Bibliografia:

MURRAY, Robert K. et al. Harpers Illustrated Biochemistry, 26.Ed. Lange

Medical Books/McGraw-Hill. 2003. Cap. 43, p. 456 a 467.

MECANISMOS DE TRANSDUO DE SINAL

Um dos principais tipos de receptores extracelulares so os receptores

acoplados a protenas G, de que so exemplo os receptores adrenrgicos.
De uma maneira geral, os receptores acoplados a protenas G incluem sete
segmentos transmembranares, em hlice , apresentando com frequncia
pontes de glicosilao.
Os receptores extracelulares esto geralmente associados a mecanismos de
transduo de sinal, responsveis pela transmisso da informao que os
hormnios e outros sinalizadores qumicos transportam, desde o receptor, na
superfcie da clula, at ao seu interior, onde uma srie de eventos ocorrem em
resposta ligao hormnio-receptor.
Existem diferentes mecanismos de transduo de sinal. Esses diferentes
mecanismos esto normalmente associados a segundos mensageiros
diferentes.
Os principais segundos mensageiros associados a transduo de sinal so,
ento:
1) AMP cclico (cAMP)
2) GMP cclico (cGMP)
3) Fosfatidilinositois, Diacilgliceris e Clcio
4) Cinases

OBS: Segundo mensageiro corresponde a uma pequena molcula que se

forma ou que libertada no citosol (exceto no caso dos diacilgliceris, que
permanecem na membrana) em resposta a um sinal extracelular (primeiro
mensageiro) e que permite a conduo deste sinal at ao interior da clula.

1) cAMP como segundo mensageiro

Fig. 2 Mecanismo de Transduo com cAMP como segundo mensageiro (Etapas 1, 2 e 3)
Este mecanismo de transduo de sinal inicia-se pela ligao de um hormnio
(primeiro mensageiro) a um receptor de superfcie, receptor esse que se
encontra acoplado a uma protena G. As protenas G so heterotrmeros
formados por trs subunidades: , e . (ETAPA 1)
A ligao hormnio-receptor induz a ativao da protena G, que passa pela
clivagem deste heterotrmero em: subunidade e subunidade / (as
subunidades e mantm-se juntas, formando um heterodmero). (ETAPA 2)
A subunidade est ligada a um GDP que, aps a clivagem do heterotrmero,
substitudo por um GTP, processo no qual o magnsio desempenha um
papel essencial. precisamente este conjunto da subunidade ligada ao GTP
que vai ser responsvel pela estimulao ou inibio da enzima adenilato-
ciclase. (ETAPA 3)
De acordo com o tipo de subunidade , teremos diferentes tipos de protenas
G. Se a subunidade for do tipo s, a protena G estimular a enzima
adenilato-ciclase, designando-se por protena Gs (estimulatria); se a
subunidade for do tipo i, ento a protena inibir a enzima adenilato-ciclase,
designando-se por protena Gi (inibitria).
A atividade das protenas G no est apenas limitada modulao de enzimas
(neste caso, a enzima adenilato-ciclase). Elas tambm modulam (ativando ou
inibindo) a atividade de outros elementos efetores, como por exemplo, os
canais inicos. Com efeito:
a subunidade s pode modular a actividade dos canais de sdio, cloreto ou
clcio;
a subunidade i pode modular a actividade de canais de potssio e clcio;
a subunidade / pode modular a actividade de canais de potssio.
A transduo do sinal terminada, ao nvel da modulao da adenilatociclase,
atravs de uma enzima GTPase que cliva o GTP em GDP + Pi. A clivagem do
GTP leva a subunidade a associar-se novamente ao heterodmero /,
reorganizando-se o heterotrmero original, que corresponde protena G no
seu estado inativo. Portanto, a inativao da protena G pela GTPase impede a
modulao da adenilato-ciclase e, logo, termina a progresso do sinal.

Enquanto a transduo de sinal no interrompida, o que que acontece na

clula depois de a adenilato-ciclase ter sido activada pela protena Gs?
(ETAPA 4) Ver figura 3.

A adenilato-ciclase uma protena de membrana responsvel pela converso

do ATP em cAMP (segundo mensageiro).
Por sua vez, o cAMP activa a Protena Cinase A (PKA) que inicia a
fosforilao sucessiva de uma srie de protenas intracelulares que produzem a
resposta da clula ao hormnio. A fosforilao de uma certa protena no
implica a sua ativao; dependendo dos casos, pode verificar-se que a
fosforilao de uma protena leva sua inibio.
No interior da clula, e de acordo com as suas necessidades, este sinal
correspondente protena fosforilada pode ser desligado mediante a ao de
uma fosfatase que cliva o fosfato, convertendo a protena na sua forma no
fosforilada.
Para que o sinal no se prolongue indefinidamente, tambm o cAMP
inativado de acordo com as necessidades da clula. A inativao do cAMP
levada a cabo pela enzima fosfodiesterase que converte o cAMP em AMP
no cclico. A cafena um dos inibidores conhecidos da fosfodiesterase,
contribuindo, por isso, para o prolongamento do sinal.

Fig. 3 Mecanismo de Transduo com cAMP como segundo mensageiro (Etapa 4)

Um exemplo concreto de um hormnio que utiliza o mecanismo de

transduo de sinal atravs do cAMP a Vasopressina ou Hormnio Anti-
Diurtic (ADH).
A Vasopressina secretada pela neuro-hipfise em conjunto com a
neurofisina, cuja funo ainda no est completamente esclarecida. A secreo
de Vasopressina estimulada por uma baixa presso sangunea e nveis altos
de osmolalidade sangunea, detectados pelos barro e osmorreceptores do
organismo.
A Vasopressina, depois de liberada a partir da neuro-hipfise e depois de se ter
dissociado da neurofisina, liga-se, ao nvel das clulas do tbulo contornado
distal do rim, a um receptor de superfcie acoplado a uma protena G, ativando-
a (Figura 4). A ativao da protena G leva ativao da adenilato-ciclase e
consequentemente formao de cAMP que, por sua vez, ativa a Protena
Cinase A (PKA). A PKA fosforila ento uma aquaporina, que agrega, quando
fosforilada, formando uma estrutura de poro que se insere na membrana
plasmtica. O poro aumenta, assim, a absoro de gua e a hemodiluio,
contribuindo, deste modo, para a diminuio da osmolalidade e o aumento da
presso sangunea.
Fig. 4 Mecanismo de Transduo de Sinal da Vasopressina

2) cGMP como segundo mensageiro

S so conhecidas dois hormnios que utilizam o mecanismo de transduo de
sinal mediado por cGMP: o Monxido de Azoto (NO) e o Pptido/Factor
Natriuritico Auricular (ANF).
O Monxido de Azoto (NO) uma molcula sinalizadora gasosa, sintetizada
endogenamente e que, por isso mesmo, considerada um hormnio. Por ser
um gs, o NO difunde-se facilmente atravs das membranas celulares,
regulando uma ampla variedade de processos fisiolgicos, designadamente
funes cardiovasculares, inflamatrias, imunolgicas e neuronais. Apresenta
um perodo de vida muito curto, tendo ao autcrina ou parcrina.
O NO sintetizado pela enzima NO sintase que catalisa a libertao de NO,
por converso da arginina em citrulina (Figura 5).
Depois de ser libertado, o NO difunde-se atravs das membranas e, entrando
na clula-alvo vizinha (ao parcrina), ativa a enzima guanilatociclase
citoslica. A enzima guanilato-ciclase converte o GMP em GMP cclico
(cGMP) que, por sua vez, ativa uma protena cinase, designada por Protena
Cinase G.
Entre outros efeitos, este mecanismo de transduo de sinal leva
desfosforilao das cadeias leves de miosina, o que resulta no relaxamento do
msculo liso vascular e, por conseguinte, na vasodilatao.
Para que o estado de vasodilatao no se prolongue indefinidamente, o
cGMP reconvertido em GMP pela enzima fosfodiesterase do cGMP.
O sildenafil (Viagra), usado no tratamento da disfuno ertil, atua
precisamente, inibindo a ao da fosfodiesterase, o que conduz a um estado
de vasodilatao prolongado.
Fig. 5 Mecanismo de Transduo do Monxido de Azoto (NO)

O Pptido/Factor Natriurtico Auricular (ANF) o segundo exemplo de

hormnio que utiliza o mecanismo de transduo mediado por cGMP.
O ANF um hormnio peptdico libertado pelas aurculas quando ocorre
estiramento do msculo cardaco devido a acentuado aumento de volume
sanguneo.
O hormnio transportado no sangue at s clulas dos ductos colectores dos
rins (Figura 6), onde se liga ao domnio extracelular de um receptor
transmembranar, estimulando a atividade de guanilato ciclase que o domnio
intracelular do receptor desempenha. Portanto, a guanilato ciclase no
citoslica, como no caso do NO, mas transmembranar. O domnio
citoplasmtico do receptor est altamente fosforilado e converte o GMP em
cGMP. O cGMP, por sua vez, vai permitir a ativao da Protena Cinase G,
responsvel pela resposta celular, caracterizada essencialmente pelo aumento
da excreo renal de sdio e gua e, consequentemente, pela diminuio da
presso sangunea.
O ANF atua tambm ao nvel do msculo liso vascular, promovendo a
vasodilatao e, por conseguinte, o aumento do fluxo sanguneo e a diminuio
da presso sangunea.

