UNIVERSIDAD PEDAGGICA Y TECNOLGICA DE COLOMBIA

FACULTAD DE CIENCIAS BASICAS

ESCUELA DE QUIMICA
QUMICA

PROPIEDADES CUALITATIVAS PARA LA IDENTIFICACIN DE

CARBOHIDRATOS

QUALITATIVE PROPERTIES FOR IDENTIFICATION OF CARBS

Correa Fuentes Juanita Del Pilar

Sorac Prez Gina Yasmin

Fecha de entrega del informe: 11-03-2015

Resumen: Las propiedades bioqumicas y las reacciones caractersticas de las

diferentes biomolculas dependen de los distintos grupos funcionales que las
constituyen. En esta prctica se analiz una de las principales macromolculas
(Carbohidratos) y se realizaron algunas reacciones qumicas especficas que
permitieron la identificacin por mtodos colorimtricos de dicho grupo y de tal forma
la clasificacin de los carbohidratos (monosacridos, disacridos y polisacridos).

Palabras claves: Carbohidratos, mtodos colorimtricos, sacridos.

Abstract: The biochemical properties and characteristics of the different reactions

dependent biomolecules function all groups that constitute them. In this practice a
major macromolecules (carbohydrates) was analyzed and some specific chemical
reactions that allow the identification by colorimetric methods that group and so the
classification of carbohydrates (monosaccharides, disaccharides and
polysaccharides) were performed.

Keywords: Carbohydrates, colorimetric methods, saccharides.

Introduccin y oxgeno, elementos que se conjugan

para formar diversos tipos, son
Los carbohidratos se presentan en polihidrxialdehidos o
forma de azcares, almidones y fibras, polihidroxicetonas o compuestos
y son uno de los tres principales polimricos que por hidrlisis
macronutrientes que aportan energa producen polihidroxialdehidos y
al cuerpo humano (los lpidos y las polihidroxicetonas.(2)
protenas). Actualmente est
comprobado que al menos el 55% de Estas biomolculas ejercen funciones
las caloras diarias que ingerimos fundamentales en los seres vivos,
deberan provenir de los como: soporte (celulosa), reserva de
(1)
carbohidratos. alimento (almidn), reserva energtica
(glucgeno), energa inmediata
Los carbohidratos o hidratos de (glucosa).
carbono o glcidos constituyen
compuestos qumicos formados
principalmente por carbono, hidrgeno

1
 UNIVERSIDAD PEDAGGICA Y TECNOLGICA DE COLOMBIA
FACULTAD DE CIENCIAS BASICAS
ESCUELA DE QUIMICA
QUMICA

PROPIEDADES CUALITATIVAS PARA LA IDENTIFICACIN DE CARBOHIDRATOS

Segn el nmero de unidades de Una secuencia que permite hacer el

azcares sencillos que posean se reconocimiento y diferenciacin de
clasifican en: carbohidratos se esquematiza en:
- MONOSACRIDOS o azcares Ensayo de Molish
sencillos, que a su vez pueden ser Reconocimiento general de
Aldosas cuando contienen el grupo carbohidratos en el que los
aldehdo o Cetosas cuando polisacridos y disacridos se
contienen el grupo cetona. Los hidrolizan con cido sulfrico
monosacridos naturales concentrado hasta monosacridos y
pertenecen a la serie D de los se convierten en derivados del furfural
azcares y pueden tener entre tres o 5-hidroximetil furfural los cuales
y hasta siete tomos de carbono. reaccionan con a-naftol formando un
- DISACRIDOS que estn color prpura violeta.
formados por dos monosacridos Ensayo de Benedict
unidos entre s por enlaces Reconocimiento de carbohidratos
glucosdicos. Si este enlace se reductores. Al igual que el reactivo de
efecta entre dos carbonos Felhing, el de Benedict contiene ion
anomricos, el disacrido no tendr cprico en medio alcalino que se
el potencial aldehdo o cetona libre, reduce hasta xido cuproso en
por lo tanto no dan positivas presencia de azcares con el hidroxilo
aquellas pruebas que involucren la hemiacetlico libre.
participacin de estos grupos, Ensayo de Barfoed
recibiendo el nombre de azcar no Permite diferenciar entre
reductor. Todos los disacridos que monosacridos y disacridos
posean un carbono anomrico reductores, tambin contiene ion
libre, darn positivas estas cprico que se reduce hasta xido
reacciones, llamndose azucares cuproso ms rpidamente con los
reductores, debido a que monosacridos que con los
promueven la reduccin del disacridos.
reactivo usado y ellos mismos se Ensayo con Lugol
oxidan. Permite reconocer polisacridos
- OLIGOSACRIDOS que tienen particularmente el almidn por la
entre tres y diez monosacridos formacin de una coloracin azul-
unidos tambin por enlaces violeta intensa y el glicgeno y las
glucosdicos. dextrinas por formacin de coloracin
- POLISACRIDOS que son roja.
polmeros naturales con varios Ensayo de Seliwanoff:
miles de unidades de azcar Es especfico para cetosas y se basa
sencillo ligadas entre s. Son en la conversin de la cetosa en 5-
abundantes y representan para el hidro-metil-furfural y su posterior
hombre la principal fuente de condensacin con resorcinol
energa metablica de fcil formando as complejos coloreados.
aprovechamiento.

