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OBJETIVO:
aprender las tcnicas ms utilizadas para sembrar bacterias en diferentes
medios de cultivo.
INTRODUCCIN
En la naturaleza los microorganismos se presentan como cultivos mezclados que
contienen una gran variedad de gneros y especies. Para poder estudiar las
especies individuales es necesario aislarlos en cultivo puro; que se define como un
cultivo que contiene bacterias de una sola especie.
MARCO TEORICO
El aislamiento DE un cultivo puro para su estudio por lo cual debemos manejar
todo de tal manera que nos introduzcamos microorganismos indeseables, los
contaminantes, que son microorganismos de especies distintas a la de nuestro
cultivo puro y que se encuentran tanto en los objetos como el medio ambiente que
nos rodea. Esto requiere que todos los medios de cultivo, los objetos de vidrio, las
asas y agujas de inoculacin sean estriles y en algunos casos permanezcan
envueltas para que no se contaminen. La esterilizacin se puede llevar a cabo por
calor, filtracin o mtodos qumicos; el mtodo de eleccin depender del objeto
que se va a esterilizar o si es un medio de cultivo, de su consistencia y
constituyentes lbiles. El calor hmedo es uno de los ms empleados en la
esterilizacin de medios de cultivo, el tiempo y la presin aplicados para lograr
ese calor hmedo puede variar de acuerdo al tipo de medio. Aunque generalmente
se usan 15 minutos, 15 libras de presin (121C) por 15 minutos.
Para hacer crecer un cultivo de microorganismos en un medio, se transfiere
un inoculo de clulas del medio de origen al medio de cultivo estril, teniendo
cuidado de mantener la pureza del cultivo y no introducir microorganismos
extraos. Este procedimiento se conoce como tcnica asptica.
En la tcnica asptica se deben usar medios de cultivo estriles, para la
transferencia de microorganismos se usa una aguja de inoculacin o un asa
bacteriolgica, estas se deben calentar al rojo, antes y despus de hacer la
transferencia, para esto mantenga el asa en el fuego del mechero de forma que se
caliente bien desde la base del mango hacia la punta. Permita que se enfre
ligeramente de manera que no vaya a quemar el inculo.
MATERIAL Y EQUIPO
Asa y aguja bacteriolgica
Tubos con medios de cultivo slido inclinado, semislido y caldos estriles
( nmero de acuerdo a las cepas usadas)
Placas con medio de cultivo de uso general como agar de soya y
tripticasena ( Nmero de acuerdo a las cepas usadas)
Se recomiendan las siguientes cepas:
Bacillus subtilis, Sarcina lutea, Serratia marcesens, Pseudomonas
aeruginosa, Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli y Staphylococcus aureus,
Streptococcus agalactiae
Mechero Bunsen
CULTIVO EN PLACA
Si las bacterias se pueden separar por dilucin y despus se ponen en un
medio slido para que den lugar a colonias, estas tendrn una medida, forma,
color y textura dependiendo de cada microorganismo lo cual proporcionar una
valiosa ayuda en su identificacin.
El mtodo de estra cruzada consiste en la dilucin de un cultivo mediante
el estriado en la superficie de un medio slido, en una caja Petri. Los
microorganismos se van quedando al hacer las estras en diferentes partes de la
superficie del medio de tal forma que en un momento dado quedarn clulas
individuales o bien unidades formadoras de colonias, que al multiplicarse darn
lugar a una colonia. Las placas estriadas se usan fundamentalmente para aislar
cultivos puros en muestras que contienen flora mixta, tambin es til para el
estudio de la morfologa colonial y propiedades hemolticas de las bacterias.
CONCLUSIONES
Los mtodos de siembra para los microrganismos se veden llevar de acuerdo a
las indicaciones dadas ya que depende de ello seda la obtencin de los
resultados de una forma exitosa.
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS