RECUENTO DE HEMATES

INTRODUCCIN
Cuando la eritropoyesis tiene lugar normalmente, su resultado final es la produccin de
una clula-eritrocito perfectamente diferenciada y apta para su funcin principal que es
la de transportar oxgeno y CO2. La falta de ncleo le confiere la virtud de acarrear el
oxgeno sin consumir prcticamente nada de l; su forma bicncava es la que mejor se
presta para afrontar la hemlisis; su membrana no admite la salida de hemoglobina.(1)
FUNDAMENTO
Para el conteo de eritrocitos, se usan mtodos sistemticos que son ms rpidos y
precisos, y los mtodos manuales.
Todo mtodo manual de recuento celular incluye 3 fases:
- Dilucin de la sangre
- Muestreo de la sangre diluida en un volumen
- Recuento de clulas en ese volumen
Una suspensin celular se caracteriza por presentar un nmero de partculas
microscpicas dispersas en un fluido. Habitualmente ser necesario determinar tanto la
densidad de las clulas en la suspensin como el porcentaje de stas que son viables.
Para determinar la densidad de las clulas se emplean diferentes tcnicas, desde la
relativamente simple cmara de contaje celular de la que existen numerosas variantes,
entre ellas la que utiliza la cmara de Neubauer(2)(1)
Para el conteo de eritrocitos, es necesario diluir la sangre con el lquido de Hayem, en
una proporcin exacta. Luego se examina en el microscopio con una cantidad pequea
colocada en la cmara de Neubauer, contando el nmero de elementos que se
encuentran en el retculo de la cmara y mediante una operacin se obtiene el nmero
total.
Para la realizacin del conteo manual se necesita un lquido de dilucin, una cmara de
recuento, una pipeta diluidora y un microscopio.
CUBRE OBJETO
Debe ser algo ms grueso que los normalmente utilizados. Se coloca de forma que
apoye sobre las dos bandas laterales de la porcin
central de la cmara. De esta manera, queda
delimitado un espacio entre la banda central y el
cubre en el que se deposita la muestra y cuyo espe-
sor es de 0,1 mm.(3)
 PIPETA DILUIDORA DE THOMA

Son unas pipetas especiales de cristal que constan de un largo tubo capilar graduado y
de una dilatacin en forma de ampoya o bulbo.(3)

El tubo capilar termina en punta, a nivel de uno de sus extremos, y se contina con el
bulbo, a nivel del otro de sus extremos. Adems, est dividido en 10 partes iguales, y
en su superficie estn especialmente bien marcadas la 5 divisin (con un 0,5) y la 10
(con un 1).

El bulbo contiene una perla de vidrio para facilitar la mezcla de la sangre con el lquido
de dilucin, y acaba en un tubo capilar corto. La perla de vidrio es roja en las pipetas
empleadas para el recuento de hemates, y blanca en las usadas para el recuento de
leucocitos. Adems, en las pipetas para hemates la capacidad del bulbo es 100 veces
superior a la del tubo capilar largo, por lo que en el tubo capilar corto hay una marca de
101. En las pipetas para leucocitos la capacidad del bulbo es 10 veces mayor que la del
tubo capilar largo, por lo que en el tubo capilar corto hay una marca de 11.(3)

GOMA DE ASPIRACIN
MATERIALES
Pipeta de Thoma para glbulos rojos (perla roja)

- Equipo para venopuncion (Tubo lila)

- Boquilla roja
- Tubo de plstico
- Tubos de ensayo
- Papel parafin
- Cmara de Neubauer
- Cubrehematimetro
- Microscopio
- Gasas

SUSTANCIAS

- Alcohol al 70%
- Sangre venosa
- Liquido de Hayem
PROCEDIMIENTOS
1. Una vez seleccionada, se desinfecta la zona con alcohol al 70%, y se practica
puncin venosa. La sangre es recogida en un tubo lila con EDTA.

2. Colocar el tubo de plstico y la boquilla para aspirar en la pipeta

3. Llenar la pipeta de glbulos rojos con sangre hasta la marca 0.5 para realizar una
dilucin de 1/200, y si se carga hasta 1, la dilucin ser 1/100. Limpiar la punta
con gasa o papel absorbente. Si la sangre se pasa de la marca, se puede absorber
con gasa el excedente.
4. Introducir la pipeta en el tubo o
frasquito que contiene el diluyente
cloruro de sodio y llenar de lquido
de dilucin hasta la marca de 101.

5. Desenganchamos el tubo de goma de la pipeta y

movemos suavemente el contenido de forma
horizontal, para que se mezcle la sangre con el
lquido de dilucin durante 2-3 minutos.
6. Desechamos las tres primeras gotas que se vierten con la pipeta y la siguiente gota
la colocamos entre la cmara y el cubre por uno de los bordes de la cmara,
dejndola que penetre por capilaridad. Debemos intentar que no rebose la sangre
diluida, ni se formen burbujas.
7.