Fig. 6 Mecanismo de Transduo do Pptido Natriurtico Auricular (ANF)

3) Fosfatidilinositois, Diacilgliceris e Clcio como
segundos mensageiros
Fig. 7 Mecanismo de Transduo com Fosfatidilinositois e Clcio como segundos
mensageiros

Este mecanismo de transduo de sinal inicia-se com a ligao do hormnio a

um receptor transmembranar acoplado a uma protena Gq (Figura 7).
A ligao hormnio-receptor ativa a enzima fosfolipase C (PLC) que catalisa a
degradao de alguns fosfolpidos da membrana, em particular do
Fosfatidilinositol Difosfato (PIP2), em dois produtos diferentes que atuam
como segundos mensageiros: o Trifosfato de Inositol (IP3) e o Diacilglicerol
(DAG).
O Trifosfato de Inositol (IP3) circula livremente no citosol, mobilizando ons
clcio das mitocndrias e sobretudo do retculo endoplasmtico para o citosol.
O aumento dos nveis de clcio no citosol desencadeia um conjunto de
processos, designadamente, a exocitose nos neurnios e clulas endcrinas,
bem como a contrao muscular em associao com a calmodulina. A
calmodulina uma protena com quatro locais de ligao para o clcio. Quando
trs ou quatro desses locais esto ocupados pelo clcio, a calmodulina muda a
sua conformao e inicia mltiplos efeitos no interior da clula, incluindo a
ativao ou inibio de protenas cinases, como por exemplo, a miosina cinase,
responsvel pela contrao do msculo liso.
O Diacilglicerol (DAG) permanece associado membrana celular e, juntamente
com o clcio, ativa a Protena Cinase C (PKC) que fosforila resduos
especficos de protenas-alvo, alterando a sua atividade cataltica.
Para alm disso, a poro lipdica do DAG o cido araquidnico, precursor
das prostaglandinas e outros hormnios, clivado atravs da enzima
fosfolipase A2.
Um exemplo concreto de um hormnio que utiliza este mecanismo de
transduo de sinal o Hormnio de Liberao de Gonadotrofinas (GnRH).

Fig. 8 Mecanismo de Transduo de Sinal da GnRH

A GnRH um hormnio hipotalmico que se liga a um receptor

transmembranar acoplado a uma protena G q (Figura 8). A ligao
hormnioreceptor ativa a enzima fosfolipase C (PLC), o que leva produo de
IP3 e DAG. A ao conjunta destes dois segundos mensageiros desencandeia
uma cascata de fosforilaes que culmina com a libertao de FSH e LH pela
adeno-hipfise, no nvel seguinte de sinalizao hormonal.

4) Cinases como segundos mensageiros

O ltimo processo de transduo de sinal abordado ser o que se efetua
atravs de receptores transmembranares com actividade de cinase, e mais
especificamente, os receptores com atividade tirosina cinase, ou seja
receptores que atuam como protenas cinase, fosforilando resduos de tirosina
de protenas-alvo especficas, com consumo de ATP.
O exemplo mais conhecido deste grupo de receptores o receptor de
insulina (Figura 9), constitudo por duas cadeias , orientadas para o lado
extracelular da membrana plasmtica, e duas subunidades
transmembranares, cuja extremidade carboxila se encontra voltada para o
citosol. As duas cadeias correspondem ao domnio de ligao da insulina,
enquanto que as duas subunidades possuem atividade de protena cinase,
fosforilando os resduos de tirosina das protenas-alvo, por transferncia de um
grupo fosfato do ATP para o grupo hidroxilo da tirosina (ilustrado no canto
inferior esquerdo da fig.9).
Fig. 9 Mecanismo de Transduo de Sinal da Insulina

