UNIVERSIDAD NACIONAL DE RO NEGRO

CARRERA MEDICINA VETERINARIA

SEDE ALTO VALLE Y VALLE MEDIO
CHOELE CHOEL

RESPONSABLE DE CTEDRA: Prof. Dra. MARTA S. AGERO

maguero@unrn.edu.ar

EQUIPO DOCENTE:
Prof. Dra. MARA BELN BUGLIONE mbuglione@unrn.edu.ar
AYUDANTE DE PRIMERA:
ING. AGR. FEDERICO MALDONADO maldonado516@hotmail.com
LIC. ALIM. FLORENCIA CAYOLO florenciacayolo@gmail.com
AYUDANTE ALUMNA: SOFA SENA sofiabelensena@hotmail.com

2016
 GUA PROBLEMAS METABOLISMO QUMICA BIOLGICA 2016

FUNDAMENTACIN DE LA METODOLOGA DE RESOLUCIN DE PROBLEMAS

El conocimiento requiere datos, slo con ellos puede construirse. Pero para que esos datos no sean
slo una asimilacin acumulativa y mecnica necesitan ser comprendidos utilizando estrategias cognitivas
para acceder, procesar y organizar la informacin. Para ensear estas estrategias, los docentes planificamos
actividades donde los alumnos pondrn en juego esos procedimientos porque stos slo pueden aprenderse
ejercitndolos. Configuran el saber hacer.
Un problema implica que estamos frente a una situacin nueva, para la cual no existe una respuesta
automtica, sino que es necesario reflexionar sobre los pasos a seguir para su resolucin. Esto lo diferencia
de un ejercicio (matemtico, por ejemplo), cuya resolucin requiere utilizar mecanismos que llevan a su
solucin inmediata.
La propuesta de resolucin de problemas en clase tiene por objeto localizar, reconocer, procesar
y utilizar la informacin, buscamos desarrollar una actitud activa para crear y relacionar conocimientos en
pos a una respuesta apropiada a la necesidad surgida. Adems de favorecer el aprendizaje de conceptos
nuevos, la actividad propuesta tiene como meta la de promover ciertas capacidades que consideramos
importantes para el desenvolvimiento integral del estudiante:
- Capacidad de observar, como un procedimiento bsico para abrirse al conocimiento.
- Capacidad de pensar totalidades, captar relaciones, reconocer lo esencial de un tema, situacin y/o
problema y diferenciarlo de lo accesorio o secundario. Esto ordena el pensamiento, lo va habituando a
situarse rpidamente en un contexto, a buscar alternativas, a preguntar, a interpretar y finalmente a
comprender.
- Capacidad de interactuar: aprender a comunicarse, dialogar, intercambiar opiniones, a escuchar, a valorar
las propuestas ajenas, a construir en grupo.
- Desarrollo de un mtodo de trabajo, un modo de procesar, almacenar y utilizar la informacin. Un
mtodo de trabajo supone rutinas, ordenamiento, acopio de materiales.
- Capacidad discursiva, es decir, poder expresarse tanto por escrito como verbalmente.
Proponemos algunas herramientas para encauzar la participacin y facilitar la tarea a la hora de
abordar el material de la bibliografa, de las clases tericas, de los trabajos prcticos; tanto en su trabajo
grupal e individual como en el momento en que se realizan las instancias de evaluacin.
Aprender a comprender las consignas de todos los momentos del proceso y no desesperarnos con
las que conforman el parcial o el final. All, si no se logr ese buen hbito intelectual de interesarnos por
saber qu tengo que hacer y para qu y cmo hacerlo slo conseguiremos pasar o no pasar, azarosamente.
ESTRATEGIAS PARA ABORDAR LA RESOLUCIN DE PROBLEMAS
Lo primero es leer comprensivamente el problema: qu significa esto? Significa que hay que
abordarlo como un texto, realizando los siguientes pasos:
lectura comprensiva
anlisis de sus partes
resolucin
UNA LECTURA GENERAL, abarcativa de todo lo enunciado, para saber de qu se trata. Es necesario
detectar el problema, es decir identificar a dnde hay que llegar.
EL ANLISIS DE SUS PARTES para poder reconocer las acciones que se solicitan y los datos que
suministra el enunciado.
1- Las acciones que se solicitan (verbo o verbos), qu operaciones se requieren, qu pide la incgnita, qu
hay que hacer: las consignas.
Las consignas que ms comnmente podremos encontrar tanto en los problemas como en las
evaluaciones son (tomados del libro Estamos Estudiando de Liliana Falcone, EDUCO, 2007):
Identificar: Se parte de las caractersticas de un hecho u objeto y se sealan aquellas que, por ser
idnticas a las de otros, permite agruparlos en alguna clase determinada.
Definir: Fijar con claridad, exactitud y precisin la significacin de una palabra o la naturaleza de una
cosa.

