LINEA LIQUIDA

TG Color
C GPO/PAP AA
Mtodo enzimtico para la determinacin de triglicridos
en suero o plasma

SIGNIFICACION CLINICA Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de

Los triglicridos son lpidos absorbidos en la dieta y tambin acuerdo a la normativa local vigente.
producidos en forma endgena a partir de los carbohidratos.
Su medicin es importante en el diagnstico y manejo de las ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
hiperlipidemias. Estas enfermedades pueden tener origen ALMACENAMIENTO
gentico o ser secundarias a otras tales como nefrosis, Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC)
diabetes mellitus y disfunciones endcrinas. El aumento de y al abrigo de la luz hasta la fecha de vencimiento indicada
triglicridos se ha identificado como un factor de riesgo en en la caja. No mantener a temperaturas elevadas durante
enfermedades aterosclerticas. lapsos prolongados.

FUNDAMENTOS DEL METODO INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS

El esquema de reaccin es el siguiente: REACTIVOS
lipoprotein lipasa El Reactivo A puede presentar una coloracin rosada que
triglicridos glicerol + cidos grasos no afecta su funcionamiento.
glicerol kinasa Lecturas del Blanco superiores a 0,250D.O. o lecturas del
glicerol + ATP glicerol-1-P + ADP Standard anormalmente bajas, son indicios de deterioro del
GPO Reactivo A. En tal caso, desechar.
glicerol-1-fosfato + O2 H2O2 + dihidroxiacetonafosfato
POD MUESTRA
2 H2O2 + 4-AF + clorofenol quinonimina roja
Suero o plasma
a) Recoleccin: previo ayuno de 12 a 14 horas, obtener
REACTIVOS PROVISTOS
suero o plasma. Separar de los glbulos rojos dentro de las
A. Reactivo A: solucin conteniendo buffer Good (pH 6,8),
2 horas de extraccin.
clorofenol, lipoprotein lipasa (LPL), glicerol kinasa (GK), gli-
b)Aditivos: en caso de emplear plasma, se recomienda
cerol fosfato oxidasa (GPO), peroxidasa (POD), adenosina
el uso de Anticoagulante W o heparina para su obtencin.
trifosfato (ATP) y 4-aminofenazona (4-AF).
c)Sustancias interferentes conocidas: no se observan
S. Standard*: solucin de glicerol 2,26mmol/l (equivale a
interferencias por bilirrubina hasta 15 mg/dl; hemlisis mar-
2 g/l de triolena).
cadas no interfieren en la determinacin.
Concentraciones finales Referirse a la bibliografa de Young para los efectos de las
Buffer Good............................................. 50 mmol/l; pH 6,8 drogas en el presente mtodo.
clorofenol................................................................ 2 mmol/l d)Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: los
lipoprotein lipasa................................................... 800 U/l triglicridos en suero son estables 3 das en refrigerador
GK......................................................................... 500 U/l (2-10oC). No congelar.
GPO.................................................................... 1500 U/l
POD....................................................................... 900 U/l MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
ATP......................................................................... 2 mmol/l - Espectrofotmetro
4-AF..................................................................... 0,4 mmol/l - Micropipetas y pipetas para medir los volmenes indicados
- Cubetas espectrofotomtricas
REACTIVOS NO PROVISTOS - Bao de agua a 37oC
Calibrador A plus de Wiener lab. para la tcnica automtica. - Reloj o timer

INSTRUCCIONES PARA SU USO CONDICIONES DE REACCION

Reactivos Provistos: listos para usar. - Longitud de onda: 505 nm
- Temperatura de reaccin: 37oC
PRECAUCIONES - Tiempo de reaccin: 5 minutos
Los reactivos son para uso diagnstico "in vitro". - Volumen de muestra: 10 ul
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales - Volumen de Reactivo A: 1 ml
de trabajo en el laboratorio de anlisis clnicos. - Volumen final de reaccin: 1,01 ml

