Universidad Catlica de Temuco

Universidad Autnoma de Toluca

Facultad de Qumica
Ingeniera Civil Ambiental
Qumica Ambiental

Contaminantes emergentes en
aguas residuales de hospital de
Mxico

Alumno a cargo del tema: Bryan E. Cerda Morales

Profesora: Mara A. Francois Cifuentes

Temuco, 06 de Julio de 2017

 TABLA DE CONTENIDO
Pag.

RESUMEN....3
Palabras claves.4
Definicin palabras claves..4
INTRODUCCIN..5
1. OBJETIVOS ...6
1.1. Objetivos generales ....6
1.2. Objetivos especficos .....6
2. DESARROLLO...7
2.1. Materiales y mtodos..7
2.2. Resultados.11
3. DISCUSIN..13
4. CONCLUSIN....13
5. REFERENCIAS....14

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 Resumen
En estudios recientes realizados por la facultad qumica de la Universidad Autnoma del
Estado de Mxico, Toluca. Se ha investigado los posibles efectos secundarios que generan
los contaminantes emergentes, principalmente en efluentes hospitalarios, donde la
toxicidad es de 5-15 veces mayor que en efluentes urbanos. En comparacin a aguas
residuales municipales, las aguas de los hospitales contienen principalmente
contaminantes comunes y contaminantes emergentes tales como productos
farmacuticos y de cuidado personal, perfluoroqumicos, hormonas, esteroides,
nanomateriales de ingeniera, entre otros.

El principal grupo de contaminantes emergentes son los productos farmacuticos, que se

han encontrado en altas concentraciones en aguas superficiales, donde se ha demostrado
que los compuestos farmacuticos aislados no muestran ningn riesgo medio ambiental.
Sin embargo, estudios han afirmado que la mezcla de estos productos farmacuticos, sus
metabolitos y diversos contaminantes pueden interactuar con concentraciones de
aditivos, con una notable y significativa mezcla de efectos secundarios como la
genotoxicidad y la bioacumulacin en la cadena alimenticia.

Este estudio reporta la citotoxicidad, genotoxicidad y el efecto apopttico utilizados como

biomarcadores de exposicin en las especies acuticas de Cyprinus carpio.

El rea de estudio se ubica en Mxico, Toluca. Donde se hacen muestras de aguas

residuales no tratadas, dos veces en 6 meses y se vertieron en tanques con especies de
Cyprinus carpio que se dividieron en 5 grupos. Estos se mantuvieron a ciertas
temperaturas y a travs de una serie de experimentos determinaron que el LC50 fue de
5,49% a las 96 horas. El citotxico, biomarcadores genotxicos y apoptticos aumentan
cuando los peces fueron expuestos a aguas residuales del hospital (1/10 CL50).

Este estudio pone de relieve la importancia de identificar y cuantificar los efectos de los
contaminantes como productos farmacuticos, desinfectantes y agentes tensoactivos con
el fin de disear e implementar un plan de ecotoxicolgico.

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Palabras claves: Biomarcadores, citotoxicidad, contaminantes emergentes,
genotoxicidad, efluentes hospitalarios, ecotoxicologa, apoptosis.

Definicin palabras claves:

Biomarcadores: son substancias que indican un estado biolgico, ya sea bioqumico,
fisiolgico o morfolgico.

Citotoxicidad: Dao celular provocado por la accin de anticuerpos especficos y

complemento o por clulas citotxicas. Constituye una de las ms importantes respuestas
efectoras inmunitarias para la defensa contra los agentes infecciosos.

Contaminantes emergentes: son compuestos de distinto origen y naturaleza qumica,

cuya presencia en el medioambiente, han pasado en gran medida inadvertidas, causando
problemas ambientales y de riesgo para la salud.

Genotoxicidad: Grado en el que una toxina tiene efectos adversos en el ADN.

Efluentes hospitalarios: Residuos que generan los hospitales.

Ecotoxicologa: Estudia el destino y los efectos de los contaminantes en los ecosistemas,

intentando explicar las causas y prever los riesgos probables.

Apoptosis: La apoptosis o muerte celular programada es el proceso ordenado por el que la

clula muere ante estmulos extra o intracelulares.

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 Introduccin
Actualmente, existe un creciente inters por los contaminantes emergentes (CE).
Pues, hasta hace poco han pasado desapercibidos, ocasionando problemas ambientales y
problemas de riesgo hacia la salud. Estos compuestos se encuentran diseminados en el
ambiente y se han detectado en fuentes de abastecimiento de agua, aguas subterrneas e
incluso en agua potable.

