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compromisso com voc
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Editorial
Caros colegas,
Novamente temos a satisfao de encaminhar co-
munidade veterinria e zootcnica mineira o volume 73
do Cadernos Tcnicos, o segundo fascculo de 2014.
A Escola de Veterinria e o Conselho Regional de
Medicina Veterinria de Minas Gerais, com satisfao
consolidam a parceria e compromisso entre as duas ins-
tituies com relao Educao Continuada da comu-
nidade dos mdicos veterinrios e zootecnistas de Minas
Gerais.
O presente nmero aborda, de forma objetiva, a te-
mtica sobre Sanidade em Organismos Aquticos, dis-
correndo sobre relevantes pontos das principais enfer-
midades que acometem a piscicultura nacional. O tema
apresentado importante, uma vez que a Sanidade de
Organismos Aquticos uma rea pouco conhecida pe-
los mdicos veterinrios e zootecnistas, mas que possui
alta relevncia para a cadeia produtiva do peixe de gua
doce. Deste modo, este volume poder contribuir para
o melhor entendimento destas questes pelos profissio-
nais da rea, alm de apresentar os problemas e solues
queles que querem se iniciar nesta rea.
Com este nmero do Cadernos Tcnicos esperamos
contribuir tanto para a conscientizao quanto para a in-
Universidade Federal formao dos colegas, auxiliando para que possam cons-
de Minas Gerais
truir as melhores opes de atendimento aos desafios
Escola de Veterinria de um novo setor em franca expanso na produo de
Fundao de Estudo e Pesquisa em
Medicina Veterinria e Zootecnia alimentos em nosso pas.
- FEPMVZ Editora
Portanto, parabns comunidade de leitores que uti-
Conselho Regional de lizam o Cadernos Tcnicos para aprofundar seu conhe-
Medicina Veterinria do
Estado de Minas Gerais cimento e entendimento sobre Sanidade de Organismos
- CRMV-MG
Aquticos, em benefcio da sociedade.
www.vet.ufmg.br/editora Prof. Antonio de Pinho Marques Junior
Correspondncia: Editor-Chefe do Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinria e Zootecnia (ABMVZ) -
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CADERNOS TCNICOS DE
VETERINRIA E ZOOTECNIA
Edio da FEPMVZ Editora em convnio com o CRMV-MG
Fundao de Estudo e Pesquisa em Medicina Veterinria e
Zootecnia - FEPMVZ
Editor da FEPMVZ Editora:
Prof. Antnio de Pinho Marques Junior
Editor do Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia:
Prof. Marcos Bryan Heinemann
Editores convidados para esta edio:
Danielle Ferreira de Magalhes Soares
Pedro Lcio Lithg
Revisora autnoma:
Angela Mara Leite Drumond
Tiragem desta edio:
9.300 exemplares
Layout e editorao:
Solues Criativas em Comunicao Ldta.
Impresso:
O Lutador
Streptococcus
dysgalactiae subsp.
dysgalactiae em peixes
Frederico Augusto de Alcntara Costa1
Carlos Augusto Gomes Leal2 (CRMV-MG 9014)
Henrique Csar Pereira Figueiredo2* CRMV-MG 5839)
1
Professor Adjunto, Mdico Veterinrio, Doutor, Faculdade de Medicina Veterinria/UFU
2
Professor Adjunto, Mdico Veterinrio, Doutor, DMVP, Escola de Veterinria/UFMG
*autor para correspondncia: figueiredoh@yahoo.com
19. COSTA, F.A.A. Molecular epidemiology and de- 25. KYORITSU SEIYAKU KK. RYOKO, T.
velopment of vaccines against emerging pathogens Inactivated vaccine using fish Streptococcus dysga-
for Brazilian fish farming: Streptococcus dysgalac- lactiae as antigen. JP 2007-326794A. 20 dez., 2007.
tiae and Weissella ceti. 2013. 64f. Tese (Doutorado,
dorsal dos peixes, foi classificado como geral, o cultivo desse microrganismo
Bacillus columnaris. Aps o primeiro realizado em meios relativamente po-
isolamento em meio de cultura, foi pos- bres em nutrientes, mas com a presena
svel sua caracterizao fenotpica e a de algumas substncias essenciais para seu
determinao de sua similaridade com crescimento, como no caso o colgeno. Os
os membros da ordem Myxobacteria. principais meios de cultura utilizados para
Como possua a capacidade de degra- isolamento de F. columnare so: meio de
dao de colgeno, essa bactria foi Ordal; caldo ou gar Shieh (na sua verso
renomeada como Chondrococcus colu- original ou15modificado); e no meio de
mnaris14. Posteriormente, foi reclassi- Hsu-Shotts (MHS) (Tabela 2).