1 Gua para resolucin problemas metabolismo Medicina Veterinaria

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Comparar: Fijar la atencin en dos o ms objetos, hechos o ideas para descubrir sus relaciones o
estimar sus diferencias y/o semejanzas.
Describir: Es producir proposiciones o enunciados que enumeren cualidades, propiedades,
caractersticas del objeto o fenmeno que se describe. La accin de describir implica: observar,
comparar, encontrar semejanzas y diferencias, identificar lo esencial.
Indicar: Pide precisin en el desarrollo concreto de un tema.
Relacionar: Comparar y establecer semejanzas y diferencias. Sinnimo de vincular.
Explicar: Es producir razones o argumentos de manera ordenada. Establecer relaciones entre las razones
o argumentos que lleven a modificar un estado de conocimiento. Es dar a conocer la causa o razn de
una cosa. La respuesta debe responder a la pregunta por qu?, debe ser exhaustiva y el desarrollo de
ideas, claro.
Comporta dos operaciones:
Producir razones o argumentos que enumeren cualidades, propiedades, caractersticas, etc.
Establecer relaciones causales entre las razones y los argumentos
Analizar: distinguir y separar las partes de un todo dado para conocer sus elementos y establecer las
relaciones entre ellos.
Justificar es probar una cosa con razones convincentes. Pide que se expongan causas o razones de algn
hecho o que se defienda alguna idea o postura.
Interpretar: Explicar el sentido de una cosa. La interpretacin debe partir de un anlisis previo y
de l se deriva el sentido. Se pueden hacer relaciones con otros elementos.
Deducir: Como sinnimo de proponer o hipotetizar. Partiendo de lo dado, y mediante un anlisis
detallado, derivar lgicamente las conclusiones en forma clara y ordenada.
2- Datos que incluidos en el enunciado, las figuras y tablas- ayudan a encontrar los elementos que
permitirn realizar lo solicitado. Datos que nos dirn qu buscar y dnde buscarlo. Ello nos permite
comprender la situacin. El desarrollo de este trabajo prctico tiene por objeto introducirnos en el
manejo e interpretacin de las diferentes maneras en que pueden presentarse los datos en esta asignatura.
LA RESOLUCIN: Implica tener disposicin para intentar resolverlo. Es decir, encontrarle significado.
Requiere: esfuerzo cognitivo (de pensamiento) para buscar, seleccionar, jerarquizar y utilizar la
informacin requerida. Esfuerzo para poder expresarlo por escrito en forma clara.
Cuando consideremos que hemos finalizado la tarea de resolucin de un problema, recomendamos:
- Leerlo detenidamente (como si fuera un texto escrito por otro). Detectar falta de articulacin, faltas de
ortografa, omisin de algn dato que al volver a leerlo se recuerda, etc.
- Constatar que tiene puesto el nombre y la fecha y firmarlo
Un DOCENTE EVALUAR un texto o un discurso explicativo/argumentativo considerando las siguientes
pautas:
Pertinencia: que las razones o argumentos, globalmente, tienen coherencia y se refieren al objeto de
explicacin.
Complecin: Significa que hay un nmero suficiente de razones argumentadas que se pueden considerar
aceptables. Los argumentos tienen relaciones de tipo causal explcitamente. Inclusin de esquemas y
dibujos.
Precisin: Se usa el lxico teniendo en cuenta estos principios:
Precisin de los vocablos de acuerdo con el rea de conocimiento
Uso adecuado de los vocablos que tengan diferente significado en lenguaje coloquial y
especfico del rea de conocimiento.
Volumen de conocimiento: que sea adecuado en relacin con el nivel en que se hace la explicacin.
Organizacin del texto: El texto se ha ordenado con el modelo explicativo /argumentativo, en el cual se
encadenan los hechos de acuerdo con la lgica de la explicacin. Incluye descripciones, explicaciones y
razonamientos.

2 Gua para resolucin problemas metabolismo Medicina Veterinaria

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ASPECTOS A TENER EN CUENTA PARA LA RESOLUCIN DE PROBLEMAS DE

METABOLISMO
Luego de leer cuidadosamente los enunciados:
Establezca cul es el sistema experimental (ej.: microrganismos, animal intacto, rgano, tejido, etc.)
Determine qu procesos metablicos son capaces de realizar de acuerdo a su naturaleza, estadio de
desarrollo, etc. (ej.: ayuno, etapa post-absorcin de alimentos, ejercicio intenso, recuperacin post-
ejercicio, aerobiosis, anaerobiosis, etc.)
Determine sobre qu va o vas metablicas trata el problema.
Analice tablas y figuras cuidadosamente. Vea si presentan datos sobre metabolitos, actividades
enzimticas y en qu unidades se presentan los valores.
Cules son las variables de estudio que afectan a estos valores? (ej.: pasar de aerobiosis a anaerobiosis,
provocar estrs, adaptaciones a programas de entrenamiento y perodos de entrenamiento, etc.).
Ubique todos los metabolitos y/o reacciones enzimticas en las vas que correspondan. ATENCIN: un
metabolito o enzima pueden figurar en ms de una va, pero en el problema puede requerirse que
determine unvocamente la va involucrada en el mismo (ej.: fructosa-6P en gluclisis, gluconeognesis,
va de las pentosas).
Identifique si los metabolitos o actividades enzimticas, corresponden a reacciones iniciales, intermedias,
o finales (acumulacin final) de una va metablica.
Considere que:
- Los niveles o concentraciones de un metabolito estn determinados por el balance entre su produccin
(por una determinada enzima o va metablica) y su consumo (dem). A travs de estos niveles puede
inferirse la actividad in vivo de una enzima o va metablica, si est activada o inhibida.
- Las actividades enzimticas estn medidas in vitro, es decir se agrega al medio de reaccin la cantidad
de sustratos saturantes y cofactores requeridos as como otras condiciones ptimas (pH, temperatura)
para trabajar en condiciones de velocidad mxima. Sus niveles de actividad representan en general la
cantidad de enzima disponible, aunque in vivo la enzima puede estar activada o inhibida por la
presencia de moduladores, situacin que podr relacionarse a lo que ocurra in vivo.
Determine de acuerdo a los conceptos tericos, cules sustancias, o seales qumicas, o situaciones
metablicas pueden llevar a la activacin o inhibicin de una determinada enzima clave o va
metablica. Complemente con la informacin suministrada por el problema.
Analice a fondo los resultados presentados por el problema, determine si los estados de activacin o
inhibicin de estas enzimas o vas coinciden con la informacin que posee.
Siempre indique por escrito sus anlisis, y las conclusiones a las que arriba.

