I.

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

II. MARCO TEORICO

2.1. Antecedentes del Estudio

2.1.1. Antecedentes Nacionales

2.1.2. Antecedentes Internacionales

2.2. Bases Tericas

2.2.1. Concentracin de Dixido de Carbono (CO2)

- Fuentes de obtencin de CO2

- CO2 y su implicancia ambiental

2.2.2. Fijacin de CO2 por la microalga Chlorella sp.

- Micro algas
o Caractersticas de las microalgas
o Tipos de micro algas
o Crecimiento de micro algas
Tasa especifica de crecimiento (u)
Concentracin de biomasa (Cb)
Productividad (P)
- Descripcin de Microalga Chlorella sp
o Morfologa
o Taxonoma y nomenclatura
o Distribucin de la micro alga
o Micro alga en el Per
- Fijacin de CO2
o Mecanismos de fijacin de CO2
o Fijacin biolgica de CO2
Fotosntesis
Factores que afectan la fotosntesis
Foto inhibicin
Foto respiracin
o Indicadores de Fijacin de CO2
CUE (Eficiencia de utilizacin de dixido de carbono)
Tasa de fijacin de dixido de carbono
- Cultivo de microalgas
o Cultivo a escala laboratorio
o Tipos de medio de cultivo
o Factores condicionantes de desarrollo
Luminiscencia
Temperatura
 Nutrientes (CO2, etc)
Turbulencia y mezclado
Transferencia Gaseosa
pH
Alcalinidad

Concentracin de Dixido de Carbono (CO2)

- Fuentes de obtencin de CO2

- CO2 y su implicancia ambiental

Fijacin de CO2 por la microalga Chlorella sp.

- Micro algas
o Caractersticas de las microalgas
o Tipos de micro algas
o Crecimiento de micro algas
Tasa especifica de crecimiento (u)
Concentracin de biomasa (Cb)
Productividad (P)
- Descripcin de Microalga Chlorella sp
o Morfologa
o Taxonoma y nomenclatura
o Distribucin de la micro alga
o Micro alga en el Per
- Fijacin de CO2
o Mecanismos de fijacin de CO2
o Fijacin biolgica de CO2
Fotosntesis
Factores que afectan la fotosntesis
Foto inhibicin
Foto respiracin
o Indicadores de Fijacin de CO2
CUE (Eficiencia de utilizacin de dixido de carbono)
Tasa de fijacin de dixido de carbono
- Cultivo de microalgas
o Tipos de cultivo

o Escala de cultivo

Escala laboratorio
o Tipos de medio de cultivo
 o Factores condicionantes de desarrollo
Luminiscencia
Temperatura
Nutrientes (CO2, etc)
Turbulencia y mezclado
Transferencia Gaseosa
pH
Alcalinidad

INTRODUCCION

(Kassim & Meng, 2017) cita textualmente La microalga quien tiene la capacidad
de crecer y utilizar alta concentracin CO2, ms all del CO2 atmosfrico, es el
mejor candidato para ser usado en la bio fijacin de CO2.

(Kassim & Meng, 2017) la capacidad de la microalga para tolerar altas

concentraciones de CO2 es especifico de cada especio y puede ser agrupado en
dos diferentes grupos CO2-sensitivos (menos del 2-5%) y CO2-tolerante (5-20%)

Existe un sin nmero de microorganismos fotosintticos and plantas que realizan

la fijacin biolgica del CO2, (Ho, Chen, Lee, & Chang, 2011) menciona que las
plantas esperan contribuir con solo un 3-6% de reduccin en las contaminaciones
de CO2 globales, sin embargo, las microalgas y cianobacterias pueden crecer
mucho ms rpido que las plantas terrestres y su eficiencia de fijacin de CO 2 es
alrededor de 10 a 50 veces mejor.

La produccion de biomasa microalgal tiene un gran potencial para contralar las

emisiondes de CO2.(Salih, 2011)

Anthropogenic carbon dioxide (CO) has been identified as one of the major
causes. Out of several CO sequestration methods, biological methods of
sequestration using algae are energy efficient due to less energy requirement.

