Universidad Andrs Bello

Facultad de Ciencias de la Salud

Departamento de Ciencias Biolgicas
Laboratorio de Biologa Celular Bio 035

TRABAJO PRCTICO N 4:
COMPONENTES QUMICOS DE LA CLULA.

Alumnos:
Andrea Fritz.
Bryan Morales.
Catalina Cortes.
Pablo Droguett.

Seccin: 8.

Profesores:
Macarena Kaiser.
Jorge Zuiga.

2017
Introduccin.

La clula es la unidad bsica, estructural y funcional de la vida, por esto mismo, est constituida por
estructuras que son vitales para las clulas, como el agua (se encuentra en mayor cantidad), sales
minerales y sustancias orgnicas. Esta ltima es esencial para la clula, ya que le otorga funciones
especiales a cada una, las sustancias orgnicas que encontramos en la clula son:

1.- Hidratos de carbonos (compuestos por hidrogeno, carbono y oxigeno), que son azucares y son la
principal fuente de energa de la clula, estos se dividen en monosacridos, disacridos, oligosacridos y
polisacridos.

2.- Lpidos, que son insolubles en agua, pero solubles en solventes orgnicos y los lpidos que se
encuentran en mayor cantidad en la clula son los triglicridos, fosfolpidos y los esteroides.

3.- Protenas, que son cadenas de aminocidos y todas las funciones bsicas de la clula dependen de
esta, ya que le dan rigidez estructural, controla la permeabilidad de las membranas, participan en el
transporte y el movimiento celular, son enzimas y tienen otras funciones (4).

4.- cidos Nucleicos, que estn presente en todos los organismos vivos como cido desoxirribonucleico
(ADN) y cido ribonucleico. El ADN es el depsito fundamental de la informacin gentica, luego esta
informacin es transcrita en el ARN.

Sin embargo, no solo son importante las molculas orgnicas, ya que en las clulas existen molculas
inorgnicas, estas son las sales minerales, aunque se encuentren en muy pocas cantidades (entre el 2 y el
3%), son importantes para mantener la presin osmtica, el equilibrio acido-base y son indispensables
como cofactores enzimticos (1).

Hiptesis:

Por cada muestra, alguna de sus molculas en particular reaccionaran por naturaleza a la par con una
sustancia y/o molcula especifica cambiando as sus caractersticas fsicas o qumicas, estos cambios
pueden inhibir o resaltar alguna funcin o estructura de la muestra.

Objetivos.

El objetivo de este practico es conocer y aprender cuales son los reactivos que se utilizan para poder
identificar molculas orgnicas e inorgnicas, se conocer las partes de estas molculas, para poder
identificar y conocer porque ocurren estas reacciones.
Materiales y procedimientos.

ACTIVIDAD N1: Reconocimiento de hidratos de carbono.

a) Identificacin de monosacridos mediante la reaccin de Somogyi:

Se prepararon 5 tubos de ensayo con agua destilada, solucin de glucosa al 1%, solucin de almidn al
1%, leche y solucin de NaCl al 1% (rotular cada uno para identificar con que muestra se trabaj). A
cada tubo se le agrego 1 ml del reactivo de Somogyi. Se agit cada uno de los tubos, se colocaron en una
gradilla y se dejaron calentar en el bao termoregulado, por 3 minutos a 90C. Se dej enfriar y se
observ el cambio de cada muestra.

b) Identificacin de polisacridos mediante la prueba de Lugol:

Se prepararon 5 tubos de ensayo con las mismas muestras descritas anteriormente. Luego se agreg 1
gota de solucin de Lugol diluida y se agit. Se observ el color producido por cada muestra.

ACTIVIDAD N2: Reconocimiento de protenas.

Identificacin de protenas mediante la prueba de Biuret:
Se rotul 5 tubos de ensayos, a los cuales se le agrego 1 ml de lo siguiente, agua destilada, solucin de
glicina al 1%, clara de huevo, leche y solucin de NaCl al 1%. Se agreg adems a cada tubo 1 ml del
reactivo de Biuret y se agit. Se observ la variacin de colores.

ACTIVIDAD N3: Reconocimiento de lpidos.

