen paquetes de lminas paralelas, algunas de
las cuales estn conectadas a la membrana citoplasmtica.

Muchas bacterias estn dotadas de flagelos que les permiten moverse,

insertaCos en la superficie celular. Si los flagelos se encuentran concentrados
en un extremo de la clula se denominan polares; si estn distibuidos por toda
la superficie celular, reciben el nombre de pertricos.
 85

Los flagelos posibiiitan ia qumiotaxis, que es el movimento hacia la fuente de

nutrentes o el alejamiento de un entorno qumicamente hostit. La protena del
flagelo, flagelina, est unida a un gancho asociado a un cuerpo basal que causa
el movimiento gratorio del flagelo. La base del flagelo est anclada en la
membrana citoplasmiica, asociada en las Gram-negatvas al pptido glucano y
a la membrana externa para estabilizar la estructura flagelar. Las bacterias sn
flagelos carecen de movimlento excepto aqullas que se deslizan sobre el
substrato. La superficie bacteriana Gram-negativa tambin suele tener otras
estructuras protecas filamentosas las fimbrias o Pili lque participan en la
adhesin a diversas superficies, por ej. Las mumsas animales, y los pelos de
conjugacin o Pili F

A veces las bacterias acumulan cpas de polsacridos sobre la superficie

exterior {ej. Xanthomonas), pero algunas tienen una cpsula polipeptdica (ej
Bacil/us)- La cpsula no es esencial para la vida y no siempre est presente.
Para observarla se suspende al microorganismos en una solucin de nigrosina
o rojo Congo y como la cpsula no es teida se ve como un halo claro alrededor
de la clula. En muchos casos el material capsular puede ser separado en
forma de fimo, por agitacin u homogenizacin. Por ejemplo, Leuconostoc
mesenterodes convierte rpdamente a una solucin de azcar de caa en una
jalea de dextrano (1,6-aglucano), Por otra parte Acetobacter aceti var. Xylinum
secreta celulosa formado una cuberta coricea que rodea a las clulas y da
cohesin a la colonia. Numerosas eubacterlas y tambin arqueobacterias,
poseen una envoltura exterior pfoteca o capa s que suelen perder en las
condiciones ptimas del laboratorio. Esia capa favorece la adhesin al substrato
para permitir la accin de las exoenzimas y a ia viiuiencia de las bacterias
patgenas

Un pequeo grupo de eubacterias que se encuentran en el suelo {Bacillus,

Ciostridium, Sporosarcina, etc. ) poseen endosporos. Son paquetes de ADN y
otras molculas que pueden permanecer en estado latente por muchos aos' y
 ato

resultan aiiarnente resistentes ai calor (inciuso ai agua hirviendo), productos

quimiol.xicos y otros agentes que ocasionan la muerte a las clulas. Ya en el
ambiente apropiado, el endosporo puede dar origen a una nueva bacteria. Si se
calienta una suspensin de suelo a 80-100"C dufante 1 0 minutos, slo
sobrevlven los endosporos bacteranos. stos contienen cdo dipicolnico, una
sustancia no hallada en la fofma somtica, en la proporcin de 10-15% del peso
seco de{ esporo. Son varias las cubiertas que rodean al citootasma del
endosporo: membrana citoplasmtica, pared celular, crtex (pptidoglucanos),
envoltura interna, envoltura externa (polipptidos) y, en ocasiones, exosporio.

Los plsmidos son pequeos anillos (hay algunos lineales) de ADN

extracromosomal que se multiplican independientemente en las ciulas oue los
alojan y pueden portar genes que confieren ciertas ventajas a las mismas, por
ejemplo resistencia a los antibiticos. Las bacterias hospedadoras a su vez.
deJan que el ADN plasmdico se repfique en eilas hasta cierto ounto.
asegurando as la presencia continuada del plsmido en las clulas hijas. Los
tumores de las plantas producidos por la infeccin con Agrobacteium
tumefacens se deben al plsmido Ti que es el agente infercioso real. El ADN
plasmdico penetra en la clula vegetal y parte del mismo se incorpora al
genoma de la planta. Este proceso se llama transformacin oncognica, La
parte integrada del plsmido lleva la informacin para la produccin de opinas
que son substancias utilizadas solamente por la bacteria. otra especie,
Agrobactenum rhizogenes desencadena el crecimiento anormal de las races
mediante el plsmido Ri.

La conjugacin es una forma de transferencia de genes y para que se produzca

debe haber contacto entre las clulas bacterianas a travs de los pili F o pelos
de conjugacin que retienen juntas a las clulas dadora y receptora. Los
sistemas de conjugacin en bacterias Gram-negativas produce la transferencia
de una parte del ADN del cromosoma o de un plsmido de la clula dadora a la
receDtora.
 87

Las bacterias forman colonias caractersticas sobre la suoerfice del substrato,

que tienden a adoptar una forma circular creciendo por adicin de clulas a su
permetro. Al extenderse la colonia sobre el agar se observa que en el
crecimiento participan unos elementos en anillos y otros en sectores. A todos
los sectores los va formando, por propagacin centrfuga, la progenie de un
antepasado comn. Algunos sectores se diferencian del resto porque las
clulas difieren en su ADN de las de los sectores contiguos debido a
mutaciones espontneas. Las bacterias de un anillo comparten algunas
propiedades entre s pero no estn emparentadas, pues tienen parentesco
directo con las de la zona precedente y la siguiente. La figura 5 presenta
algunas colonias de bacterias de distinto aspecto.

ri t "f" ")( Yl g)
mlcrgaocos lacilos rttrrlos
diFlocotos

*t
coc06 estreptococos sareins espirrlos

Las bacterias
multiplican
't
Figura 5. Formas de @lonias bacierianes'

generalmente
por fisin o;;,,";
se
.*;
phio.,.lo crdra,od

**
'ffi m m
, de la
Despus del crecimiento
tuta, aparece er septo
*o_* -liloo.r,'
Clulas se separan o permanecen
r ,* imlffil pffinffin
; &l
pattidn dd
Parickin Preto
pletiio
i rE ricd.i&l

ip49!l
lpdddr

caractersticas:
unidas con formas caractersticas:
-
ffiil: /-l,li\'r<in
I d\1$ion celular
.elulr
@D ;(audel9iKlcn
;.ouoeoeiKr(ln
pafes dg baCtefiaS, Ca^' '

paquetes cbicos t ""*rt" ffiffi c

ffi*,"o.
planos inegulares entre las j:ff;.,S;yo"
bacterias esfricas (cocos), o pares
ffiffit
y cadenas en las cilndricas (bacilos). La multiplicacin por brotacin es rata en
los procariotas pero se observa, por ejemplo, en la bacteria del agua estancada
Hyphomicrcbium. Figura 6.
 88

La segregacin del ADN es el proceso que distribuye igualitariamente el

material gentico en las clulas hijas. Es producida en las bacterias debido a un
mecanismo parecido al mittico. La replicacin de los plsmidos en la clula,
sobre el replisoma, entraa la formacin de un complejo de separacin o
particin donde se adhiere el plsmido cual regin centromrica. Una vez
formadas las copias, stas se alejan activamente unidas a las protenas de
particin hasta que la clula se divide. La divisin del cromosoma parece ocurrir
de igual manera. La figura 6 presenta un esquema de la divisin de una
bacteria.

- de procariotas en su bioqumica y en la
Arqueobactenbs. Este grupo
estructura de los ribosomas, membrana y pared, difieren tanto de los
procarotas como de los eucariotas. Se los denomina arqueobacterias pues
algunas poseen un metabolsmo particularmente adecuado a las condiciones
que se supone prevalecieron en los primeros tiempos de la vida sobre la tierra.
Comprende tres clases muy diferentes: las meangenas, las halfilas extremas
y las termoacidflas.

Las arqueobacterias no enen pptidoglucano en la pared. La membrana est

formada por lpidos no habituales, compuestos por un grupo glicerol ligado a
dos cadenas de alquil-isoprenoides por un enlace tipo ter (-O-). Algunas de
estas bacterias tenen histonas y nucleosoma de tipo eucaritico.

Las metangenas (Methanobacterium, etc. ) viven solamente en ambientes

libres de oxgeno y liberan meano mediante la reduccin del CO2. Su
apariencia extema es la de las dems bacteras pero su pared celular vara.
Algunas metanobacteras contienen pseudomurena donde el cido
acetilmurmico est reemplazado por el cido Nacetilalosaminurnico pero en
otras predominan las protenas o los heteropolisacridos en la pared celular.
Viven en estrecha asociacin con otras bacterias, como ios clostridios, que
metabolizan matera orgnica en descomposcn y desprenden hidrgeno
como producto de desecho. Se encuentran en agua estancada, en las plantas
de tratamiento de aguas residuales, en la panza del ganado, en el intestino de
los animales, en el fondo del ocano y en los manantiales de aguas termales.

Las halfilas extremas son bacterias que, para sobrevvr, requieren elevadas
concentraciones de sal. Algunas de ellas crecen fcilmente en salmuera
saturada- Pueden conferir color rojo a los estanques de evaporacin donde se
obtiene la sal y alteran al pescrdo salado. Mantienen fuertes gradentes en la
concentracin de ciertos iones a travs de la membrana celular y utilizan esos
gradientes para transportar diversas substancas hacia adentro o hacia fuera de
la clula. Poseen un mecanismo fotosnttico sencllo que se basa en un
pigmento ligado a la membrana: la rodopsina bacteriana. La pared de
Halobacterium est formada por protenas pero la de Haloaccus por
heteropolisacridos.

Entre las termoacidfilas se encuentra Sulfolobus que se halla en los

manantiales de aguas termales sulfurosas. Crecen a ms de 80'C y a Ph
inferior a 2. Otro gnero es Termoplasma, un micoplasma que slo posee
membrana celular y crece a ms de 55"C. El medio interior de la clula tiene un
Ph prximo a la neutralidad; ello exige mantener un considerabie gradiente de
Ph a travs de la membrana celular. El gradiente es empleado para bombear
molculas hacia dentro o fuera de la clula.

- Los actinomicetos constituyen un importante grupo de

Actinomicetos.
organismos procariticos habitantes del suelo y del material vegetal
compostado. El gnero princpal del grupo es Sfrepfomyces cuyas especies
suelen excretar antibticos y el olor a ltena mojada se debe a compuestos
voltiles fabricados por los mismos. Cuando se los cultiva en medo slido, no
slo forman un fino micelio ramificado, sino que tambin producen una hifa
area que se diferencia en cadenas de mnidiosporos- Cada conidiosporo
puede, a su vez, generar una colona micelial. Otro gnero de inters es
 on

Nocardia cuyas colonas carecen de micelio areo o es escaso, con unos pocos
conidiosporos en los extremos de las cortas ramas hifales o sin ellos, y
finalmente las hifas se fragmentan totalmente en elementos bacilares. Figura 7.

micelio micelio aretr

Ar:lfuopitnrs

RjJolor'rcctrs Durtyltsporungiunt

Fgura 7. Algunos gneros de ac{inomicetos.

Los Thermoactinomyces, a diferencia de los otros gneros de actinomicetos,

forman endosporos similares a los de Bacillus y Clostidium, en el extremo de
pequeas ramificaciones.

Las Nocardiag como la bacteria Mycobacterium. no se tie fcilmente por el

coforante de Gram ni por otros, para colorearla se recurre al mtodo de Ziehl
Neelsen donde el colorante (fucsina fenicada) se aplica en caliente y con el fin
de diferenciarla se decolora a los otros organismos con un cido mineral diluido.
Esto se debe a que el pptidoglucano est unido a los arabino-galactanos
esterificados con cidos miclicos de naturaleza cerosa.

- Canobacterias. Son organismos procariticos, unicelulares o filamentosos

(por reunin de lulas individuales adheridas por sus extremos) que contienen,
adems de la clorofila, un pigmento azulado llamado ficocianina. Estn
presentes en suelos, y aguas dulces o saladas. A veces colonizan ambientes
extremadamente inhspitos. Algunos convierten el nitrgeno atmosfrico en
 91

compuestos que los vegetales aprovechan y fertilizan los campos y de manera

muy especial los arrozales. Ciertas especies producen metabolitos secundarios
txicos (por ej. Un fosfato orgnico letal) que son liberados de las lulas en el
tracto digestivo de los animales al beber agua con verdn. Figura 8.

GIcercawa

Figura 8. Formas de cianobaclerias.

Agunas son unicelulares adheridas por un limo o dentro de una cpsula, ej'
Gloeocapsa. otras tambin unicelulares generan multiples beocitos en su
interior, d. Dermocatpa. Las que forman cadenas de lulas (tricomas) que
pueden deslizarse, suelen tener lulas especiales donde ocune la ftjacin del
nitrgeno molecular (heterocistos) y lulas de reposo (acinetos), ej. Nosfoc, o
carecer de ellas, ei. osciltatoria. unas pocas tienen una vaina alrededor del
tricoma. Los gneros Anabaena, Aphanzomenon, Mictocystis y Nodularia
contienen especies txicas. En cambio el gnero spirulina es comestible y
apreciado por el alto tenor de protenas, del orden del 5000 del peso seco,
con un aminograma similar al de la harina de soja. Las cianobacterias tambin
pueden convivir en simbiosis con las plantas, debido a su capacidad de fijar el
ntrgeno molecular, por q. Anabaena en las cavidades dorsales de las hojas
del helecho acutico Azolla, y Nosfoc en los ndulos caulinares del arbusto
tropical Gunnera.

- Mixobacteias. Las mixobacterias son organismos sociales cuyas clulas son

flexibles y no tienen una pared celular rgida, generalmente estn embebidas en
un limo espeso. Al desplazarse segregan un material mucoso extracelular que
 J

se convierte en grandes avenidas por donde avanzan miles de clulas. El

movmento es muy coordnado. Cuando la poblacin emigra sobre el agar' se

desolaza como una unidad indivisa. Incluso las especies que entran en letargo
como esporos unicelulares, exhiben hbitos sociales durante buena parte de su
ciclo vital. Muchas de ellas nunca se pfesentan aisladas, por el contrario, entran
en una etapa de letargo en forma de cisto pluricelular que luego germina y
libera una nueva poblacin de millares de mixosporos. Figura 9.

Las mixobacterias son organismos del

suelo y los cuerpos fructferos SC _- #"#.,

encuentran sobre material vegetal
descomposicin o estircol. Algunas, como
forman cuerpos fructferos
en

*H {,*;*#
d *r.*'""\

#L
My><ococcus,
como gotitas con menos de 1 mm de
l8 *TP
dimetro. Otras, como Sporocytophaga
.&R/
forman adems de los bacilos delgados'
unas lulas ovales como esporos
?[.,*n*'fi-8'
\/
llamadas microcistos. Pero Cytophaga no
\ \46'./ Alv.rrr&lr .u|rt rrr

Etr 9. Ciloioli(o t t^i.obdlrir.

forma ni microcistos ni cuerpos fructferos.

En el conjunto de la poblacin de mixobacterias se dejan sentir ondas pulstiles

rtmicas. Las oleadas de mixobacterias que se acercan al centro o se alejan
hacia el borde de la colonia en crecimiento, forman agregados en puntos
especficos para construir los cistos o, en algunos gneros como
Chondtomyces,comp|ejoscuerposfructferos.Laproduccindeestas
estructuras responde a cambios fsicos y nutricionales en el ambiente. Las
clulas perciben estos cambios y transforman esta percepcin en una serie de
hechos que implican agregacin, construccin del cuerpo fructfero pluricelular
y

la conversin de las clulas alargadas en mixosporos redondos, resistentes y

metablicamente en reposo. Durante estos procesos monitorean la densidad
celular. controlan el cronometrado de una serie de acontecimientos evolutVos'
 emprenden comportamentos tcticos, sufren autlsis evolutiva y se orientan er,
el espacio tridimensional. Las mixobacterias depredadoras se alimentan
segregando enzimas en los huecos de las colonias para evitar su dilucin en el
medio acuoso, que disuelven la cubierta celular externa de otros
mcroorgansmos. cuando stos estallan, las mixobacterias absorben el
contenido.

2'6.3 Microorganismos eucariticos. Los cromosomas eucariticos estn

asociados a una clase de protenas bsicas llamadas histonas, y experimentan
movmientos en el momento de la divisin celular. como en los procariotas, la
informacin contenida en el ADN es transportada por los ARN mensajeros del
ncleo hacia el citoplasma, donde esta informacin es descodificada y da lugar
a la sntesis de las protenas en los ribosomas.

una ciula eucaritica contiene orgnulos definidos por membranas que

cumplen funciones esenciaies, tales como las mitocondrias
{produccin la
energa), el retculo endoplsmico (sntesis de protenas en los ribosomas
adherdos), el aparato de Golgi o dictiosoma (sntesis y almacenamiento de
glicoprotenas), y en algas los cloroplastos
{fotosntesis).

Las protenas son dirigidas hacia la ruta secretora por una secuencia terminal
(seal pptida) que es reconocida por una partcula reconocedora de la seal.
Despus de la unin der complejo ribosoma-partcura a ra membrana del
retculo endoplsmico, er trasrado contina y er polipptido naciente ilega al
lumen del retculo endoplsmico donde una endoproteasa especfca quita
la
seal y' tiene lugar er ensambraje (plegado y formacin de puentes disurfuro) y
la N-glicosilacin de la protena. Despus las protenas dejan el retculo
endoplsmico en vescuras y son transportadas ar aparato de Gorgi donde
ocurren ulteriores modificaciones. De all salen las protenas para sus diversos
destinos, otra vez en vescuras, hacia la membrana citoprasmtica (secrecin)
o
los lisosomas (digestin de molculas).
 94

La mayor parte de la energia obtenida por la oxidacin de glucosa y cidos

grasos es transformada en energa qumica utilizable por la clula mediante la
sntesis del trifosfato de adenosina (ATP) en la cadena respiratoria. Estas
reacrones ocurren en las mtocondrias. Tienen dos membranas, la tnterna est
invaginada en crestas. Los pliegues contienen los componentes de la cadena
de transporte de electrones y la ATP sintasa. Tambin un pequeo nmero de
protenas es sintetizado en los rbosomas de la matriz mitocondrial, la que
contiene tambin su propo ADN pues estos orgnulos estn dotados de la
capacidad de multiplicarse.

Todas las estructuras se desplazan por el citoplasma a lo largo de pequeos

tubos huecos, los microtbulos, que son polmeros de tubulina nucleados por el
centrosoma. La organizacin de los microtbulos en flagelos y clios, permite a
algunos eucariotas uncelulares nadar en el medio en que se encuentra.

- Mohos. Los mohos se caracterizan por tener ncieo verdadero, carecer de

pigmentos fotosintticos, poseer micelio con pared celular constituida pof
glucanos, quitosano y quitina (polmeros de glucosa, glucosamina y N-acetil-
glucosamna, respectivamente). En pocas ocasiones la pared est constituida
enteramente de quitina. La pared celular del micelio de los hongos semeja un
extenso sistema tubular por el que avanza protegido el citoplasma para su
dispersin y bsqueda de nutrientes. Figura 10.

Los elementos somticos tubulares que constituyen el micelio reciben el

nombre de hifas. Las hifas pueden estar separadas en seclones, generalmente
multinucleadas, por medio de septos perforados o bien carecer de ellos. Los
hongos pueden reproducirse tanto sexual como asexualmente. Los hongos
asexuales (anamorfos) generan varias clases de esporas asexuales por mitosis
del ncleo celular (mitosporas).
 95

La morfologa de las estructuras que contienen las esporas es muy variable y

consttuye una de las bases de la clasificacin de los hongos. El micelio
somtico no es suficientemente discriminador para utilizarlo en la clasificacin.
El color de muchos mohos que viven en la materia orgnica en descomposicin
se debe al color de sus esporas asexuales. stas presentan varias tonalidades
de color blanco, amarillo, azul, verde, rojo, pardo o negro.

Fgura 10. Estrucluta de un moho.

Los mohos generan varias clases de esporas asexuales, mono o pluricelulares.

Las esporas se desanollan en los esporforos, estructuras especializadas que
se efienden en el aire a partir del micelio vegetativo, y las esporas se
acumulan en el extremo superior de los mismos. Si las esporas estn
encerradas en un esporangio (en forma de bolsa) se las llama
esporangiosporas. Los conidios son esporas externas o sea no estn
encerradas. Al madurar, estas esporas son esparcidas por el viento.

Muchos mohos pueden reproducirse tambin a travs de esporas sexuales,

generadas por meiosis, o divisin reductora, de un ncleo diploide
(meiosporas). En la meiosis, el nmero de cromosomas se divide por la mitad.
Las esporas sexuales contienen slo un cromosoma de cada par homlogo. La
condicin diploide se restablece cuando dos estructuras haploides se unen,
completando el ciclo vital. Los mohos a los que no se les conoce ciclo sexual,
se consideran hongos imperfectos.
 YO

Los mohos con estructuras reproductoras sexuales (teleomorfos) corresponden

a tres grupos: ascomicetos, basidiomicetos y zigomicetos. Los ascomicetos
producen sus esporas en ascos, que generalmente se forman dentro de un
complejo cuerpo fructfero, el ascoma. De forma similar, los basidiomicetos
desarrollan sus esporas sexuales externamente, en los basidios que se hallan
en un complejo cuerpo fructfero: el basidioma. Pero este grupo tambin
comprende a los carbones y las royas, organismos de inters agronmico por
ser parsitos vegetales. Los zigomicetos producen zigosporas a veces visibles
a ojo desnudo. En condiciones naturales, los mohos se reproducen en la
mayora de los casos asexualmente, las estructuras reproductoras sexuales
slo aparecen ocasionalmente en circunstancias favorables.

- Levaduras. La mayoria de las

numerosas especies de levaduras se
han clasificado desde el punto de vista xffiiu*aciri*
de la reproduccin, que puede ser en escsron

sexual o asexual. En la reproduccin

vegetativa, generalmente, una clula
madre da lugar a diversas lulas hijas
por la formacin repetida de yemas en la lOlar
Fgura 11. Reproduccn de una
superficie celular; en unas pocas ,
levadura

Ievaduras la divisin asexual se hace por escisin celular luego de la

duplicacin del ncleo. Figura i i.

Tres grupos de hongos acogen a ras revaduras: ros ascomicetos, ros

basidiomicetos y ros hongos imperfectos. Er primer grupo incruye ras revaduras
cuyas estructuras reproductoras sexuales son los ascos sencillos que
contienen
ascospofas. una clula diploide de levadura sufre meiosis y forma de
cuatro a
ocho ascosporas, encenadas en er asco. una ascospora es una crura haploide
que al germinar genera una progenie de cruras haproides por mitosis
(reproduccn asexuar). Las luras de diferente polaridad sexuar se combinan
 97

para fofmar un nuevo organsmo diploide. Entre las ievaduras que pertenecen a
los ascomrcetos se encuentia Saccharomyces Deevisiae empleada para la
fabricacin del pan y la fermentacin alcohlica. Los basidiomicetos agrupn un
nmero reducido de levaduras. Los hongos imperfectos incluyen levaduras que
se reproduc--n slo de forma asexual, e1. Candida tropicales.