2
 UNIVERSIDAD PEDAGGICA Y TECNOLGICA DE COLOMBIA
FACULTAD DE CIENCIAS BASICAS
ESCUELA DE QUIMICA
QUMICA
Ensayo de Bial:
El reactivo de Bial contiene orcinol en
cido clorhdrico, el cual forma
complejos de coloracin slo con las
pentosas.
Resultados y discusin
1. PROPIEDADES QUMICAS SEGN
CLASIFICACIONES GENERALES
DE LOS CARBOHIDRATOS.
TEST DE MOLISH
Es una prueba general para cualquier
carbohidrato sin importar su
complejidad; el H2SO4 hidroliza los
carbohidratos complejos y deshidrata
los monosacridos resultantes
formando furfural y derivados y estos,
finalmente, producen compuestos
color purpura por reaccin con el -
naftol.(3) Este tipo de reaccin es de
adicin nucleoflica y de tipo SN1.
(Ver Anexo A)
La formacin de una capa intermedia
de color prpura es indicativo de la
presencia de furfural (Glcido
deshidratado) condensados; el tiempo
que demore la reaccin es indicativo
del nmero de carbonos que tenga el
glcido, asi las pentosas tiene una alta
reaccin y por el contrario una hexosa
tiene una baja reaccin.
3
PROPIEDADES CUALITATIVAS PARA LA IDENTIFICACIN DE CARBOHIDRATOS
TEST DE BARFOED
Esta prueba es especfica para
monosacridos. Se basa en la
reduccin de cobre (II) (En forma de
acetato) a cobre (I) (En forma de
xido), el cual forma un precipitado
color rojo ladrillo.
RCOH + 2Cu+2 + 2H2O RCOOH + Cu2O + 4H+
Se utiliza para detectar la presencia de
monosacrido (reduciendo) los
azcares en solucin. Un precipitado
de xido de cobre rojo (II) al formarse
indica la presencia de azcares
reductores. La reaccin ser negativa
en presencia de azcares disacridos,
ya que son agentes reductores ms
dbiles.
(Ver Anexo B)
La formacin de precipitaciones rojas
dentro de los tres minutos indica un
resultado positivo.
TEST DE BIAL
Se usa para diferenciar pentosas de
hexosas. Tanto las pentosas como las
hexosas se deshidratan en el medio
cido concentrado dando furfural (a
partir de pentosas) o 5-
hidroximetilfurfural (a partir de
hexosas); ambas sustancias
reaccionan con orcinol y Fe3Cl3
dando productos de condensacin,
que se diferencian por la coloracin. A
partir de pentosas se obtienen colores
de tonalidad azul verde, mientras que
las hexosas originan una coloracin
verde, caf o caf-rojiza. (4)
(Ver Anexo C)
 UNIVERSIDAD PEDAGGICA Y TECNOLGICA DE COLOMBIA
FACULTAD DE CIENCIAS BASICAS
ESCUELA DE QUIMICA
QUMICA
Es positivo al observarse un color
azulado. Los dems colores indican
negativo. Las hexosas generalmente
presentan un color verde, rojo o caf.
TEST DE SELIWANOFF
Las cetohexosas y aldohexosas se
deshidratan en medio cido dando
lugar a 5-hidroximetilfurfural, el cual se
condensa con resorcinol para dar
lugar a un producto rojo oscuro. Sin
embrago, las cetohexosas (como la
fructosa) reaccionan con mucha
mayor rapidez (de 3 a 5 minutos) que
lo hacen las aldohexosas; por este
motivo el reactivo de seliwanoff se usa
para diferenciar cetohexosas de
aldohexosas. Los disacridos que
contienen fructosa (por ejemplo la
sacarosa), da positiva esta prueba si
se deja correr la reaccin durante un
tiempo prudencial para permitir la
hidrlisis cida, de esta manera la
sacarosa libera fructosa y, sta, da
positiva la prueba de Seliwanoff. (5) (6)
(Ver Anexo D)
PROPIEDADES CUALITATIVAS PARA LA IDENTIFICACIN DE CARBOHIDRATOS
Un producto rojo indica un resultado
positivo, debido a la formacin de 5-
hidroximetilfurfural, reaccionando
junto con el resorcinol.
TEST DE NELSON
Esta prueba se realiza para determinar
cules azucares son reductores, por una
coloracin rojo ladrillo producida por la
reduccin de Cu+2 a Cu+1.
TEST DE BENEDICT
Se utiliza para reconocer azucares no
reductores. Est constituido por
soluciones de carbonato de sodio
(Na2CO3), sulfato de cobre (CuS04) y
citrato de sodio (C6H5O7Na3). El
carbonato de sodio da a la solucin un
pH alcalino, medio necesario para que
la reaccin pueda llevarse a cabo. El
citrato mantiene el ion Cu+ en
solucin, formando un complejo
coloreado poco ionizado, en este caso
azul.
Cuando el reactivo est en presencia
de un azcar reductor, se producen
cambios en la coloracin de la
solucin, ya que se oxidan los grupos
aldehdos o cetonas a cido a cido
carbnico y, a su vez, los iones Cu se
reducen a xido cuproso (Cu2O)
formando un precipitado.
La coloracin de la reaccin, cuando
es positiva, vara entre amarillo, verde,
naranja y rojo ladrillo dependiendo de
la cantidad y el tipo de azcar
presente. (7)
(Ver Anexo E)
4
 UNIVERSIDAD PEDAGGICA Y TECNOLGICA DE COLOMBIA
FACULTAD DE CIENCIAS BASICAS
ESCUELA DE QUIMICA
QUMICA

PROPIEDADES CUALITATIVAS PARA LA IDENTIFICACIN DE CARBOHIDRATOS

PRUEBA DE LUGOL
La reaccin positiva es una coloracin El color que dan los polisacridos con
que va desde verde, amarillo, naranja el Lugol (solucin de I2 y de IK) se
y rojizo, el grado de coloracin y el debe a que el I2 ocupa espacios vacos
tono radica en la concentracin de en las hlices de la cadena de
cobre oxidado (Cu2O); esta reaccin unidades de glucosa. Esta unin del I2
indica que un azcar reducido. a la cadena reversible, y por
calentamiento desaparece el color,
2. PROPIEDADES QUMICAS
ESPECFICAS DE LOS
que al enfriarse reaparece. (9) (10)
CARBOHIDRATOS
(Ver Anexo F)
EPIMERIZACIN
Los cidos aldnicos epmeros se
aslan como lactonas, que por
reduccin con amalgama de sodio
producen los correspondientes
azcares sencillos. De esta forma una
aldosa se puede transformar en el
azcar epmero a travs del siguiente
camino:
La formacin de un complejo azul
oscuro, debido a la adhesin del
Un intercambio de este tipo de los colorante a la molcula de azcar. (11)
sustituyentes en el tomo de C-2, es
decir, en posicin alfa respecto al Resolucin de Preguntas y/o tema
grupo aldehdo, se denomina de consulta
(8)
epimerizacin.
Otros mtodos para la identificacin
Glucosa y Almidn, son positivas en de carbohidratos.
esta prueba.
Reaccin de Fehling: Este ensayo
pone de manifiesto la presencia de
azucares reductores (aldosas:
glucosa, ribosa, eritrosa, etc.).

