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RESUMEN ABSTRAT
El perfil de cidos grasos permite caracterizar las By examining fatty acid profiles, the different ingre-
materias utilizadas en la elaboracin de helados. De la dients used in ice cream production may be character-
comparacin de dichos perfiles con los de otras grasas ized. When these profiles were compared to those of
(aceites, leches, etc.) se deduce que gran parte de los other fats (oils, milk, etc.), many of the commercial
helados comerciales analizados parecen haber sido brands of ice cream tested were found to contain co-
elaborados con aceite de coco o grasas elaboradas a conut oil or coconut itself. In contrast, our data indi-
partir del mismo. Por el contrario los helados artesana- cate that the smaller cottage industry-type ice creams
les analizados han sido elaborados con leche o deriva- examined were elaborated from milk or milk products
dos (mantequilla). Estas conclusiones cualitativas son (butter or cream). These qualitative findings were con-
confirmadas mediante anlisis estadstico multivariante firmed by multivariate statistical analysis (factor and
(anlisis en factores y anlisis clster). En ambos ca- cluster analyses). In the cluster diagrams presented, it
sos puede comprobarse que gran parte de las mues- can be seen that that many of the industrial sam-
tras industriales se agrupan en las proximidades del ples grouped in the vicinity of coconut oil. Within
aceite de coco. Dentro de los helados artesanales the cottage ice cream grouping, appeared a group
puede observarse un grupo en las proximidades de la close to one clustering milk and butter, while ice
leche y derivados (mantequilla), mientras que los hela- cream made of almond and nougat appeared in the al-
dos de almendra y turrn aparecen en la zona del mond oil zone, showing great similarity with other veg-
aceite de almendra, de gran parecido con otros aceites etable oils (olive, sunflower etc.).
vegetales (oliva, girasol etc.).
KEYWORDS
PALABRAS CLAVE
Fatty acids, Ice cream, Factor Analysis, Cluster
cidos grasos, Helados, Anlisis en Factores, Anlisis Analysis.
Clster.
1. INTRODUCCIN
Segn el RD 618/1998 de 17 de Abril, los helados
son preparaciones alimenticias que han sido llevadas al
estado slido, semislido o pastoso, por una congela-
Correspondencia: cin simultnea o posterior a la mezcla de las materias
e-mail: ebarrado@qa.uva.es primas utilizadas y que ha de mantener el grado de
Palma PA
2. EXPERIMENTAL
Mantequilla Leche MN
2.1. Reactivos
-ter de petrleo 40-60% PRS (Panreac), Trifloruro Margarina Industrial MR
de boro, 14% en metanol (Panreac, PS); n-Hexano Manteca cerdo MP
95%, M&B (May & Baker, grado HPLC); Metilato de so-
dio (disolucin 30% PS, Panreac), Cloruro de sodio (PS- Huevo lquido Industrial LH
ACS-ISO, Panreac).
Leche entera Industrial LE
-Supelco Fatty Acid Methyl Ester Mix Standars 189-
Almendra AL
19, 7-7123 and 4-7118
Por lo que respecta a los helados, los hemos agru- Tabla 3. Programa del microondas para la extraccin de los
pado en dos categoras: cidos grasos.
Etapa
Helados industriales: Hemos seleccionado tres mar-
cas comerciales diferentes a las que hemos asignado Parmetro Rampa Mantenimiento Ventilacin
las letras Y, H y U. Estos ltimos son los que se distri-
Temperatura (C) 60 60 NC
buyen se distribuyen dentro del Hospital Clnico
Universitario de Valladolid. Tiempo (min) 20 15 20
Helados artesanales: Hemos conseguido dos tipos di- Potencia (W) 700 700 NC
ferentes que hemos identificado con las letras T y A.
NC = No controlable
Dentro de cada grupo hay una segunda letra que
identifica el diferente sabor con el que se expenden las
muestras, tal y como puede observarse en la Tabla 2. vente. Se introducen 8 ml de sodio metilato y se pone a
reflujo durante 10 min, se deja enfriar y se aaden 15 ml
En todos los casos se analiz el residuo seco, obte- de BF3 y se somete a un nuevo reflujo. Tras la formacin
nido tras una deshidratacin de las muestras a una de steres metlicos se lavan con 8 ml hexano y se aade
temperatura no superior a 60C. agua sobresaturada de NaCl formndose dos fases y se
extraen 200 l de la fase orgnica. Se diluyen en hexano
2.4 Procedimientos (1:15) y se introducen en un vial para el posterior anli-
2.4.1.-Extraccin de la materia grasa sis cromatogrfico, en las condiciones indicadas. La iden-
tificacin y cuantificacin de los cidos grasos se lleva a
Se pesaron 1.5 gramos del residuo seco y se introdu- cabo por comparacin con los cromatogramas del patrn
jeron en paper-bags para su posterior extraccin. Las obtenidos en las mismas condiciones.