- lmportanca econmica y algunos efecfos periudiciales de las levaduras' Las

levaduras tienen importancia en Ia obtencin de productos y bebidas
fermentabfes debido a su capacidad de realizar fermentacin alcohlica es el
caso de Saccharomyces cerevrsrbe. Tienen un papel importante en la
fabricacin de pan y productos de pastelera. Tambin se utilizan en la
produccin de antibiticos, son fuente de protena y de vitaminas del complejo
B. Mediante tcnicas de ADN recomblnante se utilizan como hospederos en la
industria mdico farmautica, para la produccin de vacunas, por eemplo'
Anti-hepatitis A, Anti-hepatitis B, inmunopotenciadores, la Hirudina indicada en
la Trombocitopenia y para la prevencin de trombosis, protenas de la sangre,
hormonas como la insulina y el glucagn e interferones.

sin embargo un pequeo porcentaje de levaduras aproximadamente un 25

o/o

pueden alterar los alimentos causando su deterioro. La actividad contamlnante

de las levaduras sobre alimentos puede inhibirse por dos vas, mediante la
aolicacin de mtodos f isicos con actividad bactericida, entre los que se

destacan la esterilizacin por calor a presin y por filtracin y por la aplicacin

de condiciones ambientales desfavorables con efecto bacteriosttico, tales
como disminucin de la H.R, bajos valores de Ph y temperatura'

. P|otozoos. Son organismos microscpicos mviles, inco|oros, unice|ulares,

eucariticos, poseen ncleo, membrana nuclear, membrana celular'

mitocondrias,aparatodeGolgi,mtcrotbulosyotrosorganelos'carecende
y
pared celular, algunos tienen vacuolas digestivas y excretoras' flagelos cilios'
pertenecen al reino Protisto. Se encuentran en su mayora en medios
 98

acuticos, en el suelo hmedo aunque algunos son endoparsitos y otros

ectoparsitos. Figura 12.

Los protozoarios parsitos se pueden encontrar en sangre de humanos y

animales y en lquidos tisulares de plantas. Algunos necesitan varios
hospedadores para completar su ciclo de vida, presentando en cada uno de
ellos una morfologa, metabolismo y tipo de reproduccin diferente.

fozoto y quiste. En la
fase de trofozoito los protozoarios realizan sus funciones de nutricin y
crecimiento y es la forma que produce la enfermedad, mientras que la fase de
quiste es la forma infectante que fuera del organismo puede resistir condiciones
extremas como la desecacin, bajas temperaturas, y en medio hmedo logra
sobrevivir hasta aos.

ameba cilido
teshicea

Figura 12. Diversas lormag de Protozoos y su estudura.

- Clasificacin de los profozoos. Segn la forma como se desplazan los

protozoos se clasifican en:

Sacordinos.
Ciliados.
Flagelados.
Esporozoos.
- Sacordrnos. Se desplazan por medio de pseudpodos, que son
prolongaciones de la clula que les sirven adems para capturar el alimento,
englobarlo (proceso de fagocitosis) y formar una vacuola digestiva, donde el
alimento es digerido por accin de enzimas. La mayora son parsitos del
hombre y habitan en el tracto gastro-intestinal y cavidad oral.

Son representantes de este filo: la Entamoeba histolytica o ameba que produce

la disentera, por la ingestin de aguas o alimentos contaminados con heces.
Esta enfermedad es propia de los pases tropicales y produce unas diarres
muy intensas. La E. histotytica puede causar enfermedad invasora intestnal y
extraintestinal. Los foraminferos componentes del plancton (con un caparazn
por cuyos orificios salen los pseudpodos)

- citiados: su forma es ovalada, se desplazan y capturan el alimento por medio

de cilios, filamentos cortos, vibrtiles y numefosos que roclean su cuefpo.
Poseen una hendidura bucal o boca en el citoplasma para la ingestin de
alimentos al final se presenta el citostoma y la citofarnge que se continan, en
el interior del citoplasma, con las vesculas alimenticias. El citoplasma realiza
movimento de ciclosis. Poseen vacuolas contrctiles que ayudan a expulsar el
agua y residuos de la digestin a travs del poro anal o citopigio'

se caracterizan por ser los nicos organismos con dos ncleos un microncleo
para la reproduccin y un maconcleo para la alimentacin. se reproducen de
dos formas: asexual por biparticin y sexual por conjugacin'

Ejemplos de este filo son: el Paramecio, la vofticela, el Balantidium coli este

ltimo es un parsito del intestino del hombre cuyo reservorio natural es el
cerdo. La infeccin humana, es causada por la ingestin de quistes eliminados
con las heces del cerdo, ocasionando inflamacin del intestino o enterits.

- Ftagelados: Se desplazan por medio de flagelos, filamentos largos y poco

numerosos Muchos son de vida libre y otros son parsitos' como el

 100

Tripanososma cruzi que causa la enfermedad de chagas. La forma principal de

transmisin es a travs de vectores (insectos hematfagos- chinches-) que al
picar a un animal o persona infectada se contagian, estos hematfagos
infectados despus de que pican e ingieren la sangre defecan sobre la persona;
las heces del insecto entran en la persona a travs de la picadura, de las
mucosas o de las cortadas en la piel. El Tripanosoma brucei produce la
L brucer es transportado por
enfermedad del sueo o tripanomiasis africana. El
la salva de la mosca ts-ts, que contagia al pcaf a otros seres vivos
arcomonas vaginalis es un parsito de forma ovoide, mide de 10 a 20
micrmetros, posee cuatro flagelos en la parte anterior que junto con su
membrana ondulante le permiten su movimiento. Causa la enfermedad de
transmisin sexual conocda como tricomoniass.

La Leishmania parsito intracelular que causa la enfermedad llamada Kala-azat

o fiebre negra. Requiere para completar su ciclo de vida dos huspedes, un
vertebrado y un artrpodo gue acta como vector. La Giardia lamblb es un
parsito intestinal que ocasiona la giardasis una enfermedad dianeica
infecciosa. La infeccin se produce al consumir alimentos o agua con qustes
los cuales son activados por el cido gstrico, se liberan los trofozoitos que se
se fijan a la mucrsa del duodeno o del yeyuno proximal donde se reproducen.
La formacin de los quistes ocurre a nivel del colon de donde pasan a las
heces.

- Esporozoos. Carecen de rganos de locomocin todos son parsitos

obligados de clulas del hombre y de los animales- Presentan una estructura
apical adaptada a la penetracin intracelular- Se reproducen en dos fases una
asexual y otra sexual, dependiendo de la fase pueden estar como: trofozoito,
gameto o cigoto. Un representante de este grupo es el Plasmodium que
produce la malaria, tambin llamada paludismo. Hay cuatro especies de
Plasmodium que provocn la malaria: P.vivax, P, ovale, P. malanae y P.
falciparum, de las cuales slo la ltima es realmente una amenaza para la vida.
 101

El vector que transmite la malaria es la hembra del mosquito Anofeles.

En los glbulos rojos de la sangre de la persona los P/asmodium se diferencian
en gametos que son ingeridos por el mosquito- En el tubo digestivo del
mosquito los gametos se reproducen sexualmente dando como resultado los
esporozoitos que luego son inoculados por picadura a las personas sanas. Los
esporozoitos pasan al torrente sanguneo hasta que llegan a las clulas
hepticas. All se reproducen asexualmente, luego las clulas hepticas se
fompen, el plasmodio alcanza de nuevo al tonente sanguneo para parasitar los
hemates. El Toxoplasma gondi), causante de la toxoplasmosis es otro parsito
perteneciente a los esporozoos y est presente en animales con pelo y plumas.

- tmportancia Biotgica de los protozoos. Los protozoos tienen importancia en

las cadenas alimentarias como componentes del plancton. Son considerados
como bioindicadores en el proceso de tratamiento de aguas residuales. Se
utlizan para detectar vetas petrolferas. Debido a su fcil y rpida reproduccin
en el laboratorio son utilizados en investigaciones sobre nutricin y crecimiento,
por ejemplo, El protozoo ciliado letrah ymena thermophila fue el primer
microorganismo eucariota en el que se desarroll la induccin de cultivos
sincrnicos, facilitando el anlisis de las diferentes fases del ciclo celular
eucariota. Este protozoo tambin particip en el descubrimiento de los
lsosomas y peroxisomas.

un equipo de investigadores argentnos logr convertir el colesterol presente en

la leche y el huevo en pro vrtamina D., a travs de la aplicacin directa del
protozoo ciliado denom inado Tetrahymena' Tambin se ha provocado

parasiismo artficial con protozoos de vida libre con el fin de llegar a conocer los
cambios que ocurren en la adaptacin a la vda parastica.

Algunos tienen la habilidad de concentrar sustancias radioactvas disueltas en el

agua. Estas sustanclas pueden pasar a travs de la cadena alimenticia hasta el
hombre, producindole un incremento en las mutaciones, cncer y otras

enfermedades.
 102

La mayor importancia de los protozoos para el hombre lo consiituyen las

numerosas enfermedades que provocan los protozoos parsitos como se
mencion anteriormente.

- Algas micrcscpicas. Eucariotas, auttrofas, pertenecientes al reno Protsta.

Presentan pared celular, clorofila, algunas poseen otros pigmentos como
carotenos, ficoxantina o {icobilinas que pueden enmascarar [a clorofila. La
mayorla son unicelulares como las algas doradas o diatomeas, otras como las
algas verdes y las rojas son multiclulares. Su tamao varfa desde algas
microscpicas de 1 micrmetro hasta las que se observan a simple vista como
las verdes que crecen en las charcas o las que se encuentran en los acuarios o
en el mar. Su reproduccin puede ser asexual por fisin bnara longitudinal y
sexual por produccin de esporas cuando las condiciones del medio son
extremas. Figura 13.

Pueden vivir solitarias o en colonias.

Ejemplo de algas verdes tenemo.s: la
Chlorella, la Dunaliella, el Vo/vox, y la
Spiogyn. Algunas algas unicelulares se
desplazan por medio de flagelos,
tambn apar@en flagelos en los
individuos que forman colonias. Las
algas son frecuentes en hbitats
acutlcos constituyndose en un Frgurs 13. Eatruchra de una mirroalg

eslabn importante (fitoplancton), de las cadenas alimentarias de los

organismos actticos se pueden encontrar tambin en selos, muc*tos
gneros de algas tienen representantes que viven en smbiosis con hongos y
forman los lfquenes.

- Clasifrcacin de las algas. Se conocen en la naturaleza las siguientes clases:

 103

- Euglenofitas: unicelulares se encuentran en aguas dulces ricas en nutrientes.

Carecen de pared celular. Tienen cloroplastos encerrados por una membrana
triple. Poseen dos flagelos que les dan movilidad. Se reproducen sexualmente.
Su presencia es un indicador de contenido mercurio en el agua.

- Diatomeas: la pared celular esta cubierta por un exoesqueleto de slice y

pectina lo que las hace muy resistentes. Cuando se acumulan forman la tiena
de diatomeas gue, adems de su inters paleontolgico, se usa como abrasivo,
en la fabricacin de pasta de dientes, como insecticida y como agente filtrante.

- Dinoflagelados. La mayora marinas, de clor rojo, pueden producir toxinas

que en grandes cantidades forman las mareas rojas, que causan intoxicacin
en humanos y mortandad de peces.

- Clorofeas: Son llamadas tambin algas verdes con abundante clorofila no

asociada a otros pgmentos, las unicelulares generalmente son de agua dulce y
se reproducen asexualmente por biparticin, mientras que las pluricelulares
tienen fase de reproduccin asexual y sexual. La mayora de agua dulce,
aunque las hay marinas y de humedad, y a veces asociadas con los hongos en
los lquenes (simbiontes). Pueden presentar vida libre o formar colonas.
Tambin aparecen los s,ncifios, que son estructuras polinucleadas, formadas
por fusin de varios individuos que comparten el citoplasma celular sin que
exista membrana de separacin entre ellos.

- lmpodancia biolgica de las algas. Representan un importante eslabn en la

cadena alimentaria, formando parte del plancton (productores primarios). Son

productoras de oxgeno. tles en la elaboracin de frmacos. Las algas rojas
son importantes en la formacin de anecifes de coral pues viven en simbioss
con los corales brindndoles carbonato de calcio y suministrndoles el color rojo
brillante. Algunos grupos de algas rojas se utilizan en la produccin de Agar que
es un medio de cultivo microbiolgico. Las algas marinas son una importante
 104

fuente alimenticia. se ulizan como indicadores biolgicos, en el control de

acidificacir5n de las aguas. En medicina y farmacia en la produccin de
antioxidantes, antibiticos, cidos grasos polinsaturados.

2,6.4 irlicroorgansmo3 acelulass. No son considerados seres vivos debido

aquenocump|enconlaspropiedadesqueestosposeen.Entree||osse
encuentran los virus, viroides y priones. En la figura 14 se muestran diferentes
pos de virus.

Fgura 14. Formas comunes de los virus

- Losvirus. son considerados como microorganismos acelulares oon un

programa genco que llevan de una lula a otra el mensaie para su
reproduccin. consisten de un cido nucleico y una cubiefta protenica conocida
comocpside,avecestambintienenunaenvolturaomembrana.Haymuchas
que
clases de virus y se los puede agrupar por el tipo de material gentico
portan.Algunosenenunamo|culadeARNmonocatenario(cadenas"mas")
que puede ser ledo
compuesto por varios miles de subunidades nucleotdicas,
 105

directamente por el aparato de traduccin del hospedador, el ribosoma, como si

fuera un ARN mensajero propio. Un ejemplo de este tipo de virus es el del
mosaico del tabaco. Otros virus, por ej. El de la rabia, cifran sus mensajes en
cadenas "menos" de ARN, las que en el interior de la clula deben transcribirse
en cadenas complementarias de po "ms" para que empiece la replicacin.

Los retrovirus constituyen una tercera

clase de virus de ARN monocatenario.
Cuando un retrovirus infecta a una
clula, la enzima retrotranscrptasa
transforma la cadena de ARN vrico en
ADN monocatenario y sle es copiado
por la ADN-polimerasa celular a ADN
bicatenario que puede integrarse al
Fgura 15. Estructura intema de un relrovirus
genoma del hospedador. Figura 15.

Los reovirus, patgenos de plantas y animales, enen ARN bicatenario.

Ejemplos de virus con ADN monocatenario son los inovirus y con ADN
bicatenario los miovirus, ambos patgenos de bacterias.

Un fago (virus que nfecta a bacterias)

Cpui!.
posee una sola molcula de cido
nucleico que se inyecta en la lula
."*l Paoterc
DNA
Collar
bacteriana. Figura 16. Una vez dentro de
la bacteria los extremos de su ADN Ncleo
Placa basal
bicatenario lineal se urien y los genes o
Cola
la col
dispuestos sobre ese anillo dirigen la
sntesis de las protenas vricas,
valindose de la maquinaria bacteriana Figura '16. Estructura de un fago
de sfntesis. Parte de las protenas son
enzimas implicadas en la replicacin del cido nucleico del fago, tarea que
 106

realizan en conjuncin con enzimas de la propia bacieria. El virus se reproduce,

es decir fabrica nuevas molqrlas de ADN y protenas de la cpsula. Los
nuevos ADN se introducen en las cpsulas recin formadas y el hospedador
acaba lisndose. Por otra parte, el fago puede nsertarse en el ADN de la
bacteria hospedadora. En el esado integrado, el ADN del fago es replicado
junto con el ADN bacteriano y no se expresa la intormacin contenida en el
primero. Este fago no infeccioso, que puede pasar de clula en clula por
herencia, se denomina profago La escisin del fago en la clula lisognica le
devuelve la virulencia.

Otra forma de agrupar los virus es por la forma. Se llama nucleopside al cido
nucleico (o virin) con la cpside, y puede estar desnuda o recubierta por una
membrana. Una cpside consta de capsmeros, y en [a mayora de los casos
es simtric. Se observan dos tipos de estructuras simtricas: helicoidal e
icosahdrica.

- Viroides. Los viroides son ms sencillos que los virus, pues son slo
filamentos muy cortos de ARN. Producen enfermedades especficas de las
Dlantas.

- Priones. Se llama as a las protenas que actan cmo agentes infecciosos en

algunas enfermedades del sistema nervioso de ovejas, vacas y otros animales,
pero es diso.ible si se pueden considerar microorganismos.

- Mecanismo de repficacin de los virus. El mecanismo de replicacin de los

virus depende la constitucin del virus {tipo de cido nucleico, presenca o
ausencia de envoltura) y del po de ctula husped. El proceso se inicia con la
adhesin del virus a la clula. EI virus penetra dentro de la clula e inyecta en
ella su cido nucleie (material gentico). Si es ADN el cido nucleico del virus,
este se inserta en el ADN de la lula hospedera. El ADN de la clula
hospedera fabrica las protenas vricas y el cido nucleico viral se replica en la
 ,l n7

clula que parsta uilizando las enzimas, el material y los mecanismos de la

clula que lo hospeda. Si el cido nucleico del virus es ARN, el virus debe
primero cambiar su ARN en ADN, empleando la maquinaria de la clula
hospedera para poder nsertarse. Luego la clula hospedera fabrica las
protenas vricas y el cido nucleico viraf se replica en la clula que parsita
utilizando las enzimas, el material y los mecanismos de la clula que hospeda.
Cuando hay suficiente cantidad de cido nucleico viral este se ensambla con la
protena vrica y abandona la clula. Los virus emplean las enzimas de la
clula hospedera para fabricar nuevas cpsidas y otras protenas virales. Los
nuevos genes virales y las protenas se ensamblan en nuevas partculas virales.
Los nuevos virus son liberados de la clula hospedera.

- Ciclo vital de /os virus o mecanismo de replicacin ltico. El cclo vital de los
virus consta de las siguientes cuatro fases: entrada en la clula, eclipse,
multiplicacin y liberacin del virus. Veremos primero el ciclo vital de un virus,
explicado de la forma ms general posible, para pasar a contnuacin a estudiar
las diversas modalidades que pueden presentarse en cada una de las fases del
ciclo.

a. Entrada. La entrada en la clula corista a su vez de dos etapas: la adsorcin

o fijacin del virus en la superficie celular, y la penetracin a travs de la
membrana. En la fase de fijacin el virus se une a la membrana de la clula
hospedadora de forma estable. Hay una alta especficdad en la frjacin de un
virus a la membrana de su clula hospedadora, porque se ha de producir la
unin entre determinadas protenas de la cpsida vrica y determinadas
glicoprotenas de la membrana plasmtica de la clula que lo hospeda. A lo
largo de un proceso evolutivo, cada virus ha do adquriendo sitios de unin
especficos para anclarse en la membrana de un determinado tipo celular.

La penetracin o inyeccin a travs de la membrana sigue diversas

modalidades. Como resultado, bien el virus completo, bien solamente su cido
 108

nucleico, logra invadir el ctoplasma celular. Por regla general, se necesita el

concurso de muchos virus para que alguno de ellos logre penetrar en la clula.

b. Ectipse. La fase de eclipse corresponde a un tiempo, despus de la

penetracin, en que el virus parece desaparecer, pues no se advierte ningn
indicio de su presencia ni de su actividad. Lo que ocune en esta fase es que se
da un desensamblaje de las piezas del virus (s es que ha penetrado completo),
y su cido nucleico queda asimilado en las estructuras celulares aptas para los
procesos de replicacin y trascripcin.

Esta fase, variable de unos tipos de virus a otros. Durante esta fase se produce
la sntesis del ARN, necesario para generar las copas de protenas de la
cpsida. Tambin se produce la continua formacin de cidos nucleicos virales
y enzimas destructoras del ADN bacteriano. Termina con la sntesis de los
ARNm necesarios para que se sinteticen las protenas que actuarn en la
multiplicacin del virus.

c. Multiplicacin y ensamblaje. La multiplicacin del virus consiste tnto en la

replicacin de su cido nucleico, como en la sntesis de las protenas de la
cpsida. Los cidos nucleicos y las protenas recin sintetizadas se ensamblan
rpidamente, producindose nuevas partc,ulas vricas. En esta fase se produce
la unin de los capsmeros para formar la cpsida y el empaquetamiento del
cido nucleico viral dentro de ella.

d. Liberacin y Lr'srb. La liberacin del virus consste en la salida de las nuevas

lulas iniciando un
partculas vricas o viriones, que podrn infectar nuevas
nuevo ciclo. Los viriones salen de la clula, mediante la lisis o ruptura
enzimtica de la pared bacteriana que conlleva a la muerte celular. Los nuevos
virus se encuentran en situacin de infectar una nueva clula.

- Modalidades de penetracin en la clula. Los virus complejos producen una

ruptura en la membrana bacteriana en uno de los puntos de anclaje, gracias a
 109

la presencia de algunas molculas de enzimas hidroltcas entre las protenas

de la cpsida. A travs de la ruptura, el tubo central inyecta del ADN vrico,
quedando la cpsida vaca en el ederior de la bacteria. La presencia de
cpsidas en la superficie bac-teriana es un buen indicio de que la baderia ha
sufrido una infeccin vrica

Otros virus sin envoltura lipdica se introducen en la clula con cpsida y todo,
lo cual ouede realizarse de dos maneras:

a. Por penetracin directa'. despus de la fijacin, el virus abre una brecha en la

membrana y se introduce en el citoplasma.

b. Por endocitosis: la membrana forma una nvagnacin en tomo al vrus,

llegando a formar una vescula que penetra en la clula. Formada la vescula, el
virus abre una brecha en la membrana de la misma con ayuda de algunas
enzmas hidrolticas que l mismo transporta, penetrando as en el citoplasma.

Los virus con envoltura lipdica burlan la barrera de la membrana celular porque
su cubiela lipdica se funde con la membrana, ya que tienen la misma
naturaleza. Esta fusn de membranas puede realizarse en dos lugares
distintos: Fusin en la superfrcie celular, de manera que el virin penetra
directamente en el citoplasma; Fusin con un lisosoma, se forma una vescula
por endocitosis, a la que se une un lsosoma para dgerir la partcula
introducida; entonces, la cubierta lipdica del virus se funde con la membrana
del lisosoma y el vrn escpa hacia el citoplasma.

- Modalidades de fase de eclipse. Segn la duracin de la fase de eciipse, se

suelen distinguir dos modalidades de ciclo infeccioso de un rus:

a. Ciclo ordinario: el cido nucleico vrico procede inmediatamente a la

transcripcin de su mensaje gentico en los ARNm necesarios para su
 110

multiplicacin, y prosigue rpidamente el cclo vtal Este tipo de ciclo es el ms

extendido en ia natut-aleza.

b. ciclo lisagnico: fue descubierto por Lwoff en bacterifagos. El ADN virico se

ciena por sus extremos generando un ADN circular. Este ADN se inserta en el
ADN bacteriano en un lugar especfico en el que la secuencia de nucletidos
bacterianos es semejante a alguna regin del ADN vrico.

La bacteria prosigue sus funciones vitales sin que el virus realice ninguna
accin, y cuando el ADN bacteriano se duplica tambin lo hace el ADN vrico,
de manera que el genoma del virus pasa a las dos bacterias hijas' La
multiplicacin bacteriana puede seguir durante generaciones sin que el virus se
manifieste. Pero ante una alteracin de las condiciones ambientales, el ADN
vrico se separa del bacteriano y prosigue entonces las restantes fases de ciclo
infeccioso, produciendo la muerte de la bactera y nuevos ejemplares del virus.