En dos tubos de ensayos se agreg 1 ml de agua y en el otro 1 ml de ter. Adems a cada tuvo se agreg
tambin 1ml de aceite y se agito fuertemente. Se observ la reaccin ocurrida en cada tubo de ensayo.

ACTIVIDAD N4: Reconocimiento de sales minerales.

Preparar dos tubos de ensayo, en cada uno se agrega 1 ml de Cloruro de Calcio. Adems se numero los
tubos con 1 y 2.
a) Identificacin de Cloruros:
Al tubo 1 se le agrego 1ml de solucin de Nitrato de Plata al 1%. Se observ lo ocurrido.
b) Identificacin de Calcio:
Al tubo 2 se le aadi 1ml de solucin de Oxalato de Amonio al 1%. Se observ lo ocurrido.

ACTIVIDAD N5: Reconocimiento de enzimas.

a) Activacin de enzima:
 Se coloc en un tubo de ensayo un trozo pequeo de hgado de pollo y se aadi 1 ml de agua
oxigenada. Se observ los resultados.
b) Inactivacin de enzima:
Se coloc en un tubo de ensayo un trozo pequeo de hgado de pollo y se aadi 1 ml de agua para
hervir la muestra. Se dej hervir a 90C durante 30 minutos. Luego se desech el agua sobrante y se le
agrego 1ml de agua oxigenada.

Resultados.
ACTIVIDAD N1: Reconocimiento de hidratos de carbono.

a) Identificacin de monosacridos mediante reaccin de Somogyi:

Tubo Muestra Reaccin (+) o (-) Observacin

1 Agua Destilada.
2 Solucin glucosa 1%.
3 Solucin almidn 1%.
4 Leche.
5 Solucin NaCl 1%.
- No hay cambios.
++ Se pone de color naranjo.
- No hay cambios.
+ Se pone de color amarillo.
- No hay cambios.

Observacin:

Cul es el color y la cantidad relativa del precipitado en cada uno de los tubos?

En la muestra numero 2 el color se torna naranjo con una alta concentracin; la muestra 4 el color se torna de
color amarillo con una dbil concentracin; y las muestras 1,3 y 5 no poseen cambios en sus colores naturales y
no se diferencia concentracin alguna.

-Revise la estructura qumica de los monosacridos. A qu caracterstica se debe su capacidad reductora?

Su caracterstica reductora se debe a una acetona o aldehdo libre en su estructura que es capaz de oxidarse en
una reaccin.

Se logra apreciar con los datos que la leche y la solucin de glucosa contienen monosacridos en diferentes
concentraciones con la caracterstica de ser reductores.

b) Identificacin de oligosacridos mediante Lugol:

Tubo Muestra Reaccin (+) o (-) Observacin

1 Agua Destilada.
2 Solucin glucosa 1%.
3 Solucin almidn 1%.
4 Leche.
5 Solucin NaCl 1%.
- No hay cambios.
- No hay cambios.
++ Se pone de color negro.
- No hay cambios.
- No hay cambios.

Observaciones:
 Se observan un cambio nico en estas muestras, que es de la muestra nmero 3 que corresponde a la de
almidn, con esto se entiende que posee polisacridos y por el color observado, que es negro, se puede deducir
que corresponde a la interaccin del yodo con la amilasa (estructura sin ramificaciones) por ello el color tan
notable.

ACTIVIDAD N2: Reconocimiento de protenas mediante Biuret:

Tubo Muestra Reaccin (+) o (-) Observacin

1 Agua Destilada.
2 Solucin glicina 1%.
3 Clara de huevo.
4 Leche.
5 Solucin NaCl 1%.
+ Se pone de color celeste.
++ Se pone de color azul elctrico.
++++ Se pone de color Azul intenso.
+ Se pone de color azul violeta.
+ Se pone de color celeste.

Observaciones:

Cmo explica la diferencia de intensidades en los tubos que presentaron una reaccin positiva?

La diferencia de las intensidades de los colores de los tubos se debe a la cantidad de concentracin de enlaces
peptdicos que contengan las muestras, como se puede observar la muestra 3 (clara de huevo) posee una
cantidad muy superior de protenas que las dems y por ende poseer una mayor cantidad de enlaces peptdicos,
pudiendo as tomar una colocacin de intensidad mayor, en cambia las otras dos muestras presentara una
concentracin menor y por ende un color de intensidad ms dbil.

