Preinforme Nilthon

Laboratorio de Bioprocesos UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA
Universidad Nacional del Santa

Facultad de Ingeniera
E. A. P. de Ingeniera Agroindustrial
Tema:
CULTIVO CELULAR CONTINUO AIREADO
Curso:
LABORATORIO DE BIOPROCESOS
Docente:
ING. AUGUSTO CASTILLO CALDERN
Grupo:
B (Mircoles 7 -1pm)
Integrantes:
Arbildo Abanto Magaly.
Fiestas Maza Carmen.
Lavandera Alva Aldo.
Ortega Rodrguez Liesly.
Prez Villanueva Karito.
Sandoval Lpez Beatriz.
Santa Maria Podesta Nilthon.
Villegas Ramrez Carla.
Nuevo Chimbote Per
INGENIERIA AGROINDUSTRIAL
CULTIVO CELULAR CONTINUO AIREADO
I. OBJETIVO GENERAL:
Disear y realizar una experiencia de cultivo

celular continuo en quimiostato empleando una cepa
de Kluyveromyces marxianus ATCC-16045.
II. OBJETIVOS ESPECFICOS:
Disear medio de cultivo.
Activacin clulas y desarrollo del inculo.
Obtener la curva caracterstica del cultivo

continuo considerando al menos cinco estados
estacionarios.
Obtencin y caracterizacin de un estado

estacionario bajo limitacin por fuente de
nitrgeno.
Perturbacin de un estado estacionario mediante

aumento de la concentracin del nutriente limitante
en la alimentacin y su seguimiento hasta el nuevo
estado estacionario.
Determinar la velocidad especfica mxima de

crecimiento mediante operacin en condicin de
lavado.
III. METODOLOGIA EXPERIMENTAL
III.1. Preparacin de medios
3.1.1 Medio de mantencin:
Materiales y equipos:
Balanza analtica
Olla a presin
Mechero Bunsen
Pipetas de 10 ml.
Tubos de ensayo con tapas
Varilla de vidrio
Matraz erlenmeyer
Guantes.
Esptula
Probeta graduada
Capachos de papel
Reactivos:
Muestra: Kluyveromyces marxianus ATCC-

16045.
Extracto de levadura.
Peptona.
Agar.
Glucosa.
Procedimiento:
Se pesa cuidadosamente en la balanza

analtica los nutrientes que la clula
necesitara para su crecimiento (tabla 1) en
base a los clculos del medio de
fermentacin que deseamos alcanzar
Medir 10 ml de agua destilada en una

probeta graduada.
Posteriormente mezclar y disolver todos
los componentes con el agua destilada
medida anteriormente en un matras
Erlenmeyer.
Calentar la mezcla del matraz durante 1 a
2 minutos; contabilizar este tiempo a
partir de la aparicin de las primeras
burbujas; con ayuda de un mechero Bunsen.
Preparar 1 tubo de ensayo con tapa, y en
caliente adicionar 8 ml de la mezcla en
el tubo, e inmediatamente taparlo.
Colocar los tubo en un vaso de
precipitado, y llevarlos a la olla a
presin, previamente aflojar las tapas,
para permitir el intercambio de gases
Esterilizar a 121 C por 15 20 minutos.
Ajustar las tapas de los tubos estando
estos aun dentro de la olla, luego
colocarlos en posicin inclinada y
dejarlos a temperatura ambiente.
3.1.2 Inoculacin:
Procedimiento:
Se tiene el que desinfectar la mesa de

trabajo con alcohol, luego se enciende el
mechero y se prosigue de la siguiente
manera:
La aza bacteriolgica se coloca al fuego
del mechero hasta alcanzar el rojo vivo.
Dejamos enfriar por unos segundos para de
se introdujo en el tubo de ensayo que
contena las clulas desarrolladas en
medio rico liquido (sin agar), se extrajo
una gota y se coloc y/o sembr en un
tubo de ensayo con medio rico slido
(con agar).( la azada se realiz en el
tubo desde adentro hacia fuera en
estras)
La inoculacin de medio liquido a medio
slido fue vista a trasluz para su
identificacin de buen sembrado.
El procedimiento de inoculacin se
recomienda hacerlo por duplicado es decir
2 azadas.
Se lleva a la incubadora a 37C para su
crecimiento
3.1.3 Medio de activacin:
3.1.3.1 Materiales y equipos:
Balanza analtica
Esptula
2 tubos de ensayo con tapa
Mechero Bunsen, trpode y rejilla.
Varilla de vidrio
Agua destilada
Pinzas, Guantes
Olla a presin, pipetas, pH metro
Reactivos:
Sustrato limitante: sacarosa