Algunos virus que infectan clulas animales siguen tambin el ciclo lisognico,
como los virus de las venugas y algunos retrovirus que producen algunos tipos
de cncer. En el caso de los retrovirus, conviene recordar que el cido nucleico
es ARN monocatenario, pOr lO que la tfanscriptasa inversa ha de copiar el
genoma vrico en forma de ADN antes de que pueda insertarse en el ADN
celular.

- Modatidades de muttiplicacin del virus. La multiplicacin del virus consta de la

replicacin de su material gentico, de la transcripcn de su mensale en una
molcula de mARN y de la traduccin del mensaje para producir protenas
viricas, tanto las que formarn parte de la cpsida como las protenas
enzimticas necesarias para el ensamblaje de las piezas del virin
y para
algunas de las funciones anteriores. Los ribosomas y la mayor parte de las
enzimas que los crdos nucleicos viricos utilizan en estos procesos son los
de

la clula infectada.
 111

Los virus con ADN realizan la replicacin del material gentico de la misma
manera que las clulas; en el caso de los virus con ADN monocatenario.
previamente a la replicacin se sintetiza una cadena de ADN complementario
para formar ia dobie hlice.

Los virus con ARN reprican el materiar gentico sin necesidad de pasar por
ADN, actuando cada adena de ARN amo morde para ra sntesis de su
complementaria. Entre tanto, los retrovirus constituyen una excepcin a lo dicho
anteflormente, ya que su ARN sntetza un ADN bicatenario, gue ser el que
posteriormente realice la sntesis de nuevos ejemplares de RNA vrico. por
otra
parte, los virus con ADN y los retrovirus sintetizan el ARNn a partir de la
cadena molde deADN de forma smlar a cpmo lo hacen las clulas.

Los virus con ARN, excepto ros retrovirus, sintetizan en el ARNm copiando ra
cadena molde de ARN, sin necesdad de pasar por ADN.

Posteriormente a estos procesos, tiene lugar el ensamblaje de las piezas para

construir nuevos viriones.
 112

2.7 RESUMEN DE LA UNIDAD 2.

La mayora de las caractersticas usadas para determinar las relaciones

filogenticas entre los eucariotas, como por ejemplo, las estructuras anatmicas
intrincadas y los patrones complejos de reproduccin, desanollo y crecimiento,
simplemente no existen en los procariotas. Los centfcos dedicados al estudio
de los procariotas se vean obligados a basarse en las diferencias fenotpicas,
aunque algunas, tales como la forma de la clula y de las colonias,
probablemente hayan aparecido una y otra vez. por el conhario, otfos aspectos,
como la capacidad de fotosntetzar o de formar esporas, se han perdido
independientemente en varios linajes. Muchas de estas caractersticas no
reflejan entonces relaciones filogenticas.

Basados en el anlisis comparativo de secuencias del RNA ribosomal se han

establecido tres linajes celulares -o dominios- distintos: Archaea, Eukarya y
Bacteria. Slo uno de estos tinajes, Eukarya, es eucariota. A pesar de que
Archaea y Bacteria son estructuralmente procariotas, a nivel molecular son
evoh.tivamente tan diferentes uno de otro como cada uno lo es de Eukarya. se
piensa que los tres grupos derivan de un organismo ancestral comn: ,,el
ancestro universal". Los distintos linajes evolutivos que forman parte de los
dominios Bacteria y Arcfraea se determinaron tambin por anlisis del rRNA.
Actualmente, el dominio Archaea, coffespondiente a las arqueobaderias,
comprende los reinos crenarchaeota, Euryarchaeota y Korarchaeotia, aunque
este ltimo es an discrtido.

Las distancias evolutivas relativas entre los dominios y este ancestro universal
estn an en discusin. Dentro de los dominos Archaea y Bacteria se muestran
algunos representantes de los reinos, los linajes evolutivos que derivan de cada
domnio, de acuerdo con los estudios ms recientes. Las eubacterias que son
fotosintticas incluyen a las cianobacterias, las bacterias verdes y muchas de
las bacterias prpura. nmamente relacionadas con las bacl,erias prpura hay
 113

muchas formas no fotosintticas familiares que incluyen a E. coli y al gnero

Pseudomonas.

Las relaciones filogenticas entre los procariotas emergieron a partr de anlisis

genotpicos, pero la taxonoma bacteriana se basa tradconalmente en anlisis
fenotpicos. As, a diferencia de otros organismos, la filogenia y la taxonoma
bacterianas no son equivalentes.

En cuanto a la identificacin de las especies, en la taxonoma bacteriana certos

caracleres son de partcular importancia: la morfologa de las colonias, la
morfologa de las clulas, su tincin con distintos colorantes, la movilidad, la
presencia o ausencia de estructuras celulares, las condiciones de cultivo, los
parmetros de crecimiento, el metabolismo, la resistencia a antibiticos y el

porcentaje de ciertas bases nitrcgenadas.

A pesar de que los caracteres fenotpicos han provisto de poca informacin a la

filogenia bacteriana, continan siendo de gran utilidad y de uso rutinario en el
diagnstico y tratamento mdico y veterinario, en la agricultura y en Ia

microbiologa industrial. Por eso, para nuestros propsitos, el examen de las

caraclersticas de los organismos procariotias es la mejor introduCcin a su
diversidad.

Por otra parte, dentro de la clasificacin de los microorganismos se encuentras

los virus, que son entidades no celulares de muy pequeo tamao
al del ms pequeo procariota), por lo que debe de
(normalmente inferior
recunirse al microscopio electrnico para su visualizacin. Son agentes
infectivoS de naturaleza obligadamente parasitaria intracelular, gue necesitan su
incorporacin al protoplasma vivo para que su material gentico sea replicado
por medio de su asociacin ms o menos completa con las actividades
celulares normales, y que pueden transmitrse de una clula a otra. Cada tipo
de virus consta de una sola clase de cido nucleico (ADN o ARN, nunca
ambos), con capacidad para codificar varias protenas, algunas de las cuales
 aa^

pueden tener funciones enzimiicas, mientras que otras son estructurales,

disponindose stas en cada partcula virsica (virin) alrededor del material
gentico formando una estructura regular (cpsida); en algunos virus existe,
adems, una envuelta externa de tipo membranoso, derivada en parte de la
clula en la que se desanoll el virin (bicapa lipdica procedente de
membranas celulares) y en parte de origen virsico (protenas).

- Replicacin (Cicto ltico y lisognico de un bacteifago) Todos los

bacterifagos (virus que parasitan bacterias) tienen un cicto ltico, o infeccioso,
en el que el virus, incapaz de replicarse por s mismo, inyecta su materal
gentico dentro de una bacteria. utilizando las enzimas y los mecanismos de
sntesis de protenas del husped, el virus puede reproducirse y volverse a
encapsular, fabricando unas 100 nuevas copias antes de que la bac{eria se
destruya y estalle. Algunos bacterifagos, sin embargo, se comportan de
diferente forma cuando infectan a una bacteria. El material gentico que
inyectan se integra dentro del ADN del husped; se replica de manera pastva
con ste, y lo hereda la progenie bacteriana- En una de cada 100.000 de estas
clulas lisognicas, el ADN vral se activa de forma espontnea y @menza un
nuevo ciclo ltico.

Los virus, al carecer de las enzimas y precursores metablicos necesaros para

su propia replicacin, tienen que obtenerlos de la clula husped que infectan.
La replicacin vifal es un proceso que incluye varias sntesis separadas y el
ensamblaje posterior de todos los componentes, para dar origen a nuevas
partculas infecciosas. La replicacin se inicia cuando el virus entra en la clula:
las enzimas celulares eliminan la cubierta y el ADN o ARN viral se pone en
contaclo con los ribosomas, dirigiendo la sntesis de protenas. El cido nucleico
del virus se autoduplica y, una vez que se sntetzan las subunidades proteicas
que consttuyen la cpsida, los componentes se ensamblan dando lugar a
nuevos virus. una nica partcula viral puede originaf una progenie de miles.
Determinados virus se liberan destruyendo la clula infectada, y otfos, sn
 115

embargo, salen de la lula sin destruirla por un proceso de exocitosis que

aprovecha las propias membranas celulares. En algunos casos las infecciones
son "silenciosas", es decir, los virus se replican en el interior de la clula sin
causar dao evidente.

Los virus pueden clasificarse en tres grandes grupos, atendiendo al tipo de

organsmos que afectan: fitfagos, cuando atacn a las plantas, las que
determnan multtud de enfermedades: sofagos, cuando atacan a los animales,
distinguindose entre estos los dermatropos, que afectan a la piel (viruela,
herpes, sarampin), neurotropos, que afectan a las vas respiratorias (gripe,
neumonitis), viscerotropos, que atacan a diversas vsceras (hepatitis vricas,
etc.), etc. y los bacterifagos, cuando atacan a los cultivos bacteranos, esta
ltima categora reviste gran inters, ya que ha permitido llevar a cabo una serie
de expermentos que han mnducido a dilucidar algunas de las muchas
incgnitas en el campo de la gentica molecular.

Las bacterias por su parte, estn formadas por tres capas externas que
envuelven las estructuras intemas; la capa pegajosa protege la pared celular
rgida, que a su vez cubre la membrana celular semipermeable. El flagelo es un
medio de locomocin y los pelos que se extienden por fuera de la cpsula
ayudan a la bactera a sujetarse a las superficies. El material gentico est
contendo en el ADN que forma el nucleoide. Los ribosomas que flotan en el
ctoplasma intervienen en la sntesis de protenas.

Las clulas bacterianas se dividen por fisin; el material gentico se duplica y la

bacteria se alarga, se estrecha por la mitad y tiene lugar la divisin completa
formndose dos clulas has dnticasa la clula madre. As, al gual que
ocurre en los organismos superiores, una especie de bacteria origina al
reproducirse slo clulas de la misma especie. Algunas bacterias se diden
cada certo tiempo (entre 20 y 4O minutos). En condiciones favorables, si se
dividen una vez cada 30 minutos, transcunidas 15 horas. una sola clula habr
 116

dado lugar a unos mil millones de descendientes. Estas agrupaciones, llamadas

colonias, son observables a simple vista. En condiciones adversas' algunas
bacierias pueden formar esporas, que son formas en estado latente de la clula
que permiten a sta resistir las condiciones extremas de temperatura y
humedad.

Por otra parte, la clasificacin taxonmica ms utilizada divide a las bacterias en

cuatro grandes grupos segn las caractersticas de la pared celular. La divisin
a las bacterias con pared celular delgada del tipo Gram
Gracilicutes incluye
negatvas; las bacterias de la divisin Firmicutes tienen paredes celulares
gruesas del tipo Gram positivas; las de la Tenericutes carecen de pared celular
y las de la cuarta divisin Mendosbules tienen paredes celulares poco
comunes, formadas por materiales dstintos a los tpicos peptidoglucanos
bacterianos. Entre las Mendoscutes se encuentran las Arquebacterias, un
grupo de organsmos poco comunes, que incluyen a las bacterias
metanognicas, anaerobias estrictas, que producen metano a partir de dixido
de carbono e hidrgeno; las halobacterias, que necesitan para su crecimiento
concentraciones elevadas de sal, y las termoacidlas, que necesitan aztrtre y
son muy termfilas. Se ha discutido sobre la conveniencia de que las
Arquebacterias se incluyeran en un reino aparte, ya que estudios bioqumicos
recientes han mostrado que son tan diferentes de las otras bacteras como de
los organismos eucariotas (con ncleo diferenciado englobado en una
membrana). Estos cuatro grandes grupos de bacterias se subdividen adems
en unas 30 secciones numeradas, alguna de las cuales se dividen a su vez en
rdenes, familias y gneros.

En cuanto a los hongos, la mayora estn constituidos por finas fibras que
contenen protoplasma, llamadas hifas. stas a menudo estn divididas por
tabiques llamados septos. En cada hifa hay uno o dos ncleos y el protoplasma
se mueve a travs de un diminuto poro que ostenta ei centro de cada septo. No
obstante, hay un filo de hongos, que se asemejan a algas, cuyas hifas
 117

generalmente no tienen septos y los numerosos ncleos estn esparcidos por

todo el protoplasma. Las hifas crecen por alargamiento de las puntas y tambin
por ramificacin. La proliferacin de hifas, resultante de este crecimiento, se
llama micelio. Cuando el micelio se desanolla puede llegar a formar grandes
cuerpos fructferos, tales como las setas y los pedos o cuescos de lobo. Otros
tipos de enormes estructuras de hifas permten a algunos hongos sobrevivir en
condcones difciles o ampliar sus fuentes nutricionales. Las fibras, a modo de
cuerdas, del micelio de la armilaria color de mel (Armillaria mellea), facilitan la
propagacin de esta espece de un rbol a otro. Cierios hongos forman masas
de micelio resstentes, con forma ms o menos esfrica, llamadas esclerocios.
stos pueden ser pequeos cmo granos de arena, o grandes como melones.

Con respecto a su reproduccin, la mayora de los hongos se reproducen por

esporas, diminutas partculas de protoplasma rodeado de pared celular. El
champin silvestre puede formar doce mil millones de esporas en su cuerpo
fructfero; as mismo, el pedo o cuesco de lobo gigante puede producir varios
billones. Las esporas se forman de dos maneras. En el primer proceso, las
esporas se originan despus de la unin de dos o ms ncleos, lo que ocune
dentro de una o de varias clulas especalizadas. Estas esporas, que tienen
caractersticas diferentes, heredadas de las dstntas combnacones de genes
de sus progenitores, suelen germinar en el interior de las hifas. Los cuatro tipos
de esporas que se producen de esta manera (oosporas, zigosporas,
ascosporas y basidiosporas) definen los cuatro grupos principales de hongos.
Las oosporas se forman por la unn de una clula macho y otra hembra; las
zigosporas se forman al cmbinarse dos clulas sexuales similares entre s. Las
ascosporas, que suelen disponerse en grupos de ocho unidades, estn
contenidas en unas bolsas llamadas ascas. Las basidiosporas, por su parte, se
renen en conjuntos de cuatro unidades, dentro de unas estructuras con forma
de maza llamadas basidios.
 118

que
Por otra parte, los miclogos utlizan un sistema sencillo de clasificacin,
tiene la ventaja de ser cmodo de usar. segn este sistema, los cuatro filos
principales son: Oomicetes (Oomycota), Zgomicetes (Zygomycota)'
Ascomicetes (Ascomycota) y Basidiomicetes {Basidiomycota) y sus respectivos
gran
individuos forman oosporas, zigosporas, ascosporas y basidiosporas' Una
variedad de especies se colocan, de forma arbitraria, en un quinto filo:
Deuteromicetes (Deuteromycota)' tambn llamados hongos impefectos Se
procesos
incluyen en este grupo aquellos hongos en los que slo se conocen
de multiplicacin vegetativa. sin embargo, la mayora de esas especies estn
emparentadas con los ascmcetes.

Los protozoos se incluyen en el reino Protista, junto con otros organlsmos

protozoos
unicelulares cuyo ncleo celular est rodeado de una membrana Los
no tienen estructuras Internas especialzadas a modo de rganos o' si las
tenen,estnmuypocodiferenciadas.Entre|osprotozoossesue|enadmtlr
varios grupos: los flagelados del grupo de los Zoomastiginos' con mucnas
del
especies que vven como parsitos de plantas y de animales; los ameboides
grupo Sarcod,nos, que incluyen a los Foraminiferos y Radiolarios' y que son
componentesimportantesdelplancton;losClforos,quesonciliados'con
gue reo'terdan
diversos representantes que poseen estructuras especializadas
alabocayalanodelosorgansmossuperiores;losCnrdospondlos'parsitos
y
de invertebrados, de peces y de algunos reptiles y anfbos, los Esporozoos'
condVefsasespeqesparsitasdeanima|esyt.ambindesereshumanos.Se
organismos tan
conocn ms de veinte mil especies de protozoos, que incluyen
conocidos como los paramecios y las amebas'

ros y
Muchas especes viven en hbitats acuticos como ocanos' lagos'
protozoos se
charcas. Su tamao vara desde 2 hasta 70 micrmetros Los
algas y
alimentan de bacteras, produclos de desecfro de otros organismos,
otros Drotozoos.
 119

2.8 AUTOEVALUACIN FINAL UNIDAD 2

Resuelve las siguientes preguntas encenando en un crculo la respuesta

correcta.

. Segn Alexander Oparn, las primeras formas de vida (microorganismos) se

'l
pudieron haber originado a partir de:

a. La intervencin de un poder divino.

b. La presencia de un Principio vital en la naturaleza.
c. La evolucin de la materia inorgnica.
d. La generacin espontnea.

2. El mundo mcrobiano es muy variado y para poder estudiarros ha sido

necesario el apoyo de otras ciencias. La clasificacin de los microorganismos,
por ejemplo, se relaciona con la agrupacin de los organismos en -grupos o
taxones en funcin de semejanzas mutuas o del parentesco evolutivo. Este
ltimo aspecto es el campo de estudio de:

a. La filogenia.
b. La taxonoma.
c. La sistemtica.
d. La zoologa.

3. Los microorganismos celulares y no celulares tienen como estructura

gentica un cido nucleico que puede ser ADN o ARN, en algunos
*fno
las bacterias y protozoos se pueden en@ntrar ambos. Er hJcho de "..o.
que todos
los microorganismos, compartan una estructura gentica similar hace deducir
que stos:

a. Comparten un mismo ADN.

b. Tienen un antepasado comn.
c. Hacen parte de la misma especie.
d. Se reproducen en forma smlar.

4. Las bacterias presentan un sistema que les permite acercarse a una fuente
de nutrientes o alejarse de sustancias nocivas para su supervivencia, gracias
al
movimiento de los flagelos que poseen en su pared. Este fenmeno s cono"e
con el nombre de:

a. Desplazamiento.
b. Transporte activo.
c. Quimiotxis.
d. Migracin.
 120

5. Los plsmidos son pequeos anillos (hay algunos lineales) de ADN

extracromosomal que se multiptican independientemente en las clulas que los
alojan y pueden portar genes que confieren ciertas ventajas a las mismas, por
eiempl iesibtencia a los antibiticos. si una bacteria A resistente a la penicilina
marte el mismo hbtat con una bacteria B susceptible a este antibitico, es
posible que al cabo de un tiemPo:

a. La bacteria A se vuelva susceptible a la penicilina.

b. La bacteria B se vuelva resstente a la penicilina.
c. Ambas sean susceptibles al antibitico.
d. Sigan conservando su respuesta frente al efecto del antibitico.

6. Una persona que presentaba una infeccin bacteriana en la garganta tom

penicilina (antibitico de amplio espectro) 3 capsulas diarias por dos das, luego
de esto sinti una mejora y suspendi el tratamiento; poco tiempo despus la
infeccin y el dolor volvieron, por lo que la persona tom nuevamente penicilina'
sin embargo, no pudo obtener el resultado de la primera vez. Lo anterior se
debi a que:

a. El antibitico perdi su efectividad debido a que su aplicacion fue por un

tempo muy corto.
b. La dosis diaria empleada no fue suficente para eliminar un nmero
determinado de bacterias en la infeccin.
c. las bacterias sobrevivientes adquirieron resistenca debido a una mutacin en
un plsmido.
d. El antibitico empleado no era el ms adecuado.

7. Despus del crecimiento de la clula bacteriana, esta empieza a reproducrse

replicando su ADN y al final aparece un estrangulamento en su pared formando
dos clulas bacterianas hias con el mismo ADN. Este procso de reproduccin
se conoce como:

a. Fisin binaria.
b. Mitosis.
c. Meiosis.
d. Gemacin.

8. Las cianobacterias son organismos procariticos, unicelulares o filamentosos

que contienen, adems de la clorofila, un pigmento azulado llamado ficocianina'
La presencia de estos pigmentos hace pensar que estas bacterias:

a. Son hetertrofas.
b. Son auttrofas.
c. Se alimentan de sustancias orgnicas ya elaboradas.
d. Son patgenas para el ser humano.
 121

9. el cuadro siguente muestra las caractersticas de dos tipos de

microorganismos A y B.

Cras{erstcas elructutales Microorganismos

B
Presencia de ncleo
Presencia de plsmtdo
Presencia de cilios
Presencia de ffaqelos X X
Respiracin aerobica
Respiracn anaerobia
Alimenlacn auttrofa X X
Alimentacin heterirofa X
Reproduccrn sexua

Segn el cuadro anterior, se puede deducir que:

a. El microorganismos A es eucariota y el B procariota.

b. Ambos son Drocariotas.
c. Ambos son Eucariotas.
d. El microorgansmo A es procariota y el B eucariota.

10. En el mundo microbiano existen seres celuiares y no celulares, los primeros

incluyen bacterias, hongos, protozoos y los segundos virus. La razn por el cul
los virus son considerados organismos no celulares se debe principalmente a
que:

a. No tenen ncleo definido.

b. Requieren de una clula para reproducirse.
c. No poseen cidos nucleicos en su interior.
d. Son muy infecciosos.

Il. Los virus pueden replicarse incorporando su material gentico a la clula

husped y iuego formar mltiples copias que causan su rompimiento y muerte
en poco tempo; otros despus de incorporar su material gentco en la clula
husped permanecen en ella por mucho tiempo sin causar dao alguno y solo
se replcan bajo ciertas condiciones ambientales. Estos dos procesos se
conocn como:

a. Infeccin viral.
b. Reproduccin viral.
c. Multiplicacin viral.
d. Ciclo ltico y lisognico.
 122

[*5 g$ [ m]^&"lm 'rERffi.s

3. FstoLoca v e eNncA MtcRoBtANA

3.1 pREseHrrcrx.

El mundo microbiano, como conjunto, exhibe una gigantesca versatilidad

metablica de uso de nutrientes: desde auttrofos que obtienen su carbono por
reduccin del COz y los dems elementos a partir de fuentes igualmente
inorgnicas, hasta hetertrofos capaces de usar amplia gama de fuentes
orgnicas de carbono. Estas sustancias les permiten fabricar sustancias que
intervienen en su estructua, procesos metablicos, genticos y reproductivos.
Esta situacin hace que los microorganismos sean los causantes de mltiples
fenmenos que se llevan a cabo en la naturaleza, entre los que estn: la
fermentacin, la formacin de humus en el suelo, la descomposicin de
alimentos, etc. De igual manera, experimentan diversas formas de transmisin
de sus caracteres heredtarios y de transformaciones genticas que les ayudan
a adaptarse al medio y reproducirse con mucha eficiencia. No obstante, para
lograr todo esto requieren de factores de crecimiento adecuados que no pueden
ser fabricados por ellos mismos pero que estn presentes en el medio, tales
como vitaminas, coenzimas, etc. Tambin requieren de condiciones
ambientales adecuadas para su desanollo como por ejemplo: humedad relativa,
pH, salinidad, entre otros.

