Documenti di Didattica
Documenti di Professioni
Documenti di Cultura
CIUDADANO
FERMENTACION ACETICA
ESCUELA: INGENIERIA DE ALIMENTOS
CURSO: BIOQUIMICA
INTEGRANTES
I.-INTRODUCCION
La fermentacin actica es la fermentacin bacteriana por
Acetobacter, un gnero de bacterias aerbicas, que transforma
el alcohol en cido actico que se encuentra en pocas
proporciones en el vinagre. La fermentacin actica del vino
proporciona el vinagre debido a un exceso de oxgeno y es
considerado uno de los fallos del vino.
C2H5OH +O2+ Acetob. Acet.= CH3COOH+H20 Alcohol + Oxgeno + Bacteria del vinagre
= cido Actico + Agua
PRACTICA DE LABPRATORION N 6: 1
EXTRACION DE UNA SOLUCION ENZIMATICA DE INVERTASA
UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO
FACULTAD DE INGENIERIA PESQUERA Y DE ALIMENTOS
II.-MARCO TEORICO
cido actico tambin llamado cido etanoico o
cido metilencarboxlico, es un cido orgnico de
dos tomos de carbono, se puede encontrar en
forma de ion acetato. Su frmula es CH3-COOH
(C2H4O2), siendo el grupo carboxilo es el que le
confiere las propiedades cidas a la molcula.
Este es un cido que se encuentra en el vinagre,
siendo el principal responsable de su sabor y olor
agrios. De acuerdo con la IUPAC se denomina
sistemticamente cido etanoico.
FERMENTACION
La fermentacin es un proceso catablico de oxidacin incompleta, que no requiere oxgeno, y
cuyo producto final es un compuesto orgnico. Segn los productos finales, existen diversos
tipos de fermentacin.
TIPOS DE FERMENTACION
Hay fermentacin natural, cuando las condiciones ambientales permiten la interaccin de los
microorganismos y los sustratos orgnicos susceptibles, y artificial, cuando el ser humano
propicia condiciones y el contacto referido.
Todas las fermentaciones comienzan a partir del piruvato, hay siete tipos de
fermentaciones:
Fermentacin actica
Fermentacin alcohlica
Fermentacin butrica
Fermentacin lctica
Fermentacin butrica II
Fermentacin butanodilica
Fermentacin propinica
PRACTICA DE LABPRATORION N 6: 2
EXTRACION DE UNA SOLUCION ENZIMATICA DE INVERTASA
UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO
FACULTAD DE INGENIERIA PESQUERA Y DE ALIMENTOS
FERMENTACION ACETICA
La fermentacin actica es la fermentacin bacteriana por Acetobacter, un gnero de
bacterias aerbicas, que transforma el alcohol etlico en cido actico, la sustancia
caracterstica del vinagre. La fermentacin actica del vino proporciona el vinagre debido a un
exceso de oxgeno y es uno de los fallos del vino, un proceso que degrada sus cualidades. La
fermentacin actica es un rea de estudio dentro de
la cimologa.
Aunque es una fermentacin en el sentido original de la
palabra, un proceso que partiendo de un azcar produce
cidos, gases o alcohol, se aparta de la regla en que es un
proceso aerobio, es decir, que requiere oxigeno
La formacin de cido actico (CH3COOH) resulta de la
oxidacin de un alcohol por la bacteria del vinagre en
presencia del oxgeno del aire. Estas bacterias, a
diferencia de las levaduras productoras de alcohol,
requieren un suministro generoso de oxgeno para su
crecimiento y actividad.
El cambio que ocurre es descrito generalmente por la
ecuacin:
Los licores de fermentacin suave, se convierten solo con la exposicin al aire. Esto es debido
a la conversin del alcohol en cido actico. El cido actico es producido mediante la
fermentacin de varios sustratos, como solucin de almidn, soluciones de azcar, o productos
alimenticios alcohlicos como vino o sidra, con bacterias de Acetobacter.
El nmero de bacterias acticas usualmente presente en el jugo fermentado es pequeo y a
menudo son del tipo indeseable o inactivo. Por lo tanto, debe ser aadido un indicador
adecuado para suministrar la clase apropiada de bacterias y producir las condiciones
favorables para su crecimiento y actividad. El mejor medio para prevenir el crecimiento de
organismos indispensables es aadir vinagre fuerte en un biorreactor con Alcohol Etlico
diluido, y una bacteria llamada Acetobacter que se desarrolla en presencia de oxgeno con
ciertas condiciones, como un pH entre 3.5 a 5.5 y con una temperatura de 30 C esta bacteria
se encarga de oxidar el alcohol diluido. La rapidez de transformacin de alcohol a cido
depende de la actividad del organismo.
El Acetobacter es de particular importancia comercialmente, debido a que es usada en la
produccin de vinagre (Intencionalmente convirtiendo el etanol del vino en cido actico). El
cido Actico tambin es mejor conocido como cido metilencarboxlico, se puede encontrar
en forma de ion acetato. ste es un cido que se encuentra en el vinagre, siendo el principal
responsable de su sabor y olor agrios. As mismo, es agregado en la mayonesa para
incrementar el efecto de inactivacin contra la Salmonella, ingrediente verstil de sus comidas
como resaltador del sabor o condimento, un ablandador de las carnes, un preservante natural
de alimentos, un agente medicinal y un elemento de gran utilidad en la limpieza del hogar.
PRACTICA DE LABPRATORION N 6: 3
EXTRACION DE UNA SOLUCION ENZIMATICA DE INVERTASA
UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO
FACULTAD DE INGENIERIA PESQUERA Y DE ALIMENTOS
TEMPERATURA
La optima oscila entre 26y 28 C a 10C la acetificacin es lenta a 44C se detiene y a 55 C
muere la mayora de fermentos.
AIREACION
Dado que es un proceso de aireaccion , el xito depender en gran parte de la presencia de
cantidad suficiente de oxigeno.
PH
El ph optimo para el desarrollo de bacterias acticas es 4.5.
CLASIFICACIN
PRACTICA DE LABPRATORION N 6: 4
EXTRACION DE UNA SOLUCION ENZIMATICA DE INVERTASA
UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO
FACULTAD DE INGENIERIA PESQUERA Y DE ALIMENTOS
Tanto los cidos orgnicos como los inorgnicos se encuentran abundantemente en los
sistemas naturales donde desempean funciones muy diversas desde metabolitos
intermediarios hasta componentes de sistemas tampn. Los cidos se aaden a los alimentos
naturales o procesados para beneficiarse de muchas de sus funciones naturales.
PRACTICA DE LABPRATORION N 6: 5
EXTRACION DE UNA SOLUCION ENZIMATICA DE INVERTASA
UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO
FACULTAD DE INGENIERIA PESQUERA Y DE ALIMENTOS
III.-OBJETIVOS
Comprender que la fermentacin puede ser posible gracias
Acetobacter aceti.