Extracto de levadura.
K2HPO4.
MgSO47H2O.
KCl.
(NH4)2SO4.
Procedimiento:
Pesar los componentes calculados para

este medio ver tabla 2 (anexos).
Mezclar el extracto de levadura en tuvo
de ensayo con 5 ml de agua destilada;
mezclar la sacarosa con 10 ml de agua
destilada en un matraz de 125 ml; mezclar
el extracto de malta con 8 ml de agua
destilada en un matraz de 125 ml y
mezclar las sales en un tubo de ensayo
con 5 ml de agua destilada.
Esterilizan por separado cada mezcla para
evitar la formacin de otros componentes
no deseados.
Luego de esterilizar mezclar todos los
componentes en el matraz;
posteriormente ajustar el pH a 6.0 con
cido fosfrico (H3PO4)
Este procedimiento se har por duplicado
3.1.3.2 Activacin celular y desarrollo del

inculos
Matraz de 112 ml con mezcla de nutrientes

ya preparada anteriormente.
Algodn, Gasa
Shaker
Mechero Bunsen, trpode y rejilla.
Procedimiento:
Para la activacin partimos con la cepa

incubada en medio slido (Kluyveromyces
marxianus ATCC-16045).
Se toma una o dos azadas (siguiendo los

pasos del medio de inoculacin)y se
introduce en el matraz con los 20 ml del
medio de activacin
Tapamos el tubo con un tapn de gasa y

algodn preparado anteriormente.
Luego se lleva al Shaker a 50 rpm, T =

37C y un t = 4-6 horas hasta alcanzar
un desarrollo celular suficiente,
evidenciado por el incremento en la
turbidez del medio.
Este procedimiento se har por duplicado.
3.1.4 Medio de fermentacin:
3.1.4.1 Materiales y equipos:

Balanza analtica
Mechero Bunsen
Pipetas de 10 ml.
Tubos de ensayo con tapas
Varilla de vidrio
Matraz erlenmeyer de 1 L
Guantes.
Esptula
Probeta graduada
Procedimiento:
Pesar los componente componentes

descritos en la tabla 3
Se mezcla sacarosa y el KHPO4 en un matraz
de 1 L con 88 ml de agua destilada
Se mezcla Extracto de levadura en un
matraz con 40 ml. de agua destilada
Esterilizar las diluciones por separado a
121 C por 15 minutos.
Dejar enfriar y guardar en refrigeracin
hasta su posterior uso.
3.1.5 Determinacin de la cintica de

crecimiento de la biomasa:
Matraz de 1 L conteniendo el medio de

fermentacin
Espectrofotmetro
pH metro
Gasa y algodn
Centrifuga
Tubos de ensayo
Capachos de papel aluminio
Procedimiento:
Fermentacin del microorganismo
El medio anterior agregar a un matraz de 1

litro contenido de 180 ml de medio con la
siguiente composicin:
Fuente de carbono : Sacarosa

Concentracin celular final de 3 g/l
Volumen del medio 1 Lt. Pero considerando
el volumen de 680 ml con que se va a
trabajar en el quimiostato, de ello el 10
% es 68 ml, y sera esta la cantidad
requerida, pero trabajaremos con 88 ml.;
es decir un excedente de 20 ml. para
emplearla en la elaboracin de la curva de
calibracin para la biomasa.
Ajustar el pH a 5-6 con HCl o NaOH 2 M y
llevar el autoclave a 121C por 15
minutos.
3.1.6 Obtencin de la curva caracterstica de

crecimiento de una levadura:
Para la obtencin de esta curva, es necesario

considerar 5 estados estacionaros.
Estados estacionarios:
dx ds dp
; ; 0
dt dt dt
Con liderando D < max porque de lo contrario ocurrir

el lavado del cultivo, es decir existir un DC = max =
0.28 h-1. Para evitar el lavado tomaremos velocidades de
dilucin (D) menores a 0.28 h-1 y determinaremos el
valor de los flujos para los estados estacionarios.
Sabiendo que VL = 680 ml
Consideramos arbitrariamente las velocidades de

dilucin para los siguientes estados estacionarios:
N de Estado D
Estacionario ( 1/h)
1 0.082
2 0.103
3 0.123
4 0.154
5 0.175
Utilizando la siguiente formula: donde VL = 680 ml.

F
D ; = D
VL
Luego determinamos los flujos de alimentacin (F) para

los 5 estados estacionarios, considerando un V L = 680
ml. Como por ejemplo para el 1er estado estacionario
tenemos:
1 1h ml
F DV V 680mlx0.080 x 0.9973
h 60 min min
Luego tenemos para cada estado estacionario los

siguientes flujos de alimentacin (F).
N de Estado F F
Estacionario ( ml/ min) ( ml/ h)
1 0.93 56
2 1.16 70
3 1.40 84
4 1.75 105
5 1.98 119
Luego hallamos los tiempos de residencias considerando

la siguiente formula:
T = 1 / D , = D
Donde:
1 1
T 12.2 h
D 0.08 h 1

siguientes tiempos de residencia (T)
N de Estado Tiempo de
estacionario residencia (h)
1 12.2
2 9.71
3 8.13
4 6.49
5 5.71
Seguidamente alcanzamos los tiempos de fermentacin

( t ) aplicando el siguiente producto: 3 x T
Donde:
3 xT 3 x12.2 h 36.60h

siguientes tiempos de fermentacin
N de Estado Tiempo de
estacionario fermentacin (h)
1 36.60
2 29.13
3 24.39
4 19.47
5 17.13
Tiempo total de
126.72 h
fermentacin
Para hallar el gasto de alimentacin hacia el

quimiostato se considera la siguiente formula, para
los 5 e.e.:
Gi = Fi x Ti
Donde:
Gi: gasto
Fi: flujo
Ti: tiempo de fermentacin
ml L
G i Fi x( ) G i 56 (36.60h) Gi 2049.6ml G i 2.0496 L
h 1000ml

siguientes gastos
N de Estado Gasto
estacionario (L)
1 2.050
2 2.039
3 2.049
4 2.044
5 2.038
Gasto total de
10.22 L
alimentacin
Calculo del flujo de aire necesario para el

cultivo
Demanda de Oxigeno:
Estando el cultivo ya en el quimiostato, se tienen

que tomar en cuenta la velocidad del flujo de aire
que ingresa.
Yo2 = Rendimiento de oxgeno en clula

(0.5 2.0 g cel. / g O2)
Consideramos:
Yo2 = 0.5
= 0.10 (Eficiencia de absorcin)
= 0.28 h-1
X = 3 g/L
Entonces reemplazamos datos:
*X
NA
YO 2
NA = 3.96 g/ L.
h
Velocidad de aeracin especifica
N A *T
VVM 2.035 * 10 4 T = 30 C = 303 K

VVM = 2.4418 min-1
Este ltimo valor es la velocidad de aireacin

especfica para alcanzar la concentracin
deseada.
Flujo de aire necesario para el cultivo
Q = VVM*VL
Q= 1.66 L/min
Procedimiento :
Durante el desarrollo del cultivo, para las

evaluar el crecimiento de biomasa, tomar una
muestra inicial, al que se le mide la absorbancia
y se centrfuga, guardando el sobrenadante en
viales y la masa sedimentada en capachos que
sern expuestos a la estufa.
Una vez iniciado el crecimiento de biomasa en el

quimiostato, se manipula el flujo de
alimentacin de tal manera que en tiempos
determinados, se provoque en el comportamiento
del crecimiento, 5 estados estacionarios.
3.1.7. Perturbacin de un estado estacionario mediante

aumento de la concentracin del nutriente limitante en
la alimentacin:
Habindose obtenido los estados estacionarios en el

crecimiento de la levadura, se perturbara este estado
aumentando la concentracin de sacarosa (Nutriente
limitante) en la alimentacin, con el cual el estado
estacionario en el que se encontraba terminar, dando
lugar a un comportamiento logartmico.
Este nuevo flujo tendr una concentracin de Sacarosa =
5 g/l. Para este estado estacionario consideraremos los
siguientes datos:
= 0.088 h-1
F = 60 ml/h
t = 34 h
V = 2.04 L o gasto a utilizar
Antes de ingresar al flujo esterilizar el medio a 121C

por 15 min.
3.1.8. Determinacin de la velocidad especfica mxima

de crecimiento mediante lavado:
Para poner en marcha esta actividad, comenzamos

realizando los siguientes pasos:
Cortar el flujo de alimentacin, despus de haber

transcurrido el tiempo de fermentacin; en donde se
alcanza una reduccin de X y = MAX.

