Preguntas de Repaso

1- Cul es la finalidad de la tincin de las muestras en la

microscopia ptica? Por qu se utilizan los colorantes
catinicos como agentes generales de tincin?

- La finalidad de la tincin en muestras observadas a travs de

un microscopio ptico es utilizar colorantes para que exista un
mejora en el contraste y as teir las clulas y aumentar la
nitidez, facilitando la observacin.

- En este tipo de tinciones se puede utilizar colorantes

catinicos dado que las superficies celulares estn, por lo
general, estn cargados positivamente y combinan
fuertemente, con constituyentes celulares cargados
negativamente, estos colorantes se combinan con estructuras
de la superficie de las clulas.

[Ing. Ambiental] Pgina 1

 2- Qu ventaja ofrece el microscopio de contraste de
interferencia diferencial respecto al mismo microscopio de
campo claro?,Qu ventaja presenta el microscopio de
contraste de fases sobre el de campo claro?

- En el microscopio de interferencia diferencial se pueden

observar con mayor claridad y en un plano tridimensional las
estructuras internas de una clula no teida, transparentes.
Ya que con el microscopio de campo claro se deben utilizar
mtodos de tincin porque el campo claro de este no produce
un nivel til de contraste, para poder obtener una mayor
resolucin, pero a pesar de la tincin es imposible observar
estructuras internas.

- El microscopio de contraste de fases obtiene una imagen

bidimensional de las clulas y al existir una diferencia de
contrastes entre la clula y su medio, podemos observar con
mayor claridad a la clula. No es necesario utilizar tinciones o
usar fluorforo , a diferencia de la microscopia de campo
claro, ya que a veces la tincin puede ocasionar la muerte
celular e incluso distorsionar la imagen en el microscopio

[Ing. Ambiental] Pgina 2

 3- Cul es la principal ventaja de los microscopios electrnicos
sobre los microscopios pticos? ,Qu tipo de microscopio
electrnico utilizara para ver las estructuras tridimensionales de
una clula?

- La principal ventaja del electrnico sobre el ptico es que

para la mayora de los anlisis de rutina se usa el microscopio
ptico, mientras que para el examen de las estructuras
intracelulares se utiliza el electrnico como un complemento
ya que este tiene un mayor poder de resolucin.

- Para observar estructuras tridimensionales sera conveniente

utilizar la microscopa con focal de barrido porque sta se
basa en un microscopio computarizado que puede acoplar
una fuente de luz lser a un microscopio ptico y esto le
permite producir imgenes tridimensionales de muestras
biolgicas y microorganismos.

[Ing. Ambiental] Pgina 3

 4- Cules son las principales morfologas de los procariotas?
Para cada morfologa que cite dibuje algunas clulas

- Bacterias con forma esfrica u ovoide se les denomina cocos

- Bacterias con forma cilndrica se les denomina bacilos

- Bacilos se curvan en forma espiral y se les conoce como

espirilos.

- Bacterias con yemas y apndices

- Filamentos

[Ing. Ambiental] Pgina 4

 5- Describa en una frase la manera en la que se construye una
unidad de membrana a partir de molculas de fosfolpidos.

- Cuando los fosfolpidos se agregan en soluciones acuosas

tienden a formar bicapas de manera espontnea; los cidos
grasos se orientan hacia el interior, mantenindose en
ambiente hidrofbico, mientras que las porciones hidroflicas
son las expuestas a la fase acuosa. En las membranas
celulares los fosfolpidos juegan un papel muy importante, ya
que controlan la transferencia de sustancias hacia el interior o
exterior de la clula.

[Ing. Ambiental] Pgina 5

 6- Explique en una sola frase porque las molculas ionizadas no
atraviesan con facilidad la barrera de la membrana celular
Cmo pueden atravesar la membrana citoplasmtica?

