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Aplicao de microRNAs na prtica clnica
cer os avanos realizados nessa rea para futuramente aplic-los caso isso ocorra a enzima RISC, que nesse caso estar associada
na prtica. protena Argonaute, quebrar a fita de RNAm em duas7, aps a
O objetivo desta pesquisa foi mostrar alguns estudos recentes de clivagem o miRNA permanece intacto e continua exercendo seu
miRNAs que envolvem a rea da sade. papel modulador12. Entretanto, esse mecanismo no observado
com frequncia em clulas de animais, sendo a principal forma
DESENVOLVIMENTO de controle da expresso gnica em plantas6. A segunda, mais
comum nos animais, acontece quando h um pareamento imper-
Biognese e mecanismo de ao feito entre o miRNA e o RNAm, embora os passos no estejam
Os genes que contem os microRNAs so transcritos, na maioria elucidados. Acredita-se que o complexo miRNA, Ago-2 e RISC
dos casos, pela RNA polimerase II, gerando o miRNA primrio transporte o RNAm para compartimentos citoplasmticos cha-
(pri-miRNA) com algumas centenas de nucleotdeos5,7 e como os mados corpos de processamento que composto por protenas
RNAm acrescido uma cauda de poliadenosinas na poro 3 e que possuem afinidade com a Ago-2 e que armazenam e degra-
um cap de 7-metilguanosina na poro 52. Essa primeira estru- dam o RNAm; outros estudos, todavia, mostram que o miRNA
tura gerada contm regies em que os nucleotdeos se pareiam e e suas protenas associadas possam atuar no controle da traduo
regies no pareadas que formam alas8. Ainda no ncleo, a Rnase do RNAm, impedindo a ligao dos ribossomos ao RNAm, ou
III-tipo Drosha quebra locais de pareamento do pri-miRNA, libe- interrompendo a traduo aps seu incio, ou decompondo o
rando uma estrutura similar a um grampo de cabelo denominado cap de 7-metilguanosina na poro 5 que funciona como uma
miRNA precursora (pre-miRNA), que possui aproximadamente proteo contra os mecanismos de processamento7,8.
70 nucleotdeos2,5. Protenas relacionadas com o transporte nuclear importante ressaltar tambm que como o miRNA uma mo-
como a exportina-5 e a Ran-GTP transportam o pr-miRNA para lcula pequena, cada um deles pode apresentar vrios RNAm al-
o citoplasma6,12. Em seguida, a ala (regio no pareada) removi- vos e alguns RNAm necessitam de vrios miRNA para inibio.
da pela enzima DICER, formando somente um duplex de RNA Supe-se que 30% dos genes de animais sejam alvo de miRNAs6.
com 22 pares de nucleotdeos que iro se associar com a protena Desta forma, a sub ou superexpresso de um miRNA pode cul-
Argonaute (Ago). Para finalizar, o complexo proteico denominado minar em grandes disfunes celulares, consequentemente teci-
RISC separa o duplex, permanecendo o miRNA maduro associado duais e sistmicas.
a Ago e a outra metade degradada. Acredita-se que a instabilidade
termodinmica da regio 5 seja a responsvel por definir qual me- Cncer
tade ser o miRNA maduro5 (Figura 1). Por regularem a expresso gnica, os miRNAs tambm partici-
Existem duas maneiras pelas quais os miRNAs silenciam o pam da modulao de oncogenes, genes que ativam o ciclo celu-
RNAm: a primeira ocorre quando h uma complementaridade lar, e supressores tumorais, os quais suprimem a diviso celular8,
perfeita ou quase perfeita das bases do miRNA com a do RNAm, sendo mais um fator na patognese dos tumores.