Utilizando la ecuacin de balance general de clulas:
dx
DX 0 ux
dt
Consideramos x0 = 0, obtenemos la grfica Ln X vs t.
Luego trazamos una recta tangente a la curva,
considerando un D = 0.66, y obtenemos el MAX. a

travs de la funcin tangente.
Utilizando la siguiente frmula: Ln(X/Xo) = t,

hallamos el tiempo para el lavado:
t = 4.545 h
ANEXO
TABLA 1. Composicin del medio de mantencion Kluyveromyces
marxianus ATCC-16045 para un crecimiento de
biomasa de 3 g/L
Sustancia Concentracin (g/L)

Extracto de levadura 10
Peptona 20
Agar 20
Glucosa 20
TABLA 2. Composicin del medio de activacin de

Kluyveromyces marxianus ATCC-16045 para un
crecimiento de biomasa de 3 g/L
Sustancia Concentracin (g/L) Para 20 ml (g) Para 68 ml (g)

Sacarosa 20 0.4 1.36
Extracto de levadura 5.0 0.1 0.34
K2.HPO4 5.0 0.1 0.34
(NH4)2.SO4 5.0 0.1 0.34
MgSO4.7H2O 0.5 0.01 0.034
KCl 0.57 0.0114 0.03876
pH = 6.8
TABLA 3. Composicin del medio de fermentacion de para la

Kluyveromyces marxianus ATCC-16045 para un
crecimiento de biomasa de 3 g/L
% % Yx/s So So
Elemento Compuesto
Cel. Nut. (g/g) (g/L) (g/0.68L)
C Sacarosa 50 42.105 0.505 5.941 4.039
Extracto de Levadura - - - 5.0 3.4

N (NH4)2.SO4 9 21.212 2.357 1.91 1.298
P K2.HPO4 2 17.816 8.908 0.505 0.3434
Mg MgSO4.7H2O 0.4 9.863 24.658 0.1824 0.124
K KCl 0.5 52.448 104.896 0.042 0.029
Fuente de carbono y energa: Sacarosa (C12 H22 O11), M = 342 g
YX/S = % de C en el nutriente / % de C en la clula

% de C en el nutriente = 12(12) x 100 / 342 = 42.1 %
% de C en la clula = 49 %
YX/S = (42.1/50) x 0.6 (este factor por ser aireado)
YX/S = 0.868x 0.6 = 0.505 g/g
A. DISEO DEL MEDIO DE FERMENTACION:

1. Calculo de % Nutriente:
Sacarosa: C12 H22 O11

PM = 342
342 100%
12x12 x
x = 42.105
(NH4)2SO4:
PM = 132
132 100%
28 x
x = 21.212
MgSO47H2O
PM = 246.3
246.3 100%
24.3 x
x = 9.866
K2HPO4
PM = 174
174 100%
31 x
x = 17.82
KCl
PM = 74.5
74.45 100%
39 x
x = 52.349
2. Calculo de Yx/s :
%nutriente
Yx / s 0.6
%celula
Sacarosa:
Yx/s=(42.105/50)x0.6
Yx/s= 0.505
(NH4)2SO4:
Yx/s=(21.212/9)
Yx/s= 2.357
K2HPO4:
Yx/s=(17.816/2)
Yx/s= 8.908
MgSO47H2O
Yx/s=(9.863/0.4)
Yx/s= 24.658
KCl
Yx/s=(52.448/0.5)
Yx/s= 104.896
3. Calculo de S0
x x0
Yx / s
s0 s
Sacarosa:
0.505 = 3/S0
S0= 3/0.505
S0 = 5.941
(NH4)2SO4:
S0= (3/2.357)x1.5
S0 = 1.91
K2HPO4
S0= (3/8.908)x1.5
S0 = 0.505
MgSO47H2O
S0= (3/24.658)x1.5
S0 = 0.1825
KCl
S0= (3/104.896)x1.5
S0 = 0.043
Tabla N 4: Medio de alimentacin para la fermentacin.
% % Yx/s Sf Sf
Elemento Compuesto
cel. Nut (g/g) (g/L) (g/10.5L)
C Sacarosa 50 42.105 0.505 11.8816 124.745

N (NH4)2.SO4 9 21.212 2.357 3.1838 33.4267
P K2.HPO4 2 17.816 8.908 0.8418 8.8381
Mg MgSO4.7H2O 0.4 9.863 24.658 0.3041 3.1927
K KCl 0.5 52.448 104.896 0.0706 0.7412
Tabla N 5: Medio de fermentacin para el cultivo contino

con limitacin de nitrgeno, de Kluyveromyces marxianus
ATCC 16045 para un crecimiento de biomasa de 1.5 g/L
% % Yx/s Sf Sf
Elemento Compuesto
cel. Nut (g/g) (g/L) (g/2.040L)
C Sacarosa 50 42.105 0.505 35.6448 72.7154

N (NH4)2.SO4 9 21.212 2.357 3.1838 6.495
P K2.HPO4 2 17.816 8.908 0.8418 1.7173
Mg MgSO4.7H2O 0.4 9.863 24.658 0.3041 0.6204
K KCl 0.5 52.448 104.896 0.0706 0.144
Tabla N 6: Medio de alimentacin para la fermentacin para

el cultivo contino con limitacin de nitrgeno, con un
flujo de 1ml/min
Element % % Yx/s Sf Sf
Compuesto
o cel. Nut (g/g) (g/L) (g/2.040L)
C Sacarosa 50 42.105 0.505 14.8515 30.2971

N (NH4)2.SO4 9 21.212 2.357 2.5456 5.193
P K2.HPO4 2 17.816 8.908 0.8418 1.7173
Mg MgSO4.7H2O 0.4 9.863 24.658 0.3041 0.6204
K KCl 0.5 52.448 104.896 0.0706 0.144
Tabla N 7: Medio de alimentacin para la fermentacin para

el cultivo contino en condicin de lavado (flujo de 448.8
ml/h)
% Sf (g/L) Sf
Elemento Compuesto % Nut Yx/s (g/g)
cel. (g/2.04L)
C Sacarosa 50 42.105 0.505 11.8816 24.2385

N (NH4)2.SO4 9 21.212 2.357 3.1838 6.495
P K2.HPO4 2 17.816 8.908 0.8418 1.7173
Mg MgSO4.7H2O 0.4 9.863 24.658 0.3041 0.6204
K KCl 0.5 52.448 104.896 0.0706 0.144
Determinacin del contenido de azcares reductores

mediante el mtodo del DNS
La preparacin del reactivo DNS se requiere de lo siguiente:
10 g /L de cido 3,5 dinitrosalicilico (DNS)

200 mL / L de NaOH 2N
300 g/L de tartrato de sodio y potasio
tetrahidratado
Para la preparacin de este reactivo, se disuelve el

tartrato en aproximadamente 500 600 mI de agua,
paralelamente se disuelve el cido DNS. Ambas soluciones se
mezclan en un matraz aforado de 1 litro y se agita hasta la
completa disolucin de todos los componentes, para
posteriormente aforar hasta un litro.
1. Se precisa realizar los siguientes pasos para el

anlisis de la muestra:
2. Se aade un volumen del reactivo DNS a un volumen de
muestra a analizar.
3. Se mantiene la mezcla en un bao de agua a
ebullicin durante 5 minutos para luego dejar
enfriar.
4. Se aaden 10 volmenes de agua destilada.
5. Se lee la absorbancia a 540 nm, utilizando agua como
blanco.
6. La concentracin se obtiene interceptando la medida
de absorbancia en la curva de calibrado.
La curva de calibrado para el azcar se obtiene a partir de muestras de concentracin
conocida y analizadas segn este procedimiento.
Determinacin de la concentracin celular por densidad

ptica.
El mtodo se basa en el aument de la turbidez del medio,

al incrementarse la concentracin de microorganismo s, esto
puede ser detectado fcilmente por espectrofotometra a 640
nm. Para sta determinacin es necesario que previamente'
se elabore una curva de calibrado, para lo cual las
concentraciones de microorganismos en el medio son
determinadas por peso seco de acuerdo al siguiente
procedimiento:
1. Se toma una muestra de volumen conocido, y se

centrifuga a 1200 rpm durante 20 minutos.
2. Se elimina el sobrenadante y se resuspende el
centrifugado con agua destilada. 3.- Se vuelve a
centrifugar en las mismas condiciones a fin de
eliminar restos de sustrato que pudieran alterar la
determinacin.
3. Se elimina el sobrenadante, se redisueIve el
precipitado y se seca en la estufa a 80C hasta
peso constante.
Descripcin del muestreo:
1.- Extraemos con una pipeta 5 ml del medio del