3 Gua para resolucin problemas metabolismo Medicina Veterinaria

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PROBLEMA 1 METABOLISMO
INTRODUCCION
El msculo esqueltico de los mamferos est constituido por fibras con diferentes propiedades
contrctiles y metablicas que le permiten transformar la energa qumica en energa mecnica para utilizarla
en la contraccin, originando el movimiento muscular.
En el msculo esqueltico del equino ocurren adaptaciones en respuesta a distintos programas de
entrenamiento y a perodos de entrenamiento. Se ha comprobado adems, que los msculos de equinos
adultos de distintas razas se modifican en forma diferente frente a un mismo tipo de entrenamiento,
producindose variaciones en la composicin miofibrilar y bioqumica de los mismos.
La determinacin de la actividad de enzimas que regulan las vas metablicas aerbicas y
anaerbicas se ha utilizado para evaluar la capacidad metablica y la adaptabilidad del msculo esqueltico
al ejercicio. La actividad enzimtica de la citrato sintetasa es utilizada como marcadora del metabolismo
aerbico y la deshidrogenasa lctica y creatinquinasa del metabolismo anaerbico. Estas actividades
enzimticas se correlacionan con el porcentaje y tamao de las fibras musculares y son dependientes de la
raza de los equinos.
Se ha demostrado que durante una actividad fsica prolongada el metabolismo oxidativo juega un rol
importante en la utilizacin de carbohidratos y lpidos, disminuyendo la utilizacin de glucgeno de los
msculos para evitar su fatiga.
El objetivo de este trabajo fue estudiar las caractersticas metablicas del msculo Gluteus medius en
animales inactivos y trabajando en faenas agrcolas. Para ello, de 16 equinos mestizos de tiro, de ambos
sexos, clnicamente sanos, se obtuvieron biopsias del msculo Gluteus medius a 3, 6 y 9 cm de profundidad,
con el objetivo de evaluar su metabolismo anaerbico y aerbico, determinando las actividades de las
enzimas creatinquinasa (CK), deshidrogenasa lctica (LDH) y citrato sintetasa (CS).
El tejido muscular se homogeneiz, sonic y centrifug; posteriormente en el sobrenadante se
determinaron las actividades enzimticas en estudio.
MATERIAL Y METODOS
Se utilizaron 16 equinos mestizos (criollos chilenos cruzados con equinos de raza pesada) con
aptitud de tiro (8 hembras y 8 machos castrados), clnicamente sanos, de 5 a 15 aos de edad. Los animales,
denominados inactivos, no haban realizado trabajos de tiro por un perodo mnimo de 3 meses previo a la
toma de las biopsias; aquellos denominados en trabajo corresponde a los mismos animales, pero las
muestras se tomaron al trmino de tres meses de haber realizado faenas de aradura en vias de secano en
jornadas de 4 horas, 2 veces al da durante 5 das consecutivos a la semana.
Se realizaron tres biopsias musculares en el mismo sitio, a profundidades de 3, 6 y 9 cm. Las
muestras fueron tomadas con una aguja percutnea de 6 mm de dimetro estandarizando la localizacin y
profundidad de las biopsias. El sitio exacto se precis dorsocaudalmente a la tuberosidad coxal, en un ngulo
de 45, a una distancia de 15 cm. La profundidad de las biopsias se garantiz por medio de topes metlicos
que permitieron introducir la aguja de biopsia a la profundidad deseada. Las muestras musculares obtenidas
se congelaron hasta su anlisis en nitrgeno lquido (-196 C) en un envase rotulado.
Preparacin de las muestras musculares: Los trozos de msculo se descongelaron, se limpiaron de tejido
conectivo y grasa en ambiente fro (4C). Luego, 50 mg de tejido se suspendi en 5 ml de PBS (pH 7.3) y se
homogeneiz en un triturador Ultra-turrax T-25 a 8.000 rpm por 1 minuto, se sonic en un sonicador
Trassonic C-460 por 30 segundos y luego se centrifug a 7.000 g durante una hora a 4C. En el sobrenadante
obtenido se determinaron las actividades de las enzimas deshidrogenasa lctica (LDH), creatinquinasa (CK)
y citrato sintetasa (CS). La actividad de la enzima LDH se determin midiendo la variacin de absorbancia a
365 nm de NADH por minuto. Las actividades de las enzimas CK y CS se evaluaron utilizando reactivos
comerciales. La concentracin de protenas se determin por el mtodo de Lowry usando seroalbmina de
bovino como estndar.
Anlisis estadstico: se obtuvo la media y la desviacin estndar de cada variable. Las diferencias observadas
entre las tres profundidades de muestreo y entre los animales "inactivos" y "en trabajo" fueron analizadas por
la prueba de ANOVA de una va.
RESULTADOS
Los valores promedios de las actividades especficas de las enzimas en estudio se muestran en la
figura 1.

4 Problema Metabolismo 1 Medicina Veterinaria

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Creatina quinasa (CK) Citrato sintasa (CS)

3.5

Actividad Especfica, U/mg prot.

Actividad Especfica, U/mg prot.

Inactivos En trabajo 3000 Inactivos En trabajo

3.0
* * * 2500 *
2.5 *
2000
2.0

1.5 1500
+*
1.0 1000
+
0.5 500
0.0 0
3 6 9 3 6 9
Profundidad muscular, cm Profundidad muscular, cm

Lactato deshidrogenasa (LDH)

Figura 1: Valores promedio desvo estndar de la
1.2 actividad especfica (U/mg protena) de las enzimas
Actividad Especfica, U/mg prot.

Inactivos En trabajo
CK, LDH y CS en tres profundidades del msculo
1.0
*
Gluteus medius de equinos mestizos de tiro, inactivos
0.8 y en trabajo.
* *
0.6 *p<0.05 Diferencia significativa en comparacin a
equinos inactivos.
0.4 +
+ p<0.05 Diferencia significativa en comparacin a la
0.2 profundidad del tejido.

0.0
3 6 9
Profundidad muscular, cm

Conteste JUSTIFICANDO:
a) Complete el siguiente esquema de las vas de la glucosa 6-P en el msculo:

5 Problema Metabolismo 1 Medicina Veterinaria

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b) A qu va metablica estn asociada la lactato deshidrogenasa analizada en este trabajo? Cul sera el
objetivo metablico de la misma?
c) A qu va metablica estn asociada la citrato sintasa analizada en este trabajo? Cul sera el objetivo
metablico de la misma?
d) A qu va metablica estn asociada la creatn quinasa analizada en este trabajo? Cul sera el objetivo
metablico de la misma?
e) Esquematice las vas metablicas que aportan precursores a las vas mencionadas en los incisos a), b) y c),
indicando precursores, enzimas que resultan reguladas, as como metabolitos y hormonas involucradas en
esta regulacin, en las condiciones fisiolgicas estudiadas en este trabajo.
f) Por qu se considera que la enzima CS est asociada al metabolismo aerbico mientras que las enzimas
LDH y CK estn asociadas al metabolismo anaerbico?
g) Analice si la profundidad del tejido afecta la actividad de CK, en animales inactivos y en trabajo
h) Analice el efecto que induce el ejercicio (animales en trabajo) sobre los valores obtenidos para CK en
comparacin con los animales inactivos.
i) Realice un anlisis similar a los incisos g y h para la enzima LDH.
j) Realice un anlisis similar a los incisos g y h para la enzima CS.
k) Luego de analizar los resultados que se presentan, los autores llegaron a la siguiente conclusin:
Estos resultados sealan que los equinos mestizos de tiro incrementan su metabolismo al realizar faenas
agrcolas; sin embargo, utilizan preferentemente el metabolismo aerbico, evitando el consumo de las
reservas de glucgeno y la fatiga muscular.
Analice estas conclusiones y justifique en base a los resultados presentados.