El trmino de contaminantes emergentes (CE) generalmente se utiliza para referirse a

compuestos de distinto origen y naturaleza qumica, cuya presencia en el medio ambiente
no se considera significativa debido a sus diminutas concentraciones, por lo que pasan
inadvertidos debido a que los procesos de tratamientos de aguas no estn estrictamente
diseados para eliminar concentraciones tan bajas.

Estudios recientes realizados por la Universidad Autnoma de Toluca, Mxico. Hace

referencia a la toxicidad intrnseca de efluentes hospitalarios, debido a que estos
efluentes son 5-15 veces mayores que en efluentes urbanos.

Las aguas residuales hospitalarias, a diferencia de las municipales, contienen

contaminantes principalmente emergentes, como productos farmacuticos y de cuidado
personal, perfluoroqumicos, hormonas, esteroides, entre otros. Siendo los productos
farmacuticos, los principales en riesgo de ecotoxicologa.

Los productos farmacuticos se han encontrado en grandes concentraciones en aguas

superficiales, subterrneas e inclusive agua potable. Debido a sus efectos, diferentes
estudios han demostrado que compuestos farmacuticos por s solos no muestran ningn
riesgo hacia el medio ambiente. Sin embargo, las mezclas entre productos farmacuticos,
sus metabolitos y diversos contaminantes pueden interactuar con concentraciones de
aditivos, con una notable y significativa mezcla de efectos secundarios como la
genotoxicidad y la bioacumulacin en la cadena alimenticia.

Este estudio reporta la citotoxicidad, genotoxicidad y el efecto apopttico utilizados como

biomarcadores de exposicin en las especies acuticas de Cyprinus carpio. Adems, se
enfatiza la importancia de identificar y cuantificar los efectos de tales contaminantes
especficos como productos farmacuticos, desinfectantes y surfactantes para disear e
implementar un plan ecotoxicolgico para prevenir la captacin y bioacumulacin de los
posibles efectos que pueden ser muy perjudiciales para la cadena alimentaria.

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 Materiales y mtodos
En la siguiente investigacin, se realizaron diversos estudios en peces de especies
Cyprinus Carpio para determinar los posibles efectos que pueden ocasionar los
contaminantes emergentes (productos farmacuticos) en aguas residuales del hospital
ubicado en Mxico, Toluca.

Se utiliza la especies Cyprinus carpio por ser un indicador de un estado biolgico. La

medida de los niveles molecular, bioqumico o celular de los biomarcadores, tanto en
poblaciones naturales provenientes de hbitats contaminados, indican que el organismo
ha estado expuesto a sustancias txicas y la magnitud de la respuesta del organismo al
contaminante. Identificando as los posibles problemas que pueden ocasionar estos
contaminantes farmacuticos vertidos en las aguas de los hospitales.
Para este estudio, se utilizaron mtodos tales como cromatografa, mtodo de nmero
ms probable, espectrometra de masas, anlisis Provit.

Procedimiento
Se origina un muestreo de veinte litros de muestras de aguas residuales no
tratadas, donde fueron tomadas dos veces en seis meses desde el centro mdico No. 222
del IMSS en la ciudad de Toluca, estado de Mxico. De acuerdo con las normas y
regulaciones para el muestreo de aguas residuales, las muestras se recogieron en botellas
de polietileno limpias y se almacenaron a 4C hasta su ensayo. Es necesario observar que
los residuos se liberan en las aguas residuales municipales sin tratamiento previo. El
anlisis microbiolgico de coliformes totales (TC) y coliformes fecales (FC) se realiz
utilizando el mtodo de nmero ms probable (MPN).

Se midieron propiedades fisicoqumicas, como el pH, dureza total, cuantificacin de

metales (Arsnico, Cadmio, cobre, mercurio, nquel, plomo y zinc). Todo esto de acuerdo a
la metodologa correspondiente en la reglamentacin mexicana.

Despus de la extraccin orgnica de muestras, se evalu la determinacin de frmacos

(anti-inflamatorios) como acetaminofeno (ACE), ibuprofeno (IBP), naproxeno (NPX) y
diclofenaco (DCF). La cuantificacin se realiz mediante un espectrmetro de masas,
utilizando un triple cudruple 6430 equipado con ionizacin por electrospray (ESI) .