ficada como Flexibacter columnaris12, Tabela 2 Composio do meio de
sendo alocada taxonomicamente na Hsu-Shotts (MHS)
famlia Flavobacteriaceae . A doena
13
Figura 1: Isolado de F. columnare em gar MHS, onde pode ser verificada a morfologia rugosa-rizoide
com colorao amarela caracterstica das colnias.
o popular da enfermi-
O diagnstico da 4. Diagnstico
dade de doena da sela columnariose O diagnstico da co-
(saddleback disease), de- baseado no isolamento lumnariose baseado no
vido aparncia visual e identificao da isolamento e identifica-
da leso, semelhante a bactria a partir de o da bactria a partir
uma sela de montaria26,27. peixes moribundos, com
de peixes moribundos,
Em estado avanado, po- sintomatologia clnica com sintomatologia cl-
dem ocorrer bacteremia sugestiva. nica sugestiva28. Embora
e infeces secund- a columnariose seja uma
rias por outros patgenos bacterianos doena comum e que pode infectar qua-
e parasitrios27. No tecido branquial, o se todos os peixes de gua doce, ainda
quadro se caracteriza inicialmente pela frequentemente subdiagnosticada. O
formao de reas plidas de colora- no crescimento em meios de cultura
o branca e amarelada, com produo convencionais usados no diagnstico de
excessiva de muco e congesto vascu- doenas de peixes e rpida evoluo da
lar10,27. Microscopicamente, possvel enfermidade durante os surtos dificul-
visualizar alteraes patolgicas, como tam o diagnstico29.
hiperplasia branquial, e, em casos mais Para o diagnstico, os animais mo-
graves, fuso de lamelas e at de fila- ribundos devem ser enviados preferen-
mentos branquiais10. cialmente vivos ao laboratrio. Porm,
26 Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia, n 73 - junho de 2014
Figura 3
Eletroforese em gel
de agarose a 2% do
amplicon da PCR
espcie-especfica
para Flavobacterium
columnare. 1 =
marcador de DNA,
2-5 amostras de F.
columnare.
plenamente possvel a realizao do riana pode ser realizada por testes feno-
diagnstico a partir de animais enviados tpicos3 e moleculares (PCR e PCR em
resfriados, em caixas isotrmicas com tempo real).
gelo (normal ou reciclvel). O tempo de Com a popularizao dos mtodos
transporte mximo recomendado nes- moleculares, diversas tcnicas tm sido
ses casos de 48 horas. O congelamento utilizadas para a confirmao da espcie
promove a lise das clulas de F. colum- bacteriana e para deteco da bactria F.
nare, devido formao de cristais de columnare a partir de determinados teci-
gelo e rompimento da clula bacteriana dos de peixes infectados31,32. A primeira
em temperaturas abaixo de 0C. Assim ferramenta molecular padronizada para
sendo, o envio de material congelado diagnstico de F. columnare foi a PCR
no recomendado para o diagnstico e sequenciamento do gene da subuni-
bacteriolgico da doena. Mas, a partir dade 16S do RNA ribossmico21. No
desse material, possvel a deteco do ano de 2004, foi desenvolvida uma PCR
patgeno por mtodos moleculares. espcie-especfica para a confirmao e
Os principais tecidos utilizados para deteco de F. columnare31. Esse mto-
o isolamento da bactria so rim, fgado, do tem sido utilizado pelo AQUAVET
tecido subcutneo adjacente s reas (EV-UFMG) desde 2007 e vem apre-
de necrose da pele e tecido branquial, sentando uma alta eficincia para o
nos casos de infeco desse rgo30. diagnstico da doena. Na Figura 3
Posteriormente, ao isolamento em cul- apresentada uma imagem do produto
turas puras em meios especficos (como da PCR espcie-especfica para F. colu-
supramencionado), a morfologia da mnare com peso molecular de 675 pares
colnia, morfologia microscpica na de base, aps a eletroforese em gel de
colorao de gram, e testes de catalase agarose.
e oxidase so utilizados com triagem Adicionalmente, outros mtodos
inicial. A confirmao da espcie bacte- mais modernos, como PCR em tempo
Grol, gltA, metG, ppsA e recA, com total aquticos e na microbiota de peixes,
de 3.084 nucleotdeos). O mtodo foi anfbios e outros mamferos . Esses
6,11
Figura 1: doena ulcerativa causada por Aeromonas hydrophila em peixes: A- piracanjuba coletada
durante um surto em fazenda no Brasil apresentando ulcerao cutnea (seta); B- carpa colorida apre-
sentando ulcerao na boca; C- carpa colorida com ulcerao cutnea (seta).