muestras se introducen en un tubo apto para microon-
das, se les aaden 30 ml de ter de petrleo y se so- 3. RESULTADOS Y DISCUSIN
meten a un programa de temperaturas con las condi-
ciones reflejadas en la Tabla 3. Se realiza la extraccin En la Tabla 4 se muestran los porcentajes relativos de
por duplicado. cada cido graso en relacin al total de los mismos en
las diferentes muestras analizadas. Incluimos sola-
2.4.2 Derivatizacin.
mente aquellos cuyo porcentaje es superior al 0,1% y
El extracto se somete a una destilacin para obtener un solo los cidos grasos que aparecen con mayor frecuen-
residuo aceitoso, donde se encuentran los cidos grasos cia, ya que nuestro inters no llega a los componentes
extrados. Posteriormente se introducen durante 60 min minoritarios, ni como se ver, son imprescindibles para
en una estufa a 60C para eliminar los restos de disol- el anlisis estadstico.
Tabla 2. Relacin de helados incluidos en el estudio, procedencia y acrnimo utilizado en el resto de las tablas y grficas.
Acrnimo
Marca comercial/ Sabores
Nata Vainilla Fresa Chocolate Turrn
Helados industriales
Y YN YV YF YC
H HN HY HF HC HT
U (H. Clnico) UV UC
Helados artesanales
T TV TT
A AA Almendra AV AF Frambuesa
Muestra C8:0 C10:0 C12:0 C14:0 C16:0 C16:1 C18:0 C18:1 C18:2 C18:3 C20:0 C20:1 C20:5 C21:0 C22:6
OI 0,0 0,0 0,0 0,0 13,0 0,8 3,1 75,8 6,0 0,5 0,2 0,2 0,0 0,0 0,0
OV 0,0 0,0 0,0 0,0 14,6 1,1 3,3 72,6 6,8 0,7 0,3 0,2 0,0 0,0 0,0
OS 0,0 0,0 0,0 0,0 13,6 1,0 3,3 72,9 8,1 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0
GI 0,0 0,0 0,0 0,1 8,6 0,2 3,7 30,5 56,4 0,2 0,0 0,1 0,1 0,0 0,0
MA 0,0 0,0 0,0 0,0 13,6 0,1 2,1 39,4 43,4 0,8 0,2 0,2 0,0 0,0 0,0
CC 7,7 6,2 51,2 20,1 7,6 0,0 2,0 4,0 1,1 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0
CO 0,0 0,0 0,0 0,1 6,1 0,3 1,8 62,9 19,4 7,9 0,3 0,7 0,1 0,1 0,0
PA 0,0 0,0 0,3 1,0 38,3 0,2 3,4 44,6 11,1 0,2 0,2 0,1 0,0 0,0 0,0
YN 13,6 10,1 47,7 7,0 9,6 0,0 1,2 7,1 1,8 0,0 0,1 0,0 0,0 0,0 0,1
YV 6,1 5,3 45,0 18,6 10,5 0,0 3,7 8,3 1,8 0,0 0,1 0,0 0,0 0,0 0,2
YF 13,9 10,5 53,5 8,2 10,5 0,0 1,3 0,1 1,8 0,0 0,1 0,0 0,0 0,0 0,0
YC 4,8 4,7 41,6 17,5 12,0 0,1 6,2 10,4 2,0 0,0 0,2 0,0 0,0 0,0 0,1
HT 11,7 9,0 45,6 7,0 8,2 0,0 1,2 7,3 2,2 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0
HV 15,8 12,0 59,5 8,0 1,8 0,0 0,4 1,1 0,3 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0
HF 12,8 9,4 46,3 6,7 21,8 0,1 0,4 0,9 0,3 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0
HN 2,0 2,2 20,8 9,5 27,7 0,1 4,7 25,6 6,5 0,1 0,3 0,0 0,0 0,0 0,1
HC 3,7 3,6 31,6 13,0 14,9 0,1 10,8 16,1 4,5 0,1 0,3 0,0 0,1 0,0 0,8
AV 0,7 2,1 3,1 10,4 32,6 1,7 11,2 28,8 4,8 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0
AA 0,2 0,6 1,1 3,3 14,8 0,7 4,9 65,4 7,9 0,2 0,1 0,0 0,0 0,0 0,0
AF 0,8 2,1 2,8 10,3 33,9 1,5 12,6 29,5 5,0 0,5 0,2 0,0 0,1 0,0 0,3
TT 0,3 0,8 1,3 4,0 19,4 1,3 6,1 51,3 14,1 0,3 0,0 0,0 0,0 0,1 0,0
TV 0,7 2,1 3,2 9,3 32,2 1,9 9,8 29,9 6,6 0,6 0,2 0,0 0,2 0,0 0,0
UC 5,9 5,4 48,4 19,1 10,1 0,0 8,9 1,7 0,2 0,0 0,0 0,0 0,1 0,0 0,0
UV 4,2 4,3 43,2 19,0 10,9 0,5 9,8 1,9 0,3 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0
MN 1,4 3,2 3,8 14,5 34,3 2,5 9,5 20,5 2,5 1,1 0,7 0,1 0,0 0,0 0,0
MR 0,5 0,0 7,7 2,8 15,8 0,5 7,3 19,0 41,1 3,5 0,1 0,0 0,1 0,0 0,0