Se obtuvieron especies de Cyprinus carpio juveniles (pesando 50 + -8g) del centro de carpa
acutica de Tiacaque en el estado de Mxico, siendo trasportados al laboratorio
toxicolgico de la Facultad de Qumica de la Universidad Autnoma del Estado de Mxico

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ubicado en la ciudad de Toluca. Los organismos se aclimataron y se mantuvieron en
diferentes tanques de vidrio con una capacidad de 160 L y un pH de 7,5-8,5 en agua
sinttica. Todos los experimentos se realizaron a una temperatura de 20 + -2 C con flujo
de aire constante para una adecuada oxigenacin (saturacin 80% -90%). Para determinar
la concentracin objetivo a emplear en ensayos sub-letales, se determin la concentracin
letal media (CL50) de la exposicin a efluentes hospitalarios en cinco grupos enriquecidos
con concentraciones de 0,0, 3,0, 6,0, 7,0, 8,0 y 10% de efluentes de residuos, donde las
muestras se diluyeron en agua sinttica. Se colocaron diez Cyprinus Carpio en cada
sistema en condiciones estticas y se realiz el experimento quintuplicado. La 50 de 96
h (p <0,05) se estim utilizando el anlisis de Provit.

En el ensayo de toxicidad sub-letal, los peces se dividieron en cinco grupos, colocndose

cada grupo en un acuario de vidrio de 40 litros separado (10 peces por acuario). Los
grupos se expusieron a 1/10 de 50 (LOAEL), correspondiente a una concentracin
perceptiva de 0,54, para este ensayo, se diluyeron 0,216 L de aguas residuales en 349,78 L
de hbitat sinttico.

El grupo de control de pescado se mantuvo en condiciones idnticas, aparte del medio

sinttico que se utiliz. Los peces no mostraron signos visuales de enfermedad o lesin
durante el perodo de exposicin. Los tiempos de exposicin fueron 0, 24, 48, 72 y 96
horas.

Se extrajeron muestras de sangre y se centrifugaron a 1000xg y 4C durante 5 min. Se

extrajo el sobrenadante de plasma y se almacen para anlisis posterior de LDH. Los
paquetes de clulas se lavaron dos veces con D-PBS. Finalmente, el brote se suspendi en
D-PBS, con una concentracin final de 1106 clulas 1 . Las muestras fueron alcuotas y
se conservaron con un kit de ensayo de citologa lquido para anlisis posterior.

Se determin el lactato deshidrogenasa (LDH) en el plasma a los tiempos muestreados

usando el mtodo enzimtico cintico. Para los tiempos descritos, la actividad de la
Caspasa 3 se midi en eritrocitos mediante ensayo colorimtrico usando el ensayo de
Caspasa. Se tomaron muestras de sangre de cada pez en los momentos indicados
anteriormente.

Finalmente, un total de 2000 eritrocitos (500 por diapositiva para cada individuo) se
examinaron en un microscopio de luz bajo aumento de 1000x.

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 Resultados
Las concentracin de acetaminofeno, ibuprofeno, naproxeno y diclofenaco se
determinaron mediante HPLC-ESI-MS/MS usando HPLC aglutinante infinity 1290. Es una
tcnica utilizada en espectrometra de masas para producir iones.

El compuesto farmacutico medido que se encontr en mayor cantidad fue el naproxeno

con 0.123 ug / mL. Seguido del ibuprofeno, diclofenaco y acetaminofeno. Tal y como se
puede divisar en la tabla N 1.

Tabla N 1

Compuestos farmacuticos
Compuesto Valor obtenido Unidades Referencia para el anlisis
Acetaminofeno 3.99104 g / mL HPLC-ESI-MS/MS
Ibuprofeno 0.0717 g / mL
Naproxeno 0.123 g / mL
Diclofenaco 6.46103 g / mL

En el caso de las propiedades fisicoqumicas y compuestos no farmacuticos, se

determinaron de acuerdo a la metodologa correspondiente de la reglamentacin
mexicana. El pH muestra una tendencia ligeramente alcalina, el pH es un parmetro
biolgico importante debido a que la mayora de los organismos acuticos estn
adaptados a un pH promedio y no a cambios abruptos, que podran, adems, aumentar la
ionizacin de algunos compuestos en la mezcla, mejorando as la captacin por los
organismos acuticos. Las concentraciones de metales pesados observadas estn en el
lmite de los lmites recomendados por las regulaciones mexicanas. La presencia de
metales, cianuro, cromo, aceites grasos y productos farmacuticos parece no ser mayor
que los reportados anteriormente en otros lugares. Tal y como se representan en las
tablas 2 y 3.