Figura 2: septicemia hemorrgica causada por Aeromonas hydrophila em peixes: A- tilpia do Nilo
infectada experimentalmente, em que pode ser verificado um quadro severo de hemorragia na base
de nadadeiras (setas); B- pintado amaznico (Leiarius marmoratus x Pseudoplatystoma reticulatum)
apresentando hiperemia pronunciada na regio periocular (seta preta) e hiperemia cutnea (setas
vermelhas).
bigstockphoto.com
Guilherme C. Tavares (CRMV-MG: 11340)
Henrique C. P. Figueiredo (CRMV-MG 5839)
Carlos A. G. Leal* (CRMV-MG 9014)
*carlosleal@vet.ufmg.br
Antibitico Mecanismo de ao
Amoxicilina Bloqueia a transpeptidao da parede celular
Eritromicina Inibe a sntese proteica por se ligar a unidade 50S do
ribossomo bacteriano
Inibe a sntese proteica a partir da ligao subunida-
Florfenicol de ribossmica 50S, inibindo a atividade tipo peptidil-
-transferase desta
Inibe a sntese proteica por ligao subunidade 30S
Oxitetraciclina
dos ribossomos, impedindo a ligao do amino-acil
tRNA ao stio A do ribossomo
Quinolonas
(cidos nalidixico e oxolnico)
Atuam bloqueando a atividade da enzima DNA girase
Fluorquinolonas necessria para a replicao do DNA bacteriano
(Enrofloxacina, Norfloxacina e
Sarafloxacina)
Competem com o PABA pela enzima diidropteroato-
Sulfonamidas
-sintetase e impedem a sntese de cido flico
de doenas bacterianas em peixes de cficos de resistncia a essa droga, no
produo12. O florfenicol (Aquaflor, seriam risco para os consumidores. O
MSD; Florfenicol 50%, FAV), deriva- florfenicol apresenta ainda boa estabi-
do fluorado do tianfenicol, um agente lidade na gua, rpida absoro pelo
bacteriosttico que inibe a sntese trato gastrintestinal dos peixes, exce-
proteica a partir da ligao subunida- lente distribuio tecidual, inclusive
de ribossomal 50S, inibindo a peptidil- crebro, e efetivo contra diversos tipos
-transferase, consequentemente, a sn- de bactrias, tanto gram-positivas como
tese proteica. Essa droga oferece maior gram-negativas13. Para piscicultura, uma
eficcia que seus anlogos (tianfenicol vantagem adicional dessa substncia
e cloranfenicol), e at o momento no advm de sua resistncia trmica. Esse
existem muitos relatos de desenvolvi- antibitico pode ser includo na mistura
mento de resistncia bacteriana. Uma da rao na fbrica e submetido aos pro-
vantagem adicional desse frmaco cessos trmicos de extruso e secagem,
que ele no utilizado no tratamento sem haver degradao significativa de
de seres humanos. Portanto, em caso sua molcula.
de patgenos com mecanismos espe- Antibiticos base de oxitetracicli-
6. Antibioticoterapia em peixes 69
na (TM 700, Phibro) so amplamente assintomticos e acarreta a persistncia
utilizados nas pisciculturas brasileiras e do agente bacteriano na fazenda pro-
possuem eficcia contra bactrias gram- dutiva14. Alm disso, peixes portadores
-positivas e gram-negativas. agente podem propiciar a disseminao da do-
bacteriosttico e inibe a sntese protei- ena entre propriedades. As principais
ca ao se ligar subunidade ribossomal indicaes de uso desses antibiticos
30S, impedindo a ligao do aminoacil- no Brasil, bem como as espcies que
-tRNA ao stio A do ribossomo. efi- podem ser submetidas administrao
ciente contra diversos patgenos de desses medicamentos, esto apresenta-
peixes; porm, amostras resistentes a das na Tabela 2.
esse medicamento tm sido descritas5.