Extrado de: MERINO, V. et al. Caractersticas metablicas del msculo Gluteus medius de equinos mestizos con
aptitud de tiro. Arch. Med. Vet. 1998, vol.30 (2): 125-130. Disponible en:
http://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0301-732X1998000200012&lng=es&nrm=iso&tlng=es

6 Problema Metabolismo 1 Medicina Veterinaria

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Problema 2 Metabolismo
El objetivo del presente estudio fue analizar las concentraciones sanguneas de glucosa, -hidroxibutirato
( HBA) y creatnfosfoquinasa (CK) como indicadores sanguneos de estrs en novillitos sometidos a
tiempos de transporte terrestre de 3 y 16 horas y a tiempos de ayuno de 3, 6, 12 y 24 hs en la Planta
Faenadora de Carnes (PFC). Cabe mencionar que la ltima ingesta de alimentos fue en el predio.
El estudio fue dividido en dos experimentos.
En el primer experimento se utilizaron 40 novillitos de raza Overo Negro, con peso promedio de 472 kg, los
cuales fueron transportados por 3 hs hasta la PFC, donde fueron divididos en cuatro grupos de 10 animales
cada uno, los que fueron faenados luego de tiempos de ayuno de 3, 6,12 y 24 hs.
En el segundo experimento, se utilizaron 40 novillitos con las mismas caractersticas del experimento
anterior, los que fueron transportados por 16 horas y faenados luego de tiempos de ayuno de 3, 6,12 y 24
hs.
En el predio de origen, los animales fueron sangrados por puncin yugular, pesados e identificados mediante
la utilizacin de aretes plsticos numerados. Posteriormente fueron embarcados en un camin que cumpla
las caractersticas indicadas por la reglamentacin vigente y transportados por espacio de 3 o 16 hs. hacia la
PFC.
Al momento del arribo, los animales fueron divididos en 4 grupos de 10 animales, que fueron sacrificados
despus de diferentes tiempos de ayuno (3, 6, 12 y 24 hs.).
En sntesis, se realizaron 3 muestreos de sangre en los siguientes tiempos:
1. En el predio, previo a la identificacin y pesaje.
2. Al desembarcar los animales en la PFC.
3. Al momento de la sangra.
La sangre se recolect en tubos con heparina como anticoagulante y se separ el plasma por centrifugacin,
determinndose las concentraciones plasmticas de glucosa, -hidroxibutirato (-HBA) y actividad de la
creatnfosfoquinasa (CK).
La enzima CK, ubicada principalmente en las clulas del msculo estriado, cataliza la fosforilacin
reversible de creatina y ATP para formar creatina-fosfato, la principal fuente de reserva energtica para el
msculo, siendo adems el nivel sanguneo de CK un indicador de estrs ampliamente utilizado en los
animales. Los valores de referencia para el bovino son menores a 94 U/l.
Creatina + ATP Creatina-P + ADP
CK
Predio PFC Sangra Transporte 3 horas Predio PFC Sangra Transporte 16 horas

10 10 b
b b
[Glucosa], mM

[Glucosa], mM

8 8 b b
b b b b c
6 a 6 a
4 4
2 2
0 0
3 6 12 24 3 6 12 24
Horas de ayuno previo a sangra Horas de ayuno previo a sangra

Figura 1: Valores promedio D.E. de las concentraciones plasmticas de glucosa (mM) luego de 3 hs. de
transporte (izquierda) o de 16 hs. de transporte (derecha), con perodos de ayuno variables entre la llegada a
la PFC y el momento de sangra. Letras diferentes indican diferencias significativas (p<0,05)

Elaborado a partir de: Hedie Almagro Bustamante Daz. 2001. Tesis de Grado (Universidad Austral de Chile, Facultad
de Ciencias Veterinarias, Instituto de Ciencias Clnicas Veterinrias, Valdivia, Chile). Determinacin del efecto de
diferentes tiempos de ayuno y transporte terrestre sobre algunas variables sanguneas indicadoras de estrs en bovinos
en el periodo otoo-invierno.
Disponible en: http://cybertesis.uach.cl/tesis/uach/2001/fvb982d/doc/fvb982d.pdf

7 Problema Metabolismo 2 Medicina Veterinaria

 GUA PROBLEMAS METABOLISMO QUMICA BIOLGICA 2016

Predio PFC Sangra Transporte 3 horas Predio PFC Sangra Transporte 16 horas
0,4
a
a 0,4 a
0,3 a a a a
[b-HBA], mM

[b-HBA], mM
a
0,3 b
b
0,2 b
0,2 b
0,1
0,1

0,0 0,0
3 6 12 24 3 6 12 24
Horas de ayuno previo a sangra Horas de ayuno previo a sangra

Figura 2. Valores promedio D.E. de las concentraciones plasmticas de HBA (mM) luego de 3 hs. de
transporte (izquierda) o de 16 hs. de transporte (derecha), con perodos de ayuno variables entre la llegada a
la PFC y el momento de sangra. Letras diferentes indican diferencias significativas (p<0,05)
Predio PFC Sangra Transporte 3 horas Predio PFC Sangra Transporte 16 horas

b b

Actividad CK, UI/l

Actividad CK, UI/l

800 800 b
b b b
b b
600 b 600

400 400 a a
a
200 200

0 0
3 6 12 24 3 6 12 24
Horas de ayuno previo a sangra Horas de ayuno previo a sangra

Figura 3. Valores promedio D.E. de la actividad plasmtica de Creatn fosfoquinasa (CK, U/l) luego de 3
hs. dePredio
transporte
PFC (izquierda)
Sangra o Transporte
de 16 hs.16dehoras
transporte (derecha), con perodos de ayuno variables entre la
llegada a la PFC y el momento de sangra. Letras diferentes indican diferencias significativas (p<0,05)
b
Actividad CK, UI/l

800
A partir del anlisis
b de la informacin aportada por los grficos que se presentan, conteste
b b
JUSTIFICANDO:
600
1. Realice
400 una esquema del diseo experimental a donde se muestre: tipos de tratamiento, nmero animales,
momentos de muestreo y variables analizadas.
200
2.a. Considerando que los niveles de glucosa se cuantifican en sangre, esquematice brevemente el /los
0
rgano/s y la/s3 va/s metablicas involucradas que explicaran los resultados observados y cules seran
6 12 24
los principalesHoras
precursores participantes.
de ayuno previo a sangra
2.b. Analice y explique si el perodo de transporte desde el predio hasta la PFC afecta los valores
sanguneos de glucosa.
2.c. Tomando como referencia los valores obtenidos en la PFC, analice cmo afecta el perodo de ayuno los
niveles sanguneos de glucosa. Compare la respuesta obtenida en funcin del perodo de transporte.
Explique las posibles causas de las diferencias obtenidas.
2.d. Ample la respuesta del inciso 2.a., especificando qu vas se encontraran activadas y cules inhibidas y
cul sera el principal modulador.
3.a. Considerando que los niveles de -HBA se cuantifican en sangre y que el origen del -HBA puede ser
del metabolismo ruminal o de la degradacin de cidos grasos y formacin de cuerpos cetnicos,
esquematice brevemente el/los rgano/s y la/s va/s metablicas involucradas que explicaran los
resultados observados y cules seran los principales precursores participantes.
3.b. Analice y explique si el perodo de transporte desde el predio hasta la PFC afecta los valores
sanguneos de -HBA.
3.c. Tomando como referencia los valores obtenidos en la PFC, analice cmo afecta el perodo de ayuno los
niveles sanguneos de HBA. Compare la respuesta obtenida en funcin del perodo de transporte.
3.d. Ample la respuesta del inciso 3.a., especificando qu vas se encontraran activadas y cules inhibidas y
cul sera el principal modulador.

8 Problema Metabolismo 2 Medicina Veterinaria

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Considerando que la enzima CK cataliza la fosforilacin reversible de creatina y ATP para formar creatina-
fosfato, y que este compuesto es la principal fuente de reserva energtica para el msculo:
4.a. Cules seran las vas metablicas que proporcionaran ATP para permitir la formacin de creatina-
fosfato en el msculo, que luego sera utilizado para mantener la actividad muscular?
4.b. Analice si el perodo de transporte desde el predio hasta la PFC afecta los valores sanguneos de CK.
4.c. Tomando como referencia los valores obtenidos en la PFC, analice cmo afecta el perodo de ayuno los
niveles sanguneos de CK. Compare la respuesta obtenida en funcin del perodo de transporte. A qu
atribuye las variaciones observadas? Por qu?

9 Problema Metabolismo 2 Medicina Veterinaria

 GUA PROBLEMAS METABOLISMO QUMICA BIOLGICA 2016

Problema 3 Metabolismo

Como ya se ha analizado, el ayuno y el transporte de bovinos puede afectar los niveles sanguneos de
diferentes compuestos y la actividad de ciertas enzimas.
Con el objeto de determinar si la respuesta fisiolgica se debe al estrs generado por el ayuno
solamente o a la combinacin del ayuno y transporte se planific el siguiente experimento con nueve
novillos de carne con pesos promedio de 477 Kg, a los que se les coloc una fstula ruminal
dividindoselos en tres grupos:
- Grupo Control (C): alimentacin ad lbitum (sin restricciones) con heno de alfalfa, agua y
suplementos salinos en bloque.
- Grupo Ayunado (A): privado de alimentacin por 32 horas.
- Grupo Ayunado y Transportado (AT): privado de alimentacin y transportado por 32 horas en
camiones apropiados.
Una vez finalizado el experimento, los grupos A y AT fueron alimentados con heno de alfalfa, agua y
suplementos salinos en bloques a libre acceso.
Se analizaron los cambios especficos que se producen en el rumen y en la sangre de novillos
sometidos a los diferentes tratamientos.
Para ello se tomaron muestras del contenido ruminal al inicio del experimento (0 hs.) y luego de las 32
hs. de tratamiento para la determinacin de pH y cidos grasos voltiles totales (AGV). Los resultados
obtenidos de muestran en la figura 1.
En muestras de sangre venosa se determin adems la concentracin de glucosa y lpidos totales. Los
resultados se muestran en la figura 2.
% AGV en rumen, en relacin a 0 hs. 100%
pH ruminal
10 140 90%
0 hs. 32 hs 0 hs. 32 hs 80%
120
8 70%
100
60%
6 80 50%
pH

40%
60
4 30%
40 20%
2
20 10%
0%
0 0
C A AT C A AT
Figura 1: Efecto del ayuno y el transporte sobre el pH ruminal y el contenido de cidos grasos
voltiles en rumen de novillos de carne. C: alimentacin sin restricciones; A: privado de alimentacin
por 32 horas; AT: privado de alimentacin y transportado por 32 horas.
% Glucosa en sangre, en relacin a 0 hs. %%
Lpidos en sangre,
Triglicridos en relacin
en sangre, a 0 hs. a 0 hs.
en relacin

160
0 hs. 32 hs 0 hs. 32 hs 0 hs. 32 hs
125 150 140
125 120
100
100
100
75 80
75
50 60
50 40
25 25 20
0 0 0
C A AT C C A A AT AT
Figura 2: Efecto del ayuno y el transporte sobre la concentracin de glucosa y lpidos totales en
sangre de novillos de carne. C: alimentacin sin restricciones; A: privado de alimentacin por 32
horas; AT: privado de alimentacin y transportado por 32 horas.