O mecanismo de transduo de sinal inicia-se com a ligao da insulina ao

domnio extracelular do receptor, o que provoca a fosforilao cruzada, em
que, a subunidade de um lado fosforila os resduos de tirosina da outra
subunidade e vice-versa. A fosforilao cruzada permite a ativao do local
de ligao de protenas-alvo, prontas a serem fosforiladas.
A primeira dessas protenas-alvo a IRS1 (Insuline Receptor Substract 1),
que se torna o ponto de nucleao para um complexo de protenas responsvel
pela transduo do sinal, desde o receptor de insulina transmembranar at
alvos finais localizados no citosol e no ncleo.
O mecanismo de transduo de sinal da insulina um dos mais complexos,
envolvendo uma srie de cascatas de fosforilao (mediadas por cinases) e
no s (Figura 10). Devido enorme complexidade funcional da insulina que, o
interior da clula atua a vrios nveis, o mecanismo de transduo envolve
tambm a regulao da expresso gnica no ncleo, bem como, por exemplo,
a translocao para a membrana plasmtica de transportadores de entrada
para a glicose.

Fig. 10 Mecanismo de Transduo de Sinal da Insulina

Os mecanismos de transduo permitem, portanto a transmisso da
sinalizao associada a um determinado hormnio para o interior da clula,
desencadeando, atravs dos segundos mensageiros, uma srie de
acontecimentos que culminam na resposta celular ao hormnio.
Contudo, o prolongamento do sinal por tempo indefinido seria insustentvel,
impedindo a funcionalidade do prprio processo de sinalizao, de acordo com
as necessidades do organismo. Assim existe um conjunto de mecanismos
responsvel pela cessao do sinal hormonal.
O mecanismo de cessao pode ser feito atravs da endocitose e
degradao do complexo hormnio-receptor.
No entanto, existem outros mecanismos, essenciais tambm para a eliminao
de hormnios em circulao e consequente decrscimo de um sinal hormonal
ao longo do tempo (Figura 11).
- No caso das hormnios esterides, a cessao do sinal faz-se
habitualmente por:
oxidao dos grupos hidroxilo;
conjugao (formao de steres);
reduo de ligaes duplas (como no caso do cortisol e do estradiol).
- No caso dos hormnios peptdicos, o processo faz-se normalmente por:
quebra de pontes bissulfito (quando as h);
degradao por exopeptidases (em que ocorre clivagem na extremidade
terminal amina ou carboxilo e consequente degradao aminocido a
aminocido);
proteinases (que reconhecem sequncias internas).
Fig.11 Mecanismos de Cessao de Sinal

Evolutivamente, para evitar a degradao por proteinases, os hormnios mais

pequenos, como os secretados pelo hipotlamo, tm as suas extremidades
terminais alteradas de forma a tornarem-se mais estveis.
Por exemplo o hormnio hipotalmico TRH (Hormnio de Libertao de
Tirotrofina), que regula a liberao de TSH (Hormnio Estimulante da Tiride
ou Tirotrofina) pela adeno-hipfise, constitudo apenas por trs aminocidos
(Glutamato, Prolina e Histidina). O seu terminal carboxilo reage com uma
amina, formando-se uma amida que fornece estabilizao adicional. Essa
estabilizao poder eventualmente funcionar como alvo para a inativao do
hormnio. Tambm ao nvel da extremidade amina podem ocorrer mecanismos
de estabilizao. Neste caso em particular, comum a cadeia lateral do
glutamato formar um anel, o piroglutamato, que estabiliza o hormnio (Figura
11).
Como j foi referido, a inativao de um sinal hormonal d-se tambm por
degradao do complexo hormnio-receptor. Muitas vezes, este complexo
localiza-se sobre uma rede hexagonal formada por clatrina que promove a
invaginao e consequente internalizao, por endocitose, do complexo
hormnio-receptor. A partir dos clatrine coated pits (pequenas depresses
encontradas na membrana celular, na zona da rede hexagonal de clatrina)
formam-se pequenas vesculas de endocitose, designadas por coated vesicles
que se fundem, originando vesculas maiores parcialmente revestidas por
clatrina, conhecidas como receptossomas (Figura 12).

Fig. 12 Mecanismo de Cessao de Sinal por Degradao do Complexo Hormona-Receptor

Os receptossomas podem ter diferentes destinos no interior da clula (Figura

12):
1) Fuso com um lisossoma para: degradao do complexo hormnio-
receptor ou degradao exclusiva do hormnio e reciclagem do receptor que
regressa membrana plasmtica;
2) Reciclagem do receptor para a membrana plasmtica, com ou sem
passagem pelo complexo de Golgi (na maioria das vezes, ocorre passagem
pelo complexo de Golgi).