Adicionalmente, sabe-se que esse anti-
3. Vias de administrao
bitico no capaz de promover a cura Diferentemente do tratamento de
completa em casos de infeco pela bac- espcies terrestres, o uso de antibiticos
tria Streptococcus agalactiae em tilpias, na aquicultura apresenta caractersticas
o que induz a ocorrncia de portadores prprias, desde a via de administrao
AQUAFLOR
(Florfenicol)
Trutas
Doena da boca vermelha (Yersinia ruckeri)
6. Antibioticoterapia em peixes 71
tado, dose recomendada es para realizao de
A principal via de
do antibitico e a con- tratamentos com antibi-
administrao de
centrao fornecida do
antibitico utilizada na tico via banho. Nessa
medicamento. O clculo
prtica a oral, atravs via de administrao, a
pode ser realizado a par- da incorporao do droga pode ser absorvida
tir da expresso: V = (D x medicamento rao.. via brnquias ou trato di-
P)/C, onde V o volume gestrio. Os banhos para
requerido do antibiti- serem efetivos devem ser
co; D, dosagem recomendada (mg/kg); realizados por perodos mais prolonga-
P, peso do peixe (kg); e C, concentrao dos e necessria uma maior quantida-
fornecida do medicamento (mg/mL)17. de do antibitico para alcanar o efeito
Apesar da existncia de tais recomenda- desejado5,8,17. Por esses motivos, sua
es da literatura, vale salientar que no aplicabilidade pequena no contexto da
existem produtos (antibiticos) licen- piscicultura comercial. No passado, esse
ciados no Brasil para uso injetvel em tipo de tratamento foi muito realizado
peixes de produo. Adicionalmente, os durante o transporte de alevinos em sa-
produtos base de florfenicol e oxitetra- cos plsticos. O principal produto utili-
ciclina so comercializados na forma de zado no transporte era a oxitetraciclina
p, no devendo ser administrados por e objetivo era evitar as mortalidades no
vias parenterais. No passado, diversos perodo ps-transporte, principalmente
produtores tinham por hbito admi- as causadas pela bactria Flavobacterium
nistrar por via injetvel o antibitico columnare (causadora da columnario-
oxitetraciclina em p, diludo em solu- se). Atualmente, com a adoo de boas
o fisiolgica (0,9%), principalmente prticas de manejo, o uso profiltico de
em reprodutores. Esse antibitico no antibitico na gua de transporte tem
apresenta boa solubilidade em soluo diminudo.
fisiolgica com pH prximo neutrali- A principal via de administrao de
dade (pH=7), devendo ser diludo em antibitico utilizada na prtica a oral,
solues levemente cidas. Assim, no atravs da incorporao do medicamen-
havia uma correta solubilizao e aps to rao. A incorporao pode ser reali-
a administrao formavam-se cristais de zada diretamente na fbrica de rao ou
antibitico na musculatura dos peixes. na propriedade. No Brasil, a maioria das
Devido ao carter cido dessa substn- raes comerciais para peixes so extru-
cia, era comum a ocorrncia de reas de sadas. O processo de extruso (alta tem-
necrose na local da aplicao. Essa pr- peratura e presso por um tempo curto)
tica tem se reduzido nos ltimos anos. pode promover a degradao parcial ou
Na literatura existem recomenda- total dos antibiticos. Como supramen-
72 Cadernos Tcnicos de Veterinria e Zootecnia, n 73 - junho de 2014
cionado, o florfenicol resistente a esse cada 100 kg de rao. A quantidade de
processo. Quanto oxitetraciclina, po- antibitico a ser incorporada poder va-
rm, no existem informaes seguras. riar de acordo com o tipo de antibitico
Uma segunda forma de incorporao escolhido e o grau de pureza do mesmo.
aps o processo de extruso. Nesse A dose final do antibitico dever ser
caso, o antibitico pode ser pulveriza- calculada na unidade mg/kg de peso
do rao para sua incorporao aos vivo por um perodo pr-determinado,
pletes. No pas, apenas uma fbrica de considerando a taxa de arraoamento
rao est licenciada pelo Ministrio da de cada tanque .
8
PCE
Patgeno Antibitico PCE (CIM1) Referncia
(Disco de Difuso)
Aeromonas mveis Florfenicol 4g/mL 23 mm 24
Aeromonas mveis Biciclomicina 6,25g/mL ----- 24
S. agalactiae Oxitetraciclina 1,95g/mL 23 mm 14
Florfenicol ----- 16 mm
Eritromicina ----- 21 mm
Weissella ceti Oxitetraciclina ----- 10 mm 25
Norfloxacina ----- 7 mm
Sulfonamida ----- Resistente
Concentrao Inibitria Mnima
1
A antibioticoterapia deve ser reali- 5. NOGA, E. J. Fish disease: diagnosis and treatment.