2.1. Antecedentes del Estudio

2.2. Bases Tericas
2.2.1. Fijacin de CO2

A) Mecanismos de fijacin de CO2

Distintos enfoques han introducidos con respecto a la captura de CO2, entre ellos
se encuentra procesos fsicos (almacenamiento biolgico, almacenamiento en el
ocano, secuestro geolgico), procesos qumicos (carbonizacin mineral y
depuracin qumica) y procesos biolgicos (reforestacin, agricultura y
microorganismos fotosintticos), siendo los microorganismos fotosintticos los
ms prometedores para la fijacin de CO2, debido a su capacidad de utilizacin de
CO2 como fuente de carbn para su produccin de biomasa. (Kassim & Meng,
2017)
(Ho et al., 2011) en su investigacin clasific tres estrategias de acuerdo a
investigaciones enfocadas en la mitigacin y reduccin de CO2, las cuales son: (i)
Enfoques basados en la reaccin qumica; Por ejemplo, el lavado con soluciones
alcalinas (ii) inyeccin directa al subsuelo u/o ocano (iii) mitigacin biolgica de
CO2, con Co2 siendo convertido biolgicamente en materia orgnica.

CUADRO RESUMEN DE MECANISMOS

B) Fijacin biolgica de CO2

Es un proceso que es llevado a cabo a travs de la fotosntesis de todas las

plantas terrestres y un nmero inmenso de microorganismos
fotosintticos.(Cuellar-Bermudez, Garcia-Perez, Rittmann, & Parra-Saldivar, 2015)
Las plantas contribuyen con el 3-6% de la reduccin global de las emisiones de
CO2, en cambio, distintos estudios realizados hace ms de 50 aos, han
denotado que los microorganismos fotosintticos como microalgas y
cianobacterias tienen una eficiencia de fijacin de CO2, comparada con otras
plantas, alrededor de 10-50 veces mayor.(Alberto & Costa, 2000; Cuellar-
Bermudez et al., 2015; Fernndez, 2012; Lindblad, Muller, & Skja, 2007)
(Cuellar-Bermudez et al., 2015) considera que las microalgas pueden obtener su
fuente de carbono desde distitnas fuentes, tales como: (i) CO2 atmosferico, (ii)
Emisiones de CO2 de plantas de energa y procesos industriales y (iii) CO2 de
soluciones carbonadas.

Concentracin de CO2
CUE (Eficiencia de uso de dixido de carbono)
Tasa de fijacin de dixido de carbono

2.2.2. Fijacin de CO2 por va Fotosinttica

A) Fotosntesis
Las microalgas y cianobacterias son individuos unicelulares o pluricelulares cuyas
clulas funcionan independientemente, realizando todas las funciones vitales, es
por ello, su energa la obtienen gracias a su capacidad para realizar la fotosntesis.

La fotosntesis es un mecanismo complejo, eficiente y nico de conversin de

energa de la luz solar, resultado de varios millones de aos de evolucin y
provocando la formacin de todas las formas aerobias vivas en la tierra. (Martnez
Garca, 2008; Raven, 1997)

La absorcin de energa lumnica y su conversin a su potencial qumico estable

por la sntesis de compuestos orgnicos, a travs de las plantas y los organismos
fotosintticos, se resume a travs de la siguiente reaccin:(Ho et al., 2011)

6CO2 + 6H2O + Energa luminosa C6H12O6 + 6O2

El proceso fotosinttico puede considerarse en tres fases:

1. Absorcin de la luz y retencin de energa lumnica. (Ciclo Claro)

2. La conversin de energa lumnica en potencial qumico. (Ciclo Claro)
3. La estabilizacin y almacenaje del potencial qumico. (Ciclo Oscuro)

Este proceso contiene 2 pasos, reacciones de luz (Ciclo Claro) que solo ocurren
cuando las clulas estas iluminadas, y reacciones de fijacin de carbono, tambin
conocidos como reacciones oscuras (Ciclo Oscuro), que ocurren en presencia o
ausencia de luz. En el corazn de la fotosntesis existen dos complejos
fotoactivos, Fotosistema I y el Fotosistema II, quienes cosechan la luz solar dentro
de una cadena de transporte de electrones va la excitacin de la clorofila.
(Iverson, 2006). (Fig.1)

Fig. 1: Esquema del proceso de Fotosntesis

Fuente: Perspectives on microalgal CO2 - emission mitigation systems - A

review.(Ho, S., Chen, C., Lee, D., & Chang, J. (2011).)