- Las membranas actan como barrera biolgica que, de modo

selectivo, impiden el paso de las molculas. Dependiendo de
la carga y tamao de la molcula, la membrana decidir el
tipo de molcula que es capaz de entrar al interior de la clula
sin ningn esfuerzo, mientras que las dems debern utilizar
otros medios para atravesar la membrana. Para evitar
prdidas y funciona como puerta de entrada y salida de
nutrientes

- No todas las molculas ionizadas logran pasar la barrera

citoplasmtica debido a que la capa est cargada
positivamente y existe la separacin de cargas y entonces los
iones atraviesan la membrana por los diferentes mecanismos
de transporte que ofrece la clula: difusin facilitada, osmosis,
transporte activo (simporte, antiporte, uniporte)

[Ing. Ambiental] Pgina 6

 7- Describa una de las principales diferencias qumicas entre
membranas de Bacteria y Archaea

- Una de las principales diferencias entre estas dos es que los

lpidos de Archaea son nicos ya que poseen enlaces ter
entre el glicerol y los cidos grasos y en su lugar tienen
cadenas laterales hidrofbicas por unidades de isopreno,
adems que forman una monocapa lipidica mucho ms
estable que la bicapa

- lipdica de los otros 2 reinos. A diferencia de lo que sucede en

bacteria donde los enlaces que poseen son de tipo ster los
cuales son los responsables de la unin entre el glicerol y los
cidos grasos.

- Las Archeas y las bacterias no tienen membranas internas

que delimiten orgnulos. Como todos los organismos
presentan ribosomas, pero a diferencia de los encontrados en
las bacterias que son sensibles a ciertos agentes qumicos
inhibidores, los de las archaea no lo son, lo que puede sugerir
una relacin cercana entre Archaea y Eukarya.

[Ing. Ambiental] Pgina 7

 8- Las clulas de Escherichia coli incorporan la lactosa por medio
de la persona Lac, la glucosa por la va del sistema
fosfotransferasa, y maltosa mediante un transportador de tipo
ABC. Para cada uno de estos azucares ,describa (1) los
componentes de su sistema de transporte y (2) la fuente de
energa que sustenta el proceso de transporte

Para que la lactosa pueda atravesar la membrana

citoplasmtica, E. coli posee un simportador conocido como
permeasa Lac mediante el cual la lactosa entra al citoplasma
con la ayuda de un H+ a su estructura. As que la fuerza
protn motriz es lo que le proporciona energa para poder
ingresar al interior de la clula. La energa de la FPM
disminuye por el flujo de protones que ingresan a la clula,
pero esta disminucin se restablece por otras reacciones que
proporcionan energa a la clula.

Para transportar la maltosa al interior de la clula, es

necesario un sistema de transporte ABC (ATP binding
casette) en donde la membrana citoplasmtica posee en la
superficie protenas peri plasmticas de unin, las cuales
poseen una gran afinidad por su sustrato (en este caso la
maltosa), despus las Protenas transmembranales (forma el
canal de transporte) intervienen dejando pasar la maltosa a
travs del canal y por ltimo la Protena citoplasmtica es la
encargada de hidrolizar el ATP y as dar la energa necesaria
para que la maltosa entre completamente a la clula

[Ing. Ambiental] Pgina 8

 9- Por qu se denomina peptidoglicano a la capa rgida de la
pared celular bacteriana?, Cules son las razones qumicas
que explican la rigidez que confiere el peptidoglicano a la pared
celular?

Se le denomina as ya que esta capa rgida es responsable de

la resistencia de la pared celular y est formada por finas
lminas compuestas por dos derivados de azcares,
N-acetil glucosamina y cido N.acetilmurmico, y un pequeo
grupo de aminocidos que incluye L-alanina, D-alanina, D-
glutmico y o bien lisina o DAP.

La bacteria produce su propia pared celular de

peptidoglucano (glucano es otro nombre para polisacrido),
que consiste en cadenas paralelas de polisacrido unidas
transversal y covalentemente a pptidos

Las razones que explican la rigidez es que los enlaces

glicosdicos que unen los azcares en las cadenas son muy
fuertes. Cuando las cadenas se entrecruzan mediante
puentes peptdicos se logra la rigidez caracterstica de la
pared.

[Ing. Ambiental] Pgina 9

 10 -Teniendo en cuenta que una sola molcula de
peptidoglicano es muy fina, explique en trminos qumicos
como se forma la gruesa capa de peptidoglicano en la pared
celular de Bacteria Gram positiva?

La capa de peptidoglicano a pesar de ser muy delgada, puede

llegar a formar una capa bastante gruesa y rgida que proteja
a la clula. Esta capa se forma por medio de varios enlaces
interpeptidicos entre los aminocidos que se encuentren
presentes (L-Alanina, D-Alanina, G-Glutmico o Lisina o DPA)
y as le va confiriendo rigidez a la pared celular. Ya que los
enlaces glicosdicos entre N-acetil glucosamina y N-
acetilmuramico no son enlaces muy fuertes, as que para
conferirle rigidez y grosor a la pared, se unen 2 molculas de
N-acetilmuramico a travs de enlaces interpeptidicos.

[Ing. Ambiental] Pgina 10

 11 -Enumere varias funciones de la membrana externa de la
pared en Bacteria Gram negativa Cul es la composicin
qumica de la membrana externa?

1.- Es barrera de exclusin forma un saco rgido alrededor de

la bacteria, mantiene estructura
2.- Permeabilidad a macromolculas, ofrece proteccin en
condiciones adversas
3.- Secrecin de sustancias al exterior
4.- Previene la salida de protenas periplsmicas como las
enzimas digestivas
5.- Interacciona con el ambiente, con los antgenos de la
superficie
6.- Anclajes de estructuras superficiales

Las Bacteria Gram negativas adems de peptidoglicano

poseen en su pared una membrana externa que contiene
lipopolisacrido, protena y lipoprotena. La naturaleza
altamente cargada de los lipopolisacrido confiere una carga
negativa total a la pared. Representa una segunda bicapa
lipdica contiene diversas protenas, siendo una de ellas las
porinas o canales proteicos que permiten el paso de ciertas
sustancias. Tambin presenta unas estructuras
llamadas lipopolisacrido (LPS), formadas por tres regiones:
el polisacrido O (antgeno O), una estructura polisacrida
central (KDO) y el lpido A (endotoxina).

Y en Salmonella done se estudi ms detalladamente, el

ncleo del polisacrido est compuesto por
cetodesoxioctonato (KDO), azucares de siete carbonos
(heptosas), glucosa, galactosa y N-acetil glucosamina.

[Ing. Ambiental] Pgina 11

 12 - En dos o tres frases , de una explicacin lgica de porque la
sacarosa es capaz de estabilizar las clulas bacterianas sin
que se lisen las clulas una vez tratadas lisosoma

13 - Describa la estructura y funcin de un flagelo bacteriano.

Cul es la fuente de energa para el flagelo?

Los flagelos estn compuestos por cerca de 20 protenas, con

aproximadamente otras 30 protenas para su regulacin y
coordinacin. El filamento es un tubo hueco helicoidal de 20
nm de espesor. El filamento tiene una fuerte curva o "codo"
justo a la salida de la membrana externa, un eje se extiende
entre el codo y el cuerpo basal, pasando por varios anillos de
protenas en la membrana de la clula que actan como
cojinetes. El flagelo bacteriano es una estructura filamentosa
que sirve para impulsar la clula bacteriana. Son finos (20nm)
no es posible verlos en el microscopio ptico y necesita
tinciones especficas para que aumenten su dimetro.

El mecanismo del flagelo bacteriano es rotatorio, con un

motor reversible (funciona en los dos sentidos de giro). La
energa que propulsa a este motor no es ATP ni ninguna otra
molcula con enlaces energticos, sino que deriva
directamente del gradiente de protones (fuerza protn-motriz).

[Ing. Ambiental] Pgina 12

 14 - En qu se diferencia los mecanismos de movilidad por
deslizamiento de Flavobacterium y la movilidad de
Escherichia coli?

El mecanismo Flavobacterium se debe al movimiento de

una protena de la superficie de la clula y el
deslizamiento tiene una enorme importancia ecolgica
puesto que permite a la clula colonizar nuevos
ambientes o interactuar de modo beneficioso con otras
clulas

Mientras en la movilidad Escherichia coli

Es anaerbico facultativo, mvil por flagelos peritricos

(que rodean su cuerpo ) , no forman esporas ,es capaz

de fermentar la glucosa y la lactosa

15 Explique en unas pocas frases el modo por el cual una

bacteria mvil percibe la direccin en que se encuentra una
sustancia atrayente y se mueve hacia ella.

Por la a quimiotaxis que es el desplazamiento que

realizan las clulas o bacterias mviles en el medio
lquido en el que se encuentran, a favor o en contra de
un gradiente qumico. Para ello las clulas poseen
receptores celulares que captan las sustancias
qumicas y se mueven en la direccin donde se
encuentran dichas sustancias quimiotcticas. La
quimiotaxis es por tanto un sistema de respuesta
sensorial de locomocin, gobernado qumicamente.

[Ing. Ambiental] Pgina 13

 16 - Qu tipos de inclusiones citoplasmticas forman las
procariotas? En que difieren en cuanto a composicin y
papel metablico una inclusin de poli- B-hidroxibutirato
(PBH) y una magneto soma?