* No provisto en todas las presentaciones 864126522 / 01 p. 1/9


PROCEDIMIENTO
Homogeneizar la muestra antes de usar, especialmente
frente a sueros lechosos.
En tres cubetas espectrofotomtricas marcadas B (Blan-
co), S (Standard) y D (Desconocido) colocar:
B S D
Muestra - - 10 ul
Standard - 10 ul -
Reactivo A 1 ml 1 ml 1 ml
Mezclar, incubar 5 minutos a 37 C o 20 minutos a tem-
o
peratura ambiente (18-25oC). Enfriar y leer en espec-
trofotmetro a 505 nm llevando el aparato a cero con
agua destilada.
Microtcnica
Seguir el procedimiento indicado anteriormente pero
utilizando 5 ul de Muestra y 500 ul de Reactivo A.
PERFORMANCE
a) Reproducibilidad: procesando simultneamente 20
replicados de las mismas muestras, se obtuvieron los
siguientes datos:
Nivel D.S. C.V.
0,76 g/l 0,039 g/l 0,50 %
3,73 g/l 0,060 g/l 0,16 %
b) Recuperacin: agregando cantidades conocidas de
triolena a distintos sueros, se obtuvo una recuperacin
entre 96 y 101% para todo el rango de linealidad del mtodo.
c)Linealidad: la reaccin es lineal hasta 10g/l de triglic-
ridos. Para valores superiores, repetir la determinacin con
muestra diluida 1:2 con solucin fisiolgica. Multiplicar el
resultado obtenido por la dilucin efectuada.
d)Lmite de deteccin: depende del fotmetro empleado.
En espectrofotmetros, el cambio mnimo de concentracin
detectable en las condiciones de reaccin descriptas, para
una variacin de absorbancia de 0,001 D.O. ser aproxima-
damente de 0,009 g/l.

PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS

ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL
Para las instrucciones de programacin debe consultarse
El color de reaccin final es estable 60 minutos, por lo que
el Manual del Usuario del Analizador en uso.
la absorbancia debe ser leda dentro de este lapso.
Para la calibracin debe emplearse Calibrador A plus de
Wiener lab., de acuerdo a los requerimientos del analizador.
CALCULO DE LOS RESULTADOS
Corregir las lecturas con el Blanco de reactivos y usar las
PRESENTACION
lecturas corregidas para los clculos.
- 1 x 100 ml (Cd. 1780111).
2 g/l
- 4 x 100 ml (Cd. 1780112).
TG (g/l) = D x factor factor =
S - 4 x 60 ml (Cd. 1009318).

- 4 x 60 ml (Cd. 1009632).
CONVERSION DE UNIDADES - 8 x 50 ml (Cd. 1009274).
Triglicridos (g/l) = 0,01 x Triglicridos (mg/dl)
Triglicridos (mg/dl) x 0,0113 = Triglicridos (mmol/l) BIBLIOGRAFIA
- Fossati, P - Clin. Chem. 28/10:2077 (1982).
METODO DE CONTROL DE CALIDAD - McGowan, M.W.; et al - Clin. Chem. 29/3: 538 (1983).
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad - Tietz, N.W. - Fundamentals of Clin. Chem. - W.B., Saunders
(Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas Co. - Philadelphia, Pa. (1970), pg. 329.
- Expert Panel of National Cholesterol Education Program
de triglicridos, con cada determinacin.
- JAMA 285/19:2486 (2001).
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
VALORES DE REFERENCIA
AACC Press, 4th ed., 2001.
El panel de expertos del National Cholesterol Education Pro-
gram (NCEP) provee los siguientes valores de Triglicridos:
Deseable: < 1,50 g/l
Moderadamente elevado a elevado: 1,50 - 1,99 g/l
Elevado: 2,00 - 4,99 g/l
Muy elevado: 5,00 g/l
No obstante, se recomienda que cada laboratorio establezca
sus propios intervalos o valores de referencia.

LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO

Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
Los reductores disminuyen la respuesta de color, mientras
que los oxidantes colorean el Reactivo A aumentando los
Blancos.
Las contaminaciones con glicerol producen resultados fal-
samente aumentados.
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Smbolos
Los siguientes smbolos se utilizan en todos los kits de reactivos para diagnstico de Wiener lab.

C
Este producto cumple con los requerimientos
previstos por la Directiva Europea 98/79 CE de
productos sanitarios para el diagnstico "in vitro"
M Elaborado por:

P
Xn

Representante autorizado en la Comunidad

Europea Nocivo

V Uso diagnstico "in vitro"

Corrosivo / Castico

X Contenido suficiente para <n> ensayos

Xi

Irritante

H Fecha de caducidad

i Consultar instrucciones de uso

l Lmite de temperatura (conservar a)

No congelar
Calibr. Calibrador

b Control

F Riesgo biolgico

Volumen despus de la reconstitucin

b Control Positivo

Cont. Contenido c Control Negativo

g Nmero de lote h Nmero de catlogo

M Wiener Laboratorios S.A.I.C.

Riobamba 2944
2000 - Rosario - Argentina

Wiener lab.
http://www.wiener-lab.com.ar
Dir. Tc.: Viviana E. Ctola
Bioqumica
Producto Autorizado A.N.M.A.T.
Cert. N: 3803/00 2000 Rosario - Argentina
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