As primeiras evidncias do envolvimento dos miRNAs em cncer rebro de pacientes psiquitricos e controles e percebeu que estes
foram feitas por Calin e col.13, que ao estudar a regio 13q14, fre- estavam diminudos tanto em pacientes esquizofrnicos quanto
quentemente deletada em casos de leucemia linfoctica crnica, em pacientes bipolares. O gene desse miRNA um ntron do
perceberam que essa era responsvel pelos genes de 2 miRNAs, o gene GRID1, que codifica uma das subunidades do receptor de
miR-15a e o miR16-1, que inibiam a expresso de um oncogene, glutamato, que tambm est diminudo na esquizofrenia e no
posteriormente identificado como o antiapoptose BCL-22. transtorno bipolar17.
Da mesma forma que descrito acima, estudos mostraram que em O receptor glutamatrgico N-metil-D-aspartato (NMDA) tam-
clulas cancergenas a quantidade de miRNA est diminuda7. bm controlado por miRNA; e verificou-se que alteraes gen-
No cncer de pulmo, um dos mais agressivos, foi constada a ticas nesse receptor estavam associadas a baixos nveis de miR-219
diminuio de miRNA let-7 que modula a ao dos oncogenes e essa condio estaria associada a alteraes comportamentais19.
RAS e MYC8, demonstrou-se tambm que a superexpresso desse Outra forma de ao dos miRNAs no controle do Brain-derived
miRNA resultava na inibio do crescimento do cncer10. neurotrophic factor (BDNF), uma substncia importante na neu-
Com relao ao cncer de mama, tambm foi observada reduo roplasticidade e que se encontra em nveis alterados na depresso,
de alguns miRNA, como miR-17-5p e o miR14514. A menor transtorno bipolar e esquizofrenia17. O BDNF tem sua expresso
expresso de miR-126, miR-206 ou miR-335 se relacionam com diminuda pelo miR-30a, miR-134 e miR195. J o miR-132 re-
menor sobrevida, uma vez que nessa neoplasia quanto maior for gula positivamente o BDNF e potencializa os receptores NMDA.
a discrepncia na expresso dos miRNAs, maior o nmero de lin- Foram encontrados nveis reduzidos de miR-132 no crtex pr-
fonodos comprometidos e a invaso vascular. Observou-se tam- -frontal de pacientes esquizofrnicos e bipolares o que juntamen-
bm que alguns subtipos do cncer de mama tm uma ntima te com a ao do miR-129 ajuda a elucidar porque a via do glu-
relao com o estrgeno, este quando ligado ao seu receptor (tipo tamato est diminuda nessas patologias20.
E2) desencadeia reaes intracelulares que diminuem fatores de Os conhecimentos do papel dos miRNAs em doenas psiqui-
transcrio de miRNA, favorecendo o crescimento do tumor15. tricas ainda restrito e algumas pesquisas da rea apresentam re-
Certos miRNAs, no entanto, tm uma ao oncognica e sua sultados conflitantes, dessa forma so necessrios maiores estudos
expresso est aumentada em tumores, pois modulam negati- para uma melhor compreenso do assunto.