En las reacciones de luz, que estn unidas a membranas fotosintticas, la energa

luminosa se convierte en energa qumica proporcionando un reductor bioqumico
NADPH2 y un compuesto de alta energa ATP. En las reacciones oscuras, que
tienen lugar en el estroma, NADPH2 y ATP son utilizados en la reduccin
bioqumica secuencial del dixido de carbono a carbohidratos.(Richmond, 2004)
(Fig. X)

Figura X: Proceso de Fotosntesis (Fase lumnica y oscura)

Fuente: Handbook of Microalgal Culture: Biotechnology and applied phycology.
Richmond, 2004.

Fijacin de CO2

La fijacin de CO2 se da en la reaccin oscura (Ciclo Oscuro), siendo el dixido de

carbono asimilado en una serie de reacciones cclicas utilizando la accin
reductora de 2 molculas de NADPH2 y las fuerza fosforilante de tres de ATP
producido en la reaccin lumnica de la fotosntesis (una energa de 5.2x104
Julios, que se consigue mediante la absorcin de al menos ocho fotones de luz)
(Richmond, 2004). La reaccin general puede ser expresada de la siguiente
manera:
2 NADPH2 + 3ATP
CO2 + 4H+ + 4e- > CH2O (carbohidrato) + H2O

En cuanto a la eficiencia cuntica de fijacin de CO 2, se encontr que al menos

diez cuantos de luz absorbidos son necesarios para cada molcula de CO2 fijado.

El conjunto de reacciones que ocurre en el estroma de lso cloroplastos y

promueve la sntesis de azucares en denominado Calvin-Benson, pues es el
primer pcompues estable a ser formado en un azcar con tres atomos de carbono.

El compuesto inicial (o final) de este ciclo es un azcar de cinco tomos de

carbono con dos grupos fosfato, denominado ribulosa 1,5-bifosfato (RuBP), la
reaccin entre este azcar y la molcula de CO2, es a partir de la enzima RuBP
carboxilasa/oxidasa, conocida como rubsico.

La conversin de CO2 en azcar (u otros compuestos) ocurre en cuatro fases

distintas que forman el llamado ciclo de Calvin-Benson: (Fig. XX)

1. Fase de carboxilacin:

El CO2 es fijado a la RUBP por accin de la enzima Rubisco. El compuesto

formado por seis atomos de carbono inestable, siendo rpidamente
hidrolizado y resultando en dos molculas de 3 fosfoglicerato o acido 3-
fosfoglicerico (PGA)

2. Fase de reduccin

Con el fin de convertir el 3-fosfoglicerato en productos de 3-carbonos

(Triosa-P), la energa debe aadirse en forma de ATP y NADPH 2 en dos
etapas: fosforilacin de 3-fosfoglicerato (PGA) para formar difosfoglicerato y
ADP, y en segundo lugar, la reduccin de difosfoglicerato (DFG) a 3-
fosfogliceraldehdo (GPA).

3. Fase de regeneracin
 Durante las dos primeras etapas, tres molculas de CO2 son fijadas en tres
molculas de RuBP para formar seis molculas de gliceraldehido 3-fosfto.
Cinco de las seis molculas de gliceraldehido 3-fosfato son usados para
regenerar tres molculas de ribulosa 1.5-bifosfato, que es compuesto inicial
del Ciclo de Calvin. La otra corresponde al primer compuesto de uan serie
de nuevas reaccin para sintetizar molculas de azucares complejas

4. Fase de produccin

Los productos finales primarios de la fotosntesis se consideran hidratos de

carbono, pero los cidos grasos, los aminocidos y los cidos orgnicos
tambin se sintetizan en la fijacin fotosinttica de CO2. Varios productos
finales pueden formarse en diferentes condiciones de intensidad de luz,
concentraciones de CO2 y O2, y nutricin

La reaccin de fijacin de carbono a manera ms exacta pueden ser sintetizadas

de la siguiente ecuacin:

3CO2 + 9ATP + 6NADPH + GH+ GAP + 9ADP +9P +6NADP+ + 3H2O

.

Fig. XX: Proceso de fijacin de CO2 (Proceso de Calvn Benson)

Fuente: Handbook of Microalgal Culture: Biotechnology and applied phycology.

(Richmond, 2004)

B) Factores que afectan la Fotosntesis

Existen varios factores que afectan a la fotosntesis:
 - Concentracin de O2
- Concentracin de CO2
- Temperatura
- Luz

Todos ellos se relacionan entre si y a su vez dependen en mayor o menor grado

de las diversas caractersticas como fisiologa y anatoma de la planta que se
trate, as como tambin de la regin donde se localice (zona templada, tropical,
etc.)

El oxigeno influye mucho en la fotosntesis de diversas formas, sin embargo, se ha

demostrado que es indispensable en mnimas cantidades para llevar acabo la
fotosntesis pero en altas concentracin causa efectos irreversibles al sistema
fotosinttico.

La concentracin de CO2 es un factor limitante en la actividad fotosinttica, ya que

una reduccin del dixido de carbono desciende la tasa fotosinttica y se ha visto
experimentalmente que el aumento hasta el 1% del CO2 en la atmsfera produce
el correspondiente aumento en la fotosntesis.

La intensidad de luz afecta la fotosntesis ya que cuando se aumenta, se eleva la

tasa de fotosntesis.

Factor Efecto

A medida que aumenta la concentracin de

CO2 aumenta la tasa fotosinttica hasta llegar a un
nivel; en este punto la RUBISCO se satura y la
Concentracin
eficiencia deja de aumentar. Hasta una determinada
de CO2
concentracin de CO2, el aumento de concentracin
aumenta la tasa de fotosntesis. Influye en la
apertura de los estomas.

Influye en la fotorrespiracin, cuanto menor sea la

concentracin de oxgeno, mayor ser el rendimiento
energtico, ya que si hay mucho oxgeno la RUBISCO
Concentracin
har el proceso de fotorespiracin. La oxidacin de
de O2
carbohidratos en los peroxisomas en presencia de luz
y O2 (sin produccin de ATP ni NADPH) puede reducir
en un 50% o ms la eficiencia fotosinttica.

Si hay escasez de agua los estomas se cierran, la

Disponibilidad
concentracin de CO2 se reduce y la de O2 aumenta, por
de agua
tanto disminuye el rendimiento fotosinttico ya que se
 produce fotorrespiracin.

Las enzimas son protenas y por encima de la

temperatura ptima se produce la desnaturalizacin
Temperatura
de los enzimas, disminuyendo el rendimiento.
Tambin influye en el cierre de los estomas,

Periodo de luzo Guarda una relacin directa con el rendimiento

fotoperiodo fotosinttico.

La tasa fotosinttica aumenta con intensidad

Intensidad luminosa hasta un cierto lmite, caracterstico de
luminosa cada especie, en el que se produce la fotooxidacin
de los pigmentos.

Las plantas slo aprovechan la luz perteneciente a un

rango de longitudes de onda que corresponde a la luz
Longitud de
visible (400-700 nm). Las longitudes de onda inferiores,
onda de la luz
como la luz ultravioleta pueden romper las molculas
orgnicas.

2.2.3. Microalgas
Las microalgas son plantas microscpicas unicelulares eucariotas fotosintticas no
vasculares que poseen estructuras reproductoras simples flotando libremente,
pero con movilidad limitada. Aunque son especies consideradas libres, un cierto
nmero de micro algas vive en simbiosis con otros organismos.(Richmond, 2004)

Especialistas en el estudio de algas consideran que cualquier organismo con

clorofila a y un tallo, que no se diferencia en races, tallos y hojas, es considerado
una alga. (Richmond, 2004).

Bajo condiciones naturales de crecimiento, las microalgas fototrpicas

(Fotoautotrficas) realizan los mismos procesos fotosintticos que las plantas
superiores terrestres: (i) la absorcin de la luz solar como fuente de energa, que
es luego convertida en energa qumica a travs de reacciones fotosintticas, (ii)
asimilacin de dixido de carbono del aire y (iii) absorcin de nutrientes de los
hbitats acuticos, tal como el Nitrgeno que se obtienen a partir de especies
nitrogenadas como nitrato, amonio o aminocidos, simplemente con la finalidad de
obtener oxgeno y biomasa.(Cuellar-Bermudez et al., 2015; Richmond, 2004)
Su aparato fotosinttico est organizado en organelas especiales, los cloroplastos,
que contienen capas alternas membranas lipoprotecas (tilacoides) y fases
acuosas, como el estroma.

Cabe recalcar que son consideradas como el primer eslabn de la cadena

alimenticia, formando el fitoplancton, estas se clasifican segn su tamao en
Microplancton, nanoplancton y ultraplacton. Por otro lado, estos microorganismos
fotosintticos se pueden dividir de acuerdo a sus pigmentos fotosintticos de
recoleccin de luz en:

- Rhodophyta (rojo Algas).

- Chrysophyceae (algas doradas)
- Phaeophyceae (algas pardas)
- Chlorophyta (algas verdes).

Siendo la Chlorophyta (algas verdes), la estudiada en el presente tema de

investigacin.

Las caractersticas principales de las microalgas son su crecimiento acelerado y su

generacin de una alta cantidad de biomasa en un tiempo relativamente corto. Asi
mismo, pueden generar gran variedad de productos y biomoleculas, no necesitan de
una tierra cultivable, su requerimiento nutricional es simple, aprovechan la luz del sol,
retiran el CO2 de la atmosfera y finalmente, poseen una eficiencia fotosinttica alta
comparada a la de las plantas.

A) Usos de las microalgas

El uso de las microalgas ha sido estudiad

En su investigacin, (Fernndez, 2012) clasific cuatro estrategias de reduccin de

CO2, aprovechando la produccin de biomasa de las microalgas:

i) Produccin de biocombustibles.

ii) Mejora de la eficiencia econmica de la captura de carbn y

almacenamiento a travs de produccin de Productos o subproductos de
los gases de combustin.

iii) Utilizacin de consorcios de bacterias-micro algas para reducir la energa

requerida para aireacin in plantas de tratamiento de aguas residuales.
 iv) Utilizacin de micro algas para reducir las emisiones totales de Co2
liberados en plantas de tratamiento de aguas residuales.

La siguiente tabla Nx

B) Tipos de micro algas

Sin embargo, de todos los organismos capaces de fijar o acumular CO2,

microalgas y cianobacterias cobran una importancia especial debido a que
presentan ciertas ventajas nicas:(Martnez Garca, 2008)

Son los nicos organismos fotosintticos capaces de utilizar directamente el

CO2 de una corriente de gases de combustin, como puede ser el de
centrales trmicas (a base de carbn, fuel o metano), sin necesidad de
tratamientos previos, ya que son resistentes a altas concentraciones de
CO2. A diferencia de los cultivos vegetales o rboles, las micro algas
mejoran su productividad con el aumento, hasta cierto lmite, de la
concentracin de CO2 respecto a la atmosfrica.
Poseen un potencial de productividad mucho mayor que el de las plantas
superiores y otras plantas acuticas.
Para su produccin pueden utilizarse ciertos recursos que no son
adecuados para la agricultura, como aguas salobres, agua marina y aguas
residuales y suelos arcillosos, duros o salinizados, por lo que no compiten
con la agricultura respecto a los usos del suelo y el agua. Adems, su alto
requerimiento de nutrientes (principalmente N y P) permite su cultivo en
aguas residuales, aportando el beneficio adicional de la reduccin de los
contenidos de nitrgeno y fsforo en dichas aguas.

De acuerdo a estudios previos, (Sharmila et al., 2014) resumen en el siguiente

tabla n 01 las especies que han sido estudiadas bajo condiciones de
concentraciones de CO2 superiores al 14%, indicando que las microalgas pueden
asimilar entre rangos de (0.04%) to 100% v/v CO2 con solo seleccionar la especie
adecuada.

Tabla N1: Tolerancia a CO2 de varias especies de microalgas

Especies Mxima concentracin de Referencias

Co2 absorbida
Cyanidium caldarium 100% (Seckbach & Kaplan,
1973)
Scenedesmus sp. 80% (Sung et al., 1999)
Chlorococcum 60% (Sasak et al.,1998)
littorale
Synechococcuselong 60% (Miyairi, 1995)
atus
Euglena gracilis 45% (Kimura et al., 1996)
Chlorella sp. 40% (Sung et al., 1999)
Eudorina spp. 20% (Sung et al., 1999)
Dunaliellatertiolecta 15% (Tsuji et al., 2003)
Nannochloris sp. 15% (Yoshihara et al., 1996)
Chlamydomonas sp. 15% (Miura et al., 1993)
Tetraselmis sp. 14% 35