IV.-MATERIALES, MUESTRAS,REACTIVOS
MATERIALES
PRACTICA DE LABPRATORION N 6: 6
EXTRACION DE UNA SOLUCION ENZIMATICA DE INVERTASA
UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO
FACULTAD DE INGENIERIA PESQUERA Y DE ALIMENTOS
MUESTRAS
BURETA PROPIPETA CINTAS DE PH
LEVADURA VIVA
LEVADURA VIVA TOCABLE
TOCABLE
REACTIVOS
V.-PROCEDIMIENT0
PRACTICA DE LABPRATORION N 6: 7
EXTRACION DE UNA SOLUCION ENZIMATICA DE INVERTASA
PRUEBA DE BENEDICT
1. SE COLOCARA 5ML DE LA MUESTRA (LEVADURA VIVA TOCABLE O
UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO
FACULTAD DE INGENIERIA PESQUERA Y DE ALIMENTOS
VI.-RESULTADOS
PROCEDIMIENTO:
PRUEBA DE REACTIVO DE BENEDICT
PRACTICA DE LABPRATORION N 6: 8
EXTRACION DE UNA SOLUCION ENZIMATICA DE INVERTASA
UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO
FACULTAD DE INGENIERIA PESQUERA Y DE ALIMENTOS
PROCEDIMIENTO: TITULACION
PRACTICA DE LABPRATORION N 6: 10
EXTRACION DE UNA SOLUCION ENZIMATICA DE INVERTASA
UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO
FACULTAD DE INGENIERIA PESQUERA Y DE ALIMENTOS
PH PH
INICIAL INICIAL
3 3.5
PH PH
FINAL FINAL
2.5 2.5
TABLA DE RESULTADOS
PRACTICA DE LABPRATORION N 6: 11
EXTRACION DE UNA SOLUCION ENZIMATICA DE INVERTASA
UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO
FACULTAD DE INGENIERIA PESQUERA Y DE ALIMENTOS
.
% . =
. .
% A. Actico= =0.448%
. .
% . = =0.64%
VII.-CONCLUSIONES
La Fermentacin actica es la fermentacin bacteriana por
Acetobacter, un gnero de bacterias aerbicas, que transforma
el alcohol en cido actic
PRACTICA DE LABPRATORION N 6: 12
EXTRACION DE UNA SOLUCION ENZIMATICA DE INVERTASA
UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO
FACULTAD DE INGENIERIA PESQUERA Y DE ALIMENTOS
VIII.-RECOMENDACIONES
ESTERIFICACIN
Los cidos forman steres por condensacin de un cido
carboxlico y un alcohol, la cual es una reaccin reversible
llamada esterificacin. La esterificacin de cido actico con
etanol en presencia de un cido fuerte como el sulfrico produce
acetato de etilo y agua.
MTODOS DE DETECCIN
Algunos de los medios de crecimiento utilizados para la
deteccin de las bacterias acticas han sido el medio
GYC, el medio Manitol o el medio Agar carbonato .Sin
embargo, la deteccin clsica de bacterias acticas puede
presentar inconvenientes, sobre todo en muestras
procedentes de vinagres. Cuando Bartwosky y cols. (2003)
intentaron aislar bacterias acticas a partir de vino
embotellado, comprobaron que no crecan en los medios
generales para bacterias. Es por ello que se han
desarrollado tcnicas de doble capa de agar en el medio, y
medios que incluyen agar y cido actico (Entani y cols., 1985). Hasta hace poco tiempo, la
clasificacin de las bacterias acticas se haca en funcin de caractersticas fenotpicas, como
la apariencia y la fisiologa. Sin embargo, estas caractersticas pueden variar entre cepas de la
misma especie de BA, lo que complica las identificaciones y obliga a realizar muchas pruebas.