7. Dejamos reposar la sangre diluida ya en la cmara, durante unos minutos. As las

clulas
tienen
tiempo de

sedimentarse.
 8. Ya tenemos la cmara preparada para el estudio al microscopio.
Colocar en la platina del microscopio y enfocar la cuadricula a 10x. luego con el
objetivo de 40x contar sobre el cuadro grande central de la cmara solo en 5
cuadrados pequeos: uno central y cuatro angulares (80 cuadritos del total).
9. En el recuento se incluyen las clulas que cubren o tocan por dentro o por fuera
las lneas limitantes superior e izquierda en el cuadro pequeo de recuento y no se
consideran los que estn en los lmites inferior y derecho.

Enfocando el cuadro central de los

El rayado de la cmara de Neubauer
cuadros
cubierta de miles de eritrocitos, que pequeos, se aprecian claramente
destacan por su forma redonda los 16 cuadritos pequeos donde se tienen
y gran
cantidad. que contar los eritrocitos que hay en ellos.

CAMARA10X
CAMARA DE NEUBAUER, DE NEUBAUER, 40X
RESULTADOS
Los recuentos de eritrocitos se expresan como concentraciones, que en este caso seran
nmero de clulas por unidad de volumen de sangre, que es 1mm3
Despus de contar los hemates de los 5 cuadrados pequeos, se suman y con dicha
cantidad de hace el siguiente clculo:

N de hemates x mm3 = altura x dilucin x rea

N de hemates x mm3 = 1/10 x 1/200 x 1/5 = 1/10 000
N de hemates x mm3 = hemates contados x 10 000

En el anlisis hecho, el nmero de eritrocitos fue de 491, que al multiplicarse por 10

000 daba como resultado 4 910 000/mm3, lo que indica un ndice normal pues el
paciente era una mujer de 11 aos de edad.

VALORES DE REFERENCIA
(Millones de clulas/mm3)

Hombres:..4 500 000-5 500 000

Mujeres:....4 000 000-5 000 000
Nios (4 aos):.........................4 200 000-5 200 000
Lactantes (1-6 meses)....3 800 000-5 200 000
Recin nacidos:..5 000 000-6 000 000

CONCLUSIN
Los eritrocitos o glbulos rojos son clulas de color amarillento, con la forma de un
disco bicncavo, sin ncleo y contienen un pigmento llamado hemoglobina que les
otorga su caracterstico color.
Estos se forman constantemente en la medula sea, en el crneo, las costillas, las
vrtebras y el esternn, en un proceso conocido como eritropoyesis. Viven
aproximadamente 120 das y al envejecer son destruidos por las clulas
reticuloendoteliales del hgado, la medula sea y el bazo.
La falta de ncleo le confiere la virtud de acarrear oxigeno sin consumir nada de l.
La pipeta de Thoma para glbulos rojos est constituida por dos porciones capilares y
un bulbo central. El tubo capilar inferior est dividido en 10 partes iguales con marcas
de 0.5 y 1.0. En el interior del bulbo existe una perlita de plstico roja para favorecer la
mezcla de sangre con el lquido y en el capilar superior hay una marca de 101.
El lquido de dilucin no solamente debe de diluir los eritrocitos hasta cifras legibles,
sino que tambin permita identificarlos y que destruya otros elementos celulares que no
son de inters en este momento. En general se puede usar cualquier solucin isotnica
como diluyente y pueden ser:
- Soluciones de Gower
- Soluciones de Dace
- Solucin salina de NaCl al 0.9%
- Liquido de Hayem,
el cual est formado de 5g de NaCl, 2.5g de Na2SO4, 2.5g de MgCl2 y agua destilada
para un litro. Este ltimo es el ms usado.
Es muy importante observar que en la cmara de Neubauer las reas de recuento de
eritrocitos y linfocitos son diferentes.
Los glbulos rojos se cuentan en las reas coloreadas de rojo, mientras que los
glbulos blancos se cuentan en las reas coloreadas de azul.

BIBLIOGRAFIAS
1. RECUENTO DE HEMATES Y LEUCOCITOS [Internet]. Available from:
http://tertuliadeamigos.webcindario.com/practicas09.html
2. PRCTICA No15. RECUENTO DE HEMATES | Prcticas de Hematologa y
Citologa [Internet]. Available from:
https://practicasdehematologiaycitologia.wordpress.com/2014/11/23/practica-
no15-recuento-de-hematies/
3. EdUrIrOm: PRCTICA No. 4: "CUENTA DE ERITROCITOS"
[Internet]. Available from: http://edurirom.blogspot.pe/2012/03/practica-no-4-
cuenta-de-eritrocitos.html