Fuente: Carbon sequestration using microalgae-a Review (Sharmila et al. 2014)

Los factores determinantes en la productividad de un cultivo de microalgas son la

temperatura, el pH, los nutrientes del medio y la luz que incide sobre cada clula.
Los
fotobiorreactores son los sistemas de cultivo cuyo objetivo consiste en facilitar el
aporte de
nutrientes y luz a las clulas microalgales y adecuar (en la medida de lo posible)
las
condiciones ambientales a las condiciones ptimas de crecimiento de la especie
en
concreto que se va a cultivar. Estos sistemas pueden ser cerrados (closed
systems) o
abiertos, tipo estanques (open ponds).
Temperatura
La temperatura en el crecimiento microalgal es un factor a tener en cuenta, ya que
sta
influye en los coeficientes de velocidad de reacciones biosintticas (Richmond,
1986). La
relacin entre temperatura y velocidad de crecimiento crece exponencialmente
hasta que se
alcanza la temperatura ptima. Cuando se trata de un sistema de cultivo cerrado,
la
temperatura puede ser controlada fcilmente por varios mecanismos, como
rociadores de
agua, inmersin del colector solar en un bao (piscina) termostatizado, situar
reactor dentro
de un invernadero, etc (Rebolloso-Fuentes, 1999). Sin embargo, en un sistema de
cultivo
en estanques abiertos, es ms difcil de controlar y existen ciertos recursos como
cubrir los
estanques con plsticos transparentes a modo de invernadero.

Nutrientes
Los requerimientos nutritivos para el cultivo de las microalgas (Richmond, 2004)
incluyen:
Carbono inorgnico. Para conseguir altas producciones de biomasa microalgal,
el
aporte externo de CO2 es fundamental. Las concentraciones atmosfricas de CO2
no
satisfacen las necesidades de sistemas autotrficos (cuya nica fuente de carbono
es
el CO2) de produccin de microalgas de alto rendimiento (Lee, 1995). Por otro
lado, el sistema de equilibrio CO2H2CO3HCO-
3
_CO3
2-
es el mecanismo
amortiguador ms importante presente en las aguas dulces, y el mejor modo de
controlar y mantener un nivel especfico de pH, ptimo para cada especie.
El sistema bicarbonato-carbonato puede aportar CO2 para la fotosntesis mediante
las siguientes reacciones:

++
+
++
CO H O CO OH
HCO CO OH
HCO CO H O CO
2
2
22
2
3
32
22
2
33
La existencia de este equilibrio provoca que durante la fijacin fotosinttica de
CO2, se acumule OH- en el medio de cultivo, subiendo el pH. Posiblemente, la
mejor forma de regular el pH sea mediante un controlador esttico que inyecta
CO2
directamente en el medio cuando detecta una cada de pH, al mismo tiempo que
aporta el CO2 necesario para cultivos de alta productividad. Se debe tener en
cuenta, adems, que durante la respiracin, los microorganismos liberan CO2 al
medio, bajando el pH, aunque su influencia no suele ser muy grave, ya que como
regla general la respiracin suele ser un 10% de la fotosntesis.
Nitrgeno. Despus del carbono, el nitrgeno en el nutriente ms importante
para
las microalgas. El contenido en nitrgeno en la biomasa microalgal vara desde un
1 al 10%. El nitrgeno, normalmente, se aade como nitrato (NO3
-) o como amonio
(NH4
+). La adiccin de amonio suele ser ms problemtica, ya que al ser fijado por
los microorganismos, el pH baja significativamente. La utilizacin de nitrato como