MP 0,0 0,1 0,1 2,0 30,5 2,9 12,5 43,0 6,5 0,5 0,1 0,6 0,2 0,0 0,0
LH 0,0 0,0 0,0 1,1 36,5 5,6 7,6 39,3 7,5 0,4 0,5 0,6 0,4 0,0 0,0
LE 1,5 3,6 4,6 16,0 36,2 2,7 6,7 20,4 2,2 0,5 0,0 0,2 0,1 0,0 0,0
AL 0,0 0,0 0,0 0,0 7,3 0,6 1,2 68,7 21,9 0,0 0,1 0,0 0,0 0,0 0,0
De la observacin directa de la tabla pueden obtenerse o palma para su elaboracin y que no se trata de hela-
algunas ideas claras, como que la composicin de la dos de base lctea.
grasa de los helados, especialmente los industriales, con-
tiene cantidades elevadas de cidos grasos saturados de 3.1. Anlisis en componentes principales
cadena corta, mientras que el porcentaje insaturados (a
Con el fin de confirmar estas conclusiones de modo
excepcin del C18:1 y en menor proporcin C18:2) es
ms objetivo hemos realizado diversas pruebas estads-
extremadamente bajo. Tampoco aparecen cantidades
ticas de anlisis multivariante, un anlisis en factores (o
apreciables de cidos grasos de cadena larga. Si compa-
componentes principales) y un anlisis clster.
ramos estos resultados con las muestras que utilizamos
como referencia (leche, huevo, aceites, margarinas, La primera etapa del proceso consiste en obtener la
mantequillas y manteca), puede observarse claramente matriz de correlacin de los datos normalizados, para
que no hay similitud alguna con la composicin de los evitar que la contribucin de cada cido graso sea fun-
aceites de oliva, girasol, maz o colza, ni tampoco con los cin de su valor absoluto (Tabla 5).
otros tipos de grasas. Por el contrario puede observarse Al comparar los valores que aparecen en dicha matriz
que el aceite de coco contiene una composicin elevada con el valor crtico (r = 0,161 para P=0,05 y n = 105),
de cidos grasos saturados de cadena corta, y el de se observa que existen correlaciones muy elevadas en-
palma duplica al menos el porcentaje de C16:0 del resto tre los distintos factores originales (cidos grasos). Esto
de los aceites. En consecuencia, de la simple observacin implica que utilizando combinaciones lineales de los
de los resultados puede obtenerse como conclusiones mismos podramos reducir la dimensionalidad de la ta-
que la composicin gran parte de los helados industria- bla original de los datos, lo que hara ms sencillas las
les analizados es compatible con el uso de aceite de coco observaciones y la extraccin de las conclusiones perti-
C8:0 C10:0 C12:0 C14:0 C16:0 C16:1 C18:0 C18:1 C18:2 C18:3 C20:0 C20:1 C20:5 C21:0 C22:6
C8:0 1
C10:0 0,981 1
C18:3 -0,265 -0,301 -0,297 -0,281 -0,112 -0,007 -0,066 0,265 0,319 1
C20:0 -0,358 -0,324 -0,373 -0,097 0,401 0,456 0,251 0,212 -0,002 0,325 1
C20:1 -0,353 -0,399 -0,420 -0,404 0,208 0,531 0,092 0,366 0,155 0,589 0,407 1
C20:5 -0,332 -0,341 -0,336 -0,203 0,380 0,702 0,421 0,095 0,176 0,232 0,335 0,61 1
C21:0 -0,174 -0,186 -0,205 -0,182 -0,074 0,017 -0,047 0,259 0,111 0,368 -0,050 0,18 -0,03 1
C22:6 0,031 0,065 0,150 0,247 -0,006 -0,141 0,337 -0,171 -0,137 -0,099 0,183 -0,16 0,03 -0,081 1
nentes. El test de esfericidad de Bartlett confirma esta tivamente C18:1, C18:2, C18:3, C20:1 y C21:0 y posi-
apreciacin, ya que el valor del estadstico chi cuadrado tivamente el resto. Estas contribuciones se observan
calculado, 507,4 es mayor que el valor crtico 129,9 ms claramente en la Figura 1.