Durante el desarrollo de la presente unidad se har un reconocimiento sobre los

procesos metablicos y genticos de los microorganismos, as como tambin,
sobre los fenmenos naturales en los cuales intervienen.
 123

3.2 OBJETIVOS

OBJETIVO GENERAL.

Reconocer los procesos metablicos y genticos que se desarrollan en los

microorganismos, asi como los fenmenos naturales en los cuales participan,
mediante el anlisis de datos tericos existentes y experiencias prcticas, que
permitan comprender el funcionamiento de estos seres en la naturaleza.

OBJETIVOS ESPECFICOS.

Establecer los mecanismos que utilizan las diferentes clases de

microorganismos en cuanto a su nutricin y crecimiento.

Analizar los procesos de transformacin y transmisin de caracteres

hereditarios que se llevan a cabo en los microorganismos.

ldentificar y reconocer los fenmenos naturales en los qrles intervienen los

microorganismos, su importancia para el medio ambiente y para el hombre.
 124

3.3 AUTOEVALUACININICIAL

Atrvete a opinar,
Resuelva el siguiente cuestionario teniendo en cuenta sus conocimientos

previos producto de experiencias propias o de estudios anteriores. Anote las

posibles fortalezas y dificultades encontradas.

1. Cmo hacen los microorganismos para alimentarse?

2. Cmo obtienen la energa los microorganismos?
3. Qu factores ambientales son necesarios para el crecimiento de los

microorganismos?
4. Qu mecanismos utilizan los microorganismos para reproducirse?
5. Cmo transfieren los microorganismos sus caracteres hereditarios?

Fortalezas y Debilidades cognoscitivas con respecto a los objetivos de la

unidad

Fortalezas:

Debilidades:

Acciones para superar debilidades:

 125

3.4 ACCIONES PARA CONSTRUIR EL CONOCIMIENTO

Para facilitar la construccin del conocimiento de esta unidad se sugiere realizar

las siguientes acciones:

- Haga una primera lectura para formarse una globai sobre el tema de la
unidad y su estructura.

- Durante la segunda lectura divida la unidad en subtemas y anote los

aspectos ms relevantes de cada uno de ellos. Puede utilizar mapas
conceptuales.

- Mentras lee observe las figuras que encuentre y detalle sus caractersticas.

- Compare lo ledo con experiencias cotidianas en el entorno, formlese

pregunts al respecto y saque conclusiones.

- Realice comentarios grupales sobre los temas ledos y exponga sus ideas a
fin de encontrar puntos de cnflicto y de encuentro. Haga los ajustes
respectvos y anote las conclusones finales.
 126

3.5 NUTRICIN Y CRECIMIENTO MICROBIANO

Tomado de CURT|S, Helena, 200513 .

3.5,1 Nutricin en microorganismos procariotas. De acuerdo con los

reouerimientos nuticionales bstcos, encontamos cuatfo categofias
fundamentales de procariotas. En cuanto a la fuente de energa utilzada, los
organismos que utilzan la luz se denominan fottrofos y los que obtienen la
energia a partir de la oxidacin de compuestos qumicos se llaman quimitrofos.
Del mismo modo, como fuente de carbono, los organisrnos pueden utilizar
compuestos inorgnicos, como COz. Estos organismos se denomlnan
el
littrofos. Si utilizan compuestos orgnicos -el ms universalmente utilizado es
la glucosa- se denominan organtrofos. A los fotirofos tambin se los conoce
como auttrofos (se bastan a s mismos) en contrapartida con los hetertrofos
cuyos compuestos orgncos derivan de los procesos anablicos de otros seres
vivos. A continuacin el cuadro 2 muestra en detalle las fuentes de energa y de
carbono de las bacterias.

Fuentes d energa y de cabono de las bacterias

de
Fu.rte Dadores dc
Tpo de organsmo Fuente de energa carbono clcctlones
Fotolititrafos cgmpueslos norgnicos
Bactori.g wrdes y purpreas del azufte, Luz
cianobaterias
Coapueslos comF"st6 orgnbos
Fotoorgano&ofos LI]z orgnicos (y (alcoholcs, cid
Bacteras purprgas no del azufre grasos, erc.)

Quimiolittitrotos Compuestoo i!orgncos

Arqueobaclerias hipenermlas del azule, Quimica. Reaccion6
fH?, S, S' . Fe", No!,
metangcnas, bacleias del hidrgcno, del de oxidoncduccin NOr, CO)
hcro. nihifcant6. catboxibeterias
CgmpuestG orgnicos
Qririoorganrofos Qumica Reaooiones compucatos (glrc6a y otr6 hidratos
La mayor parte de las bacterias d oxidoreduccin orgnic6 de carboo)

cuadro 2. clasificacn de micfoofganismos pfocafiotes segn fuentes de eefga y de carbono utlizadas.

't CURTIS, Helena. 2005. Bologa. Enciclopedia electrnica.

 127

- de las Arqueobacterias. Muchas especies de Arqueobacterias

Metabolismo
definen actualmente los lmites ms extremos de la tolerancia biolgica a
factores fisicoqumicos- Algunas Arqueobacterias muestran tambin
propiedades bioqumicas poco comunes, como los metangenos, que son
procarotas que producen metano (gas natural) como parte esencial de su
metabolismo energtico. Las arqueas absorben CO2, N2 o H2S y eliminan
cH4.

Las arqueobacterias presentan adems mecanismos de defensa contra las

condiciones extremas que podran afectarlas. Por ejemplo ellas fabrican una
variedad de molculas y enzimas protectoras. Las arqueas que viven en medio
ambiente altamente cdos, poseen en su superficie celular unas molculas
cuya funcin es ponerse en contacto con el cido para evitar que penetre en la
clula y as evitar que el ADN se destruya.

Las arqueas halfilas toman del exterior sustancas como el cloruro de potasio
para equilibrar el interior de la clula y evitar que el agua salada penetre y
destruya la clula. Se pueden encontrar en algunos pos de alimentos en los
que se han utilizado altas concentracones de sal (salmueras) para su
preservacin como es el caso de pescados y carnes, en donde se reconoce su
presencia porque forman manchas rojas. Las arqueas obene energa a partir
de compuestos como hidrgeno, dixido de carbono y azvlrc. Algunas lo hacen
a partir de la energa solar a travs de la bacteriorodopsna, un pigmento que
rea@iona con la luz y permite que la arqueobacteria fabrique el ATP.

- Metabolismo de (as cianobacterias. Las cianobacterias son capaces de

realizar fotosntesis. Algunas contienen pgmentos que les permiten usar la luz
como fuente de energa medante un proceso llamado fotosntesis, otras
dependen de compuestos orgnicos como fuente de energa, y algunas pueden
usar incluso compuestos qumicos inorgnicos como combustible para realizar
los procesos celulares.
 128

- Metabolismo de los micoplasmas. Con respecto a su metabolismo, los

micoplasmas usan como fuente de energa principalmente los carbohidratos y
requieren factores de crecimiento como las vitaminas, los aminocidos y las
bases nitrogenadas. Algunas especies son oxidativas y producen ATP por
fosforilacin a travs de la cadena de transporte de electrones. Otras especies
son fermentatas y utilizan azcar para obtener cido lctico.

- La fermentacin !cca. Uno de los procesos ms comunes en la naturaleza

es la fermentacin o respiracin anaerobia. Este proceso es llevado a cabo por
diferentes clases de bacterias que toman la glucosa como fuente de energla y a
cambio liberan al medio difeentes sustancias, entre las que se encuentran el
cido actico, el etanol, el cido lctico, entre otras. Con respecto al cido
lctico, este es producido por bacterias lcticas que se encuentran comnmente
en la leche pero que tambin se encuentran en el aire. Este proceso tiene gran
importancia en la industria lctea, ya que a partir de este se pueden obtener
productos fermentados como el queso, el yogur, el suero, etc. La figura 17
muestra en resumen el proceso de fermentacin lctica

L<lo.+bsb
Fo6to l]" ruabclosiras
galactocilasa

Ruta de la
tagatosa (2) frbs+fosfato

Figura 17. Pasos que se desanollan durante el procaso de lermentacin lc{ca.

 129

3.5.2 Nutrcin en mcroorganismos Eucariotes. Algunos microorganismos

eucariotes tienen la capacidad de realizar fotosntesis a partir de sustancias
inorgnicas presentes en el medio, es decr son auttrofos, como por ejemplo el
fitoplancton. Otros, por el contrario, son hetertrofos y dependendo de las
caractersticas del alimento en cuanto al tamao y estado de agregacin,
utilizan diversos mecanismos para su nutricin. Las sustancias mas pequeas
como las sales minerales son absorbidas por la clula mediante transpode
pasiyo con ayuda de un gradiente de concentracin presente en el medio; los
almentos de mayor tamao son incorporados al citoplasma mediante un
proceso llamado fagocifosr5, es decir, el alimento es englobado por el
microorgansmo y atrapado en el interior del citoplasma donde es digerido por
enzimas especficas. Este proceso es comn en amebas. Por otra parte, los
lquidos son llevados al interior de la clula por dos vas, la primera con ayuda
de la smosis y la segunda a travs de la pinocitosis. Muchos microorganismos
liberan enzimas al medio y digieren el alimento que all se encr.lentra,
absorbiendo posteriormente los nutfientes liberados por la dgestin. Los
hongos, por Io general optan por este ltimo procedimiento para alimentarse.

Algunos tipos de hongos como las levaduras fermentan los carbohidratos

obteniendo de ellos la energa y y CO2. Este proceso se
liberando etanol
conoce como fermentacin alcohlica y es muy empieado en la industria
enolgica para la fabricacin de bebidas alcohlcas como el vino, la cf-lveza,
elc.

-La fermentacin alcohlica. Es el proceso mediante el cual muchos

microorganismos extraen energa qumica de las molculas de glucosa y de
otros combustibles en ausencia de oxigeno molecular. Las ecuaciones de la
fermentacin alcohlca no implica el oxigeno molecular, a pesar de lo cual tiene
lugar reacciones de oxidacin - reduccin. Este aspecto se pone de manfiesto
en que el etanol es una molcula relativamente reducida es decir, rica en
hidrogeno y el CO z S ur1 molcula relatvamente oxidada, es esto, pobre en
 130

hidrgeno. La fermentacin alcohlica tfanscurre por la misma ruta enzimtica

de la gluclisis, pero necesita dos etapas adicionales. La figura 18 muestra una
comparacin de la fermentacin alcohlica y la fermentacin lctica'

Glactosa

6lueosa6fosfato

II
&fosfo-gluconato
2NAD'
\r"*" Arp

1 Trios-fosfato Actl-fosfato
MD. I . NADH
,l
\Nno.
"oor{o.6oonou*

Figura 18. Esquema comparatYo enfe la lementacin lctica y la fermentacin alcohlca'

3.5.3 Crecimiento micobiano. APELLA y ARAUJO, 2004r', plantean que el

crecimiento microbiano hace referencia al aumento del nmero de
microorganismos a lo largo del tiempo y no al aumento de tamao de un
microorganismo. El aumento del nmero de microorganismos permite la
formacin de colonias o de poblaciones. Es por eso que en microbiologa el

11
APELLA, Mara C. y ARAUJO, Paula. 2oo1. Microbiologa de agua, Conceptos bsicos' Universdad
Tucuman, Argentn.
 '131

crecimiento se estudia por poblaciones y no en microorgansmos individuales.

Las bacterias se reproducen generalmente por fisin binaria. El resultado de la
fisin binaria son dos lulas hijas por cada clula madre, as. una clula se
divide en dos, dos en cuatro y cuatro en ocho y as sucesvamente.

EI intervalo de tiempo que transcurre para la formacin de dos clulas a partir

de la clula madre se llama tiempo de generacin o tiempo generacional y al
igual que la tasa de crecmento o cambio en el nmero de elulas por unidad
de tempo, vara en dependencia de las condiciones genticas de las bacterias
y de los factores nutricionales. Si partimos de una clula al cabo de una
generacin habr duplicado su nmero y as sucesvamente en cada
generacin. Como se puede observar el crecimiento se produce en progresin
geomtrica y no artmtica.

Nmero de qerieraciones Nmero de-hr6s-

l ggneracin 2 clr-ilas = 2r
2 generaciones 4 clulas: 2z
3 generacisnes I culas = 2'
4 generaciones 16 cr-las = f
5 generaciones 32 clulas = 2s
6 qeneraciones 64 clulas =E

Cuadro 3. Progresn geomtrica del crecmiento pouacional bateriano

En afgunas bacterias como en el caso la E. afl en condicones ptimas la

dupficacin celular se realiza cada 20 minutos, es as como en 10 horas se
habrn producido 30 generaciones, es decir mil millones de clulas bacterianas.
A partr de una clula de E .coli, se obtiene al cabo de 10 horas o sea 6O0
minutos, 600/20=30 generaciones. El nmero de clulas entonces sera 230.
 132

Tiem0o oe generoc|on
l'irnridrterario p"t qrr a patir dE una clri se fdmen dos,
;" d tip"-r"q*ti, pai drdic* d nmaro de cldu dE una
pblacin

Cuadro 4. Aspecfos para el clcrilo del crecmiento mcrotiao

- Fases del crecimiento bacteriano. El incremento en el nmero de las

lulas en una poblacin se denomina como crecimiento exponencial o
logartmico. si se inoculan unas bacterias en un medio de cultivo fresco y se
cuantifica la poblacin en intervalos de tiempo se puede obtener una curva
que represente el crecimiento bac'teriano.

|l'
5
U
tr
o
(,
=
4
{3
TJ
o
I
r
.=
=
-

Figura 19. Curva de cecmento mcrotiano Oaciefia).

 133

La curva puede estar determinada por la comparacin del nmero total de los
mcroorganismos vivos presentes en la poblacin en un perodo de tiempo. La
curva de crecimiento de la poblacin tiene cuatro fases:

a. fase lag o fase de latencia. Es el periodo de adaptacin de los

microorganismos a un nuevo ambiente, en este periodo el nmero de clulas no
se incrementa, sino que se mantiene constante por un largo perodo que puede
durar desde t
hora hasta varios das. En esta fase las clulas presentan gran
actividad metablica. Al final de la fase la mayora de las lulas aumentan su
tamao.

b. fase log. o logartmica o de crecimiento exponencal. Durante este periodo las

clulas se empiezan a dividir en forma constante, la actividad metablica:
respiracin celular, la sntesis de protenas es mxima. El nmero de clulas
vrvs en reproduccin es mucho mayor que las clulas vivas de la poblacin
que comienzan a morir. El tiempo generacional es mnimo y constante. Las
clulas muestran su morfologa: color agrupacin forma entre otras. En el
momento fnal de estia fase y como resultado de la alta tasa de reproduccin,
comrenzan a escasear los nutrientes y el ambiente se torna txico por el exceso
de productos de desecho. Es el momento en el cual las clulas son ms
sensibles a los antimicrobianos o a las radiaciones que pueden intervenir
negatvamente en su crecimiento. Esta fase se representa por una lnea recta
ascendente.

c. fase estacionaia. En este periodo se genera un factor limitante del

crecimiento, razn por la cual se detiene el crecimiento de los microorgansmos,
generando una tasa reproductiva igual a la tasa de motalidad. si la poblacin
no se reproduce ni muere, el nmero de clulas pefmanece constante y la
longitud de la fase vara y depende del balance que logren las clulas con el
medio ambiente. Es un periodo de equilibrio.
 134

d. fase de muefte, o de declve logartmico- En esta fase las clulas no se

reproducen, solo mueren y son destruidas por lisis en forma exponencial a
causa del incremento en las cantidades de cido y otros desechos dainos en
el ambiente.

3.5.4 Parmetros fsicos y qumicos que afectan el crecimiento y

desarrollo de los microorganismos. Los aspectos fsicos que influyen de
manera determinante en el crecimento microbiano son: la temperatura, el pH y
la presin osmtca. Los qumicos son: el agua, las fuentes de carbono y de
nitrgeno, los minerales, el oxgeno y los factores orgnicos del propio
microorganismo.

- Parmetros fsicos:

- Temperatura: la supervivencia de los microorgansmos se presenta

normalmente en las temperaturas usuales para el desanollo de los animales
superiores, aunque se da el caso de algunas bacterias resistentes a extremos
de fro o de calor. Se puede hablar por consiguiente de una taxonomia
microorgnica referida a rErngos ptimos de adaptacin a la temperatura. Esta
clasificacin contempla los hes casos siguientes:

a. Microorganismos psicrolos. Adaptados a bajas temperaturas, en trminos

generales se maneja un rango de 0'C a 20"C como lmites normales para su
crecimento.

b. Mesfttos. Viven en temperaturas moderadas, en un rango de 2O" Q a 40'C.,

los microorganismos mesfilos, son los ms comunes. Por ejemplo, la
 l2<

temperatura ptima para ia mayora de las bacterias patgenas se aproxima a

los 37'C.

c. Termfilos. soportan altas temperaturas, contemplan como rangos usuales

de tolerancia de 40"c. a 80"c. y por consiguente sus endosporas son
normalmente resistentes al calor y sobreviven a los tratamientos trmicos
aplicados a conservs enlatadas aunque no crecen a las temperaturas
normales de almacenamiento.

De todas maneras, el crecimiento se da dentro de ciertos rangos de

temperatura, que generalmente cmprenden unos lmites de tolerancia de unos
30'c.

- El pH. Normalmente los pH (acidez o alcalinidad de una solucin o medio de

crecimiento) de rango neutro (6,5 a 7,5) son los ms adecuados para el
crecmiento bacteriano y muy pocas bacterias soportan pH inferiores a 4.0. por
esta razn el manejo de la acidez es un rectrso para el control microorgnico.
Como en el caso de las temperaturas existen algunas bacterias que soportan
niveles extremos de acidez, razn por la cual se Las denomina acidfilas. Se
conocen bacterias que sobreviven a pH de 1 .

Cuadro 5. Rangos de tolerenca a la acidez de dferentes tiDos de baderas.

Los rangos alcalinos generalmente inhiben el crecimiento microbiano. En los

ensayos de laboratorio para el cultivo de bacterias se requiere neutralizar los
cidos que producen las bacterias mediante sustancias qumicas denominadas
tampones. Las sales de fosfato amortiguan la acicF'lz y la mantienen en el rango
usual de crecimiento para la mayora de las bacterias (de 6,5 a 7,5) y de paso
 136

ptimo
aportan el fsforo que es un nutriente necesario. Entre tanto, el intervalo
de pH para mohos y levaduras esta entre 5'0 y 6'0'

- La presin osmtica. Los microorganismos estn formados por un 80-90% de

aguaypofconsiguientesonfci|menteafectadosporso|ucioneshipertnicaso
razon
sea con una concentracin de solutos mayor a la de la clula microbiana,
por la cual esta plerde agua por el efecto conocido como plasmlisis Por
celular
consiguiente la adicin de sales o de azcar produce una contraccin
llamadas
oue evita el crecimiento bacteriano. sin embargo existen las bacterias
hatflasextremasquerequierenaltaconcnt|.acinsa|inaparasupervivr
que no
(alrededor del 30% de sal). otro caso es el de las halfilas facultativas
necesitan altas concentraciones salinas pero pueden soportar concentraclones
para
entre el 2 y el 15% de sal. Se comprende entonces la tcnica usada
so|idificar|osmedosclecultivomicrobianoconagaf'conunaconcentracnde|
orden del 1,5%.

- Parmetros qumicos.

Lasfuentesdecarbonosonnecesariasparae|crecimientobacterianoyaque
estee|ementoesunaesrructurabsicaentodosloscompuestosorgnicosque
constituyenlaclu|aViVa.Porcpnsiguientelosmicroorganismosobtenensu
carbonoapartirdecompuestosorgnicos(mcroorganismosquimihetertrofos),
ode|bixidodecarbono(casodelosquimioauttrofosyfotoauttrofos)'

Nitrgeno, Azufre y Fsforo: en la sntesis de su material celular los

para formar el grupo amlno
microorganismos utilizan el nitrgeno principalmente
de los aminocidos constituyentes de las protenas En algunos casos oe
con ciertas plantas
simbiosis el nitrgeno fiiado por bacterias se comparte
(genera|mente|eguminosas),locrralpermiteaumentar|aferti|idadde|sue|o.E|
azufreseuti|izageneralmenteparasintetizaraminocidosyVitaminascomo|a
 137

tmina y la biotina. El fsforo se utiliza en sntesis de cidos nucieicos v de los

fosfolpidos de las membranas celulares.

De manera slmirar ros microorganismos necesitan otros erementos como

potasro, magnesio, y calcio necesaros para su utilizacin como
cofactores de
las enzimas. Por otra parte ros microorganismos requieren argunos erementos
minerales en cntdades muy pequeas, como es el caso de los
oligoelementos: hierro, cobre, moribdeno y zinc, ros cuares son esenciares
como
cofactores en la actividad enzimtica.

oxgeno.los microorganismos aeroblos utilizan el oxgeno morecular con el cual

producen ms energa a partir de ros nutrientes. sin embargo
existen
mrcroorganismos anaeobrbs facuttatvos que utilizanel oxgeno drsponible,
pero s no lo hay pueden crecer medante procesos de fermentacin
o
respiracin anaerbica. La bacteria Escherichia coli y muchas revaduras
son
anaerobios facurtativos. Existen adems ros anaerobios obirgados para
ros
cuales el oxgeno es perjudiciar y por consiguiente no ro utrizan.
En este
caso
los tomos de oxgeno de sus componentes celulares ios obtene
normalmente
del agua Es comprensibre entonces er uso der in perxido para
er control
bacteriano ya que en este caso es una forma txica de oxigeno.

' Agentes antimicrobianos que afectan er crecimiento. A partir del

descubrimento de la penicilina se han observado reacciones
de inhibicin del
crecmiento microbiano en medios sridos por causa
oe sustancias producidas
por otros microorganismos, sustancias que por
tal motvo se llaman antibtcos.
Algo ms de ra mitad de ros antibiticos de amprio uso son produodos
por ra
bacteria streptomyces. otros antbiticos son producidos por
bacterias der
 138

gnero Baciltus y algunos son generados por mohos de los gneros Penicillium
y Cephalosporium.

- Espectro de actividad antimicrobiana. Los antibiticos presentan certa

selectividad sobre los tipos de clulas microbianas que pueden afectar, por
ejemplo, la penicilina es efectiva contra bacterias Gram Positivas, pero ataca a
pocas bacterias Gram Negativas. Los antibiticos que atacan a un alto nmero
de Gram Positivas y Gram Negativas se denominan de amplio espectro y se
recurre a ellos cuando no es segura la identidad det patgeno.
Desafortunadamente estos antibiticos destruyen gran parte de la flora normal
del husped y aquellos microorganismos patgenos que no son destruidos por
el antibitico pueden atacar ms fuertemente al organismo husped por el
desequilibrio de la flora.

- Seleccin de frmacos antimicrobianos. Los principales criterios para

determinar el valor de un agente antimicrobiano o frmaco antibitico son los
siguientes:

. Toxicidad selectiva: que ataque al microorganismo pero no al husped o si son

ligeramente txicos, que no alcancen a interferir significativamente con las
funciones normales del organsmo.

. Que no produzca alergias o hipersensibildad ante el sistema inmunitario.

