Mtodo 5
Determinacin de Oxgeno Disuelto
Yrene M. Astor
Introduccin
Este procedimiento describe el mtodo para
determinar la concentracin de oxgeno disuelto en
agua de mar. La tcnica utiliza un sistema de titulacin
automtico basado en el mtodo Winkler (Carpenter,
1965), modificado por Aminot y Chaussepied (1983).
El lmite de deteccin es 0,06 mL L-1, y la precisin del
mtodo es de 0,03 mL L-1.
Fundamentos del mtodo
El oxgeno disuelto presente en la muestra reac-
ciona con manganeso en un medio altamente alcalino
generando un precipitado (MnO(OH)2). La muestra se
acidifica a un pH entre 1,0 y 2,5 con lo cual se disuelve
el precipitado y se libera yodo presente en la solucin
alcalina en cantidades qumicamente equivalentes al
contenido de oxgeno disuelto en la muestra original.
El yodo liberado se valora utilizando una solucin es-
tndar de tiosulfato de sodio la cual convierte todo el
yodo libre en yoduro. Una solucin indicadora (almi-
dn) detecta el punto final de la titulacin. Con este
mtodo, cuatro moles de tiosulfato equivalen a un mol
de oxgeno disuelto (Aminot and Chaussepied, 1983).
Advertencias analticas
1. En las aguas que tienen concentraciones elevadas
de agentes oxidantes y/o reductores (hierro, sulfito,
tiosulfato, nitrito, etc.) se presentan interferencias
positivas o negativas. Compuestos orgnicos sus-
ceptibles a fijar el yodo as como sustancias oxi-
dables en medio bsico son otra fuente de error
(Aminot y Chaussepied, 1983).
2. La introduccin de burbujas de aire dentro de la
botella as como en la manguera de captacin
produce interferencia positiva.
3. El trasvase de la muestra as como la agitacin
vigorosa favorece la disolucin de aire en la muestra
y la prdida de yodo debido a su volatilidad. Esto se
evita titulando en el mismo matraz en que se hace
la captacin.
4. La titulacin debe hacerse rpidamente para evitar
la oxidacin del yoduro a yodo debido al contacto
con la atmsfera.
5. Las aguas que presenten niveles elevados de color
debido a la presencia de materia orgnica as como
de turbiedad dificultan la visualizacin del punto
final de la titulacin.
Materiales
1. Pipetas aforadas (10 y 100 mL).
2. Dispensadores automticos con capacidad de 0 a
2,0 mL.
3. Pipetas automticas monocanal con capacidad de
1 mL.
4. Matraces Pyrex de 125 mL utilizados para la deter-
minacin de yoduro, con tapa cnica biselada que
se proyecte por encima del sello. Lavar previamen-
te los matraces con agua destilada y secarlos total-
mente. Cada matraz y su tapa se deben identificar
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 y mantener juntos en todo momento. El volumen
del matraz con la tapa puesta se debe calcular en
forma gravimtrica (ver seccin "Determinacin del
volumen de muestra").
5. Mangueras Tygon para la captacin de la muestra
de la botella Niskin, con dimetro no mayor de 4
mm. Usar manguera de silicona del mismo dime-
tro en caso de que se pretenda tomar muestras de
carbono orgnico disuelto o total (DOC y/o TOC)
seguidamente.
Equipos
1. Bureta de mbolo con una resolucin de 0,01 mL.
2. Agitador magntico.
3. Balanza analtica, con apreciacin de 0,1 mg.
Reactivos
1. Solucin manganosa. Disolver 600 g de cloru-
ro de manganeso tetrahidratado (MnCl2.4H2O),
o 670 g de sulfato de manganeso tetrahidratado
(MnSO4.4H2O), o 560 g sulfato de manganeso bi-
hidratado (MnSO4.2H2O), o 510 g de sulfato de
manganeso monohidratado (MnSO4.H2O) en 1000
mL de agua destilada. Mantener a temperatura am-
biente.