5
 UNIVERSIDAD PEDAGGICA Y TECNOLGICA DE COLOMBIA
FACULTAD DE CIENCIAS BASICAS
ESCUELA DE QUIMICA
QUMICA

PROPIEDADES CUALITATIVAS PARA LA IDENTIFICACIN DE CARBOHIDRATOS

Se trata de una reaccin redox en la fijada para determinar su grado de

que el grupo aldehdo (reductor) de los
azcares es oxidado a grupo cido por
el Cu2+ que se reduce a Cu+. Tanto los
monosacridos como los disacridos
reductores reaccionan con el Cu2+
dando un precipitado rojo de xido
cuproso.
La reaccin tiene lugar en medio
bsico por lo que es necesario
introducir en la reaccin tartrato
sdico-potsico para evitar la
precipitacin del hidrxido cprico. La
prueba de Fehling no es especfica;
otras sustancias que dan reaccin
positiva son los fenoles, amino
fenoles, benzona, cido rico,
catecol, cido frmico,
hidrazobenceno, fenilhidrazina,
pirogalol y resorcinol. (Da positiva con
todos los glcidos reductores).
(Ver Anexo G)
Prueba Fenilhidrazina: Es una
prueba para distinguir asas (y
oligosacridos). Los carbohidratos
que solo se diferencian en sus tomos
de carbono 1 y/o 2 darn la misma
osazona, como es el caso de la
glucosa y la fructosa, que son
ismeros de funcin.
Reaccin de Hbl (Investigacin de
dobles ligaduras): Los cidos grasos
pueden ser saturados o no saturados.
Los no saturados se caracterizan por
tener en su molcula uno o ms
dobles enlaces. Como consecuencia
de ello pueden adicionar oxgeno,
hidrgeno, cloro, bromo, yodo;
utilizndose la cantidad de sustancia
insaturacin.
El cido graso insaturado que se halla
con mayor frecuencia es el cido
oleico, cuya frmula es C18H34O2 con
doble enlace en C9.
Fundamento: El reactivo de Hbl est
formado por yodo en alcohol (con
bicloruro de mercurio como
catalizador). El yodo se fija sobre la
cadena carbonada de los cidos
grasos etilnicos a razn de dos
tomos por cada doble ligadura, por lo
tanto el reactivo se decolora al perder
yodo (mientras el cido graso lo gana).
Prueba de Fusin: Para investigar
fsforo. Se utiliza Molibdato de
amonio. La positividad de esta
reaccin indica la presencia de fsforo
inorgnico. Las sustancias orgnicas
dan la reaccin positiva, siempre que
se haga una hidrlisis previa. La
reaccin positiva se manifiesta por la
reaccin de un precipitado amarillo de
fosfomolibdato de amonio.
Prueba de las osazonas: Este
ensayo se basa en que los azcares
reductores se condensan con
reactivos como la fenilhidracina en fro
formando una fenilhidrazona. A 100 C
y en presencia de un exceso de
fenilhidracina, se lleva a cabo otro tipo
de reaccin en donde participan los
tomos de carbono 2 de las aldosas y
los tomos de carbono 1 en las
cetosas, dando lugar a la formacin de
una osazona.
(Ver Anexo H)

6
 UNIVERSIDAD PEDAGGICA Y TECNOLGICA DE COLOMBIA
FACULTAD DE CIENCIAS BASICAS
ESCUELA DE QUIMICA
QUMICA

PROPIEDADES CUALITATIVAS PARA LA IDENTIFICACIN DE CARBOHIDRATOS

Conclusiones (2) EVA IRMA VJAR RIVERA. 2005.