. Que sea soluble en los fluidos corporales, con lenta degradacin y buen
tiempo de permanencia en el organismo para lograr el efecto antibitco. Debe
mantenerse en buenas condiciones mediante refrigeracin.

. Que no produzcan fcil resistencia en los microorganismos.

- Mecanismo de ac,cin de los antibitcos o agentes antimicrobianos. Los

agentes bactericidas eliminan las bacterias y los agentes bacteriostticos solo
impiden su crecimento, contribuyendo a que las propias defensas del husped
 139

destruyan a los mcroorgansmos patgenos. Los principales mecanismos

antibiticos son los sigurentes:

. Inhibicin de la sintesis de la pared celuiar. Algunos antibiticos interfieren con

las sntesis del peptidoglucano necesario para la construccin de la pared
celular de bacterias Gram positivas y Gram Negativas. De esta manera la pared
celular de bacteria patgena se debilita y no puede crecer normaimente.

. Inhibicin de la sntesis de protenas. Algunos antbiticos como el

cloranfenicol, la Eritromicina y las Tetraciclinas inhben la sntesis de protenas
en ciertos tipos de ribosomas de las bacterias patgenas y de esta manera se
anula su actividad fisiolgica.

. Alteracin de la membrana citoplasmtica. Antibiticos como Ia polmixina B

daan la permeabilidad de la membrana citoplasmtica y otros frmacos
antifngicos como la Nistatina, Anfotericina B y Ketoconasol desorganizan la
membrana citoplasmtica causando la destruccin celular al lberar el contenido
citoplasmtico.

. Inhibicin de la sntesis de cidos nucleicos. Este tipo de accin evita el

desarrollo normal del microorganismo, pero tiene un efecto txico en el ADN y
ARN de los mamferos, como es el caso del antivrico idoxuridina. Son ms
selectivamente txicos para las bacterias, afectando menos al husped la
Rifampicina y el cido nalidixico.

. Inhibicin de la actividad enzimtica. Algunos antibiticos son antimetabolitos

gue pof su parecido al sustrato normal de una enzima necesaria en la
produccin de cido flico interfieren con esta sntesis y detienen el crecimento
del microorganismo. Es ei caso de la sulfanlamda. Otros agentes de accin
similar son las sulfotas el Timetrooin.
 140

3.6 GENTICAMICROBIANA

Tomado de CARRILL}, Leonor- 200315

En una bactefia la informacin gentica est codificada en una molcula de

ADN larga y muy plegada para caber en la clula. El cromosoma bacteriano
por clos
circular tiene al menos un milmetro de largo. La doble hlice formada
cadenas de nucletidos consta de varios millones de pares de bases y la
informacin total de la bacteria se despliega en un conjunto de varios miles de
genes estructurales. En los procariotas y eucarotas la clave gentica y la
pero no
bioqumica esencial de la transcripcin y la traduccin son las mismas,
asi las seales de control. En las bacterias la informacin gentica codificada
en un segmento contnuo de la doble hlice de ADN, que constituye el
gen

estructural, se transcribe directamente en un ARN mensajero cuya traduccin

da lugar a una protena, generalmente una enzima' Figura 20'

C&ee DaE el Codoes p&a el Codoo prs l

Flipptido I poiFptjdo 2 poli*ptido I

Figura 20. Proceso de transcripcin en procanolas

t5
cARRlLLo, Leonor. 2003 op.citp.
 141

Antes de que una clula bacteriana se divida (transferencia vertical) ha de

duplicarse su ADN (figura 21). Durante la replicacin del ADN se separan los
pares de bases al alejarse ambas cadenas helicoidales.

'\'+ta,-
lrebr
ADN
polinerasa

direrri
reFli{arin
nucS a

-{hubru
protpfnas malde

hebra

=H;'"
molde

).-$ ll
cel''atlor iJ7 he.br nueva
Figura 21 . Replicacin de ADN en bacrenas

Las ADN polimerasas copian cada una de ras hebras. Mientras se va

construyendo la nueva hebra, sta se empareja con ra que re sirve
de molde.
Pueden darse enores de repricacin por conimiento cuando arguna
de las
hebras se desliza y estabrecen un emparejamiento inadecuado.
En cada tanda
de divisin bacteriana asexuar habr arguna clura que porte una mutacin.
La
mutacin altera ros genes de un microorganismo. La recombinacin
reordena
Ios genes o parte de los mismos, y agrupa en un mismo individuo
la informacin
gentica de dos o ms organismos.

3.5-l Regulacin de ra expresin gnica. un medio principar de reguracin

gentica en ras bacterias es er sstema opern. r,ln opern
comprende al
promotor, a los genes estructurales y al operador.

Los genes estructurales opern codifican un grupo de protenas

del
funcionalmente relacionadas v se transcrben como una
sola molcula de
 143

en la nera en que es transpcflado. La transfeiencia es seguiCa por la

recon-ibinacin y as el ADN de la bacteria donadora se integfa al de ia

receptora. El intercambic ce genes en las bacierias no est confinado dentio de
una especie o especies afines, acontece entre bacterjas de gneros o famlias
diferenies.

La recombinacin homloga ocurre cuando los ADN que poseen secuencias de

bases similares, se renen e intercambian segmentos mediante la rotura y
ensamblaje de las cadenas. Otra torma de recombinacin que aade nuevas
porciones ai ADN que ya posee el microorganismo, es la especfica de sitio y
requere solo pequeos fragmentos de ADN homlogo para el reconocimiento.
Cuando ambos ADN poseen una secuencia de reconocimiento se habla de
recombinacin especfica de sitio doble, por ejemplo la insercin de un fago. Si
solamente una molcula de ADN transporta esa sectencia la recombinacin
especfica de sitio es simple y permite la insercin de una secuenca mediante
la transposicin.

3.6.2 Conjugacin. Se descubri cuando se mezclaron mutantes nutricionales

(auxotrficos) con diferentes requerimientos de la bacteria Gram-negativa
Escherichia coli y crecieron sobre un medio mnimo siendo que,
separadamente, necesitaban un suplemento de determinados nutrientes para
poder multiplcarse. Los genes silvestres de una cepa completaron los genes
mutados de la otra. Este proceso requiere el contacto entre las clulas y se
transfiere el factor sexual F (fertilidad) que es una molcula pequea de ADN
circular de doble cadena {plsmdo) desde la clula donadora {F+) a la
receptora (F-). Las clulas donadoras tenen en la superficie los pelos de
conjugacin (pili F) que sirven para facilitar el contacto (figura 22). La presencia
de un plsmido altera la capacidad para sintetizar el pelo F y el desplazamiento
del ADN para su transferencia a otra ciuia, aderns modifica os receptores
suoerficiales.
 142

mRNA. La transcripcin es controlada por secuencias en el promotor y en el

operador, adyacentes a los genes estructurales y capaces de unir protenas
especficas. El promotof conene un sio de unin para la RNA polimerasa y
puecie contener un sito de unin para el comple.io CAP-AMP cclico. El
operador es el sitio de unin para un represor, protena codificada por otro gen,
el regulador, que puede estar localizado a cierta distancia en el cromosoma
bacteriano. El operador se puede superponer con el promotor, con el pmer gen
esiructurai. o con ambos; cuando el represor se une a ia molcula de DNA en el
stio operador, la RNA polimerasa no puede iniciar la transcripcin del mRNA.
Cuando el represor no est presente, la RNA polimerasa puede unirse al DNA y
comenzar su movimiento a lo largo del cromosoma, permiiiendo que ocurra la
transcripcin y la sntesis de protenas.

El opern lac es un ejemplo de un opern inducible. Pasa de "desconectado" a

"cpnectado" cuando un inductor se une al represot y lo inactiva- Otros
operones, como el opern trp, son represibles. Estos pasan de "conectado" a
"desconectado" por la accin de un correpresor, que se une a un represor
inactivo. ste activa al represor y se une al operador. Tanto la induccin como
la represin son formas de regulacin negativa.

La regulacin positiva de algunos operones la suministra la unin del complejo

CAP-cAMP. Por ejemplo, cuando hay glucosa en la clula, los niveles de AMP
cclico son bajos y el complejo CAP-oAMP no se forma. cuando la glucosa se
agota, aumentan los niveles de cAMP y se forman complejos CAP-cAMP que
se unen luego al promotor. con la laciosa presente (y el represor as inactivado)
y el mmplejo CAP-cAMP en su lugar, la RNA polimerasa tambin se une al

promotor y ocurre la transcripcin desde el opern.

Los tres mecanismos principales de intercambio horizontal de material geniico

entre bacterias son: conjugacin, transformacin y transduccin. En todos estos
Drocesos se transfiere ADN de la clula donadora a la receptora, pero difieren
 144

Slo unas pocas bacterias f+ pueden

transferir ADN cromosomal. Son las
que tienen el factor F integrado al
cromosoma. Tales bacterias,
llamadas Hfr, transfieren sus genes
con una frecuencia muy alta. Durante
la transferencia el ADN bacteriano se
replca a partir del punto de insercin
del factor F y la cadena recin
formada entra en la lula aceptora.
Este proceso es seguido de la
recombinacin homloga del ADN de ambas clulas dentro de la bacteria
receptora (figura 23).

i-L_
o F- I+ Hfi cepor
Fgura 23. Intel.accn entre dos clulas sexuales baclerianas
C+nrirbe

La introduccin de unas cuantas bacterias con plsmidos en una poblacin

receptora, puede convertirla en portadora de plsmidos en poco tiempo. En las
bacterias Gram-positivas la conjugacin no est mediada por pili. Antes del
intercambio gentico, la lula
receptora secreta substancias que estimulan la
sntesis de protenas aglutinantes por las potenciales donadoras. Una vez que
las bacterias se asocian, se forman los poros necesarios para la transferencia
del ADN.
 145

3.6.3 Transformacin. Aigunas bacterias pueden captar ADN desnudo, por

ejemplo las clulas de una cofonia rugosa de Sfrepfococcus pneumoniae al ser
mezcladas con el ADN de una cepa virulenta con colonias lisas adquieren la
cualdad de producr coionias iisas. La transformacin suele ocurrir tanto en
bacterias Gram-positivas como en Gram-negativas, y es utilizada para introducir
genes extraos en una bacteria.

Un fragmento de ADN se puede insertar en un plsmido pequeo especializado

conocdo como vector de clonacin usando una enzima especfica. Este ADN
recombinante se usa para transformar las bacterias que crecern luego en un
medio selectivo apropiado para detectarlas. La capacidad de aislar ADN de un
organismo e inducir su incorporacin en otro no relacionado constituye el
fundamento de una de las manipulaciones del ADN recombinante (figura 24). El
plsmido srve as de vector para genes que no tienen equvalente en el
organsmo receptor y que, por lo tanto, no podrian heredarse de forma estable
mediante recombinacin homloga- Estos genes pueden asi transmitirse a
travs de generaciones sucesvas conforme el plsmido va replicndose. Pero a
veces {a bacteria pierde el p{smido espontneamente. La mayora de las
especes de rizobios, bacterias de gran mportancia agronmica, contenen
plsmidos con la informacin gentica para la simbiosis en leguminosas.

3.6.4 Transduccin. Los genes bacterianos se pueden transferir de una cepa

a otra usando bacterifagos como vectores, pero este fenmeno no ocurre en
todas las especies de bacterias. Segn et comportamiento del bacterifago la
iransduccin puede ser:

a) genera! a inespecfica. Comnmente el bacterifago se replica dentro de la

clula que infecta y con la ruptura de la misma se liberan las nuevas partculas
vricas. Estas partculas nfectan otras clulas completando el ciclo de lisis.
Ocasionaimente durante el proceso ltico el genoma bacteriano se fragmenta y
algunos segmentos pasan a formar parte del nuevo bacterifago. stos suelen
 146

carecer de parte de su propio genoma, pero aungue defectuosos son capaces

de infectar nuevas bacterias y dejarles la porcin de ADN bacteriano que
transportan. Este ADN suele recombinarse con el genoma de la clula infectada
(figura 25).

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AD r,ii'r
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Figua 24 . Introduccin de gnes efraos por un plsmido veclor.

 147

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- r lula lrndrtr 1'.lor

Figwa 25. Transduccin no especfica

La porcin de genoma bacteriano transportada por bacterifagos es por lo

general menor que'l% del ADN total. La mayora de las partculas vricas son
normales y no particpan en la transduccin.

b) especializada. Los bacterifagos moderados tambn son capaces de formar

una relacin estable con sus hospedadores. Luego de la infeccin suelen
incorporarse al genoma bacteriano como profago. ste suele codmcar otras
funciones adems de las especficas del bacterifago, por ejemplo la
produccin de toxinas. Las bacterias que albergan profagos se llaman
lisognicas.

Los profagos suelen vivir en armona con su hospedador hasta que una
situacin de stress ambiental induce el ciclo ltico. cuando el bacterifago se
escinde del genoma bacteriano puede acarrear una porcin de este ltimo.
Estos fagos defectuosos invaden nuevas bacterias. La integracin al genoma
de la clula hospedadora es esencial para la transferenca de los genes. como
cada profago tiene un particular lugar de insercin en el genoma de la bacteria,
solamente los genes adyacentes pueden ser transferidos por este proceso. La
es la recombinacin gue presentan los transposones o las
transposicin
secuencias de insercin. Las secuencias de ADN cambian de lugar en el
 148

genoma y se nsertan en una regin que no guarda homologa con ella' Si esta
integracin sucede dentro de un gen se produce una mutacin, pues se rompe
ta continuidad de la informacin codificada.

utir d!. protopLrslos

3.6.5 Fuein de protoplastos. f

Las baneras naturales a la

rlulas L'uctenans
,)
1>,^i,_ilt-c)r
A
\.\).i i.\J,'
recombinacin entre organismos
diferentes pueden romperse a
menudo mediante la preparacin
de protoplastos, clulas
ProtoFlsios

bacterianas cuyas paredes

extemas se han eliminado
poniendo al descubierto la
Figura 26. Recornbnacn por fusin de protoplaslos
membrana celular. Figura 26

Como las membranas celulares poseen aproximadamente la misma

composicin en la mayora de los organismos, puede inducirse la fusin de
protoplastos de especies distintas, formando una lula hbrida en la que los
genes quedan expuestos a la recombinacin. Tambin es una tcnica eficaz
para aumentar la frecuencia de recombinacin intraespecffica en los que el
apareamiento natural es raro. La operacin se lleva a cabo en una solucin
cuya presin osmtica equilibra la presin interior de las lulas, para que no
estalle la membrana celular. Despus se induce la regeneracin de la pared de
los protoplastos hbridos y se obtiene un cultivo normal.
 149

3.7 RESUMEN DE LA UNIDAD 3.

Los microorganismos se valen de diferentes mecanismos para nutrirse, es as,

como dependiendo de estos mecanismos de nutricin se pueden clasificar
haciendo mas fcil su estudio. Al respecto, existen microorganismos capaces
de fabricar su propio almento tomando cmo fuente la luz y sustancas
inorgnicas u orgnicas, a estos se les llama microorganismos fottrofos o
auttofos como por ejemplo, las cianobacterias, quienes pueden realizar
fotosntesis. Entre tanto, existen otros microorganismos que obtienen los
nutrientes necesarios para fabricar su energa de la oxidacin de diferentes
compuestos qumicos, por lo que se les llama quimitrofos o hetertrofos.

Muchos microorganismos obtienen la energia mediante un proceso llamado

fermentacin o respiracin anaerbica, en la cual los carbohidratos son
degradados por enzimas especficas en ausencia de oxgeno, produc.iendo
diferentes compuestos como el cido lctico (fermentacin lctica), el etanol
(fermentacin alcohlica), el
cido actico (fermentacin actica), gas
carbnico, entre otros. El fenmeno de la fermentacin es bien utilizado en
muchas empresas para Ia elaboracin de productos lcteos fermentados como
el queso, el yogur, etc. y para la fabricacin de bebidas alcohlicas como el
vino, la cerveza, entre otras.

En cuanto a la absorcin de los nutrientes, los microorganismos pueden

incorporarlos a su citoplasma ya sea mediante un transporte pasivo con ayuda
de un gradiente de concentracin en el medio, a travs de fagocitosis o bien por
pnoctosis. Algunos como lo hongos y bacterias liberan enzimas que dgieren el
almento presente en el medio y luego absorben ios nutrientes de dicha
digestin.
 150

Por otra parte. el crecimiento de los microorganismos est determinado por

mltioles factores ambientales- Ello induce a una nueva clasiJicacin que va a
depender de las condiciones en que se desarrollen- El cfecimiento de estos
seres presenta diferentes fases, entre las que se destacan: la fase de latenca,
o adaptacin de los microorganismos al ambiente; una fase logartmica, o de
crecimiento exponencial aelerado; la fase estacionaria donde se empeza a
producir un factor limitante que deene el crecimiento poblacional de los
microorganismos; y una fase de declive logartmico, en la que los
microorganismos mueren y no se reproducen por acumulacin de sustancas
txicas producidas por ellos mismos.

Para el crecimienio de los microorgansmos, es necesaria la presencia de

factores ambientales adecuados, tales como ta disponibilidad de nutrientes, la
temperatura, la humedad, el pH, entre otros. Cuando hay lteracin de algunos
de estos factores en forma inadecuada, la colonia de microorganismos puede
frenar su crecimiento y morir paulatinamente. Con respecto a este punto, no
todos lo microorganismos toleran las mismas condiciones ambientales, existen
microorganismos que pueden habitar en zonas de etevadas temperaturas y son
llamados termfilos; otros resisten bajas temperaturas como los psicrfilos; hay
microorganismos que habitan en lugares muy cidos llamados por ello
acidofilos.

Otro aspecto de los microorgansmos lo constituye su expresin gnica, en este

Droceso se llevan a cabo diferentes mecanismos de transferencia de su material
gentico. Uno de estos mecanismos lo constituye la replicacin de su ADN en el
cual una molcula de doble hlice fabrica una copia de si misma, este paso es
preliminar para ottos mecanismos importantes. La transcripcin es otro
fenmeno que se lleva a cabo con el fin de fabricar protenas, comienza con la
fabricacin de ARNm a partir de un gen en el ADN y luego el mensaie de este
ARNm es llevado al ribosoma para su traduccin y formacin de la protena.
 151

Por oira parte, existen otros mecanismos genticos en los microorganismos,

entre los cuales se encuentra la conjugacin, este proceso requiere el contacto
entre las clulas y se transfiere el factor sexual F (fertilidad) que es una
molcula pequea de ADN cirq..lar de doble cadena (plsmido) desde la lula
donadora a la receptora. La transformacin es otro de los mecanismos
genticos en donde un fragmento de ADN se puede insertar en un plsmido
pequeo especializado conocido como vector de clonacin usando una enzima
especfica- Este ADN recombnante se usa para transformar las bacterias que
crecern luego en un medio selectivo apropiado para detectarlas. por ltimo en
la transduccin los genes bacterianos se pueden transferir de una ceDa a otra
usando bacterifagos como vectores y puede ser general o inespecfica,
cuando el bacterifago se replica dentro de la clula que infecta y con la ruptura
de la misma se liberan las nuevas partculas vricas. Estas partculas infectan
otras clulas completando el ciclo de lisis; y especializada, crando los
bacterifagos moderados tambn son capaces de formar una relacin estable
con sus hospedadores. Luego de la infeccin se ncorporan ai genoma
bacterano como profago.
 152

3.8 AUTOEVALUACIN FINAL UNIDAD 3

selecciona la respuesta correcta encerando en un crculo el literal

corresoondiente.

1. De acuerdo con los requerimientos nutricionales bsicos, encontramos cuatro

categoras fundamentales de procariotas: los que utilizan como fuente de
energia la luz o compuestos qumcos, y los que utilizan como fuente de
carbno compuestos inorgnicos o inorgnicos. Segn la fuente de energa
utilizada, aquellos que requieren la luz para su nutricin se denominan tambin:

a. Qumtrofos.
b. Organtrofos.
c. Hetertrcfo.
d. Auttrofos.

2. El proceso de produccin de energa en microorgansmos se realiza a pariir

de la degradacin de una fuente de carbono, como la glucosa y puede ser de
manera aerbica o anaerbica segn la especie. Las bacteras, por ejemplo'
producen energa anaerbicamente, mientras que los protozoos lo hacen
aerbicamente, sin embargo, la cantidad de energa producida en bacterias es
menor que en protozoos. Lo anterior se debe a que:

a. La presencia de Oxgeno garaniiza la oxidacin tolal de la molcula de glucosa.

b. Las bacterias son ms pequeas que los protozoos.
c. Las bacbrias necesitan menos energa que los protozoos.
d. La fata de Oxgeno no permite obtener energa de la glucosa.

3. La siguiente grfica muestra el crecimiento de dos poblaciones de

microorganismos (A y B) que comparten el mismo hbitat.

No. de mcDorganismos

De la grfica se puede concluir que:

a. El crecimento de la especie A depende del crecimento de la especie B.

b. La espece B produce sustancias que inhiben el crecimiento de la especie A.
c. El crecimiento de las espces Ay B son independientes.
d. La especie A produce sustancas que inhiben el crecimento de la especie B.
 ,l a,

4. Un ganadero quiere fabricar queso utilizando bacterias mesfilas que

proveen al producto de una acidez baja y un aroma suave. sabe que la leche
contene, adems de bacterias mesfilas, bacterias psicrflas. por lo tianto.
para evitar la contaminacin del producto final con este ltimo tpo de bacterias
el ganadero debe:

a. calentar y mantener la lecie entre 35o y 40o centgrdos durante su preparacin,

b. Calentar la leche a 100o centgrados para eliminar la flora psicrofila.
c. Mantener la leche por debajo de 20o centgrados.
d. Calentar a leche a 7Oo C y luego dsmnuirla bruscamente a 4o C.

5. Los antibiticos son medicamentos que se utilizan para combatir la infeccin

por bacterias. Estos actan bloqueando la sntesis de protenas en la clula. En
un laboralorio se desea evaluar el efecto de 2 antibiticos (X, y) sobre la
sntesis de protenas en dos grupos de una misma poblacin de bacterias
(grupo A y grupo B). Para ello, al grupo de bacterias A se le aplica el antibitico
(X), mientras que al grupo de bacterias B se le aplica el antibitico (y). Luego
de un tiempo, al analizar el contenido intracelular de los grupos de bacterias se
encontr que el grupo de bacterias A posea ARNm mientras que las bacterias
del grupo B no. Segn lo anterior, la explicacin de estos resultados
conesponde a que:

a. El antbtico X achra bloqueando la traduccin y el Y la trascripcin.

b. El anbitco X actla bloqueando la trascripcion y el y la Traduccin.
c. Ambos antibicos actnan bloqueando la traduccn.
d. Ambos antibticos adan bloqueando la trascripcin.

6. En bacterias existen tres mecanismos principales de intercambio horizontal

de material gentico, son: conjugacin, transformacin y transduccin. El
mecanismo por el cual los genes bacierianos se pueden transferir de una cepa
de bacteria a otra usando bacterifagos como vectores es:

a. Conjugacin.
b. Transformacin.
c. Transduccin.
d. Transcripcin.