2. Solucin alcalina de yoduro. Disolver 320 g de
hidrxido de sodio (NaOH) en 300 mL de agua des-
tilada. Disolver 600 g de yoduro de sodio (NaI) en
300 mL de agua destilada mientras se calienta la
solucin. Mezclar las dos soluciones a temperatura
ambiente y ajustar el volumen a 1000 mL. Si las
muestras poseen nitrito en cantidades > 3 mol L-1,
aadir 10 g de azida de sodio (NaN3) disueltos en
40 mL de agua destilada antes de ajustar el volu-
men. Mantener a temperatura ambiente.
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3. Solucin de cido sulfrico. Diluir 280 mL de ci-
do sulfrico concentrado (H2SO4, d = 1,84 g mL-1)
en agua destilada. Ajustar el volumen a 1000 mL.
4. Indicador. Disolver 1 g de almidn soluble en 100
mL de agua destilada y calentar hasta que desapa-
rezca la turbiedad. Aadir algunas gotas de cloro-
formo como preservativo y refrigerar. Esta solucin
es estable por 2 semanas. Renovar nuevamente si
no se obtiene un color azul puro cuando se titula.
5. Solucin estndar de tiosulfato (0,01 N). Disolver
2,48 g de tiosulfato de sodio (Na2S2O3.5H2O) en
1000 mL de agua destilada. Esta solucin es bas-
tante inestable; por lo tanto, preparar antes de cada
anlisis y mantener en una botella mbar en el re-
frigerador si no se usa inmediatamente. Normalizar
todos los das.
6. Solucin estndar de yodato de potasio (0,01
N). Secar el yodato de potasio (KIO3) en una estufa
a 105 C por una hora, enfriar en un desecador y
pesar exactamente 0,3567 g. Disolver en agua des-
tilada y ajustar el volumen a 1000 mL. Esta solucin
es estable indefinidamente si se evita la evapora-
cin.
Determinacin del volumen de muestra
Es importante conocer con precisin el volumen de
muestra en cada matraz. Los volmenes se obtienen
por peso de la manera siguiente:
1. Numerar cada matraz junto con sus tapas.
2. Lavar y enjuagar cada matraz con agua destilada,
secar aproximadamente a 100 C en una estufa y
permitir que alcancen temperatura ambiente.
3. Pesar cada matraz con su tapa.
4. Llenar el matraz con agua destilada y taparlos sin
 que queden burbujas de aire adentro. Secar total-
mente, especialmente alrededor de la tapa y en los
bordes, con un papel absorbente.
5. Pesar los matraces llenos.
6. Medir la temperatura del agua destilada en los ma-
traces.
7. Calcular el volumen del agua segn la relacin:
(P2 P1)
V(mL) = (1)
D
donde
P1 = peso del matraz vaco (g).
P2 = peso del matraz con agua destilada (g).
D = densidad del agua destilada a la
temperatura de la medicin (g mL-1).
La densidad del agua destilada a diferentes tempera-
turas se muestra en la tabla 5.1.
Captacin de muestras
1. Las muestras para oxgeno disuelto se captan de
las botellas Niskin despus de recolectar las de
sulfuro de hidrgeno. Las muestras se toman por
duplicado.
2. Para la extraccin de la muestra se utiliza una man-
guera flexible transparente conectada a la espita de
la botella Niskin. Esto reduce la introduccin de bur-
bujas de aire mientras se capta la muestra. Elevar
el extremo final de la manguera, abrir el paso de
agua y remover las burbujas de aire presionando la
manguera con los dedos. Colocar el matraz de for-
ma invertida e introducir el tubo hasta el fondo del
mismo. Enjuagar el matraz y su tapa con la muestra
dos veces. Poner el matraz en posicin vertical y
permitir que el agua desborde. Para calcular cuanta
agua debe rebosar, estimar primero cuanto tarda
el frasco en llenarse y seguidamente permitir que
el agua siga fluyendo por un periodo equivalente
a dos veces ese tiempo, mientras se golpea con
la tapa la parte inferior del matraz para evitar que
alguna burbuja se adhiera al vidrio. Para retirar la
manguera, bajar el matraz lentamente hasta que
la manguera se encuentre ~1 cm por debajo de la
superficie del agua. Cerrar el flujo y retirar la man-
guera del matraz con cuidado.