fermentador enrasamos la medida del tuvo de
espectrofotmetro y medimos la absorbancia a 640 nm la
muestra (antes el espectrofotmetro debe estar encendido
con 30 minutos anterioridad y tambin previa calibracin
con el blanco en cada medida)
2.- Una ves determinada la absorbancia procedemos a llevar
la muestra en un tubo de ensayo a la centrifuga a 1200
rpm por 20 minutos. Previamente en el equipo ha sido
colocado un tubo con agua destilada para hacer contrapeso y
obtener una mejor centrifugacin.
3.-Concluido los 20 minutos se saca el tubo con el
contenido de muestra y el sobrenadante se hecha a los
viales y el pellets es desechado.
4.- Luego el vial es colocado a congelacin .
IV. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:
ALAN SCRAF 1993. Biotecnologa de alimentos.

Biotecnologia para ingenieros. Sistemas biologicos
en procesos tecnologicos SCRAGG 1era edicin
Editorial Limusa S.A Noriega Editores Mxico D.F
1981.
INGENIERIA BIOQUIMICA TEORIA Y APLICACIONES
RODOLFO QUINTERO RAMIREZ 1era Edicin Editorial
Alhambra S.A. Mxico 1981.
BIOTECNOLOGIA MANUAL DE MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL
WULF CRUEGER / ANNELIESE CRUEGER Editorial Acribia
S.A Zaragoza Espaa 1989.

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CULTIVO CELULAR CONTINUO AIREADO

Disear y realizar una experiencia de cultivo

II. OBJETIVOS ESPECFICOS:

Disear medio de cultivo.

Activacin clulas y desarrollo del inculo.

Obtener la curva caracterstica del cultivo

Obtencin y caracterizacin de un estado

Perturbacin de un estado estacionario mediante

Determinar la velocidad especfica mxima de

III. METODOLOGIA EXPERIMENTAL

III.1. Preparacin de medios

3.1.1 Medio de mantencin:

Muestra: Kluyveromyces marxianus ATCC-

Se pesa cuidadosamente en la balanza

Medir 10 ml de agua destilada en una

Se tiene el que desinfectar la mesa de

3.1.3 Medio de activacin:

3.1.3.1 Materiales y equipos:

Sustrato limitante: sacarosa

Pesar los componentes calculados para

3.1.3.2 Activacin celular y desarrollo del

Matraz de 112 ml con mezcla de nutrientes

Para la activacin partimos con la cepa

Se toma una o dos azadas (siguiendo los

Tapamos el tubo con un tapn de gasa y

Luego se lleva al Shaker a 50 rpm, T =

3.1.4 Medio de fermentacin:

3.1.4.1 Materiales y equipos:

Pesar los componente componentes

3.1.5 Determinacin de la cintica de

Matraz de 1 L conteniendo el medio de

El medio anterior agregar a un matraz de 1

Fuente de carbono : Sacarosa

3.1.6 Obtencin de la curva caracterstica de

Para la obtencin de esta curva, es necesario

Con liderando D < max porque de lo contrario ocurrir

Consideramos arbitrariamente las velocidades de

Utilizando la siguiente formula: donde VL = 680 ml.

Luego determinamos los flujos de alimentacin (F) para

Luego tenemos para cada estado estacionario los

Luego hallamos los tiempos de residencias considerando

Luego tenemos para cada estado estacionario los

Seguidamente alcanzamos los tiempos de fermentacin

Luego tenemos para cada estado estacionario los

Para hallar el gasto de alimentacin hacia el

Luego tenemos para cada estado estacionario los

Calculo del flujo de aire necesario para el

Estando el cultivo ya en el quimiostato, se tienen

Yo2 = Rendimiento de oxgeno en clula

Entonces reemplazamos datos:

Velocidad de aeracin especifica

VVM = 2.4418 min-1

Este ltimo valor es la velocidad de aireacin

Flujo de aire necesario para el cultivo

Durante el desarrollo del cultivo, para las

Una vez iniciado el crecimiento de biomasa en el

3.1.7. Perturbacin de un estado estacionario mediante

Habindose obtenido los estados estacionarios en el

V = 2.04 L o gasto a utilizar

Antes de ingresar al flujo esterilizar el medio a 121C