7. Un medio principal de regulacin gentica en las bacterias es el sistema

opern. Un opern comprende al promotor, a los genes estructurales y al
operador. Si a una bacteria se le altera la secuencia del promotor, y por ende su
funcionalidad, es de esperarse que:

a. La ADN-polmerasa no lleve a cabo la replicacin de ADN.

c. No se producira ARNm.
b. La ARN-polimerasa no pueda realzar la tEnscripcin.
d. La bacteria no sufra dao alguno.
 154

UNIDAD CT.'ATR.C'

4. ECOLOGA UlCROgtNl

4.1 PRESENTACIN.

En la naturaleza los microorganismos cumplen un papel vital en el equilibrio del

medio ambiente, ya que se encargan de la transformacin de la materia
orgnica en inorgnica. Este proceso es fundamental para las cadenas
alimenticias, permtendo el flujo de la materia y energa en los ecosistemas. Sin
y los dems seres de la
embargo, las relaciones entre los microorganismos
naturaleza no siempre son benficas, algunos son parstos y causan
enfermedades mientras que en otros casos viven en relacin simbica.

Los seres humanos conviven con los microorganismos desde sus orgenes y
stos no solo han sido la causa de muchas de sus enfermedades, sino que han
contribuido con el desanollo cientfico en muchos campos de la sociedad. Por
ello, el reconocimiento de las relaciones de los microorganismos con el
medioambiente es de suma importancia en la medida que permite la interaccin
adecuada con ellos, logrando establecer una relacin benfica y responsable en
diferentes aspectos.

En esta unidad se har un reconocimiento de las diferentes interacciones de los

microorganismos en diferentes ambientes y con el ser humano como pieza
clave en el entendimiento de su importancia en el equilibrio de la naturaleza.
 ,l <<

4.2 oBJETIVOS.

OBJETIVO GENERAL.

Analizar las funciones de los microorganismos en los ecosistemas y sus

relaciones con los dems seres vivos mediante el estudio de fenmenos
naturales en los cuales intervienen, a fin de comprender la importancia de estos
seres en el medio ambiente.

OBJETIVOS ESPECiFICOS.

- Reconocer los procesos naturales en los cuales intervienen los

microorganismos_

- Determinar las relaciones entre los microorganismos y con los dems seres
vivos de [a naturaleza.

- Establecer las relaciones entre los microorganismos y la contaminacin en

diferentes ambientes.
 156

4.3 AUTOEVALUACION INICIAL.

Atrvete a opinar.
Responda el siguiente cuestionario teniendo en cuenta sus preconceptos y
experiencias ctidianas acerca de la importancia de los microorganismos en Ia
naturaleza y sus relaciones con los dems seres vivos.

1. Qu funcin anmplen los microorganismos en las cadenas alimenticias

tenestres y acuticas?
3. Qu importancia enen fos microorganismos para el suelo?
4. Cundo se puede habiar de contaminacin microbiana en un ambente
determinado?
5. Qu tcnicas se emptean para determinar la presencia de contaminacin
por microorganismos en el ambiente?
6. Qu importanca tienen los microorganismos en la industria de almentos?

Fortalezas y llebilidades cognoscitivas con respcto a los objetivos de la

unidad

Fortalezas:

Debilidades:

Acciones para superar debilidades:

 157

4.4 ACCIONES PARA CONSTRUIR EL CONOCIMIENTO

Para comprender el contenido de la presente unidad puede realizar las

siguientes acciones:

- Haga una lectura general sobre el contenido de la unidad para hacerse una
idea global del mismo.

- Haga una segunda lectura e identifique temas principales y

secundarios
anotando los aspectos rns relevantes de cada uno de ellos. puede construir
mapas conceptuales.

- Realice mmparaciones entre lo ledo y sus experiencias cotidianas sobre

fenmenos observados en el ambiente. Formlese preguntas y trate de
respondrselas o socialcelas con sus compaeros o con su tutor. Sague
condusones l respecto.

- y revise sus avances con respecto a las

Realice la autoevaluacin final
debilidades que tuvo en la autoevaluacin inicial y haga los ajustes
respectvos.
 158

4.5 LOS MICROORGANISMOS Y LA CADENA ALIMENTICIA

MATEos, Ped F. 2005.16

El papel de los microorganismos en el ambiente es doble: (1o) suministran los

compuestos inorgnicos con una valencia adec'uada para que las plantas
superiores puedan utilizarlos (ciclos del nitrgeno y del azufre) y (2")
contribuyen a la continua descomposicin y mineralizacin de la materia
orgnica en putrefaccin.

La acvidad de los microorgansmos descomponedores es fundamental para

permitir el reciclaje de materia orgnica fijada en las plantas superiores: los
herbvoros consumen una parte muy limitada de esta materia orgnica porgue
la relacin C:N de esta materia orgnica (alrededor de 200:1) es mucho mayor
que la conveniente para los animales (en tomo a2O:1).

Otra ventaja adicional de los microorganismos es que ellos mismos se

incorporan a los detritus mejorando as la relacin C:N (para los
microorganismos oscila entre 6:1 y 12:'l)'.

Por otra parte, los microorganismos son indispensables para la descomposicin

de materia orgnica en ausencia de aire y gara la fijacin de COz en
condiciones de metanognesis, {o que determina cambios globales importantes
en los niveles de oxidacin del material orgnico en ambientes anxicos.

'6 MATEoS, Pedro F. 2005. op.citp.

 159

4,5.1 Hbitats de los microorgansmos.

- El suelo.

- Aspecfos fsicos del sue/o: el suelo est compuesto principalmente por (,1')
minerales (primarios o secundarios) derivados de la roca madre, que suponen
en tomo al 50olo del volumen; (2o) materia orgnica que representa en tomo al
30% del volumen, aunque dependiendo del tipo de suelo puede variar; (3o) are
y agua, que ocupa Ia mayor parte del volumen restante, y
{4.} microorganismos,
que pueden representar el 1o del volumen total.

La contribucin de los microorganismos a las caractersiicas fsicas del suelo

final es importante: los microorganismos ayudan al proceso de fragmentacin y
transformacin qumica de los suelos y se establecen con rapidez en las
superficies recientemente erosonadas con lo que contrbuyen al desgaste de ia
roca. Por otra parte, los microorganismos pueden liberar compuestos qumicos
al suelo (cidos orgnicos, agentes quelantes, fenoles, etc.) que contribuyen a
incrementar la erosin.

Los procesos naturales de formacin de suelo producen horizontes en que se

diferencian los estratos.

- Aspecfos qumicos del suelo: la materia orgnica del suelo sufre procesos de
oxidacin que llevarn a la produccin de COz y HzO. Sin embargo, una parte
de la materia orgnica escapa a este proceso de oxidacin y se transforma en
grandes macromolculas que no son soiubles y consttuyen la fraccin
denominada hmica (o humus). En los suelos que no son totalmente maduros
pueden extraerse fracciones solubles por tratamientos suaves; estas fraccones
representan probablemente pasos intermedios en el proceso de humificacin.

En ciertos suelos puede detectarse una actividad enzimtica no desoreciable. a

pesar de que el contenido proteco del suelo es muy bajo. Esto es ms
frecuente en ciertos suelos de alto componente arcilloso y probablemente se
 160

debe a que la arcilla, debido a su carga elctrica neta, acta como un

intercambiador inic reteniendo enzimas procedentes de la descomposicin de
tejidos y clulas- Estas actividades enzimticas son ms frecuentes en suelos
ricos desde el punto de vista agrcola en los que la composicin de arcillas es
tambin favorable.

La frarcin orgnica estabie de los suelos contiene prcticamente el 90% del

fosfato de los mismos, este fosfato no es directamente asimilable por las
pf antas y quiz se encuentra fuertemente unido a los componentes arcillosos
del suelo.

La mayor parte de los polisacridos del suelo se encuentra en una forma no

fcilmente extrable y probablemente se encuentre asociada a macromolculas
en fase de humificacin. Del resto extraible ene especial importancia la
fraccin @rrespondiente a los exopolisacridos bacterianos pofque su alla
resistencia a la degradacin les hace especialmente interesantes a la hora de
formaf los microhbitats porosos en los que viven los microofgansmos
edficos.

.Humus..ese|productoorgnicoinso|ubleenaguaquelapartemsestable
del suelo. se compone de tres fracciones separables por su solubilidad en
cidos y bases (cdo flvico), en cidos pero no en lcalis (cido hmico) o
insolubilidad en ambos (humina). Probablemente estos productos represenlan
tres grados de polimerizacin diferentes de la misma molcula que' por otra
parte,presentacaractersticasqumicasquerecr.terdana|ade|a|gnina.

E|origende|humuses,probab|emente,mixto:(1o}ciertosmicroorganismos
producn substancias pardas similares a los cidos hmicos lAzotobacter spp''
sfrepfomycesspp.),(?}ciertoshongospuedenproducirpo|merosfen|icosy
(3o) la presencia de arcilla puede ayudar en el proceso de polimerizacin de
los

compuestos anteriores.
 16't

EI humus es extraordinariamente estable y el periodo de degradacin de los

compuestos hmicos (que varan entre los distintos tipos de suelos) oscila
entre
los 5 y los 2000 aos.

-Anlisis microbiolgico del suelo: los microorganismos edficos se distribuyen

en el suelo de manera no homognea ocupando microhbitats producidos en
los pofos de las partculas del suelo. por eonsiguiente, los resultados de los
estudos de microbiologa del suelo represenian los promedios de los efectos
de
los mcroorganismos que ocupan los diferentes microhbitats.

Los microorganismos del suelo pueden estudiarse utilizando una batera de

procedimientos de microbiologa clsica que comprenden procesos de
enriguecimiento para faclitar la deteccin de microorganismos poco frecuentes.
sstemas de enumercin directa realizando preparaciones microscpicas
de
cantdades conocidas de suelo que se tien con coloranles o agentes
fluorescentes especficos, tcnicas de siembra en masa, determinacin del
nmero ms probabre, determinacin de coliformes y cuarquier otro mtodo
clsico. Por olra parte, resulta iil la determinacin de la bomasa total del suelo
por mtodos @mo recuento total y coneccin por er volumen celular, pruebas
de ATP del suelo (sensible hasta el nivel de 10-1a g de ATp), mtodo de ra
fumigacin de cloroformo (basado en una eficiencia del 4}o/o para la
transformacin de materia orgnica en coz, y determnacin de substancas
de
grupos especficos. Es tambin relevante el estudio de la distribucin
de los
mrcroorganismos en el suelo tomando muestfas a diferentes niveles.

Hasta ahora no se han empreado todas ras tcnicas de manera coordinada

de
forma que no se tienen muchos resultados completamente coherentes sobfe
los
procesos microbiolgicos del suelo. En cualquier caso, los
estudios preliminares
reaizados permiten rearizar predicciones smpes sobre ras dnmcas
de las
poblaciones microbianas der suero y sobre su influencia en
ros procesos de
descomposicin de material orgnico.
 162

- Deteccin de microorganismos no cultivables. todos los mtodos anteriores se

basan en la identificacin y aislamiento de los microorganismos del suelo. Esto
es slo posible cuando dichos microorganismos sean curtivables. se ha
observado que ia fraccin de microorganismos cuitvabes representa una
frarcin muy pequea der totar de microorganismos. Esto puede deberse
a dos
causas (1') ciertos microorganismos normalmente cultivables entran
en fase en
las que no lo son ms (por ejemplo: ciertas Fseudornonas que
son sometidas a
tratamientos con fro o con desecacin pasan por fases
de no curtvabridad) y
(2'l hay microorganismos que no son cuitivables en absoluto
con las tcnicas
actuales.

cuando se estudia microscpicamente un suero puede

obseryarse una gran
cantdad de formas microbranas que ruego no aparecen
en ros curtivos finares.
cuando los microorganismos son claramente identificables
mediante
microscopia gracias a tinciones drferenciares o a morfoogas
caracierisircas
dichos microorganismos pueden ser estudiados rn
sftu; sin embargo, en la
mayora de ros casos las variaciones morforgicas
son demasiado reves para
que los diferentes grupos sean identificabies y
suestudio individuarizado no es
factble.

Para estos casos, se ha desarroirado una tecnorogia

basada en el arslamiento
de ADN o ARN der suero y posterior amprificacin der materiar geni.ico
correspondiente ar ARN ribosomar. Este tipo de estudio permite
identificar
muchos ms microorganismos ro que ha permitido vatorar
ra compiejidad real
de la microbiologa del suelo.
- Localizacin de los microorganismos en el suelo. Los microorganismos
edficos no se encuentran ocupando todo el volumen interparticular en el suelo
sino que se localizan adheridos a la superficie de las particulas del suelo. Esto
supone una fraccin relativamente pequea (<1%). El proceso de adsorcin de
los microorganismos a la superficie de las partculas es complejo y no
completamente comprendido: parece ser que las interacciones electrostticas
entre las partculas de arcilla y las paredes celulares bacterianas son de gran
importancia; pero no siempre pueden explicarse por interaccin electrosttic
simple la retencin de las bacterias por el suelo y hay que considerar otras
fuerzas dbiles como las interacciones de van der Waals. Por otra parte, en
ciertos casos se producen estructuras de los microorganismos que coadyuvan a
su fijacin al substrato, estas estruciuras son del tipo de fimbrias y Pili en las
bacterias.

En cualquier caso, la organizacin de los microorgansmos en bopelculas

((biofilms)) en los suelos es de importancia capital para entender la biologa de
estos ecosistemas. En laS biopelculas Se alcanzan concentraciones elevadas
de nutrentes fijados que en disoluciones se encuentran demasado diludos
como para permitir el crecimiento normal de los microorganismos.

Un aspecto importante de la adsorcin de los mdoorgansmos por

interacciones electrostticas con los materiales del suelo (lo que explica que
suelos orgnicos o arcillosos puedan presentar fecuentos microbianos muy
superiores a los de suelos arenosos, por ejemplo) es el efecio de tampn que
desempean las arcilla. Las superficies fuertemente cargadas' como la
arcillosa, desempea un doble papel: (1') aporta nutrientes para el crecimiento
de los microorganismos actuando como ntercambiador inico' lo que
incrementa la concentracn efectiva de los nutrentes; y (2") acta como
tampn que permite eliminar o disminuir los efectos nocivos de una excesva
acidificacin del microambiente bacteriano del suelo producido por la excrecin
de cidos oor las bacterias. En este sentido, se ha relacionado en ciertos suelos
 164

el predominio de hongos patgenos lFusarium oxysporum var. cubana,

causante de la roa de la banana; e Htsfoplasma capsu/afurn causante de la
histoplasmosis humana) con los bajos niveles de arcillas de forma que las
poblacones bacterianas estaban desfavorecidas en estos sueios como
consecuencia de Ia acidificacin del microambiente, mientras que en suelos
ms arcillosos el efecto tampn de la arcilla permte que las poblaciones
bacterianas predominen y controlen la proliferacin de estos hongos
indeseables.

- La atmsfera del suelo: La difusin del oxgeno est muy limitada por lo que
se produce rpidamente una situacin de, al menos, microaeroflia en el suelo.
Como consecuenca de las actividades respiratorias de los mcroorganismos las
concentraciones de CO2 pueden ser suficientemente alts para dificultar el
crecmento de ciertas formas bacterianas aerobias al mismo tiempo que
estimulan el crecimiento de ciertas especies fungicas que crecen mejor en estas
tensiones de COz reltivamente elevadas que en las ms bajas de la atmsfera
normat.

Existen otros gases en el suelo cuyo efecto puede ser variado sobre los
microorganismos- Por otra parte, ciertos microorganismos pueden producir
gases que tenen importancia agrcola: as, ciertas bacterias y hongos son
capaces de producir eiileno (CzHe) que es un regulador del crecimiento vegetal
y a concentracones relativamente altas (tsppm) puede inhibir el desanollo y
crecimiento de los ndulos radiculares.

- Distribucin y composcin de la microflora del suelo: Como se ha indicado

anteriormente, el aislamiento, recuento e identificacin de los microorganismos
del suelo plantea problemas de gran complejidad, Por esto, los resultados de
los estudios de recuentos de pobiaciones mcrobianas del suelo son de dificl
interpretacin desde el punto de vista estadstico y, con seguridad, olvidan
muchos tipos de microorganismos no cultivables en absoluto.
 '165

Se ha intentado en muchas ocasiones reaiizar estudios sistemticos de la

relacin entre la abundancia microbiana y las caracterstrcas dei suelo_ Como
era de esperar, los suelos neutros, hmedos y con gran contenido en materia
orgnica presentan recuentos microbianos superiores a los de suelos menos
propicios para organismos quimioorgantrofos. Sin embargo, no debemos
olvidar que, probablemente, nuestros sistemas de cultivo y enumeracin
seleccionen preferentemente el po de microorganismos que podemos
encontrar en estos tipos de suelos. Dentro de un suelo determinado se ha
comprobado que los estratos superores de cada horizonte (A, hmico; B

hmico in{erior) presentan recuentos bacterianos superiores a ios estratos

inferiores de cada horizonte. Actualmente no es posible delimitar un lmite
inferior para la aparicin de formas microbianas; por debajo de los estratos
profundos, en situacones de presiones muy elevadas se han podido detectar
bacterias y arqueobacterias; asimismo se han podido detectar arqueobacierias
en depsitos petrolferos, aunque la interpretacin de estos resultados es

complicada por la posibldad de contamnaciones con organismos de estratos

superiores anastrados a los ms profundos durante la perforacin.

se han observado variaciones estacionales en los niveles de las poblaciones

bacterianas: en general, los niveles son mayores durante el verano que durante
el invierno; lo que es explicable en trminos de efecto de la temperatura sobre
elcrecimiento. Asmismo, se han encontrado incrementos importantes del
nmero de microorganismos durante el periodo de deshielo primaveral Esto
puede ser debido a la accesibilizacin de los restos orgnicos gue han estado
congelados durante el invierno y que se liberan a causa de la disgregacin
fsica del suelo producida por el deshielo. un efecto similar a este lo produce el
arado del terreno y, presumiblemente, efectos similares se produzcan en
cualquier tpo de tratamiento que suponga una mezcla de los componentes de
los diferentes estratos edficos puesto que, de esta forma, las atmsferas
anaerobias creadas por la respracin y el agotamiento de los nutrientes
orgnicos quedan eliminados o notablemente reducidos. En este sentido, a
 166

modo de ejemplo, considrese que la fermentacin producida durante un

proceso de compostaje puede dirigirse hacia procesos aerobigs (bacilos) o
anaerobios (enterobacteras) alterando el rgimen de volteo del compost' lo
que, al variar la disponibldad de oxgeno, determina las poblacones

bacterianas predominantes.

Desde el punto de vista de los tipos de microorganismos predominantes hay

que estudiar varios aspectos: {1"), si consideramos la biomasa, el grupo
principal de microorganismos lo constituyen los hongos (Penicillium,
Cladosporium, Cephalosporium, Aspergillus). Este tipo de microorgansmos no
es fcilmente cuantificable en recuentos estndar puesto que, en este caso, se
enumeran nicamente las esporas y no la biomasa total y, por otra parte, existe
un nmero importante de especies fngicas no aislables (hongos micorriza no
cultivables), (2') La mayor riqueza en biodiversidad la presentan las bacterias
que incluyen un nmero muy grande de especies. Como ya se ha indicado en
otra parte, hay que considerar que, adems de las especies actualmente
conocidas (en torno a las 5000) probablemente existe un nmero an mayor de
especies no cultivables que forman parte de la microflora edfica. Los grupos
principafes pertenecen a bacterias Gram-positvas de los gneros Bacillus,
Mbrocoeus y a diversos tipos de bacterias corineformes de los que puede ser
un ejemplo Arthrobacter y Nocarda. Son muy importantes en el suelo los
estreptomicetos productores del tpico olor a tierra hmeda, e importantes
industrialmente como fuente de metabolitos secundarios entre los oue destacan
antibiticos. Por ltimo, hay que considerar importante la presencia en estatos
anaerobios de bacterias del gnero Clostrklium.

Las bacterias Gram-negativas estn representadas principalmente por el

gnero Pseudomonas que coloniza una gran variedad de microambientes
debido a su versatilidad nutricional. A pesar de su nmero no excesvamente
alto tienen importanca ecolgica dos grupos de bacteras Gram-negativas: las
cianobacterias, colonizadoras primarias de nuevos suelos y las bacterias
 167

nitrifcadoras {Nrlrosomonas, Nitrobacter), los grupos oxidantes de azufre,

bacterias fijadoras de nitrgeno, etc. Finalmente, (3o) se pueden detectar en el
suefo especies de algas y de protozoos que no difieren notblemente de las
encontradas en medios acuticos. Sin embargo, en el caso de las algas, su
identificacin puede ser especialmente difcil debido a que presentan
morfologias aberrantes con frecuencia.

Es mportante valorar los ritmos de crecimiento microbiano en el suelo. Los

estudios ms finos realizados sobre la tasa de crecimiento bacteriano en el
suelo permiten suponer que, en promedio, el empo de generacin ronda los
diez das. De hecho, se considera que en la mayor parte de los casos las
bacterias se encuentran en una fase de latencia permanente (que seria
relativamente equivalente a la fase estacionaria o al periodo de adaptacin
previo al crecimiento exponencal) durante largos periodos de tiempo. Es ms:
en algunos casos se ha podido estmar que la absorcin de nutrentes por los
mieroorganismos del suelo no les permite crecer sno que toda la energa se
dirige hacia las reacciones de mantenimiento. En este sentido, el crecimiento de
los microorganismos en e{ suelo se producira por fases de <estallido> que
seguiran inmediatamente a los aportes de elementos nutritivos limitantes.

4.5.3 Ciclos biogeoqumicos y su relacin con los microorganismos.

PtA. camen. 2007.17

La integracin de las.actividades metablicas de todos los microorgansmos de

un ecosistema es la cusa de una gran parte de los cambios que se producen
tanto en sus comoonentes biticos como en los abticos.

ti P4. carmen. 2oo7 opcnp.

 168

supone un cambio de materiales entre las partes biticas y abiticas de la

biosfera. Los microorganismos, a travs de sus actividades metablicas,
desempean un papel importante en el intefcmbo de maierales entre los
diversos apartados de la biosfera.

Los principales elementos integrantes de la materia viva son los ms

ntensamente ciclados por los microorganismos: el carbono, hidrgeno,
oxgeno, nitrgeno, fsforo y azufre.

La actividad humana que orgina una liberacin de elementos alterando los

equilbrios de las etapas de los ciclos biogeoqumicos puede tener gran
rmportancia en el desarrollo de las poblaciones microbianas, de plantas y de
anmales y en la productividad de los ecosistemas partculares.

- Ciclos biogeoqumicos representatvos.

- Ciclo del carbono. El ciclo comprende la transferencia del bixido de carbono

y el carbono orgnico entre la atmsfera, donde est principalmente en forma
de COz, y la hidrosfera y litosfera donde est en forma de carbono orgnico e
inorgnico. Ei proceso de fijacin del carbono atmosfico se produce por
microorganismos fotolttrofos y quimiolittrofos. El carbono fijado (reducido)
vuelve a la atmsfera como resultado de la respiracin-

La formacin de metano (CH) por bacterias metangenas es una desviacin

del ciclo llevada a c.abo por arqueobacterias. El metano no es utilizable por
otros organismos. La principal fuente de metano atmosfrico es la bigena y,
dentro de ella, la produccin de este gas durante el proceso de termentacin
que tiene iugar en ei rumen de los herbvoros.

- Relacones trficas. EI carbono fijado por los productores primarios

(produccin primaria bruta) comenza a ser consumida por los propos
productores primarios y mineralizado por ellos a CO2- Slo una parte de la
 lAo

produccin primaria (produccin primaria neta) sirve de alimento para los

productores seeundarios y as se forman las cadenas trficas_

La mayor parte del crbono se pierde de forma en forma de COz por lo que
conforme se asciende en fa cadena trfica la cantidad de biomasa es menor.
Por otra parte, el balance entre el carbono fijado por la fotosntesis y el
consurnrdo durante la respiracin da iugar a una acumuiacin o reduccin de la
biomasa total del ecosistema. Normalmente, entre el 85% y el 90% de la
energa acumulada en forma de carbono orgnico en un nivel trfico es
consumda por la resprracin durante ia tansferenca al siguiente nivel. por
esto, ia ntidad de biomasa en niveies trfeos superores es cada vez menor.

Se pueden establecer cadenas trficas de materia viva (organismos

depredadores) y cadenas trficas de materia mueda (detritus) en la que la
actvidad de los microorganismos conduce a la mineralizacin (produccin de
COz) o la reinsercin en el ciclo (formacin de biomasa por los microorganismos
consumidores de detritus) biolgico del material inutilizable.

Los microorganismos son los principales responsables de la mineralizacin de

la materia orgnica del detritus. Los distintos productos orgnicos tienen
diferentes tasas de mineralizacin por los microorganismos. As mismo, en la
velocidad de mineralizacin microbiana tene una gran infiuencia el pH,
temperatura, humedad y grado de aireacin del suelo; factores que influyen
tambin el los tpos de poblaciones microbianas que van a desarollar los
respectivos procesos.

- Movilizacin e
inmovilizacin microbiana del carbono. La actividad
microbiana puede hacer el carbono inaccesible a los consumidores mediante
transformaciones que lleven a la formacin de humus (restos de material
vegetal difcilmente metabolizable) o a la produrcin de metano. As mismo, la
conversin de formas de carbono no digestibles (celulosa, materia fecal) en
bomasa utilizable es resultado de la actividad microbiana.
 170

- cicto del hidrgeno y del oxgeno. son cclos ntimamente relacionados con
el del carbono. El sitio de reserva principal de ambos elementos es el agua y el
ciclo comprende reacciones de oxidorreduccin cOmponentes de los procesos
respratorios y de fotolsis del agua.

- Acvidodes microbianas y oxgeno. El metabolismo microbiano est

condicionado por la disponibilidad y tolerancia al oxgeno. El nivel de oxgeno
en un ambiente puede medirse por e[ potencial de oxidorreduccin del mismo.
La actividad microbiana {excepto en ei caso de la fotosntesis oxignica) tiende
a reducir el potencial redox y a
dificrltar la vida aerobia. Muchos
microorganismos pueden continuar su actividad en condiciones anaerobias;
pero esto no es posible en el caso de animales.

- pH y activida&s microbianas. La actividad microbiana causa cambios en el

pH del sueto o agua en la que se produza. Estos cambos en el pH pueden
tener efecfos selectivos fuertes sobre otras bacterias (no sufcientemente
acidfilas para tolerar ambientes extremos cuando stos se produzcan) y tiene
efectos qumicos sobre la solubilidad de gases en el agua, la disponibilidad de
nutrientes cuya solubilidad vara y la concentracin de metaes pesados en los
ecosistemas.

- Ciclo del ntrgeno-

- Filacin det nitrgeno. Proceso de reduccin del Nz atmosfrico, no

asimilable, a NH- asimilable por las planl.;as y, a travs de ellas, por toda la
cadena trfica. La frjacin de nitrgeno se produce nicamente Por bacterias en
condiciones anaerobias y requiere el consumo de una gran cantidad de energa'
 tt I

La fijacin de nitrgeno supone unos 2x108Tm al ao (unas g veces la

produrcin anual de abonos nitfogenados).

- Amonificacrrin. Consiste en la liberacin del NH* de las molculas

inorgnicas. Es un proceso microbiano producido por microorganismos
ureolticos y por especies que posean desarninasas.

- Nitrificacin Proceso en el que ciertos quimiolttrofos utilizan la energa

liberada en la oxidacin del NH* para sus reaccones metablicas. Este
proceso es muy poco eticiente, por lo que es necesaria la oxldacin de una gran
cantidad de substrato para que pueda producirse un crecimiento apreciable de
este tipo de microorganismos. Por otra parte, el proceso es obligadamente
aerobio.

La nitrificacin produce un cambio notable en el estado de oxidacin del

nitrgeno fijado al pasar de forma catinica {NH4') a aninica {NO ). En suelos
arcillosos de gran carga negativa, el NH- queda retenido con ms facilidad,
mentras que el NOa'no se retiene y pasa a aguas subterrneas con lo que sale
del sistema. Un efecto colateral negativo de la nitrificacin es que los nitratos
son txicos para animales ya que pueden dar lugar, enke otros efectos
ndeseables, a la produccin de nitrosaminas y de otros agentes cancerigenos.
En ciertas ocasiones, se han utilizado nhbidores de ta nikificacin para reducir
estos efectos en el suelo.

- Desnitrificad on. Se produce por la activdad de microorganismos gue, en

condiciones de anaerobiosis, son capaces de utilizar NOs- y NOz- como
aceptores finales de electrones en pro@sos de respiracin anaerobia. Los
productos finales son diferentes estados de oxidacin del nitrgeno (NO, N2O,
N2) dependiendo de la disponibilidad de materia orgnica, de ia concentracin
de nitratos y del pH del suelo. Este proceso ciena el cido del nitrgeno: es una
redurcin desasimiladora.
 172

- Cicto del azufre. El ciclo comprende varios tipos de reacciones redox

desanolladas por microorganlsmos:

1.- Ciertos tipos de bacterias son capaces de extraer el azufre de compuestos

orgnicos (proceso de desulJuracin) que rinde so= en condiciones aerobias y
HzS en condiciones anaerobias.

2.- Bacterias anaerobias respiradoras de SO+= que producen la acumulacin de

HzS hasta alcanzar con@ntraciones txicas.

3.- Bacterias fotosintticas anaerobias pueden usar el HzS como donador de

electrones en sus procesos metablioos dando lugar a depsitos de azutre
elemental (So).

4.- Bacterias quimiolittrofas que utilizan el HzS como fuente de energa para la
producsin de ATP.

En muchos casos se producen asociaciones entre bacterias formadoras y

consumidores de HzS en un sistema balanceado. En todos los caos, el So es la
forma no asimilable y slo puede entrar en el ciclo por la accin de algunas
bacteras que son cpaces de oxidarlo a SO=.

- Drenaje cido de las minas. En minas de carbn en muchas ocasones hay

una contaminacin con prita (Fe2S) que se oxida rpidamente en contacto con
el aire y por accin mlcrobiana. La oidacin de estos sulfuros puede dar lugar
a la produccin de grandes cantidades de SOHz que acdifica el suelo
impidiendo todo crecimiento posterior de planias o de bacterias no acidfilas
extremas. Este cido puede alcanzar el agua de los ros al escunir de las pilas
de carbn que estn sufriendo el proceso.
 t/J

- Otros ciclos.

' Fsforo- Este ciclo no est sometido a procesos redox porque ra forma
esencial del fsforo (tanto orgnco como inorgnico) es el fosfato. La actividad
microbiana reside en ta capacidad de produccin de otos cidos orgnicos que
aumenten o dismnuyan la solubldad de los fosfatos en el ecosistema
hacindolos ms o menos accesibfes a otros organismos.

El fosfato suele ser lmtante del crecimiento. una entrada masiva de fosfatos en
ef sistema (como ocurre debido al empleo masivo de detergentes fosfatados)
aumenta la producvidad del ecosistema con lo que la materia orgnica
aumenta considerablemente. cuando esta materia orgnica comienza a
descomponerse, se incrementan los procesos de respiracin y, por
consiguiente, el consumo de oxgeno, lo que genera un incremento de
anaerobiosis conocido como pro@so de eutrofizacin

- Hieno. El ciclo de este elemento est asociado a la conversin entre sus

formas Fe2' ms solubres que ras Fe3*. Los mcroorganismos que oxidan hierro
(quimiotittrofos) producen cambios en la accesibitizacin del elemento a otros
miembros del ecosistema.

' calcio' El ciclo biogeoqumico del calcio consiste en variaciones de su

solubilidad debido a la formacin de compuestos carbonatados ms
(Ca(COsH)z) o menos (CaCOe) como consecuencia de la liberacin oor
microorganismos de cidos orgnicos que desplacen el equilibrio entre ambas
formas.

- Metales pesados. Los microorganismos pueden cambiar el estado de

oxidacin o de modificacin (metilacin, por ejemplo) de metales pesados de
manera que aumenten o disminuyan su toxjcidad o su adsorcin a las
membranas y estructuras biolgicas, lo que influye determnantemente en su
acumulacin a lo largo de la cadena trfica.
 174

4.5.4 Microbiologa del agua.

APELLA, M. Y ARAUJO, P 2004.18

La variabilidad microbiolgica de las aguas naturales abafca numerosos

organismos e incluye clulas eucariotas (algas, protozoarios y hongos)' lutas

procariotas (bacterias) y virus (mcroorganismos con capacidad de sntesis
nula).

- contienen necesariamente clorofila para la

^Atgas, Estos microorgansmos
por
actividad fotosinttica, sin embargo el color verde puede estar enmascarado
otrospigmentos(carotenodes)presentes.Sonaerobias,yenambentescon
poco oxgeno, mueren, flotan y se descomponen produciendo mal olor'
Podemos encontrar las siguientes famlias de algas:

. Chlorophyta o algas verdes que huelen a pescado o hierba'

. Cyanophyta o algas verdes azuladas con olores desagradables que puecten
producir sustancias txicas.
. chrysophita son de color amarillo verdoso y a menudo generan opres
aromticos (geranios) o huelen a pescado, por ei. Aulococeira y cycloteila.

Protozoaros. Frecuenternente en el agua contaminada con heces

se
-
encuentran dos protozoarios parsitos con incidencia en salud humana,
responsables de ePidemias:

1E 2oc4 3p ;itp
npELrA. lvl. y ARArJo. P.
 175

' Giadia lamblia: es fragelado con un tamao de I s pm y se transmite al

hombre a travs de agua contaminada con materia fecar. Las clulas
del
protozoario producen un estado de reposo denominado gu:sfe.
Los qustes al
ser ingeridos germinan y causan grardrasis, enfermedad caracterizada por
daneas, calambres intestinales, flaiulencia, nauseas, sntomas que pueden
ser
agudos o crnicos. La giardisis es una de ras enfermedades parasitarias
de
origen hdrico ms comunes.

'cryptosporidium paNum'. es un parsto de hombres y animares de tiamao

muy pequeo (2-5lm), redondeado que crece en el interior de las clulas
del
epitelio mucoso de intesno y estmago. Los quistes infecciosos producidos por
este protozoario poseen una pared muy gruesa. Los quistes de cryptosporfuiium
son mucho ms resstenies a ra croracin que ros de Giardia. La
cnpfoposlosrs
es una infeccin que se caracteriza por dolores estomacales, nauseas,
dianea y
deshidratacin.

- virus. El 87o/o de ras enfemedades virares transmitidas por er agua son

causadas por el virus de la hepatitis (adenovirus y rotavirus).

' Bacteas- Ms der 80% de ras bacterias descriptas en er Manuar de Bergey

pueden aislarse del agua. Teniendo en cuenta ra respuesa
a la tincin de
Gram, a continuacin se mencionan y describen algunas de las ms
importantes. Entre ras especies de Bacterias Gram negat*as que
se han
aislado de aguas, podemos mencionar a ras pertenecientes a ros gneros
Pseudornonas, Ftavobacterium, Gailionetta, Enterobacteriaceae, Aerornonas,
Vibrio, Achromobacter, Alcaligenes, Bordetetta, Ner.ssena, Moraxeila y
Aanetobacter.

Las pseudomonas son ras ms comunes en napas freticas debido

a su
vesatilidad respecto a fuentes de carbono, y a sus bajos
requerimientos
nutriconares. Efias son baciros psicrfilos, presentan flageros pertricos,
 176

producen pigmentos (verde, azul verdoso, rojo, marrn) y no forman esporas'

La morfologa y el hbitat de muchas pseudomonas coincide con el de bacterias
entricas como Escenblra coli pero se diferencian en que no fermentan
azcares. Segn el Manual de Bergey este grupo admite 7 especes, sendo
Pseudomonas aeruginosa la de mayor relevancia sanitaria, es un patgeno
oportunista por excelencia y el agente etiolgico principal de infecciones en vas
urinaria, intestino, odo yheridas. Por su relativa resistencia al cloro es
considerada un indicador de eficiencia de la cloracin. Su presenca en
sistemas de almacenamiento, tranque, y cisternas, responde a un estado
deficiente de dichas instalaciones. El control de pseudomonas, al igual que el
de bacterias aerbicas, debe intensificarse en redes expuestas a contaminacin
o cuando se comprueba cloracin deficiente.

Las Ftavobactenum es un gnero ampliamente distribuido en aguas y suelos.

No ha sido encontrado en sedimentos de acuferos profundos pero si en las
aguas que se extraen de ellos. Por esta razon, se duda si las flavobaderias se
encuentran naturalrnente en un acuifero o smplemenie colonzan el pozo luego
de su perforacin. Son bacilos que se caracterizan por falta de movilidad y
produccin de pigmentos de color amarillo.

Los bacilos del gnero Gallionella se caracterizan por ser quimiolitfofas,

obtienen energa por oxidacin de F e2+ a Fe3+ y la precipitacin usualmente
de hidrxidos de (lll), en o sobre las colonias, les otorga una coloracin marrn
caracterstica. Ellas crecen en lugares donde exisien mezclas de aguras
aerobias y anaerobias, y donde abunda el ion Fe2+' As, en pozos donde existe
una interfaz aero-anaerbica, su desarrollo causa obstruccin por la

precipitacin de oxihidrxidos de hieno (lll).

Las enterobacterias o EnferO bacteriaceae son las ms importantes dentro de

los anaerobicos facultativos y su presencia en agua est asociada a
contaminacin fecal. Este grupo de bacterias habita naturalmente el intesno de
 ,t7i

los animales. son baciros no esporurados, no mvires y si ro son es por flagelos

de insercin pertrica, con requerimientos nutricionales relativamente simples.
Generalmente se identifican por su capacidad para fermentar glucosa por va
glucoitica dando cidos como producto tnal. EscherchLa col, habitante
normal
del intestino humano, es utilizada como indicador de contaminacin fecal de
aguas. Las cepas patgenas de E- coli causan infecciones del tracto intestinal
(generalmente agudas y no presentan mayores complicaciones, excepto en
nios y adultos con deficiencias nutricionales). otros ejemplos de patgenos
humanos de este grupo son shigella, sarmonetta y Ktebsierta. shigela
dysenfenae es causante de la disentera bacilar, sa/rno netta typhimurium y typht
producen gastroenteritis y fiebre tifoidea respectivamente.

El grupo vibio est integrado por bacilos curvados, anaerobios facultativos,

poseen flagelos polares aunque algunos son pertricos. se diferencian de las
Pseudornonas en su metabolismo no fermentavo. Estn presentes en aguas
dulces o marnas. vbria cholerae, especie ms representativa de este gnero,
es patgeno para humanos y responsable del ctera. su transmisin es casi
exclusivamente por va hdrica.

otras especies patgenas importantes para el hombre que se pueden encontrar

en muestras de agua pertenecen a los gneros Nerssen'a, Moraxella y
Aeinetobacter. Los cocos del gnero Ner,ssen4 aslados de sedimentos de
acuferos aerbicos, son causantes de gonorrea {Nerssenb gonorrhoeae) y
meningitis (Nelssenb meningitidis). Las especies de Moraxella y Acinetobader
son bacilos y se transforman en @cos solamente en la senectud, y por ello se
Ias propone como cocobaciros. Argunas especies de Moraxelra han sido
asladas de aguas profundas originadas de acuferos aerbicos y
representantes del gnero Acinetobacter se encuentran frecuentemente
tambin en aguas subterrneas aerbicas.
 178

Entre las Bacterias Gram positivas. No representan un grupo muy difundido en

agua, sin embargo induye algunos patgenos humanos aislados especialmente
de aguas subtenneas.

Los cocos ms comunes pertenecen a los gneros Microca@us'

Staphylocoaus y Streptococcus. Los micrococos y estafilococos son aerobios y
tolerantes a altas concentraciones salinas que permite diferenciarlos de los
estreptococos. Varias especies de los dos primeros son mportantes patgenos
humanos, aunque no existe certeza acerca de su hbitat original, la bibliografa
las considera procedentes de aguas subtenneas. El gnero Strepfococcus
incluye a Enterccoccus faecalis, patgeno humano que habita normalmente en
el ntestino de hombres y animales por lo que es un indicador de contaminacin
fecal de aguas.

Las bacterias esporulantes, pertenecientes a los gneros Bacillus y Clostidium

presentan metabolismo aerbico y anaerbico respectivamente. A partir de
suelos y acuferos aerbicos se aslan especies incluidas en el gnero Bacillus;
y a partir de suelos, sedimentos, aguas subterrneas anaerobias y ltima
porcin del tracto ntestinal de animales se pueden encontrar especies de
Clostridium. Algunas especies son patgenos para animales, generalmente
debidoa la produccin de poderosas exotoxinas: la del BacIlus anfraco,
conduce al desanollo de antrax, enfermedad de anmales que puede
transmitirse a humanos fzoonos.s) y la del Clostridium fefani que ocasiona una
enfermedad en humanos caracterizada por tetanizacin de msculos, razn por
la cual recibe el nombre de ttano.
 179

- Bacterias indicadoras de contaminacin. Las condiciones bacteriolgcas

del agua son fundamentares desde er punto e sta sanitario. La norma
bacteriolgica de cadad establece que el agua debe estar exenta de
patgenos de origen entrico y parasitario intestinal que son los responsables
de transmtir enfermedades como sa/monelosis, shrge/osis, amebiasis, etc.

Los microorganismos indicadores de contamnacin deben cumplir los

siguientes requisitos: {ciles de aistar y crecer en el laboratorio, ser
relativamente nocuos para el hombre y animates; y presencia en agua
relacionada, cualitativa y cuantitativamente con la de otros microorganismos
patgenos de aislamiento ms difcil. Tres tipos de bacterias califican a tal fin:

. Coliformes fecales: indican mntaminacin fecal.

. Aerobias mesfilas: determinan efectividad del tratamiento de
aguas_
. Pseudomonas: sealan deterioro en la catidad del agua o una
recontaminacin.

Desde el punto de vista bacteriolgico, para definir la potabilidad del agua, es

precso investigar baclenas aerobias mesfilas y, coliformes totales y fecales.
La gran sensibilidad de las bacterias aerobias msfilas a los agentes de los
agentes de cloracin, las ubica como ndcadoras de la eficacia del tratamiento
de potabilizacin del agua.

Las bacterias coliformes habtan el tracto intestinal de mamferos y aves, y se

caracterizan por su capacidad de fermentar lactosa a 35"C. Los gneros que
componen este grupo son Eschenbh ia, Klebsiella, Enterobacter, Serrafra,
Citrobacter y Edwardsiella. Todas pueden existir como saprofitias
ndependentemente, o como microorganismos intestnales, excepto el gnero
Fschenchra c'yo origen es slo fecal. Esto ha llevado a distinguir entre
coliformes totales (grupo gue incluye a todos los coliformes de cualquier origen)
y coliformes fecales {trmino que designa a los colformes de origen
 180

exclusvamente intestinal) con capacidad de fermentar lactosa tambin a

44,5.C. La existencia de una contaminacin microbiolgica de origen fecal se
restringe a la presencia de coliformes fecales, mientras que la presencia de
coliformes totales que desarrollan a 35"C, slo indica exstenca de
contaminacin, sin asegurar su origen. LOs enterococos fecales cuyo desarrollo
ocure a 35"C se usan como indicadores @mplementarios de contaminacin
fecal.

La vaiidez de todo examen bacteriolgico se apoya en una apropiada toma de

muestra (recipiente estril de boca ancha y metodologia precisa), y en las
adecuadas condiciones de transporte desde el lugar de la fuente de agua hacia
el laboratorio (refrigeracin, tiempo)"

El sistema de conservacin de la muestra debe ser confiable, y la msma

analizada inmediatarnente o al cabo de un corto perodo entre extraccin y
anlisis. El anlisis cuantitavo de bacterias indicadoras de contaminacin en
una muestra de agua puede realizarse por dos metodologas dlferentes:

. Recuento directo de microorganismos cultivables por siembra de la muestra

sobre o en un medio de cultivo con agar.

, Recuento indirecto (basado en clculos estadsticos) despus de sembrar

dluciones seriadas de la muestra en medios de c-rltivos lquidos especficos' Se
considera, al cabo de una incubacin adecuada, los nmeros de cultvos

<positivos> y negativos>. Esta metodologa se denomina <Tcnica de los Tubos

Mltiptest y los resultados se expresan como nmero ms probable (NMP) de
microorganismos-

Adems de otros mtodos, se puede recunir a aquellos en los que se aplica

biologa molecular como por ejemplo, la tcnica de hibridacin in situ por
 181

fluorescencia (FlsH) utilizando sondas marcadas en base a secuencia

nucleotdica del gen 165.

En este captulo slo se describir el primer mtodo en er cuar la muestra

se
concentra por filtracin sobre membrana, denomin ada <tTcnica de Ia
Membrana FiltranteD. En ella, se procede a filtrar un volumen determinado de
muestra (normalmente 100 mL) a travs de membranas de steres de celulosa
generalmente con dimetro de poros de 0,45
Um y en algunos casos de 0,22
ym. Posteriormente, la membrana se deposita sobre un medio de cultivo
selecvo y bajo condiciones favorables (temperatura y empo de incubacin) y
sobre la membrana desarrollan colonias aisladas con aspectos caractersticos
que permiten la identificacin y el recuento. conociendo el volumen de muestra
filtrada es posibte determinar el nmero de UFC por unidad de volumen.

La obtencin de resultados confiables requiere un intercambio de nutrientes a

travs de los poros de ra membrana, por eilo se debe evitar ra filacin de
guas con alto contendo de material en suspensin que pueden obstruir las
membranas. Adems, el nmero de colonias desarrolladas sobre la membrana
debe ser inferior a un determinado valor (variable segn los microorganismos y
la composicin del medio que condiciona el tamao de las colonias)
generalmente comprendido entre 80 y 100. A valores superiores, la proximdad
de las colonias, puede conducr a resultados inexactos.