2.ed, Iowa: Blackwell Publishing, 2010, 536p.
zada como medida teraputica de com-
6. AUSTIN, B; AUSTIN, D.A. Bacterial Fish
bate de surtos de doenas bacterianas. Pathogens. Diseases of Farmed and Wild Fish, 4.
uma medida eficiente ed. Chichester: Springer/Prazis
Publishing, 2007. 553p.
e segura quando realiza- A antibioticoterapia 7. F I G U E I R E D O,
da de forma adequada; deve ser realizada como H. C. P.; LEAL, C. A. G..
porm, somente ela no Infeces por Streptococcus
medida teraputica de spp. em peixes. In: SILVA-
resolve problemas rela- combate de surtos de SOUZA, A. T.; LIZAMA, M.
cionados sanidade de A. P.; TAKEMOTO, R. M.
doenas bacterianas. Patologia e Sanidade de orga-
organismos aquticos. nismos Aquticos. Maring: Ed.
Para obteno de uma Massoni, 2012, p. 275-292.
6. Antibioticoterapia em peixes 77
Nile tilapia, Oreochromis niloticus (L.). J. Fish Dis. INSTITUTE. Methods for broth dilution susceptibil-
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approved guideline VET04-A. Wayne, CLSI, 2006.
15. SCHERING-PLOUGH. Aquaflor 50% Premix.
Disponvel em: http://www.aquatropic.com.br/ 22. MILLER, A.; REIMSCHUESSEL, R.
images/Lamina%20Aquaflor.pdf. Acesso em: 24 Epidemiological cutoff values for antimicrobial
fev. 2014. agents against Aeromonas salmonicida isolates de-
termined by frequency distributions of minimal
16. PHIBRO. TM 700 Ficha tcnica. Disponvel em: inhibitory concentration and diameter of zone of
http://www.phibro.com.br/ft/TM_700.FT.pdf. inhibition data. Am. J. Vet. Res., v. 67, n. 11, p. 1837-
Acesso em 24 fev. 2014. 1843, 2006.
17. RODGERS, C. J.; FURONES, M. D. Antimicrobial 23. CARNEIRO, D. O.; FIGUEIREDO, H. C. P.;
agents in aquaculture: practice, needs and issues. PEREIRA JUNIOR, D, J. et al. Perfil de suscepti-
In: ROGERS, C.; BASURCO, B. The use of veteri- bilidade a antimicrobianos de bactrias isoladas
nary drugs and vaccines in Mediterranean aquacul- em diferentes sistemas de cultivo de tilpia-do-nilo
ture. Zaragoza: CIHEAM, 2009, p. 41-59. (Oreochromis niloticus). Arq. Bras. Med. Vet. Zootec.,
18. HEUER, O. E.; KRUSE, H. GRAVE, K. et al. v. 59, n. 4, p.869-876, 2007.
Human health consequences of use of antimicro- 24. GODOY, D. T.; MIAN, G. F.; ZANOLO, R.;
bial agents in aquaculture. Clin. Infect. Dis., v. 49, n. YUHARA, T.; FARIA, F.; FIGUEIREDO, H. C.
8, p. 1248-1253, 2009. P. Patterns of resistance to florfenicol and bicyclo-
19. CABELLO, F. C. Heavy use of prophylactic anti- mycin in Brazilian strains of motile aeromonads.
biotics in aquaculture: a growing problem for hu- Aquaculture, v 285, p.255-259, 2008.
man and animal health and for the environment. 25. FIGUEIREDO, H. C. P.; COSTA, F. A. A.; LEAL,
Environ. Microbiol., v. 8, n. 7, p. 1137-1144, 2006. C. A. G.; CARVALHO-CASTRO, G. A.; LEITE,
20. CLINICAL AND LABORATORY STANDARDS R. C. Weissella sp. outbreaks in comercial rainbow
INSTITUTE. Methods for antimicrobial disk suscep- trout (Oncorhyncus mykiss) farms in Brazil. Vet.
tibility testing of bacterial isolated from aquatic ani- Microbiol., v. 156, p. 359-366.
mals: approved guideline VET03-A. Wayne, CLSI,
2006.
21. CLINICAL AND LABORATORY STANDARDS
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Guilherme C. Tavares (CRMV-MG: 11340)
Henrique C. P. Figueiredo (CRMV-MG 5839)
Carlos A. G. Leal* (CRMV-MG 9014)
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Figura 1: Sinais clnicos observados em peixes acometidos por doenas infecciosas. A- truta-arco-ris
com prolapso retal; B- truta-arco-ris com exoftalmia bilateral; C- tilpia do Nilo com opacidade de cr-
nea (seta) junto com outros peixes letrgicos; D- tilpia do Nilo com perda de equilbrio; E- tilpia do
Nilo com exoftalmia bilateral e paralisia bucal (seta), e, no fundo, outro animal com perda de equilbrio;
F- tilpia do Nilo com abscesso ulcerado no pednculo caudal.