17 - Cul es la funcin de las vescula de gas?,Cmo es la

estructura que permite retener el gas en su interior?

Las vesculas de gas representan una forma de movilidad

que permite que las clulas floten dentro del agua a
diferentes alturas, en funcin de los factores micro ambiental

Las vesculas de gas son estructuras fusionaras, huecas pero

rgidas, de longitud y dimetro variable. La longitud de las
vesculas de gas vara de 300 a ms de 1.000nm y la anchura
de 45 a 120 nm y la membrana de de las vesculas de gas se
componen solo de protenas, tiene unos 2nm de espesor y es
impermeable al agua y a solutos, pero permeable a los gases
por lo tanto aparecen como estructuras llenas de gas
rodeadas por los constituyentes del citoplasma

[Ing. Ambiental] Pgina 14

 18 Indique brevemente las diferencias entre una clula
vegetativa y una endospora en cuanto a la estructura,
composicin qumica y capacidad para resistir condiciones
ambientales extremas.

La estructura de la espora es mucho ms compleja que la de la

clula vegetativa al poseer mltiples capas. La capa ms
externa es el exosporium, una fina y delicada cubierta de
naturaleza proteica. Por dentro de sta se localizan las cubiertas
de la espora que se componen de capas de protena. Bajo la
cubierta de la espora se encuentra el crtex (corteza) que no es
ms que una capa de peptidoglicano con uniones laxas, y por
dentro del crtex est el ncleo o protoplasto de la espora que
contiene la pared celular (de estructura similar a la de la clula
vegetativa) (pared del ncleo), membrana citoplasmtica,
citoplasma, nucleoide, etc. Por consiguiente, las esporas se
diferencian estructuralmente de la clula vegetativa
fundamentalmente en el tipo de estructuras situadas por fuera
de la pared del ncleo de la espora

Las endospora son formas de reposo (y no formas

reproductivas), que representan una etapa del ciclo de vida de
ciertas bacterias, y que se caracterizan por una estructura
peculiar, diferenciada respecto de las clulas vegetativas, por un
estado metablico prcticamente detenido, y por una elevada
resistencia a agentes agresivos ambientales.

[Ing. Ambiental] Pgina 15

 19 El descubrimiento de la endospora tuvo una gran
importancia prctica Por qu?

El descubrimiento de las endosporas bacterianas tuvo

una gran trascendencia para la microbiologa porque el
conocimiento de estas formas de gran resistencia al
calor fue decisivo para el desarrollo de mtodos de
esterilizacin, no solo para medios de cultivo sino
tambin para alimentos y productos perecederos y otros
organismos diferentes a las bacterias forman esporas .

20 Defina los siguientes trminos : endospora madura, clula

vegetativa y germinacin

- endospora madura: Es una sustancia inactiva,

resistente, no reproductiva producida por una pequea
cantidad de bacterias de la divisin Firmicute.

- clula vegetativa: Estas son formas latentes de clulas

bacterianas producidas por ciertas bacterias en
condiciones de ayuno; las formas de crecimiento activo
de la clula se llaman clulas vegetativas.

- Germinacin: El proceso por el cual las esporas pasan a

formar clulas vegetativas se denomina germinacin.
Ocurre cuando se las coloca en el medio adecuado y se
requiere en muchos casos la disponibilidad, entre otros,
de glucosa, aminocidos y nuclesidos.

[Ing. Ambiental] Pgina 16

 21 - Cunto tiempo permanece viables las esporas en un
estado de latencia y cul es la prueba de ello?

Las endosporas pueden permanecer en estado de

latencia durante periodos de tiempo largos y como un
claro ejemplo seria la fotografa encontrada de un tubo
conteniendo esporas de la bacteria Ciostridium
aceticum, preparada el 7 de mayo de 1947 tras
permanecer en estado latente por ms de 30 aos, las
esporas se sembraron en un medio de cultivo y el
crecimiento ocurri en 12 horas .Bacterias halfilas
atrapadas en el interior de cristales de sala. Las clulas
de Halobacterium (color naranja) que permanecieron
viables en el interior .Se ha descrito que cristales
similares a estos , pero procedentes del periodo (hace
unos 250 millones de aos),contenan endosporas
bacterianas viables .

[Ing. Ambiental] Pgina 17