Los medios de cultivos usados, las temperaturas y tiempos de incubacin, y el

color de las colonias tpicas de bacterias indicadoras de contaminacin se
detallan en el cuadro 6.
 182

color de l8s colonias de

Cuadro 6. Medios de cultivo, tempersturas y tiempos de incubacin'.y
aguls bactelas ltdcadores de coniamnacion

sistemas acuosos
La importanca de conocer las especies presentes en los
naturales y el comportamiento en su ambiente' radica
en la posibitidad de
y de esta manera
desarrollar nuevas tecnologas que logren su eliminacin
controlar enfermedades de origen hdrico'

4.5.5 Relaciones entre poblacones

MATEos, Pedro F. 20051s .

positivas o negativas' Las

- Interacciones nfre poblaciones, Pueden ser
que las segundas ayudan a
primeras permiten ocupat nuevos nichos, mientras
eliminarpoblaclonespocoadaptadas,amantenerequilibrioentrepoblacionesy
proteger las poblaciones de la llegada de especies intrusas

- Relacin de neutratisfio' Se lleva a cabo cuando dos poblaciones se

encuentransimu|tneamenteene|ambientesinqueexistare|acinentfee||as.
y se puede producir cuando la densidad
Este tipo de relacn es poco frecuente

t" F 2005 Op citp

,{,q.TEtls. P.,lto
 183

de poblacin es baja, aunque no siempre que es baja ra

densidad de pobracin
se produce neutralismo.

Por otra parte, ras fases de ratencia fa ;crecen er neuirarismo

as como ra baja
actividad metabrica de ra fase de ratencia, ras excepciones
son entre cuando
existen organismos capaces de atacr ras fases de
latenca de otros.

Por ltimo, la fase de ratencia favorece que no ocupen

er mismo nicho dos
cDmundades diferentes simurtneamente, sino gue
ro hagan de forma separada
en el tiempo.

- Reracin de comensarismo. Una primera pobracin modifica er ambiente y

favorece er crecimiento de ra segunda que, a su
vez, no eerce accin ninguna
sobre la primera

- Ejemplo 1 : anaerobios facurtativos cuya actividad

respratoria baja ros niveres
de 02 y favorece el crecimiento de anaerobios
estrictos.

- Ejemplo 2: una infeccin debirita ar husped de manera que

se facrita el
establedmiento de una infeccin secundaria por
un oportunista.

- Ejemplo 3: liberacin de factores de crecjmiento.

- Ejempro 4: oxidaciones gratuitas de nutrientes: (sinergismo entre

Mycobacteium v afaae y pseudornonas).

- Ejemplo 5: hongos coprfagos.

- Ejemplo 6: eliminacin de subsancias txicas por

bacterias (ejemplo H:s).

- Ejemplo 7: flora de la piel y flora epifita.

 184

- Relacin de sinergismo. Dos po.blaciones se favorecen mutuamente de

forma no obligatorra, se denomina tambin protocooperacrn'

Ejemplo 1: sintropismo (a{imeniacin cruzada) entre E coli y S' faecalis'

Ejemplo 2: formacin de la rizosfera en las plantas. Efectos sobre la

planta:

eliminacin de Hzs, solubilizacin de nutrientes, suministro de vitaminas

y

aminocidos, antagonismo frente a patgenos vegetales. Efectos sobre la

bacteria: liberacin de factores de crecimento.

- Relacin de mutualismo o simiosrs. su estabiecimiento es obligatorio para

la adquisicin de nuevas propiedades.

- Eiemplo: protozoos en simbiosis con esproquetas

-Ejemp|osdesimbiosismicroorganismo-microorganismo:formacinde
|quenesporhongosyalgas;Parameciumaure|aensmbiosisconbacteas
para tormar las cePas asesinas.

.Ejemp|osdesimbiosismicroorganismo-p|anta:fijacindenitrgeno;
micorrizas,esunasimbiosisentrehongoyplanta'porlogeneralet9S%delas
Dlantas forman micorrizas. Existen diferentes tiPos de micorrizas:

races
- Ectomicrorrlzas: estos microorganismos se formas externamente en las
como en robles, haYas Y conferas.

plantas herbceas
- Endomicorrizas: se Intefnan en la estructura radicular en
(patata, trigo, maZ, soja, etc.)

- Ejemplos microorganismo-animal: insectos gue cultivan hongos; en

rumiantes'

bioluminiscencta.
 185

-
Relacin de competencrb, Se presenta cuando dos microorganismos
compten por un mismo factor, como por ejemplo: alimentacin y espacio_ Se
presenta adems exclusin comoetitiva.

' Relacin de amensabmo. un microorganismo excluye al otro por inhibicion,

ya sea por la produccin de antibiticos o de cido lctico (antagonismo lctico).

- Relacin de parasitismo. son especficas y de larga duracin, donde uno se

beneficia del otro, como en el caso de los bacterifagos que parasitan bacterias
y las destruyen.

- Relacin de depredacia. se presenia cuando algunos microorganismos se

alimentan directamente fagocitando otros mcroorganismos de otra especie,
como por ejemplo: los protozoos (zooplancton que se alimentan del
fltoplancton).
 186

4.6 RESUMEN DE LA UNIDAD 4.

Los microorgansmos son parte fundamental de la cadena alimenticia de los

ecosistemas, pues son ellos quienes reciclan y transfoman la materia orgnica
en materia inorgnica que las plantas utilizan pafa su nutricin. Muchos de los
procesos de fermentacin, putrefaccin, enranciamiento de amentos, entre
otros, son producto del metabolismo microbiano. Sin los microorganismos' la
naturaleza como la conocemos hoy no sera viable, ya que no existe otra
especie de organismos en la naturaleza cpaces de realizar el proceso de
transformacin de la materia y su flujo se vera estancado.

Los microorganismos pueden hallarse en diferentes hbitats, uno de ellos, y

quiz el ms comn, es el suelo. En este lugar, los microorganismos juegan un
papel muy importante en la fabricacin de humus, en la fijacin de nitrgern y
en los ciclos biogeoqumicos como el del carbono, el oxgeno, el fsforo, entre
otros. El nitrgeno (N) es indispensable para la sntess de protenas y de
cidos nucleicos de todos los seres vivos. A pesar de su abundancia en la
atmsfera 78%, son muy pocos los organismos caPaces de absorberlo
directamente para utilizarlo en sus proesos vitales. Es as como el nitrgeno
para ser absorbido debe ser fijado por las bacterias del suelo. Este proceso de
fiacin consiste en la combinacin del N con otros elementos como el oxgeno,
el carbono o el hidrgeno para formar compuestos.

La fijacin del Nitrgeno en la biosfera puede ocunir por tres procesos: 1.

mediante la energa contenida los relmpagos, la cual rompe las molculas de

nitrgeno y permte que se combine con el oxgeno del aire, 2. a travs de
reacciones qumicas entre el hidrgeno y el nitrgeno cn la formacin de
amoniaco (NH3), proceso utilizado en la produccin de fertilizantes qumicos, 3.
Por accin de las bacterias nitificantes y algunas cianobacterias cpaces cle

fijar el nitrgeno atmosfrico.

 187

En el suelo no todos los microorganismos se encuentran en un mismo nivel, la

disponibilidad y el tipo de nutrientes, la temperatura, la cantidad de oxgeno,
entre otros fadores, condicionan su desarrollo y ubicacin en este ambiente.

Aunque existen muchos microorganismos del suelo que son muy importantes
para su formacin y fertilizacin, otros pueden ser patgenos de plantas o
animales, por lo que se debe tener cuidado con el contacto directo del suelo en
heridas tanto de organismos animales como de plantas. Algunos agrcultores,
optan por controlar los patgenos del suelo con pesticidas, sin embargo afectan
de igual manera a los microorganismos benficos causando alteraciones en
muchos de los procesos biogeoqumicos en los que particpan.

Por otra parte, el agua es un sistema vivo y dinmico en cuya superficie se

encuentran una serie de microorganismos no patgenos que por el contrario
permiten el desarrollo de fos ciclos biolgicos y qumicos y el mantenimiento del
equilibrio biolgico. La presencia de los microorganismos en concentraciones y
condiciones normales en las fuentes de agua es beneficiosa; pero anando se
incrementa su concentracin se altera la calidad del agua dificultando el
tratamento de esta y su uso. Los microorganismos que en forma normal se
encuentran en aguas superficiales son los siguientes: Cianobacterias, pueden
causar efectos txicos si su biomasa se incrementa por el efecto llamado
"floracin", producido por un aumento de nutrientes como N y P aportados por
el vertido de aguas resduales, de aguas provenientes de reas fertilizadas o de
ganaderas; microalgas fotosntticas o
productores primarios, cuando se
incrementan los nutrientes se produce un aumento anormal de algas con la
consecuente eutrofizacin de la fuente de agua, el exceso de algas verdes
(Chlorophytas) cusa alteraciones en el color del agua tomndose verde y con
olor y sabor desagradabies. Las microalgas diatomeas, son unicelulares o
coloniales, de plastos marrones o amarillos.
 188

que se utilizan como

Se encueniran tambin bacterias Pseudomona aeruginosa
indicadordelaca|idaddelagua,supresenciaenaguaspotab|esseconstituye
y animales ya que pueden ocaslonar
en un riesgo para la salud del hombre los
de defensa estn ciisminuidos'
eniermedades a personas cuyos mecanismos
Serafi rnarcescens una
De igual forma, extsten tambin Bacillus como
bacteriadelasdenominadasoportunstasporquenormalmentenoespatgena'
con ciertas deficiencias
pero pueden causar enfermedades en personas
orgnicas que facilltan la rnfeccin
As mismo' se encuentran coliformes como
Ctostridium peiringens son habitantes
Eschenchia coti' Streptocaccus faecalis'
y der hombre y se los considera mmo
normares der tracto digestrvo de animares
de
C/osfndrum spp' son indicadores
indicadores de la calidad del agua' Los
contaminacin de alto riesgo del agua'
son anaefobios suf ito-feductores' su
um peffringens su presencia en ras
repfesentante ms caracterstico es c/osfndr
aguas naturales produce malos olores
y' con mucha frecuencia'

ennegrecimentodelproductocuandostetienehieno'formandounprecipitado
Ctostridium adems de las aguas
oscuro de sulfuro de hlerro (Merck, 2000) Los
pueden provenir de fuentes ambientales como suelo'
sedimentos
superficiales
en descomPosicin' heridas infectadas de hombre'
marinos, vegetacin
animales Y alimentos

en el agua son beneficiosas

La mayor parte de bacterias que se encuentran
de los cuerpos de
Dermitiendotranstormacrones orgnicas y la autodepuracin
bacterias que son patgenas y pueden
agua. Sin embargo exste otro grupo de
y en los antmales
causar enfermedades graves en el hombre

son beneficiosos' pues contrbuyen a

En el caso de los protozoos, la mayora
acuticos al formar parte del
preservar el equilibrio de los ecosistemas
el
disminuye el oxgeno disuelto' altera
zooplancton; sin embargo su incremento y
agua' Otros protozoarios presentes en el agua son parsltos
pH y ei olor del
es el caso
causar enfermedades en el hombre y en los animales como
oueden
y Cryptosporidium'
de la Ameba' de la Giardta tamblia
 Patgeno: productor o causante de enfermedad.

Prin: Protena de carcier infercioso capaz

de autorreproducirse, procedente
de una protena naturar e inocua que se
transforma en una torma nociva,
resistente a las proteasas y a las
radiaciones ionizante y ulbavioleta,
responsabre de enfermedades como
ra encfaropata espongiforme bovina,
ra
de Creutfeldt-Jamb o el kuru.

Profiraxis: conjunto de medios que

sirven para preservar de enfermedades
al
rndividuoo a la sociedad. Sinnimo de tratamiento
preventivo.

Protena: Biomorcuras formadas por

macroporimeros de aminocidos,
o
macroporipptidos' Actan como enzimas,
hormonas y estructuras contrctires
que atribuyen a los organismos
sus propias caractersticas de tamao,
potencial
metablico, color y capacidades fsicas.

Retrovirus: Virus cuyo genoma est constituido

por ARN monocatenario, que
es trascrito de forma inversa en ADN
durante su irfeccin y replicacin. La
copia de ADN se integra en el ADN cromosmico
del husped. Esta copa,
llamada provirus, se transcribe en
ARN vrico y produce mrtipres ARNm que
codifican productos proteicos del virus
o de oncogenes. Los retrovirus mas
conocdos son ros vrus der slDA (vrH)
y de la ,eucema humana de ros
lnfocitos T (HTLV). Er mas utirizado
para ra transferenqa de genes
es er virus
de la leucemia murina de Moloney
(Mo_MLV).

Toxina: Protena responsable de la especificidad

funciona de certas bacterias,
que es venenosa pafa determinados
organismos. Enr-re ras mejor conocidas,
tanto por su estructura como por
ros mecanismos de accin, figuran
ras toxinas
colrc y tetnica que interaccionan
con ras cuias diana a travs de
ganglisidos de membrana
 188

se encuentran tambin bacterias Pseudomona aeruginosa que se utilizan como

indicador de la calidad del agua, su presencia en aguas potables se constituye
en un riesgo para la salud del hombre y los animales ya que pueden ocaslonar
enfermedades a pefsonas cuyos mecansmos de defensa esin ciisminuicios
De igual forma, existen tambin Bacillus como Serrafia rnarcescens una
bacteriadelasdenominadasoportunStasporquenorma|mentenoespatgena,
peropuedencausarenfermedadesenpersonasconciertasdeficiencias
como
orgnicas que facilitan la infeccin. As mismo, se encuentfan coliformes
Escheichia coli, Streptocacf;us faecalis, Clostidium perfringens son habitantes
y
normales del tracto digestivo de animales y del hombre se los
considera como
de
indicadores de la calidad del agua. Los Ctostridium spp, son indicadores
su
contaminacn de a|to riesgo cie| agua, son anaerobios su|fito-reductores'
presencia en las
representante ms caracterstico es C/osfndi um pertringens su
aguas naturales produce malos olores y, con mucha frecuencta'
ennegrecimientode|productocuandosteenehierro,formandounprecipitado
de las aguas
oscuro de sulfuro de hierro {Merck,2000) Los Clostridium adems
superficiales pueden provenir de fuentes ambientales como suelo'
sedimentos

marinos, vegetacin en descomposicin, heridas infectadas de hombre'

animales y alimentos.

La mayor parte de bacterias que se encuentran en el agua son

beneficiosas

permitiendotransformacionesorgnicasylaautodepuracindeloscuerposde
patgenas y pueden
agua. Sin embargo existe otro grupo de bacterias que son
causar enfermedades graves en el hombre y en los animales'

pues contribuyen a
En el caso de los protozoos' la mayora son beneficiosos'
preservar el equihbrlo de los ecosistemas acuticos al formar parte del
zoop|ancton;snembargosuncfementodisminuyee|oxgenodisue|to,alterae|
son parstos y
pH y el olor del agua. Orros protozoarios presentes en el agua
es el cso
pueden causar enfermedades en el hombre y en los animales como
de la Ameba, de la Giardta lamblia y Cryptosporidium'
 189

otro de los aspectos mportantes de ros microorganismos son sus relaciones.

En este punto, los microorganismos pueden establecer relaciones
de simbiosis
con otras especies, ya sea de mutuarismo o de parasitismo. Entre
efios mismos
pueden establecer relaciones cje competenca y
de depredacin.
 190

4.7 AUTOEVALUACION FINAL UNIDAD 4

Selecciona la respuesta correcta encerando en un crculo el literal

correspondiente.
el flujo de la
1. Los mcroorganismos juegan un papel muy importante enen la siguiente
r"UrL dentro e ,n ecoistJma. Lo anierior puede soportarse
afirmacin:

a. Los microorganismos contribuyen a la c'ntnua descomposicin y

ilnerazaciOn de-la materia orgnica en
putrefaccin'
b. Los microorganismos *to un puente entre el flujo de materia desde
""ii
tos organsmoJauttrofos hasta los hetertrofos' y transformada
c. La materia inorgnica ". i".iu for los microorganismos
plantas'.
en orgnica para el aprovechamiento de las
d. Los microorgansmos ,ilrp;r* materi orgnica al suelo a partir de la
degradacin de compuestos inorgnicos'

2.Ene|sue|osehanobservadovariacionesestacionalesen|osnivelesdelas
siendo mayores durante el verano que durante
el
ooblaciones bacterianas,
que:
invemo. Lo anterior es explicable debido a

a.Lasbactefiassenanadaptadomejora|aspocasde||uviaquea|aspocas
de secas. a las bacterias'
b. La luz durante las pocas secas afecla desfavorablemente
c, En inviemo hay mas nutrientes que en verano'
.l" itpt"tu condiciona el crecimiento de las bacterlas'
producida durante un proceso de
3. Considrese que la fermentacin
compostaje puede dirigirs" n"" p'octios
aerobios (bacilos) o anaerobios
lenterobacterias) atterani-ei il;J; ;lteo del compost' Esta situacin se
debe Posiblemente a que'

a.Lavariacinde|adisponibi|idaddeoxgenodeterminalaspob|aciones
bacterianas Predominantes'
b. Las caracterstcas q"'iti""t de. la materia orgnica en fermentacin
determtnan el tipo de bacteria que se desarrolla'
aerobios en el compostaie no
c. La presencia oe mcoolgnl;?; *?:lgPlit:
de oxgeno'
depende de las vanaooneJen la disponibilidad y anaefoDlcos'
i. i .oo.t est formado por mcroorganismos aerobios
 ,t91

4. La grfica siguiente muesrra e.r desanoiro de dos pobraciones

bacterianas (A
y B) bajo diferentes grados de pH en el suelo.

No. de
A
Eactrias B

De la grfica anterior se puede concluir que:

I l-i !?Pl3gi9" BA se adapta mejor a pH menor que 7 que ta A.

:c. ,.-"
La ryff:l9n
se adapta mejor a pH superior a 7 que la B.
poolacton A se desarrolla mejor en suelos
aicalinos que
la
d. La poblacin B se desanoila mejor en su.ros iiinos que B.
la A
5' La presencia de oror a pescado en fuentes de agua
estancada puede ser
ocastonada por la presencta de:

a Algas.
b. Protozoos.
c. Bacterias.
d. Virus.

6' Las condiciones bacteriorgicas der agua son fundamentares

de vista sanitario. La norma bacteriorgica ae catttdaa desde er punto
estabrece que er agua
debe estar exenta de patgenos de orilen
*te*
son tos responsabtes de transmitii entermeoles. v parasitado -;il;"];;
intestinar que
microorganismos D" to;
el que pertenece al grupo O" p"ra"itos entricos
es:
a. Cryptosporidum paNu m.
b. Cnnobactenas.
c. Bacterifagos.
d. Clostridium,
 192

GLOSARIO

ADN: corresponde a la sigla del cido desoxirribonucleico que es el mate-ial

gentico de la mayora de los seres vivientes'

de los
ARN: Sigla del cido ribonucleico presente en las elulas de la mayora
con
seres vivos, e incluso en virus. Participa en muchos procesos relaconados
laexpresingnica.Existenvariosiipos:e{cidoribonucleicomensajero
(ARNm),elcidoribonucleicoribosomal{ARNr)yelcicioribonucleicode
transferencia (ARN0

todas
Antibitico: Literalmente destructor de la vida' Trmino que comprende
ya sean
las sustancias antimicrobianas independientemente de su origen,
productos qumicos
denvadas de microorganismos (bacterias, hongos, etc ) de
sintticos o de ingeniera gentica.

Anticuerpo: Sustancia defensora (protena) sintetizada por el sistema

protena extraa (antgeno)
inmunolgico como respuesta a la presencia de una
que el anticuerpo neutraliza.

partir del cultivo de un

Anticuerpo monoclonal: Anticuerpo monoclonado a
nico tipo de clulas (un clon de hibridoma)'
y que contiene por tanto un slo

tipo de protenas (nmunoglobulina)'

una Protena' que

Antgeno: Sustancia extraa a un organlsmo' normaimente
desencadena como reaccin defensiva la formacin
de anti&erpos que
reaccionan especficamente con el antgeno
En general, cualquier sustancia
que provoca una respuesta lnmunitaria'
 Patgeno: Productor o causante de enfermedad.

Prin: Protena de carcier infeccioso capaz de autorreproducirse, procedente

de una protena natural e inocua que se transforma en una forma nociva,
resastente a ias proteasas ya tas radiaciones ionizante y uttfavio{eta,
responsabre de enfermedades como la encefaropata espongiforme
bovina, ra
de Creutfeldt-Jacob o el kuru.

Profilaxis: conjunto de medios que sirven para preservar de enfermedades

al
individuo o a la sociedad. Sinnimo de tratamiento prevenuvo.

Protena: Biomorcuras formadas por macropormeros de

aminocidos, o
macropolipptidos. Actan como enzimas, hormonas y
estructuras contrctires
que atribuyen a los organismos sus propias caractersticas
de tamao. potencial
metablico, color y capacidades fsicas.

Retrovirus: Virus cuyo genoma est constituido por ARN

monocatenario, que
es trascrito de forma inversa en ADN durante su irfercin y
replicacin. La
copia de ADN se integra en er ADN cromosmico der husped.
Esta copia,
llamada provirus, se transcribe en ARN vrico y produce
mrtipres ARN' que
codifican productos proteicos del virus o de oncogenes.
Los retrovirus mas
conocidos son ros virus der srDA (vrH) y de ra
leucemia humana de ros
linfocitos T (HTLV). Er mas utirizado para ra transferencra
de genes es er virus
de la leucemia murina de Moloney (Mo_MLV).

Toxina: Protena responsabre de fa especificidad funcionar

de certas bacterias,
que es venenosa para determinados organismos.
Entre las mejor conocidas,
tanto por su estructura como por los mecanismos
de accin, figuran las toxinas
colrica y tetnc que ntefaccionan con ras
cruras diana a travs de
ganglisidos de membrana.
 196

patgenos que se
Vacuna: Antgeno procedente de uno o varios organismos
administraparainducir|ainmunidadactivaprotegiendocontralainfeccinde
prctica de la inmunidad adquirida'
dichos organismos' Es una aplicacin

puede
Virus: Entidad acelular infeciosa que' aunque
sobrevivir

es un parsito absoluto pof que so|amente es capaz cle

extrace|u|armente,
pero sin generar energa ni
replicarse en el seno oe clulas vivas especficas'
permanenies de los vrus son
nnguna actividad metablica' Los componentes
dos cadenas) envuelto por una
cido nucleico (ADN o ARN' de una o de
cubierta proteca llamada cpside'

fundamentalmente de dos
Virin: Unidad estructural de los virus' Consta
un cido nucleico (ADN o ARN) y una envoltura
estructuras mprescindibles:
se aade en algunos casos una
proteica (capside). A estas estructuras bsicas
de glucoProtena'
envoltura lipdica (peplos) yio espculas

de las plantas denominado

Viroides: Agente causal de ciertas enfermedades
los que se diferencia por carecer oe
as por su semeranza con los virus' de
de
envuelto por una membrana procedente
cpside. Se trata de cido nucleico
se aPlicaba a lo que hoy se
la clula en la que se replic Por extensin
denomina Priones'
 197

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