10 Problema Metabolismo 3 Medicina Veterinaria

 GUA PROBLEMAS METABOLISMO QUMICA BIOLGICA 2016

A partir del anlisis de la informacin aportada por los grficos que se presentan, conteste
JUSTIFICANDO:
1. Realice un esquema del diseo experimental donde se muestre: tipos de tratamiento, nmero
animales, muestras empleadas, momentos de muestreo y variables analizadas.
2.a. A partir de la comparacin de los resultados presentados en la figura 1 (pH y contenido de AGV)
correspondiente a los tratamientos C, A y AT, explique por qu se obtuvieron estos resultados
indicando la/s va/s metablica/s del rumen involucradas.
2.b. Analice y explique la posible relacin entre el pH ruminal y contenido de AGV en los diferentes
tratamientos aplicados.
3. Analice y explique cmo afecta el ayuno de 32 hs (A) y la combinacin de ayuno y transporte (AT)
los valores sanguneos de glucosa con respecto a los animales del grupo control (C), alimentados
sin restriccin.
4. Analice y explique cmo afecta el ayuno de 32 hs (A) y la combinacin de ayuno y transporte (AT)
los valores sanguneos de lpidos con respecto a los animales del grupo control (C), alimentados sin
restriccin.
5. Esquematice brevemente el /los rgano/s y la/s va/s metablicas involucradas que explicaran los
valores sanguneos de contenido de glucosa y lpidos en los diferentes grupos de animales (C, A y
AT). Indique cules seran los principales precursores y moduladores de las vas mencionadas.
Considere los procesos que ocurren desde la ingesta de alimentos hasta su utilizacin y/o
almacenamiento.
6. A partir de la comparacin de los valores obtenidos al inicio del experimento (0 hs.) y luego de 32
hs. en animales sometidos a ayuno (A) o a ayuno y transporte (AT), considera que la variaciones
observadas en rumen (pH y AGV) y en sangre (glucosa y lpidos) se deben solamente al ayuno o
habra un efecto adicional asociado al transporte.

Para responder a lo que se pide recuerde que:

Justificar es probar una cosa con razones convincentes. Pide que se expongan causas o razones de
algn hecho o que se defienda alguna idea o postura.
Analizar: distinguir y separar las partes de un todo dado para conocer sus elementos y establecer las
relaciones entre ellos.
Comparar: Fijar la atencin en dos o ms objetos, hechos o ideas para descubrir sus relaciones o
estimar sus diferencias y/o semejanzas.
Explicar: Es producir razones o argumentos de manera ordenada. Establecer relaciones entre las
razones o argumentos que lleven a modificar un estado de conocimiento. Es dar a conocer la causa o
razn de una cosa. La respuesta debe responder a la pregunta por qu?, debe ser exhaustiva y el
desarrollo de ideas, claro.
Comporta dos operaciones:
Producir razones o argumentos que enumeren cualidades, propiedades, caractersticas, etc.
Establecer relaciones causales entre las razones y los argumentos.

Elaborado a partir de:

Galyean, M. L.; Lee, R. W.; Hubbert,M. E. 1981. Influence of fasting and transit on ruminal and blood
metabolites in beef steers. J. Anim. Sci. 53: 7-18. Disponible en:
http://www.journalofanimalscience.org/content/53/1/7.full.pdf+html

11 Problema Metabolismo 3 Medicina Veterinaria

 GUA PROBLEMAS METABOLISMO QUMICA BIOLGICA 2016
Problema 4 Metabolismo

Diferencias en el perfil enzimtico muscular y respuesta metablica a la lidia (corrida de toros) en

toros de uno a tres aos de edad.
El crecimiento fsico promueve diversas adaptaciones sistmicas que afectan los pasos de la cadena de
transporte de oxgeno, de modo que la relacin entre las vas oxidativas y glucolticas (anaerbicas) para la
sntesis energtica muscular vara, tanto en reposo como durante el ejercicio.
La respuesta metablica muscular al ejercicio depende parcialmente de la composicin fibrilar, propiedades
metablicas y contrctiles de las miofibras y perfil enzimtico, caractersticas que varan con la edad.
En bovinos, el crecimiento fsico se caracteriza por un incremento en la proporcin relativa de fibras,
pasando de fibras de contraccin rpida y metabolismo oxidativo y glucoltico hacia fibras de contraccin
rpida y metabolismo fundamentalmente glucoltico (anaerbico).
Sin embargo, estas diferencias metablicas y en la composicin fibrilar del msculo glteo medio no son
claras al estudiar toros de lidia. Durante la lidia (corrida de toros), se producen cambios en las vas
metablicas de obtencin de energa.
La presente investigacin tiene como objetivo analizar si la respuesta metablica a la lidia y el perfil
enzimtico muscular varan de forma significativa entre animales de diferentes edades.
MATERIAL Y MTODOS
Animales. Se han incluido 24 animales en esta investigacin, divididos en tres grupos de edad: A (1 ao de
edad; n=6), B (2 aos de edad; n=6) y C (3 aos de edad; n=12). Todos ellos estaban sanos, listos para su
lidia y cumplieron los requisitos legales para una plaza de primera categora.
Extraccin de biopsias musculares. Se obtuvieron biopsias musculares dentro de los 3 min luego de la lidia,
segn la tcnica de biopsia percutnea. Una vez obtenidas, las muestras fueron congeladas en nitrgeno
lquido y almacenadas a -80C hasta su anlisis.
Procesamiento y anlisis de las biopsias musculares. Las fibras musculares fueron pesadas y divididas en
fracciones en las que se determinaron las concentraciones musculares de glucgeno (GLU), lactato (LA),
glucosa-6-P (G6P) y adenosina trifosfato (ATP). Los resultados se expresaron en mmol/kg PS (peso seco).
Se cuantificaron adems las actividades de las enzimas glucgeno fosforilasa (PHOS), hexokinasa (HK),
lactato deshidrogenasa (LDH), citrato cintasa (CS) y 3-OH-acil coenzima A deshidrogenasa (HAD). En
todos los casos, las actividades enzimticas fueron determinadas a 25C y expresadas en mmol/kg PS min.
RESULTADOS
La presente investigacin analiza las diferencias en la respuesta metablica a la lidia y en el perfil enzimtico
muscular en toros bravos con edades comprendidas entre 1 y 3 aos.
Las concentraciones musculares post-lidia de GLU, LA, G6P y ATP se representan en la figura 1 para los
tres grupos de edad (A: 1 ao de edad, B: 2 aos de edad y C: 3 aos de edad). Las actividades musculares
de las 5 enzimas analizadas (PHOS, HK, LDH, CS y HAD) se presentan en la figura 2.
A partir del anlisis de la informacin aportada por los grficos que se presentan, conteste justificando:
1.a. Nombre y esquematice brevemente las vas metablicas en las que intervienen los metabolitos (GLU,
LA, G6P y ATP) y las enzimas (PHOS, HK, LDH, CS, HAD) analizadas en msculo, en este trabajo.
Especifique posibles relaciones con otros tejidos/rganos.
1.b. Para las enzimas estudiadas especifique cules seran los sustratos y productos de cada una de ellas
(reaccin correspondiente).
1.c. Para las vas metablicas indicadas en 1.a, especifique cules corresponderan a vas aerbicas y
anaerbicas. Indique la localizacin subcelular (citoplasma o mitocondria) de las mismas. Justifique su
respuesta indicando el aceptor de equivalentes de reduccin correspondiente.
1.d. Indique cules seran los precursores y los rganos/tejidos involucrados para que el msculo pueda
recuperar los metabolitos indicados en 1.a. para una prxima lidia. Considere que durante la
recuperacin se les aporta una dieta equilibrada de granos y fibras.
2.a. Analice e interprete cmo afecta la edad de los toros bravos tras la lidia, las concentraciones
musculares de glucgeno (GLU), lactato (LA), glucosa-6-P (G6P) y adenosina trifosfato (ATP).
Relacione su respuesta con las actividades enzimticas (PHOS, HK, LDH, CS, HAD) medidas en
msculo en condiciones de laboratorio, esto es en condiciones de velocidad mxima.
2.b. Para las enzimas analizadas en 2.a. y considerando la va metablica a que corresponden indique
JUSTIFICANDO que tipo de metabolismo muscular predomina (aerbico y/o anaerbico) y analice el
comportamiento en funcin de la edad de los toros bravos tras la lidia afecta.

12 Problema Metabolismo 4 Medicina Veterinaria

 GUA PROBLEMAS METABOLISMO QUMICA BIOLGICA 2016
2.c. Analice y explique cmo afecta la edad de los toros bravos tras la lidia la eficiencia energtica
(produccin de ATP) en relacin a las vas metablicas correspondientes.
3. Considerando los anlisis realizados (metabolitos y actividades enzimticas), indique justificando cual
sera la edad de los animales en que el msculo locomotor del toro de lidia alcanza su mximo el
potencial oxidativo.
Significado consignas: Analizar: distinguir y separar las partes de un todo dado para conocer sus elementos y
establecer las relaciones entre ellos. Interpretar: Explicar el sentido de una cosa. La interpretacin debe partir de un
anlisis previo y de l se deriva el sentido. Se pueden hacer relaciones con otros elementos.
Explicar: Es producir razones o argumentos de manera ordenada. Establecer relaciones entre las razones o argumentos
que lleven a modificar un estado de conocimiento. Es dar a conocer la causa o razn de una cosa. La respuesta debe
responder a la pregunta por qu?, debe ser exhaustiva y el desarrollo de ideas, claro. Comporta dos operaciones:
-Producir razones o argumentos que enumeren cualidades, propiedades, caractersticas, etc.
-Establecer relaciones causales entre las razones y los argumentos.

Glucgeno 6 BC
AC Glucosa-6P Lactato
GLU (mmol/kg PS)

150
G6P (mmol/kg PS)

80

LA (mmol/kg PS)
BC 5
120
60 4 AC
3 90
40 BC
2 60
20 AB, AC
1 30
0 0 0
A B C A B C A B C
Grupo Edad Grupo Edad Grupo Edad

Figura 1. Concentraciones musculares medias de glucgeno (GLU),

10 ATP glucosa-6fosfato (G6P), lactato (LA) y ATP tras la lidia en toros bravos
ATP (mmol/kg PS)

8 AB de tres grupos de edad.

6 Grupo A: 1 ao de edad, grupo B: 2 aos de edad y grupo C: 3 aos de
4
edad.
AB: diferencias significativas entre grupos A y B; AC: diferencias
2
significativas entre grupos A y C; BC: diferencias significativas entre
0 grupos B y C. p<0,05.
A B C
Grupo Edad

Glucgeno fosforilasa Lactato deshidrogenasa

LDH (mmol/kg PS min)

Hexoquinasa
HK (mmol/kg PS min)

60 1.5 1800
PHOS (mmol/kg PS min)

BC
50 1.2 1500 BC
40 AB, AC 1200 AB
AB 0.9
30 900
0.6
20 600
10 0.3 300
0 0.0 0
A B C A B C A B C
Grupo Edad Grupo Edad Grupo Edad

Figura 2. Actividades musculares

medias de glucgeno fosforilasa
(PHOS), hexoquinasa (HX), lactato
Citrato Sintasa 3-OH-acil CoA deshidrogenasa
CS (mmol/kg PS min)

HAD (mmol/kg PS min)

40 30 deshidrogenasa (LDH), citrato

BC
25
30 AC
sintasa (CS) y 3-OH-acil coenzima
AB, AC 20
A deshidrogenasa (HAD) y tras la
20 15
lidia en toros bravos de tres grupos
10
10 de edad. AB: diferencias
5
0
significativas entre grupos A y B;
0
A B C A B C AC: diferencias significativas entre
Grupo Edad Grupo Edad grupos A y C; BC: diferencias
significativas entre grupos B y C.
p<0,05.
Adaptado de: Muoz. A.; Castejn, F. M.; Agera, E. I. 2007. Diferencias en el perfil enzimtico muscular y respuesta metablica a
la lidia en toros de uno a tres aos de edad. Arch. Med. Vet. 39 (1): 35-41.