(105 grados de libertad, P= 0,05), lo que indica que las
variables no son ortogonales sino que, efectivamente, La representacin del factor 2 frente al factor 1 nos
existe correlacin entre las mismas. permite observar en un plano de dos dimensiones estas
agrupaciones de los cidos grasos de la tabla original
La matriz de los datos originales (Tabla 4) puede ser (Figura 2). Este grfico explica el 55,6 % de la varianza
subdivida en dos, una de las cuales (matriz de las car- total de los datos originales, pero es muy claro desde el
gas o loadings) contiene informacin de las variables punto de vista visual. Efectivamente si observamos las
(cidos grasos). En la Tabla 6 puede observarse los lo- lneas continuas que aparecen en la figura partiendo del
adings de los cinco nuevos factores, que son los que
valor 0-0, vemos que las lneas que se dirigen hacia la
por tener un valor propio o eigenvalue superior a la
izquierda de la figura (factor 1 negativo) corresponde a
unidad, son los que contienen ms informacin que los
los cidos grasos de cadena corta (C8:0-C14:0). Hacia
cidos grasos individualmente.
la derecha (factor 1 positivo) se dirigen las lneas de los
Como puede verse, al factor 1 contribuyen negativa- restantes cidos grasos. stos, a su vez, se subdividen
mente los cidos grasos de cadena corta (C8:0-C14:0) entre los que tienden hacia arriba, es decir con factor 2
y positivamente el resto. Al factor 2 contribuyen nega- positivo, que son C18:0, C16:0, C16:1, C20:0 y C20:5 y
Tabla 6. Cargas de los cinco primeros factores con sus valores propios y la varianza que explican.
Variable F1 F2 F3 F4 F5
Figura 1. Contribucin de los cidos grasos de la tabla original de datos a los dos primeros nuevos factores (F1 y F2).
Figura 2. Grfico Biplot conteniendo los loadings de los dos primeros factores (lneas continuas) y los scores de dichos factores (pun-
tos que representan las distintas muestras analizadas).
los que tienden hacia abajo (factor 2 negativo), que son que deberan denominarse helados de base lctea.
C18:1, C18:2, C18:3, C20:1 y C21:0.
En la parte inferior derecha (factor 1 positivo, factor
Cuando superponemos sobre dicho grfico el que co- 2 negativo), zona de predominio de C18:1, C18:2,
rresponde a la contribucin de las variables (helados, C18:3, C20:1 y C21:0, aparecen agrupados los puntos
aceites etc.) o grfico correspondiente a los scores de que corresponden a los aceites de oliva (OV, OI, OS),
los dos primeros factores, aparecen una serie de pun- girasol (GI), maz (MA) y palma (PA), adems de la
tos que corresponden a cada muestra original. Al obser- margarina (MR). En esta zona aparecen dos tipos de
var cmo se distribuyen dichos puntos podemos expli- helados artesanales AA (de almendra) y TR (de turrn),
car las similitudes entre los mismos. De este modo, junto con la almendra, cuya composicin grasa deter-
vemos que a la izquierda de la figura (zona de predo- mina estas posiciones.