Prcticas de Bioqumica
La presencia en de OH hemiacetlico Descriptiva. Pgs.133-137.
(3)
(azcar reductor), es decir tienen su ROGELIO OCAMPO. 2008 Curso
OH anomrico libre, son los prctico de qumica orgnica.
carbohidratos que dan positivo en la Enfocado a biologa y alimentos.
prueba de Benedict. Pgs. 99-100
(4) ANDERSON GUARNIZO.
La sacarosa no es un azcar reductor, Experimentos de qumica
pero en presencia de HCl (medio cido orgnica. Pg. 138.
(5)
caliente) esta puede hidrolizarse a sus ANDERSON GUARNIZO.
monosacridos que la componen Experimentos de qumica
(Glucosa- Fructosa) lo queda positivo orgnica. Pg. 138
en la prueba de Benedict. (6) SILVIA QUESADA MORA. 2007.
Manual de experimentos de
En la reaccin con el cido sulfrico laboratorio para bioqumica. Pg.
los disacridos y polisacridos se 92.
(7)
hidrolizan logrando la identificacin de SILVIA QUESADA MORA. 2007.
los monosacridos que los componen. Manual de experimentos de
laboratorio para bioqumica. Pg.
Mediante las experiencias se logr 94.
(8)
identificar de manera cualitativa los HANS BEYER. 1987. Manuel de
comportamientos de cada qumica orgnica. Pg. 455.
carbohidrato y la manera cmo
reaccionan. INFOGRAFIA
(9)
http://amrita.vlab.co.in/?sub=3&brc
Bibliografa h=63&sim=631&cnt=1
(10) http://acasti.webs.ull.es/docencia/
(1) MARA DEL CARMEN DORIA practicas/5.pdf
SERRANO. 2009Experimentos de (11)
http://www.academia.edu/6347596
qumica en microescala para nivel /Identificaci%C3%B3n_de_Carboh
medio superior. Pginas. 267-270 idratos_a_trav%C3%A9s_de_reac
tivos

7
 UNIVERSIDAD PEDAGGICA Y TECNOLGICA DE COLOMBIA
FACULTAD DE CIENCIAS BASICAS
ESCUELA DE QUIMICA
QUMICA

PROPIEDADES CUALITATIVAS PARA LA IDENTIFICACIN DE CARBOHIDRATOS

ANEXOS
Anexo A

Fig1. Reaccin que transcurre durante la prueba de Molish.

Fig2. Reaccin del Monmero con el H2SO4 concentrado.

Anexo B

Fig3. Reaccin durante la prueba de Barfoed.

Anexo C

Fig4. Reaccin de la prueba de Bial con un monosacrido.

Anexo D

Fig5. Reacciones de Seliwanoff.

8
 UNIVERSIDAD PEDAGGICA Y TECNOLGICA DE COLOMBIA
FACULTAD DE CIENCIAS BASICAS
ESCUELA DE QUIMICA
QUMICA

PROPIEDADES CUALITATIVAS PARA LA IDENTIFICACIN DE CARBOHIDRATOS

Anexo E

Fig6. Reaccin Test De Benedict.

Anexo F

Fig7. Prueba de Lugol.

Anexo G

Fig8. Reaccin de Fehling.

9
 UNIVERSIDAD PEDAGGICA Y TECNOLGICA DE COLOMBIA
FACULTAD DE CIENCIAS BASICAS
ESCUELA DE QUIMICA
QUMICA

PROPIEDADES CUALITATIVAS PARA LA IDENTIFICACIN DE CARBOHIDRATOS

Anexo H

Fig9. Formacin de una Ozasona.

10