fuente de N conlleva una subida de pH, pero no muy acusada. Un problema

adicional del amonio es que, ste puede perderse por volatilizacin, sobre todo a
pH elevado. Lo que an no se ha determinado es qu forma de nitrgeno es ms
beneficiosa energticamente para la produccin de microalgas.
Fsforo. El fsforo es esencial para muchos procesos celulares, como son la
transferencia de energa, formacin de cidos nucleicos, etc. Suele aadirse a los
medios de cultivo en forma de HPO4
2- o HPO4
-. Aunque el contenido en fsforo de
las microalgas es menor al 1%, su deficiencia en el medio de cultivo es una de las
mayores limitaciones al crecimiento. Las deficiencias ocurren porque el ortofosfato
tiene tendencia a unirse a otros cationes (CO3
2-, Fe3+) y precipitar.
Otros macro- y micronutrientes. Aparte del C, N y P, otros elementos son
necesarios para el cultivo de microalgas, tanto macronutrientes (S, K, Na, Fe, Mg,
Ca) como micronutrientes o elementos traza (B, Cu, Mn, Mo, Zn, V y Se), tal como
se deriva de la composicin elemental de las clulas microalgales. Muchos de los
elementos traza son relevantes en reacciones enzimticas y biosntesis de
compuestos necesarios para el metabolismo. Al igual que el P, estos iones
tambin
muestran cierta afinidad por otros compuestos del medio y precipitan. Para aliviar
este problema, se aaden al medio agentes quelantes de metales, como el EDTA
(especialmente el Na-EDTA, que es de fcil disolucin).
pH y alcalinidad
El pH del medio influye tanto en la proporcin de las especies del equilibrio
qumico del
CO2, y por tanto, en la alcalinidad, como en la forma qumica en que se
encuentran algunos
nutrientes y micronutrientes. Cada especie de microalga necesita un cierto rango
de pH al
cual su crecimiento es ptimo, dependiendo de qu especies qumicas est ms
habituada a
asimilar. Como se ha comentado anteriormente, el pH se controla fcilmente con
la
inyeccin controlada de CO2, pero tambin con adiccin de cido o base.

Disponibilidad de luz
La disponibilidad de luz es sin duda el principal factor limitante de los cultivos
fotoauttrofos de microalgas. Los nutrientes inorgnicos e incluso el CO2 pueden
ser
incorporados al medio de cultivo en exceso, de forma que nunca sean limitantes al
crecimiento. Sin embargo la luz debe ser continuamente suministrada al cultivo, ya
que la
energa radiante no se puede acumular (Molina-Grima et al., 1996).
En cultivos poco densos la disponibilidad de luz queda asegurada suministrando
luz a la
intensidad en la que se alcanza Pmax (Fig. 2.5), pero si este cultivo est en el
exterior, en las
horas de mayor irradiancia solar, el cultivo sufrir fotoinhibicin. La forma de
combatir la
fotoinhibicin consiste en aumentar la densidad del cultivo, de forma que las
clulas se
hacen sombra entre ellas (efecto de autoensombrecimiento). As se va reduciendo
la
intensidad de luz desde el exterior hacia el interior del cultivo. Pero es posible que
la
densidad sea lo suficientemente alta como para que la luz no pueda llegar hasta el
interior,
habiendo zonas en el reactor expuestas a una alta intensidad de luz (zonas
fotoinhibidas) y
otras a las que la luz no llega (zonas fotolimitadas), como muestra el esquema de
la figura
2.6.
Por ello en cultivos densos se hace necesario una adecuada agitacin del cultivo,
que haga
circular a las clulas constantemente entre las zonas iluminadas y deficientes en
luz, como
muestra el esquema de la figura 2.6. En la zona iluminada las clulas absorbern
gran
cantidad de luz, debiendo permanecer en ella un tiempo corto para evitar la
fotoinhibicin.
De ah pasarn a la zona oscura, donde pueden seguir realizando la fotosntesis
an a
intensidad es nula, un cierto tiempo despus de haber absorbido la luz, gracias a
la inercia
del crecimiento fotosinttico (Molina-Grima et al., 1996). La geometra del reactor
condicionar el recorrido realizado por las clulas mientras son impulsadas por la
agitacin. As por ejemplo, en reactores tubulares, a mayor dimetro mayor
recorrido y
tiempo necesario para pasar de la zona iluminada a la zona oscura. El tiempo que
tarda una
clula en hacer este recorrido determina lo que se conoce como ciclo
luz/oscuridad.
Es por esto que, uno de los mayores esfuerzos en la investigacin aplicada de
microalgas
se ha centrado en el diseo de fotobiorreactores que optimizan las condiciones de

agitacin, superficie iluminada, penetracin de luz, etc., para que cada clula
reciba una
iluminacin adecuada. ste sigue siendo actualmente uno de los retos de la
investigacin
(Pulz, 2001).