En la actualidad, muchas de las especies bacterianas se clasifican de acuerdo a la secuencia
del gen 16S. Este gen se encuentra presente en el DNA de las bacterias, siendo sta una
regin conservada dentro de cada especie. Otras zonas que se suelen estudiar son las
comprendidas entre los genes 16S-23S. Dentro de las bacterias acticas, se da una situacin
especial. El gen 16S es una zona muy conservada a nivel de familia, lo que permite la
identificacin de las BA para Poblet y cols. (2000) y para Ruiz y cols. (2000), mientras que sera
una zona excesivamente conservada para Trcek y cols. (2002). Sin embargo, la zona 16S-23S
presenta una secuencia muy variable, demasiado variable para Ruiz y cols. (2000) y apropiada
para Trcek y cols. (2002). Otros genes como el gen adhA, tambin han sido investigados como
posibles objetivos para discriminar las especies, si bien no han mejorado los resultados
obtenidos con los fragmentos 16S-23S (Trcek, 2005). Recientemente, se han desarrollado
mtodos de real-time PCR para cuantificar BA que, segn los investigadores, pueden detectar
niveles de 10 CFU/ml Mosto 16.000 Fermentacin alcohlica Tras 3 das 3.000 Tras 7 das 100
En el da 10 Antes del trasiego 20 Tras el trasiego 30.000 Fermentacin malolctica Al
PRACTICA DE LABPRATORION N 6: 13
EXTRACION DE UNA SOLUCION ENZIMATICA DE INVERTASA
UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO
FACULTAD DE INGENIERIA PESQUERA Y DE ALIMENTOS
comienzo 400 Al final (3 meses) 120 Envejecimiento en barrica Tras 4 meses 160 Tras 6
meses 900 Tras 9 meses 600 Tras 11 meses 600 TABLA 1. Evolucin de la poblacin de
bacterias cido acticas durante la elaboracin de vino tinto (adaptado de Joyeux y cols, 1984)
Ni el pH del vino ni las concentraciones de dixido de azufe, que se utilizan habitualmente en
bodega, impiden la proliferacin de las bacterias acticas en el proceso de elaboracin La
velocidad del proceso de picado actico est determinada por diversos factores como son: la
especie, la cantidad de BA presentes en el vino y las caractersticas especficas del caldo
VinoTeQ 15 Eliminacin de las bacterias acticas clulas/ml (Gammon y cols., 2007; Gonzlez
y cols., 2007). Estas investigaciones han permitido a los laboratorios de anlisis desarrollar
tcnicas de deteccin e identificacin rpida para las bacterias acticas presentes en el vino,
ayudando a los enlogos a evaluar el riesgo de picado actico de sus vinos.
IX.-CUESTIONARIO
1. DEFINIR: FERMENTACIN MALOLCTICA, QUIEBRA AZUL, CARBONILACIN DEL METANOL.
FERMENTACIN MALOLCTICA
La fermentacin malolctica se produce en el vino como resultado de la actividad metablica de
ciertas cepas de bacterias lcticas bien adaptadas. La reduccin de la acidez del vino y la
modificacin de su sabor, que se producen por esta fermentacin bacteriana, se suelen
considerar beneficiosas para el vino. La ventaja de la induccin de la fermentacin malolctica
(FML) por inoculacin de cepas seleccionadas de bacterias lcticas es doble; en primer lugar,
mejora el control del tiempo y la velocidad de la conversin del cido mlico y, en segundo
lugar, ejerce una influencia positiva en el sabor y la calidad del vino. Los estudios sensoriales
demuestran que los compuestos de sabor producidos por las bacterias del cido lctico
provocan cambios reconocibles en las caractersticas de sabor del vino. Varios estudios
prueban que distintas cepas de bacterias malolcticas tienen distintos efectos sensoriales en el
vino, pero la influencia de la programacin temporal de la incorporacin de las bacterias, as
como el nivel de inoculacin, no se terminan de comprender del todo.
PRACTICA DE LABPRATORION N 6: 14
EXTRACION DE UNA SOLUCION ENZIMATICA DE INVERTASA
UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO
FACULTAD DE INGENIERIA PESQUERA Y DE ALIMENTOS
QUIEBRA AZUL
La quiebra del color llamada azul o frrica se produce
tambin, en los vino propensos en los vinos propensos a ella,
despus de u n trasiego o de otra manipulacin que ponga al
vino en contacto con el oxgeno del aire. La prueba del vaso
loa acusa en pocas horas, enturbindose y ennegrecindose
el vino como en la quiebra parda u oxidasica, pero
distinguindose fcilmente de esta ltima porque:
El color del vino no vira al tono pardo, sino azulado.
El aroma y el sabor del vino no son los de rancio y
degustado, sino que la nariz apenas percibe
modificacin.