13 Problema Metabolismo 4 Medicina Veterinaria

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Problema 5 Metabolismo

Evaluacin del entrenamiento tradicional del caballo criollo chileno de rodeo mediante el anlisis de
variables fisiolgicas y bioqumicas sanguneas.
El ejercicio fsico produce diversos cambios en la composicin y distribucin de los constituyentes
sanguneos, dirigidos a aumentar el aporte de O2, tanto al msculo esqueltico como al cardaco, con el fin de
sostener el aumento del metabolismo y facilitar la remocin de los productos metablicos de desecho. Por lo
tanto, el proceso de obtencin, transporte y utilizacin de la energa por el msculo en trabajo, constituye la
base de la respuesta fisiolgica al ejercicio.
La preparacin de un caballo para cualquier tipo de competencia involucra acondicionamiento porque uno de
los principales objetivos del entrenamiento es aumentar la capacidad de consumo de oxgeno. Este mayor
consumo de oxgeno se manifiesta, no slo como una intensificacin del metabolismo en el ejercicio, sino
tambin, por cambios adaptativos que se traducen en modificaciones de los niveles de algunos metabolitos
sanguneos.
Mediante la medicin de los constituyentes sanguneos, es posible determinar las modificaciones fisiolgicas
y bioqumicas que ocurren como respuesta al ejercicio y entrenamiento al cual son sometidos los caballos.
Los resultados que se presentan corresponden a un estudio cuyo objetivo fue analizar los cambios
metablicos que presenta el caballo Criollo Chileno durante los ejercicios de entrenamiento habitual en los
criaderos, previo al perodo de competencias.
La muestra estuvo constituida por 17 caballos Criollos Chilenos clnicamente sanos, de 7.5 2.4 aos de
edad que fueron sometidos a las normas de entrenamiento habitual del criadero para participar en una
competencia. Los caballos fueron sometidos diariamente a los ejercicios de entrenamiento durante 6 das a la
semana por un perodo total de 45 das.
Las muestras de sangre se tomaron en dos oportunidades: (1) en reposo, antes de ensillar los caballos, y (2)
inmediatamente despus de finalizado el ejercicio de entrenamiento. Esta rutina se repiti a los 15, 30 y 45
das de entrenamiento.
Se determinaron las concentraciones de glucosa, cido lctico y cidos grasos libres (AGL) (figura 1) y la
actividad de las enzimas creatin kinasa (CK) y lactato deshidrogenasa (LDH) (figura 2).
Se describe que el aumento en la actividad srica de estas enzimas puede reflejar dao en la membrana que
rodea las fibras musculares como consecuencia de las condiciones de ejercicio.

Reposo Post-ejercicio Reposo Post-ejercicio 0.6 Reposo Post-ejercicio

12 6.0
c. Lctico, mmol/L

* *
Glucosa, mmol/L

10 * * * * 0.5
AGL, mmol/L

* 5.5
8 0.4
*
6 5.0 0.3
#
4
*
0.2
4.5
2 0.1
0 4.0 0
0 15 30 45 0 15 30 45 0 15 30 45
Das de entrenamiento Das de entrenamiento Das de entrenamiento

Figura 1. Valores promedio + desvo estndar de concentraciones plasmticas de cido lctico, glucosa,
cidos grasos libres (AGL) en caballos Criollos Chilenos de rodeo previo y posterior a ejercicios de
entrenamiento en el criadero durante un perodo de 45 das.
* Diferencias estadsticamente significativas con respecto al valor de reposo (p<0.05).
# Diferencias estadsticamente significativas en animales post-ejercicio con respecto a da 0 de
entrenamiento.

14 Problema Metabolismo 5 Medicina Veterinaria

 GUA PROBLEMAS METABOLISMO QUMICA BIOLGICA 2016

Reposo Post-ejercicio 150 Reposo Post-ejercicio

400
120

LDH (U/L)
300

CK (U/L)
90
200
60
100 30

0 0
0 15 30 45 0 15 30 45
Das de entrenamiento Das de entrenamiento

Figura 2. Valores promedio + desvo estndar de actividad plasmtica de enzimas lactato deshidrogenasa
(LDH) y creatn kinasa (CK) en caballos Criollos Chilenos de rodeo previo y posterior a ejercicios de
entrenamiento en el criadero durante un perodo de 45 das.
Diferencias estadsticamente no significativas con respecto al valor de reposo.
Diferencias estadsticamente no significativas en animales post-ejercicio durante el entrenamiento.
A partir del anlisis de la informacin aportada por los grficos que se presentan, conteste justificando:
1. Realice un esquema del diseo experimental donde se muestre: tipos de tratamiento, momentos de
muestreo y variables analizadas.
2.a. Realice un esquema similar al que se presenta indicando los rganos que liberan, utilizan y/o producen
los metabolitos (cido Lctico, Glucosa y AGL) y las enzimas (LDH y CK) analizadas en sangre en este
trabajo. Especifique las vas metablicas correspondientes en cada tejido/rgano y posibles relaciones
entre los mismos. Agregue las flechas que considere necesarias.
Hgado: Msculo:

Circulacin
sangunea
Tejido Adiposo: Otros rganos/tejidos

2.b. Para las enzimas estudiadas (LDH y CK) especifique cules seran los sustratos y productos en cada
rgano/tejido que la produce y libera hacia la circulacin sangunea y cul sera el objetivo metablico
en cada caso.
3.a. Al inicio del entrenamiento (comparar valores en da 0: Reposo vs. Pos-ejercicio): analice y explique
cmo afecta el ejercicio los niveles sanguneos de cido lctico, glucosa, cidos grasos libres. Explique
las posibles causas de las diferencias obtenidas.
3.b. Durante el perodo de entrenamiento (15, 30 y 45 das en comparacin a da 0): analice y explique cmo
afectan el perodo de entrenamiento los niveles sanguneos de cido lctico, glucosa y cidos grasos
libres en situacin de reposo y post-ejercicio.
3.c. Considerando que las determinaciones se realizan en suero sanguneo, realice 2 esquemas que muestren
brevemente el /los rgano/s y la/s va/s metablicas involucradas que explicaran los resultados
observados en situacin de reposo y post-ejercicio. Cules seran los principales precursores
participantes.
3.d. Especifique cul sera el objetivo metablico de las vas mencionadas en 3.c. y si corresponden al
metabolismo aerbico o anaerbico.
4.a. Tomando como referencia los valores obtenidos en reposo, analice la respuesta al perodo de
entrenamiento de los valores sanguneos de las actividades enzimticas CK y LDH. Considera que las
condiciones de entrenamiento produjeron dao en las fibras musculares? Justifique su respuesta.
4.b. Indique cules seran los precursores, las vas metablicas y las reacciones que producen energa para
mantener la actividad muscular?

15 Problema Metabolismo 5 Medicina Veterinaria