ACTIVIDAD N3: Reconocimiento de lpidos:

Tubo Muestra Observaciones

1 Agua + Aceite. Se formaron gruesas capas de micelas al agitar
y dos fases.
2 ter + Aceite. Despus de agitar una fase y sin micelas.

Observaciones:

En la muestra nmero 1 de agua + aceite, se observaron las formacin de micelas el batir la disolucin y en el
momento en que se dej un reposo, las distintas soluciones tomaron lugar en diferentes lugares, el agua se
qued en la parte baja del tubo del ensayo, mientras que el aceite quedo por encima del agua, esto se debe por la
diferencia de densidades que poseen ambas, siendo la del agua mayor.
Por lo contrario la muestra nmero 2 de ter + aceite, se observ una rpida homogenizacin por parte de
ambas soluciones, dado que el aceite el soluble en compuestos orgnicos.
ACTIVIDAD N4: Reconocimiento de sales minerales:

Tubo Muestra Observaciones

1 Nitrato de Plata. Se crea un precipitado fino.
2 Oxalato de Amonio. Se crea un precipitado grueso.

Observaciones:

Se logra observar en la muestra 1 una formacin de lquido blanco, con un leve precipitado solido fino que
flotaba en la solucin cual se terminaba quedando en el fondo del tubo de ensayo; en la muestra 2 se logra ver
otro liquido blanco pero esta vez un precipitado solido blanco y grueso, tal que se encontraba flotando por
encima del lquido.

ACTIVIDAD N5: Reconocimiento de enzimas:

Tubo Muestra Observaciones

1 Hgado de pollo. Se crea una reaccin al instante, produciendo
burbujas.
2 Hgado de pollo cocido. No se aprecia reaccin.

Observaciones:

En la muestra 1 del hgado de pollo sano, al someterle el agua oxigenada se ve un reaccin casi instantnea de
la enzima, produciendo un burbujeo constante.
En la muestra 2, el hgado de pollo se ve en condiciones desfavorables, con un color diferente al de la muestra
1, al someterle con el agua oxigenada, no se logra percibir ninguna reaccin, la enzima no acta sobre el
compuesto toxico.
Discusin.

