Fisicoqumica II Trabajo Practico de Laboratorio N 1 Cecilia Palavecino - 2014

Determinacin de la concentracin micelar critica (CMC) usando

Naranja de Acridina como sensor. Estudio de los efectos de la
temperatura y la fuerza inica en la CMC.

En este prctico se usan mtodos de absorbancia y fluorescencia para determinar la concentracin

micelar crtica (CMC) del dodecilsulfato de sodio (SDS), un surfactante aninico que posee una cola de 12
carbonos con un grupo sulfato. El sensor seleccionado para tal fin es el naranja de 10-nonilacridina, un
colorante catinico orgnico derivado del naranja de acridina. Tambin se determinaran los efectos de la
temperatura y de la fuerza inica sobre dicho parmetro. El anlisis de los datos experimentales
obtenidos se realiza utilizando el software Origin 7, facilitando el clculo de la CMC. Se observa que la
CMC disminuye con el aumento de la temperatura y tambin con el aumento de la fuerza inica.

Introduccin:

En disoluciones acuosas las molculas anfiflicas o surfactantes forman micelas en las que los grupos
polares estn en la superficie y las partes apolares quedan inmersas en el interior de la micela en una
disposicin que elimina los contactos desfavorables entre el agua y las zonas hidrfobas y permite la
solvatacin de los grupos polares. Una micela entonces posee una superficie hidrfila y un ncleo
hidrofbico.

La formacin de micelas es un proceso cooperativo, el ensamblaje de pocas molculas no puede

proteger las colas hidrfobas del contacto con el agua; por lo tanto, las disoluciones acuosas de
molculas anfiflicas no forman micelas hasta que su concentracin no sobrepasa un valor, la
concentracin micelar crtica (CMC), por encima del cual casi todo el surfactante adicional se agrega
para formar micelas. La CMC depende de diversos factores, tales como la estructura del surfactante,
especficamente de su balance hidrfobo/hidrfilo (molculas con regiones hidrfobas largas tienen
valores de CMC ms bajos); su naturaleza elctrica (si es aninico, catinico o neutro); la forma en que se
constituyen los agregados; las caractersticas del medio en el cual se solubiliza (como la fuerza inica) y
de la temperatura. En este prctico solo consideraremos como esta ltima y la presencia de sales afectan
el estado de agregacin.
Las molculas anfipticas con una cola
hidrfoba nica forman micelas esfricas o
elipsoides debido a su forma cnica, debido a
que la cabeza hidratada de la molcula es ms
ancha que la cola. Una micela es una estructura
limitada, normalmente de dimetro menor que
20 nm.

1
Fisicoqumica II Trabajo Practico de Laboratorio N 1 Cecilia Palavecino - 2014

Como ya se dijo anteriormente, trabajamos con naranja de 10-nonilacridina, colorante catinico

orgnico derivado del naranja de acridina.

Existen dos tipos de interacciones entre el NAO y las micelas: hidrofbicas y electrostticas, que juegan
un papel muy importante en la unin entre estas dos.

El NAO se une a las micelas sin importar la carga que esta posea. Puede adsorberse en la superficie o
puede quedar atapada en el ncleo carbonado de la micela dependiendo de su naturaleza: aninica,
catinica o neutra.

Cuando el colorante esta en agua es incoloro, sin embargo cuando las micelas se forman el tinte es
extrado del agua y disuelto por la parte hidrofbica de la micela y aparece la coloracin. En soluciones
acuosas de SDS el NAO exhibe un pico de absorbancia a 496 nm.

El colorante no posee un pKa en el rango de 2.5 a 11.5 y tiene una forma catinica en todo ese rango. Las
interacciones electrostticas juegan un rol importante en el enlace del NAO catinico a las micelas
aninicas del SDS.

Mtodo:

Tradicionalmente, la CMC se determina a partir del cambio de tendencia observado para diferentes
propiedades como una funcin de la concentracin, entre ellas absorbancia y fluorescencia. En base a
esto registramos los espectros de absorcin y emisin del NAO en presencia de concentraciones
crecientes de SDS:

2
Fisicoqumica II Trabajo Practico de Laboratorio N 1 Cecilia Palavecino - 2014

Vol SDS + AO (L) Vol SDS + AO (L) [SDS] (mmol L-1)

0 0 0
111 111 2
250 139 4
333 83 5
429 96 6
538 109 7
667 129 8
1 333 10
1,5 500 12

Graficamos los cambios de la absorbancia y la fluorescencia del colorante en funcin de la concentracin

del SDS y determinamos la CMC a 25 C.

Para el estudio del efecto de la temperatura realizamos el mismo procedimiento a 40 C.

Para el estudio del efecto de la fuerza inica realizamos el mismo procedimiento en una disolucin de
SDS en presencia de 0.5 mol L-1 de NaCl.