PRACTICA DE LABPRATORION N 6: 15
EXTRACION DE UNA SOLUCION ENZIMATICA DE INVERTASA
UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO
FACULTAD DE INGENIERIA PESQUERA Y DE ALIMENTOS
El pH ptimo de crecimiento
est entre 5 y 6; sin embargo, la mayora de las cepas pueden crecer a pH inferiores a 5,
incluso a pH 2 2,2.
PRACTICA DE LABPRATORION N 6: 16
EXTRACION DE UNA SOLUCION ENZIMATICA DE INVERTASA
UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO
FACULTAD DE INGENIERIA PESQUERA Y DE ALIMENTOS
LA PREPARACION DE LA FRUTA
TRATAMIENTO TERMICO
LA INOCULACIN
LA FERMENTACIN ALCOHLICA
La presencia de aire al inicio del proceso es fundamental para que las levaduras
inoculadas se reproduzcan, utilizando el azcar como fuente de energa y carbono. Una
vez alcanzada la cantidad deseada de levaduras, se debe disminuir el contenido de
oxigeno presente para que las levaduras obtenidas, a partir del azcar, produzcan la
energa y las sustancias que su metabolismo requiere; entre las sustancias que
sintetizan, se encuentra el alcohol etlico.
Si el suministro de aire es excesivo, al final del proceso se tendra una gran cantidad de
levaduras, pero muy poco etanol.
PRACTICA DE LABPRATORION N 6: 17
EXTRACION DE UNA SOLUCION ENZIMATICA DE INVERTASA
UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO
FACULTAD DE INGENIERIA PESQUERA Y DE ALIMENTOS
Una vez iniciada la fermentacin alcohlica y hasta que las levaduras hayan convertido
el azcar en la cantidad de etanol esperada, es necesario prevenir, mediante la
restriccin de aire, la produccin de cido actico, ya que ese compuesto es perjudicial
para las levaduras: si se acidifica el medio, gran cantidad de ellas moriran y el
rendimiento final del proceso seria bajo.
PRACTICA DE LABPRATORION N 6: 18
EXTRACION DE UNA SOLUCION ENZIMATICA DE INVERTASA
UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO
FACULTAD DE INGENIERIA PESQUERA Y DE ALIMENTOS
Como condimento
Se emplea en la fabricacin de steres o esencias.
Fijador de colores
Disolvente
Materia prima en la obtencin de acetona, acetatos, aspirina y otros derivados.
En apicultura es utilizado para el control de las larvas y huevos de las polillas de la cera.
En el revelado de fotografas en blanco y negro, era utilizado en una solucin muy dbil
como bao de paro al sumergirse en l el material revelado, se neutralizaba la
alcalinidad del bao revelador y se detena el proceso; posteriormente el bao fijador
eliminaba el resto de material no revelado.
En la medicina es como tinte en las colposcopias para detectar la infeccin por virus de
papiloma humano.
Produccin de acetato de sodio y como agente de extraccin de antibiticos en industria
medicinal.
Por su accin desincrustante, el cido actico es utilizado en el lavado qumico de
Equipos de Dilisis (en diluciones que van del 2,5% al 5% dependiendo de la
recomendacin del fabricante del Equipo).
Como bactericida.
Neutralizante y vehculo en los procesos de teido en industria textil.
Vehculo de tincin en industria del cuero.
Como agente neutralizante y para la formacin de percidos en industria qumica.
Como agente acidulante y para la preparacin de steres frutales en la industria
alimenticia.
En la produccin de cido monocloroactico.
En la produccin de acetatos. Ingrediente de compuestos adhesivos.
Ingrediente de lacas especiales para la industria aeronutica.
Ingrediente de insecticidas y germicidas.
PRACTICA DE LABPRATORION N 6: 19
EXTRACION DE UNA SOLUCION ENZIMATICA DE INVERTASA
UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO
FACULTAD DE INGENIERIA PESQUERA Y DE ALIMENTOS
PRACTICA DE LABPRATORION N 6: 20
EXTRACION DE UNA SOLUCION ENZIMATICA DE INVERTASA