En la primera parte de la actividad nmero uno, como propsito es el reconocimiento de hidratos de carbono en
especfico la identificacin de monosacridos mediante la reaccin de Somogyi. Teniendo en cuenta que se hace
reaccionar el Somogyi con cada una de las muestras descritas anteriormente en el tem de materiales y
procedimientos, donde al calentar estas en el bao termoregulado a 90C y despus de dejarlas enfriar un
tiempo, se ven diferentes reacciones, en algunos casos similares, todo esto ya sea por sus estructuras y
temperatura. En las muestras de agua destilada y NaCl 1% al hacerlas reaccionar con Somogyi y llevarlas al
termoregulado no se ve reaccin alguna y esto se debe principalmente a q estas muestras son molculas
inorgnicas y no presentas carbonos en sus estructuras, por lo tanto no hay un proceso de reduccin. En el caso
de la muestra de almidn 1% tampoco se observa reaccin, ya que es una macromolcula compuesta por dos
polisacridos los cuales son la amilosa y amilopectina, por lo tanto estas estructuras no tendrn reaccin con
Somogyi. En el caso de la muestra de glucosa se aprecia reaccin, ya que es un monosacrido de formula
molecular C6H12O6, es una hexosa ya que tiene 6 carbonos y gracias a los enlaces que se podrn formar de tipo
glucosdico, habr una reaccin entre la muestra y Somogyi. En la muestra de leche hubo reaccin con
Somogyi, pero no en su totalidad, ya que esta compuesta de lactosa (galactosa + glucosa) y por su estructura no
hace una reaccin al 100%, se ve que no alcanza el color esperado de la reaccin (5). En la parte b de la
actividad nmero dos, se trabaj con el reactivo de Lugol y nos dio como resultado, una reaccin positiva en la
solucin del 1% de almidn dando una muestra de color azul muy oscuro casi negro, dado que la solucin de
Lugol es yodo diluido en yoduro de potasio, el cual, al estar en presencia de cadenas de carbohidratos
polisacridos este se une en las cadenas generando un cambio fsico en la molcula haciendo que cambie de
color, pero todo depender de la organizacin de esta cadenas, ya que como sabemos, existen distintos tipos de
plegamiento de estos carbohidratos en su cadenas (pueden tener ramificaciones como no tenerlas), esto nos
ayuda adems en conocer por el color el tipo de polisacridos y como est organizado, en este caso con el
almidn, este contiene dos componentes cual reacciona de diferente manera el Lugol, la amilasa que es un tipo
de plegamiento lineal (enlaces alfa1-4) y la amilopectina que es una estructura con ramificaciones (enlaces alfa
1-4 y 1-6) generando un espiral, el Lugol al reaccionar con estos componentes generara cambios fsicos en la
muestra dando un azul oscuro como se obtuvo en nuestro experimento, ya que este contiene amilasa, el cual al
ser lineal este genera una buena interaccin con el Lugol generando poliyoduros, el cual da el color
caracterstico de nuestra muestra , en cambio si no fuera as y hubiera reaccionado con amilopectina el color
tena que ser por defecto una mezcla entre el color natural de la muestra y el azul (morado claro) y esto se
genera por la estructura de espirales y las molculas del Lugol no tendran interacciones tan positivas generando
una dbil unin y por ende una dbil reaccin. Con todo este proceso podemos entender la gran cantidad de
hidratos de carbono en forma de polisacridos que contena nuestra muestra de almidn y adems poseer
componente de amilasa por el color que tuvimos como reaccin.
Para reconocer Protenas se utiliza un reactivo llamado Biuret, el cual CuSO 4 en solucin acuosa alcalina (de
NaOH o KOH), el cual reacciona solo con protenas y pptidos, dejando de lado los aminocidos, ya que se
genera un complejo de coordinacin de los Cu +2 con los pares de electrones libres de los nitrgenos que
generan los enlaces peptdicos de las protenas, por esta razn es que no va a interactuar nunca con aminocidos
sueltos, esta reaccin genera un cambio de color en las muestras (de violeta a azul oscuro) que tengan ms de 3
enlaces peptdicos, con esta informacin se entiende que en muestras que contengan ms concentracin de
enlaces peptdicos (protenas o pptidos) el color ser ms fuerte en comparacin con otras que contengan
menor cantidad, como por ejemplo lo que sucedi al experimentar con las muestras, en donde se esperaba
encontrar en tres de nuestras muestras un cambio de color, lo cual s se obtuvieron, y se gener una variedad en
la tonalidad del color azul y violeta, esto debido a que se encontraba una diferencia de concentracin de
protenas, lo que al observar con mayor inters fue que la muestra de huevo tomo el color azul oscuro y la leche
un color violeta dbil, lo cual se investig en una tabla de porcentaje de alimento, nos corrobora que el huevo
por su color este contiene un 11 % de protenas en 100 gr de este, en comparacin de la leche la que solo
contiene 3,2 % de protenas en 100 gr de leche. Dndonos a entender que la naturaleza de esta reaccin nos
permite apreciar la presencia y en parte la concentracin de protenas presente en muestras a estudio (2).
En el experimento de para reconocer lpidos se trabaj con aceite y dos lquidos muy diferentes en propiedades
como disolventes, el agua y el ter, los cuales al mezclarlos con aceite se comportaron de manera distinta. En la
mezcla numero 1 (aceite + agua) se observ que los lquidos no interactuaron unindose y generando una
mezcla homognea , sino que fue todo lo contrario se observaron unas formaciones circulares de aceite en la
disolucin, las que corresponden a micelas que son formas que toman los fosfolpidos ( tipo de lpidos que son
anfipticos) , estos poseen una extremo polar que es hidroflico y otro extremo apolar que es hidrofbico, ya
que estn compuestas por largas cadenas de carbono e hidrogeno de tal manera que no generan polaridad, lo que
genera un comportamiento especial en contacto con el agua, como se pudo observar en esta muestra en donde
las micelas son los fosfolpidos con una formacin estructural en donde las cabezas toman contacto con el agua
y las colas hidrofbicas se renen al centro de estas, por ser insolubles al agua, con el pasar del tiempo se
observ la diferencia de densidades, el aceite se concentr en la seccin de arriba como suspensin y el agua se
guarda en la zona inferior por su densidad ms alta. En cambio, en la muestra numero 2 (aceite + ter) se pudo
observar una homogenizacin completa entre el aceite y el ter, y esto se produce, ya que el aceite es apolar y
puede ser disuelto en solventes apolares como en este caso es el ter (1).
En las sales minerales se tuvo Cloruro de Calcio y se le agrega Nitrato de Plata, en este caso se observa la
formacin de un lquido y la suspensin de un polvo blanco, este se debe a que hay una reaccin inica entre el
cloruro de calcio y el nitrato de plata, en el cual el cloruro interacta con la plata obteniendo cloruro de plata,
este es insoluble al agua y queda suspendido como un polvo blanco y fino, mientras que el calcio interacta con
el nitrato, obtenindose nitrato de calcio el cual si es soluble en agua y queda como liquido incoloro , teniendo
la naturaleza de la reaccin.