Tabla N 2

Fisicoqumico
Compuesto Valor obtenido Unidades Referencias para el anlisis
Ph 8.37 NMX-AA-008-SCFI-2011
Dureza total 157.17 Mg/L 3 NMX-AA-072-SCFI-2001

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Tabla N3

Metales y compuestos no farmacuticos

Compuesto Valor obtenido Unidades Referencias para el anlisis
Arsnico 0.0162 mg/L NMX-AA-051-SCFI-2001
Cadmio 0.0427 mg/L
Cobre 0.204 mg/L
Mercurio 0.0021 mg/L
Nquel 0.18 mg/L
Plomo 0.12373 mg/L
Zinc 0.211 mg/L
Cianuro total 0.005 Mg / NMX-AA-058-SCFI-2001
Cromo hexavalente 0.050 mg/L NMX-AA-044-SCFI-1981
Grasas y aceites 25.4 mg/L NMX-AA-005-SCFI-2000
extrables
Cloruro total 223.44 Mg 2 / NMX-AA-108-SCFI-2001
Cloro libre residual 0.00 Mg 2 /
Fluoruro total 0.171 Mg / NMX-AA-077-SCFI-2001

Por otro lado, la concentracin letal media (CL50) en aguas residuales hospitalarias,
muestra que la mezcla de concentraciones por debajo del 10% de las concentraciones
medidas, podra producir un dao significativo en las especies acuticas. Se observaron
incrementos en la actividad de LDH con diferencias estadsticamente significativas con
respecto al tiempo inicial y el grupo de control a las 24, 48 y 73 h, despus de lo cual se
observ una disminucin significativa 96 h despus de la exposicin inicial.

La exposicin a residuos hospitalarios mostr un aumento del 40% en los glbulos rojos
apoptticos 24 horas despus de la exposicin, que se mantuvo entre el 20% y el 35%
durante todo el perodo de exposicin.

El monitoreo de los agentes genotxicos acuticos ambientales muestra un aumento

significativo de 2,5 veces con respecto al tiempo cero y control de la superficie 48 h
despus de la exposicin. Debido a las caractersticas qumicas complejas de las aguas
residuales de los hospitales, este podra ser responsable de mltiples efectos en los
organismos. Los peces respondiendo de manera similar a los agentes txicos al igual que
vertebrados superiores.

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 Discusin de resultados
El estudio de estos contaminantes es imprescindible, debido a la infinidad de compuestos
que se pueden encontrar en las aguas vertidas desde distintas fuentes, ya sea de humanos como
de animales. Si bien se mencion que estos contaminantes por s solos no causan dao alguno, la
mezcla de estos ocasiona caractersticas peligrosas para la salud, tales como patogenicidad,
reactividad, toxicidad, genotoxicidad, citotoxidad, entre otros

Por otro lado, se debe tener muy en cuenta el pH en las aguas, en este caso se mostr una
tendencia ligeramente alcalina. Sin embargo, el pH es un parmetro biolgico importante debido a
que la mayora de los organismos acuticos estn adaptados a un pH promedio y no a cambios
abruptos de este, que podran, adems, aumentar la ionizacin de algunos compuestos en la
mezcla, mejorando as la captacin por los organismos acuticos, originando que dichas especies
desaparezcan, mediante las constantes captaciones.

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 Conclusin
Como proyeccin de este trabajo, se demostr la presencia de contaminantes tales como
metales pesados y productos farmacuticos en concentraciones detectables. Las aguas
residuales de los hospitales particulares tienen una LC50 del 5,49% a las 96 h en
Cyprinus.carpio. Se observ un aumento significativo de la actividad citotxica, genotxica
y apopttica, con una correlacin positiva entre el aumento de la actividad Caspasa-3 y el
dao genotxico. Este estudio enfatiza la importancia de identificar y cuantificar los
efectos de tales contaminantes especficos como productos farmacuticos, desinfectantes
y surfactantes para disear e implementar un plan ecotoxicolgico para prevenir la toma y
la bioacumulacin de estos efectos perjudiciales en la cadena alimentaria.

Debemos tener en cuenta que todos los contaminantes que estn siendo vertidos a las
aguas pueden llegar a ser muy peligrosos tanto para la salud humana, como para especies
y alrededores que se encuentren ah. Por lo tanto, se deben tomar medidas legislativas, no
solo en el hospital de Mxico, sino que en todos los pases, con tratamientos adecuados
para dichos contaminantes y tomando como base este estudio con el fin de disminuir sus
contaminantes a travs de una serie de normas y pre-tratamientos que garanticen la
factibilidad en la reduccin de estos efectos.

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