vamente supressores tumorais; como o caso do miR-221 no
gliobastoma, do miR-372 e do miR-373 em neoplasia de clulas Cardiologia
testiculares e do miR-221, miR-222 e miR-146 nos tumores de Cada tecido expressa uma variedade de miRNAs que possibilitar
tireoide8. a clula exercer as funes a qual foi estabelecida. Nas clulas cr-
Vale ressaltar que como cada tecido apresenta um perfil proteico dicas o miR-1, miR-133a e o miR-208 tm papel fundamental no
nico, h um padro de RNAm prprio; dessa forma um mesmo desenvolvimento e na manuteno da funo cardaca9,21. Sabe-se
miRNA pode ter papis opostos, a exemplo do miR-115 que se tambm que miRNAs podem permanecer por longos perodos
encontra diminudo no cncer de mama e aumentado no linfoma estveis no plasma. Assim, compararam-se amostras de sangue de
de clulas B2. pacientes que haviam sofrido infarto agudo do miocrdio (IAM),
Observou-se tambm que cnceres de clon e pulmo com mal de pacientes cardiopatas sem IAM recente e de indivduos sadios,
prognstico apresentavam perda da heterozigose do brao lon- constatou-se que nos pacientes com IAM e nos cardiopatas sem
go do cromossomo 14, onde est o gene da enzima DICER10,16. IAM os nveis de miR-1, miR-133a, miR-499 eram significati-
Com a perda dessa enzima, a produo de miRNA fica preju- vamente maiores que os do controles, porm o miR-208a s foi
dicada, gerando uma subexpresso de miRNAs com funo su- encontrado no plasma de pacientes com IAM. Na sequncia esta-
pressora tumoral como o let-7, este reduzido associa-se a piores beleceu-se a especificidade e sensibilidade do miR-208 como bio-
prognsticos de cncer de pulmo e maiores chances de metstase marcador de IAM, obtendo os valores de 100% e 90,9%, respec-
em cncer de mama15. tivamente22; alm de diagnstico, este tambm possui capacidade
Substncias com o potencial de reduzir ou induzir microRNA prognstica: nveis muito elevados correlacionam-se com menor
esto sendo estudadas como possveis teraputicas para o cncer2. frao de ejeo do ventrculo esquerdo e maior possibilidade de
Em ratos, j foi possvel suprimir a expresso de miRNAs com a gerar insuficincia cardaca e de mortalidade em 6 meses23. A van-
infuso, por via venosa, de um oligonucleotdeo conjugado com tagem do uso de miR-1 e miR-133 esto na sua deteco precoce
colesterol que continha uma cadeia complementar a um miRNA, no sangue perifrico (pico em 156 minutos), mais rapidamente
a essa nova classe de molculas deu-se o nome de antagomirs6. que a troponina I, no entanto podem ser detectados em outras
ocasies, como nas leses de musculoesqueltico23.
Doenas psiquitricas Foi encontrada uma disfuno de miRNAs tambm na hipertro-
Esto relacionadas com alteraes concomitantes de vrios circui- fia no maligna do corao, uma resposta patolgica hipertenso
tos de sinalizao, dessa forma, busca-se nos miRNAs frmulas arterial, isquemia cardaca, valvopatias e desordens endcrinas24.
que consigam explicar a disfuno na expresso de vrios genes e O miR-21 se encontra aumentado nessas condies, pois este fa-
consequentemente encontrar novas teraputicas17. vorece a replicao de fibroblastos por inibir a protena Sprouty,
Um estudo desenvolvido por Zhu e col18, usando bioinformtica que impede que o fator de crescimento do fibroblasto modifique
demonstrou que o miR-346 e o miR-566 estavam relacionados a membrana celular e gere seu efeito25. Em ratos, demonstrou-
a modulao de diversos genes presentes na esquizofrenia. Aps -se que a superexpresso do miR-195 era suficiente para gerar a
essa primeira investigao, mediu-se os nveis do miR-346 do c- hipertrofia do micito cardaco24. Por outro lado, a expresso do
miR-1 e miR-133 apresenta uma relao oposta com a hipertro- tes miRNAs, os iRNAs que possuem a capacidade de penetrar
fia por regularem cascatas de sinalizao nos sarcmeros, quando nas clulas e inibir os RNAm especficos. Entretanto, essas alter-
inibidos por antagomirs sustentam a hipertrofia21,23. nativas podem gerar diversos efeitos colaterais, pois antagomirs e
O miR-1 um miRNA muito expresso nas clulas precursoras do iRNAs podem associar-se, com uma complementaridade parcial,
corao, agindo na diferenciao do tecido. No entanto, em ex- a alvos inesperados e desencadear reaes adversas, alm disso,
cesso torna-se um fator pr-arrtmico, pois silenciam canais ini- essas molculas podem provocar respostas imunes, gerando infla-
cos como o GJA1, KCNJ2, HCN2 e HCN4. Estes ltimos esto mao e morte tecidual6.
envolvidos na hiperpolarizao de clulas cardacas, mantendo
assim seu ritmo; o HCN2 regulado tambm pelo miR-13324. CONCLUSO
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