ALP-LQ

Fosfatasa alcalina
p-Nitrofenilfosfato. Cintico. Lquido. DGKC

Determinacin cuantitativa de fosfatasa alcalina (FAL)

IVD CLCULOS
A/min x 3300 = U/L de FAL
Conservar a 2-8C
Unidades: La unidad internacional (UI) es la cantidad de enzima que convierte 1 mol
PRINCIPIO DEL MTODO de substrato por minuto, en condiciones estndar. La concentracin se expresa en
La fosfatasa alcalina (FAL) cataliza la hidrlisis del p-nitrofenilfosfato unidades por litro (U/L).
(pNPP) a pH 10,4 liberando p-nitrofenol y fosfato, segn la siguiente Factores de conversin de temperaturas
reaccin: Los resultados pueden transformarse a otras temperaturas multiplicando por:
FAL
p-Nitrofenilfosfato + H2O p-Nitrofenol + Fosfato Temperatura Factor para convertir a
de medicin 25C 30C 37C
La velocidad de formacin del p-Nitrofenol, determinado fotomtricamente, 25C 1,00 1,22 2,64
es proporcional a la concentracin cataltica de fosfatasa alcalina en la 30C 0,82 1,00 1,33
muestra ensayada1,2. 37C 0,61 0,75 1,00

SIGNIFICADO CLNICO CONTROL DE CALIDAD

Las fosfatasas alcalinas son enzimas que se encuentran presentes en Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados:
SPINTROL H Normal y Patolgico (Ref. 1002120 y 1002210).
casi todos los tejidos del organismo, siendo particularmente alta su
Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, se debe revisar el
presencia en huesos, hgado, placenta, intestinos y rin. instrumento, los reactivos y la tcnica.
Tiene importancia clnica tanto su aumento como su disminucin de los Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer
niveles en plasma. correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias.
Causas ms probables de aumento del nivel de FAL:
Enfermedad sea de Paget, obstrucciones hepticas, hepatitis, 1
hepatotoxicidad por medicamentos y osteomalacia.
VALORES DE REFERENCIA
25C 30C 37C
Causas ms probables de disminucin del nivel de FAL:
Nios (1-14 aos) < 400 U/L < 480 U/L < 645 U/L
Cretinismo y dficit de vitamina C1,5,6.
Adultos 60 -170 U/L 73 - 207 U/L 98 - 279 U/L
El diagnstico clnico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos
Factores que pueden afectar los valores de referencia son: ejercicio, periodos
clnicos y de laboratorio.
de crecimiento en nios y embarazo.
REACTIVOS Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio
R1 establezca sus propios valores de referencia.
Dietanolamina (DEA) pH 10,4 1 mmol/L
Tampn Cloruro de magnesio 0,5 mmol/L
CARACTERSTICAS DEL MTODO
R2 Rango de medida: Desde el lmite de deteccin 4 U/L hasta el lmite de linealidad de
p-Nitrofenilfosfato (pNPP) 10 mmol/L
Substrato 825 U/L.
Si la concentracin de la muestra es superior al lmite de linealidad, diluir 1/10 con
PREPARACIN ClNa 9 g/L y multiplicar el resultado final por 10.
Reactivo de trabajo (RT): Precisin:
Mezclar: 1 vol. de (R2) Substrato + 4 vol. (R1) Tampn. Intraserie (n= 20) Interserie (n= 20)
Media (U/L) 170 408 165 446
Estabilidad: 1 mes a 2-8C o 10 das a temperatura ambiente. SD 3,94 7,45 2,26 5,17
CV (%) 2,30 1,82 1,37 1,16
CONSERVACIN Y ESTABILIDAD
Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de caducidad Sensibilidad analtica: 1 U/L = 0,0003 A/min.
Exactitud: Los reactivos SPINREACT (y) no muestran diferencias sistemticas
indicada en la etiqueta del vial, cuando se mantienen los viales bien
significativas cuando se comparan con otros reactivos comerciales (x).
cerrados a 2-8C, protegidos de la luz y se evita su contaminacin. No Los resultados obtenidos con 50 muestras fueron los siguientes:
usar reactivos fuera de la fecha indicada. Coeficiente de regresin (r): 0.99.
Indicadores de deterioro de los reactivos: Ecuacin de la recta de regresin: y= 0.9995x - 1.1116.
- Presencia de partculas y turbidez. Las caractersticas del mtodo pueden variar segn el analizador utilizado.
- Absorbancias del Blanco a 405 > 1,30.

MATERIAL ADICIONAL INTERFERENCIAS

- Espectrofotmetro o analizador para lecturas a 405 nm. El fluoruro, oxalato, citrato y EDTA inhiben la actividad de la fosfatasa alcalina,
- Bao termostatable a 25C, 30C 37 C ( 0,1C) por lo que no deben ser utilizados como anticoagulantes.
- Cubetas de 1,0 cm de paso de luz. La hemlisis interfiere debido a la elevada concentracin de fosfatasa alcalina en
- Equipamiento habitual de laboratorio. los hemates1,2. Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren
en la determinacin de la fosfatasa alcalina3,4.
MUESTRAS
Suero o plasma heparinizado1. Usar suero libre de hemlisis, separado de NOTAS
los hemates lo antes posible.
SPINREACT dispone de instrucciones detalladas para la aplicacin de este
Estabilidad: 3 das a 2-8C.
reactivo en distintos analizadores.
PROCEDIMIENTO
1. Condiciones del ensayo: BIBLIOGRAFA
Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . .. . . .405 nm 1. Wenger C. et al. Alkaline phosphatase. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co.
Cubeta:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . 1 cm paso de luz St Louis. Toronto. Princeton 1984; 1094-1098.
Temperatura constante . . . . . . . . . . . . . . . .. . . 25C / 30C / 37C 2. Rosalki S et al. Clin Chem 1993; 39/4: 648-652.
3. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
2. Ajustar el espectrofotmetro a cero frente a agua destilada o aire. 4. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
3. Pipetear en una cubeta: 5. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
6. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
RT (mL) 1,2
Muestra (L) 20 PRESENTACIN

4. Mezclar, incubar 1 minuto. R1 60 mL

Ref: 41240 R2 15 mL
5. Leer la absorbancia (A) inicial de la muestra, poner en marcha el
Cont.
cronmetro y leer la absorbancia cada minuto durante 3 minutos. R1 240 mL
6. Calcular el promedio del incremento de absorbancia por minuto Ref: 41242
R2 60 mL
(A/min).

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