minio de los cidos grasos de cadena corta) han apare-
cido la gran mayora de las muestras de helados de los Aisladamente aparecen las muestras de aceite de
denominados industriales (puntos que comienzan con Colza (CO), probablemente por su mayor contenido en
las letras Y, H y U), junto con el punto que corresponde C18:3, la manteca de cerdo (MN) cuya composicin es
al aceite de coco (CC). Esto confirma la aseveracin de mayoritariamente C16:0, C16:1, C18:0, C18:1 y C18:2
que la composicin de estos helados es compatible con y dos muestras de helado industrial, uno de sabor a
la del aceite de coco, o lo que es igual, con que hayan nata (HN) y otro a chocolate (HC). En la parte superior
sido elaborados con este tipo de aceite o grasas prepa- derecha del diagrama aparece separada tambin del
radas a partir del mismo. resto la muestra de huevo lquido, cuya composicin
grasa difiere del resto.
En la parte superior derecha del grfico, factores 1 y
2 positivos aparecen agrupados los puntos correspon-
3.2. Anlisis cluster
dientes a tres helados artesanales (AV, AF y TV) junto
con el punto correspondiente a leche entera y al de la A diferencia del anlisis en factores, el anlisis clus-
mantequilla. Esto significa que estas muestras de hela- ter es un mtodo de reconocimiento de pautas no su-
dos artesanales son compatibles con elaboracin con pervisado que utiliza toda la informacin de la tabla de
leche entera o mantequilla, por lo que seran los nicos datos original. En la Figura 3 puede observarse el den-
drograma o diagrama en forma de rbol correspon- muestras HN y HC, correspondientes a dos helados co-
diente a las variables, es decir los cidos grasos, que ha merciales que tambin aparecieron antes de forma in-
sido obtenido usando el mtodo de linkage de Ward. dividual lo hacen ahora cerca del aceite de palma (PA).
En la parte de la izquierda puede observarse una agru- En otra rama aparecen la leche entera y la mantequilla
pacin en la que estn los cidos grasos de cadena junto con tres helados artesanales (de vainilla y fram-
corta (del C8:0 hasta el C14:0), junto con el C22:6. El buesa). Finalmente aparecen las muestras MP (man-
resto de los cidos grasos se agrupan en otro cluster teca) y LH (huevo lquido), sin correspondencia apa-
que a su vez se subdivide en otros dos, El situado ms rente con el resto.
a la derecha contiene los cidos grasos C18:1, C18:2,
C18:3 y C21:0, que prcticamente se corresponde con Estos resultados confirman los obtenidos con el an-
los que se agrupaban en el grfico de cargas con fac- lisis multivariante, mostrando que el perfil de cidos
tores 1 y 2 negativo. El resto se corresponde a su vez grasos permite determinar el origen de la grasa con el
con los que tenan factores 1 y 2 positivos. que se elaboran los helados.
La consecuencia ms importante es la diferencia nu- 3. Daz A, Orzez M T, Martnez S. Clasificacin y composicin de he-
tricional entre ambos tipos de helados, por lo que su- lados variados. Alimentaria: Revista de Tecnologa e higiene de
los alimentos. 1997; 287: 61-66.
gerimos que en el etiquetado debera figurar obligato-
riamente el tipo de grasa utilizado en la elaboracin, 4. Griguol V, Vicario IM, Len M. Grasas y Aceites 2003; 54(1): 19-23.
para que el consumidor pueda tener una idea clara del 5. Griguol V, Vicario IM, Len M. Grasas y Aceites, 2007; 58(1): 87-98.
alimento que toma. 6. Barrado E, Mayo MT, Tesedo A, Romero H, de la Rosa F. Fat com-
position of several fast food. Nutr Hosp 2008; 23(3): 150-160.
REFERENCIAS 7. Barrado E, Prieto F, Sanz MA, Tesedo A, Romero H. Estudio com-
parativo de la composicin en cidos grasos de diversos alimen-
1. Reglamentacin tcnico-sanitaria para la elaboracin, circulacin tos cocinados de forma casera y otros tratados industrialmente,
y comercio de helados y mezclas envasadas para congelar. RD Nutr Clin 2007; 27: 20-27.
618/1998 de 17 de Abril. BOE 28 Abril 1998.
8. Barrado E, Sanz MA, Tesedo A, Romero H, Rodrguez JA.
2. Vidal C, Coord. El libro blanco de los helados. VVAA. Semfyc edi- Caracterizacin de mantequillas, margarinas y aceites por su per-
ciones. 2004. fil de cidos grasos. Nutr. Clin 2006; 26(1): 17-24.