Una vez seleccionados los mximos de absorcin y de fluorescencia graficamos ambos vs la

concentracin de SDS en mM. Los puntos de inflexin de las curvas corresponden a las CMC.

Sonda Colorante: 4.2M Naranja de 10-nonilacridina (NAO)

Solvente: Agua

0,45

25C
0,40 40C
Absorbancia a 496nm (ua)

25C en 20mM NaCl

Ajuste
0,35

0,30

0,25

0,20
CMC25C=(5,70 0,09) mM [SDS]

0,15
CMC40C=(4,9 0,2) mM [SDS]
CMCNaCl=0,01-0,5 mM [SDS]

0,10
2 4 6 8 10 12

[SDS] (mM)

3
Fisicoqumica II Trabajo Practico de Laboratorio N 1 Cecilia Palavecino - 2014

Sonda Colorante: 4.2M Naranja de 10-nonilacridina (NAO)

Solvente: Agua
Fuente de irradiacin: LED Royal Blue (45727)nm

2500
25C
40C

Fluorescencia a 521nm (ua)

25C en NaCl
2000
Ajuste

1500

1000

CMC25C=(6,69 0,04) mM [SDS]

500
CMC40C=(6,31 0,09) mM [SDS]
CMCNaCl=0,01-0,5 mM [SDS]
0

2 4 6 8 10 12

[SDS] (mM)

Resultados y discusiones:

Los espectros de absorcin y fluorescencia del naranja de 10-nonilacridina (NAO) se estudiaron en

concentraciones variables de SDS aninico.

Observamos en los barridos realizados para las diferentes concentraciones de SDS que el pico de
absorcin del NAO se encuentra a los 496 nm y el pico de emisin se encuentra a los 521 nm.

Los cambios presentes en los valores de absorbancia y fluorescencia se pueden explicar en trminos de
las uniones entre el colorante y las micelas y sus variaciones con la temperatura y la fuerza inica.

Efecto de la Temperatura:

De las observaciones realizadas se desprende que el aumento de la temperatura provoca una

disminucin de la CMC del SDS.

Esta disminucin puede deberse a un aumento en la entropa del sistema que favorece al proceso de
micelizacin.

El aumento de la temperatura de 25 C a 40 C produce una disminucin en la hidratacin del grupo

hidroflico de la molcula de SDS debido a que las molculas de agua presentan un mayor desorden
que a temperaturas menores, en este caso las fuerzas hidrfobas entre las colas apolares del
surfactante serian de mayor magnitud que las fuerzas hidroflicas entre las cabezas polares del
surfactante y las molculas de agua. Este efecto tiende a favorecer la micelizacin, es decir producir
micelas a menor concentracin haciendo que la CMC disminuya.

4
Fisicoqumica II Trabajo Practico de Laboratorio N 1 Cecilia Palavecino - 2014

Efecto de la Fuerza Inica:

Observamos que la adicin de electrolitos altera el ambiente fisicoqumico de la solucin y, en

consecuencia, afecta el valor de la CMC.

Una micela es una partcula coloidal que puede estar cargada elctricamente, la cual est rodeada por
iones disociados de carga elctrica de signo contrario (contra-iones). Si al medio en el que se encuentran
las micelas y los contra-iones se le aade un electrolito (como NaCl), el mismo proveer contra-iones
adicionales (Na+) y tambin co-iones, los cuales tienen una carga elctrica del mismo signo que la carga
elctrica de la micela (Cl-).

Los iones (ms pequeos que las molculas anfiflicas de SDS) y comparativamente con alta densidad de
carga (Na+ y Cl-) se hidratan fcilmente en solucin y por lo tanto interactan de manera desfavorable
con respecto al surfactante.

La CMC obtenida es mucho menor a la reportada en ausencia de electrolitos. El electrolito no slo

ocupa un espacio fsico en el sistema, sino que tambin empieza a competir por el agua libre con el
surfactante aninico.

Si la habilidad del anin de la sal (Cl-) para solvatarse es superior a la del anin del SDS, disminuye la
solubilidad de este ltimo, impidindole que se solvate con el agua libre del sistema. As, el anin del
SDS se asociar con otros aniones de su misma especie favoreciendo la formacin de agregados a
menores concentraciones.

Conclusiones:

A partir del procesamiento de los datos experimentales obtenidos a travs de las mediciones de
absorbancia y fluorescencia de las muestras de SDS en solucin acuosa de diferentes concentraciones y
utilizando el NAO como colorante se concluye que a medida que aumentan la temperatura y la fuerza
inica se observa una disminucin de la CMC.

La CMC obtenida en presencia de NaCl menor a la reportada en ausencia de electrolito, indicando el

efecto de las sales y de la fuerza inica sobre la agregacin del SDS.

De igual forma los valores de CMC a temperaturas superiores a los 25 C demostraron que el aumento de
la temperatura produce un efecto a favor de la formacin de micelas a menores concentraciones de SDS.
Esto se observa al menos n un rango de temperatura hasta 40C.