Ecuacin:

CaCl2 + 2AgNO3 (aq) 2 AgCl (s) + Ca(NO3)2 (aq)

En cambio la reaccin dos, en donde se tiene cloruro de calcio, reacciono el oxalato de amonio, nuevamente se
ve una fase liquida y una suspensin de un slido blanco pero en este caso es ms grueso que en el caso
anterior, el oxalato interacta con el calcio produciendo el oxalato de calcio que sera el polvo blanco grueso en
suspensin y el cloruro interacta con el amonio generando cloruro de amonio , quedndose liquido e incoloro,
as generndose la segunda reaccin de sales minerales.

Ecuacin:

CacCl2 + (NH4)2C2O2 2NH4CL + CaC2O2 (3)

Por ultimo tenemos la reaccin de la catalasa en el hgado de pollo. La catalasa es una enzima que se encuentra
en los peroxisomas y est encargada de neutralizar el H 2 O2 (agua oxigenada) producido por los peroxisomas
cuando ocurre la oxidacin de sustratos, este producto resulta sumamente toxico para clula. Esto explica
porque al aadir agua oxigenada al pedazo de hgado de pollo produjo una reaccin inmediata y provoco un
burbujeo, ya que los peroxisomas al estar en contacto con una sustancia toxica se activ la catalasa para poder
neutralizar la toxicidad y no causar daos a la clula. Sin embargo, el trozo de hgado de pollo cocido no tuvo
ninguna reaccin, esto se debe que fue expuesto a una alta temperatura, la enzima de la catalasa pierde su
estructura terciaria, perdiendo as su actividad funcional (1).

Conclusin.

Luego de haber llevado a cabo nuestro prctico podemos concluir que la hiptesis que hemos planteado
anteriormente es correcta ya que tal como se indic en los resultados anteriormente sealados s se
evidenci que: a mayor porcentaje de Hidratos de Carbono, Protenas, Lpidos, Sales minerales y
Enzimas en alguna muestra en especfico se obtendr una reaccin ms efectiva, rpida y visible en
presencia de cada uno de los reactivos utilizados. Cabe destacar que la nica muestra que no reaccion
fue la de Hgado de pollo cocido ya que sta estuvo en presencia de un factor externo (alta temperatura)
el cual impide la efectividad de la enzima Catalasa, por lo cual este resultado no le quita veracidad a
nuestra hiptesis. Adems, este trabajo nos permiti profundizar nuestros conocimientos acerca de las
propiedades de los reactivos.
Bibliografa.

1. (s.f.). Biologa Celular y Molecular. En E. D. De Robertis. El Ateneo. (1)

2. Laboratorios de Bioqumica. (s.f.). Obtenido de:

https://sites.google.com/site/laboratoriosbioquimica/bioquimica-i/prueba-del-almidon (2)

3. Monografas (s.f.).Obtenido de:

http://www.monografias.com/trabajos16/reacciones-descomposicion/reacciones-
descomposicion.shtml#ixzz4hkX2Y7rl (3)

4. Alberts, Bruce. 1938. Introduccin a la biologa celular. Barcelona: Omega, c1999. (4)

5. Claude A. Ville 8 ed. 2003. Biologia. Mc Graw Hill. (5)