Las microalgas como organismos auttrofos fotosintetisadores, dependen de la luz

para su desarrollo y produccin de materia orgnica. La respuesta fotosinttica a
la energa luminosa se caracteriza por una respuesta lineal baja al incremento en
la irradiancia, hasta llegar a su mxima capacidad fotosinttica, donde las clulas
son independientes de la irradiacin (Abalde, 2004). Bajo condiciones estables (no
movimiento) las clulas se aclimatan a un nivel de irradiancia, obteniendo bajo
esas condiciones tasas de crecimiento y fotosintticas no necesariamente ptimas
mediante un ajuste en sus procesos fisiolgicos. En clulas aclimatadas a bajas
irradiancias, la concentracin de clorofila se incrementa para poder obtener la
energa luminosa necesaria para continuar con el proceso fotosinttico. Por otro
lado, clulas aclimatadas a altas irradiancia, decrece la concentracin celular de
clorofila-a e incrementan la concentracin de pigmentos accesorios fotoprotectores
(carotenos) para evitar la oxidacin de los fotosistemas. MacIntyre y col., (2002),
reportan que clulas aclimatadas a alta iluminacin no mostraron una tasa de
crecimiento mayor que clulas en baja iluminacin, porque a saturacin de luz, las
concentraciones de clorofilas sern proporcionalmente mucho menores de la
masa total de de los pigmentos celulares en alta iluminacin.

Eficiencia fotosinttica

Un aspecto fundamental de la utilizacin fotosinttica del CO2 es el rendimiento

fotosinttico alcanzable, es decir, la eficiencia en la conversin solar en trminos
de
unidades de CO2 procesadas por fotn que llega a la clula.

De todo el espectro de radiacin electromagntica emitida por una fuente de luz,

solamente la parte correspondiente a la zona visible (380 a 750 nm) es
aprovechable por las plantas para realizar la fotosntesis. Este rango de luz es lo
que se conoce como radiacin fotosintticamente activa (PAR, photosynthetically
active radiation) (Richmond, 2004).

Los pigmentos y todos los organismos relacionados con la captacin de luz se

asocian con sistemas especiales de membranas fotosintticas, localizadas en el
interior de los
cloroplastos, como muestra la figura 2.3a, que contienen las molculas de
clorofila.

La mayora de ellas actan como centros captadores de luz o antena y una

pequea parte son centros de reaccin que reciben la energa capturada por las
antenas (figura 2.3b).
Un aspecto fundamental del fenmeno de la fotosntesis es que todos los fotones
captados son finalmente absorbidos por el centro de reaccin de la clorofila, que
tiene el mximo de 42,1 Kcal por mol de fotones. Asumiendo el caso ms
optimista, (8 moles de fotones por mol de CO2) y que el producto es un
carbohidrato (114 kcal/mol de carbono fijado), la mxima eficiencia fotosinttica
posible es del 34%.

Sin embargo, hay una serie de factores que impiden que se alcance esta
eficiencia, como que (Benemann, 1992):

Solo el 43% de la energa solar llega con una longitud de onda que puede
ser absorbida por el aparato fotosinttico.
Es probable que se necesiten ms de 8 fotones por mol de CO2.
No todos los fotones incidentes pueden ser absorbidos por el aparato
fotosinttico: alrededor de 10-20% son reflejados o absorbidos por otros
componentes inactivos
La productividad global debe tener en cuenta el gasto energtico en la
respiracin, en el mantenimiento de la clula, reproduccin, etc.

Todos estos factores reducen el potencial mximo de eficiencia fotosinttica a un

10%.
Incluso este 10% de eficiencia no se consigue en la prctica, ya que la velocidad a
la cual
los fotones pueden ser procesados es considerablemente menor que la velocidad
con la que son absorbidos en los centros antena. Los fotones extra que no pueden
ser metabolizados se eliminan en forma de calor y fluorescencia, y ello supone
una prdida del 30 al 90% de la energa incidente. Este fenmeno se conoce
como fotoinhibicin, que significa que la actividad fotosinttica no aumenta con la
luz recibida a partir de una cierta intensidad de luz e incluso puede llegar a
disminuir.
La fotoinhibicin podra evitarse reduciendo el tamao de la antena colectora de
luz, mediante modificacin gentica. Con un menor tamao de antena las clulas
absorberan menor cantidad de luz, impidindose as la saturacin y dejando luz
disponible para otras clulas (Polle et al., 2002, Melis, 2004).
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