3. Antes de colocar la tapa, aadir1 inmediatamente
0,8 mL de solucin manganosa y 0,8 mL de solucin
alcalina, colocando la punta de cada dispensador
por debajo de la superficie de la muestra tratando
de evitar la formacin de burbujas mientras se
agregan los reactivos. Colocar cuidadosamente
la tapa correspondiente al matraz, sin que queden
burbujas dentro del mismo, y agitar al menos 15
veces invirtiendo el frasco. Permitir que se forme
el precipitado despus de 20 minutos y agitar
nuevamente.
4. Colocar agua de mar en la copa alrededor de la
tapa para evitar la resequedad del esmerilado y la
difusin del gas. Guardar el matraz a temperatura
ambiente protegido de la luz.
5. Analizar las muestras en un periodo no mayor de
24 horas despus de la captacin.
1
La dosis de cada reactivo depender del volumen del matraz usa-
do a razn de 6 mL por cada litro de muestra.
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Anlisis de muestras
1. Antes del anlisis permitir que las muestras y los
reactivos alcancen temperatura ambiente.
2. En el laboratorio, se debe retirar el agua que se
encuentra alrededor de la tapa del matraz antes
de empezar el anlisis, procurando no provocar
turbulencia en la muestra que pueda perturbar el
precipitado. Remover la tapa cuidadosamente y
aadir 0,8 mL de la solucin de cido sulfrico.
Mezclar la solucin con un agitador magntico para
disolver el precipitado completamente.
3. Realizar la titulacin en el transcurso de una hora.
Titular directamente en el matraz con tiosulfato de
sodio 0,01 N hasta obtener un color amarillo pli-
do.
4. Aadir 1 mL de la solucin de almidn con lo cual
la solucin se torna de un color azul. Continuar len-
tamente la titulacin hasta que la solucin se torne
transparente y permanezca as por 20 segundos.
La titulacin no debe tomar ms de 3 minutos.
Normalizacin del tiosulfato
Se deben realizar un mnimo de tres estndares por
cada grupo de muestras.
1. Colocar 10 mL de la solucin estndar de yodato de
potasio 0,01 N en un matraz limpio.
2. Agregar aproximadamente 100 mL de agua destila-
da.
3. Aadir 0,8 mL de la solucin de cido sulfrico y
mezclar.
4. Adicionar 0,8 mL de la solucin alcalina y mezclar.
5. Titular inmediatamente siguiendo los pasos 3 y 4
del "Anlisis de muestras".
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Determinacin del blanco
Blanco del anlisis (Bana). Los reactivos pueden
contener impurezas oxidantes o reductoras las cuales
se pueden controlar realizando un blanco.
1. Verter exactamente 1 mL de la solucin estndar
de yodato de potasio 0,01 N a un matraz limpio.
2. Agregar 100 mL de agua destilada con una pipeta
volumtrica.
3. Adicionar 0,8 mL de la solucin de cido sulfrico y
mezclar.
4. Aadir 0,8 mL de la solucin alcalina y mezclar.
5. Por ltimo, agregar 0,8 mL de la solucin man-
ganosa y mezclar.
6. Titular inmediatamente hasta alcanzar el punto de
equivalencia (V1).
7. Aadir nuevamente 1 mL de la solucin estndar de
yodato de potasio 0,01 N y titular inmediatamente
con tiosulfato (V2).
8. El blanco del anlisis se calcula:
Bana = (V1 V2) (2)
Blanco del estndar (Best). Hacer el blanco del
estndar como se describe para Bana sin agregar la
solucin manganosa.
Clculo y expresin de resultados
La concentracin de oxgeno disuelto se calcula
usando la siguiente ecuacin:
(VT Bana)
O2 (mL L-1) = 559,8* (V B ) * (Vmue Vr) 0,01 (3)
est est
donde Best= blanco estndar.
VT= volumen de tiosulfato utilizado para titular Vmue= volumen de muestra en el matraz (ver
la muestra. seccin "Determinacin del volumen de
Bana= blanco del anlisis. muestra").
Vest= volumen medio de tiosulfato utilizado para Vr= volumen de los reactivos de fijacin
titular las tres soluciones estndar. aadidos al matraz.

Tabla 5.1.
Densidad (D) del agua destilada a una temperatura T C.

T (C) D (g cm-3)

20 0,99823
22 0,99777
24 0,99730
26 0,99679
28 0,99623
30 0,99567

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