3. La cepa debe estar libre de contaminantes, incluyendo fagos. 4. Debe poder conservarse por largos perodos de tiempo, sin perder sus caractersticas particulares. 5. Los requisitos nutricionales deben ser satisfechos con medios de cultivos baratos. 6. El microorganismo debe realizar el proceso de fermentacin en poco tiempo. 7. Debe tener alto rendimiento del producto esperado. 8. Si el producto se libera al medio debe ser fcil de extraer. Pueden obtenerse de: Fermentaciones naturales: vino, pan, queso, materiales en descomposicin. Animales y plantas enfermos: vacunas. Suelo: es el mayor almacn, pero tambin el ms difcil de manejar ya que se puede encontrar todo tipo de microorganismo y en una concentracin de 100 millones por gramo de suelo (gran variedad y cantidad). Colecciones internacionales de cultivos tipo Para obtener nuevos productos metablicos se aslan cepas de ambientes extremos como: grandes altitudes hbitats fros aguas marinas profundidades en los ocanos desiertos giseres campos de petrleo Las industrias poseen su propia coleccin de organismos. La mayora ha sido mejorada a travs de mutaciones o ingeniera gentica. Estos organismos tienen patentes y pueden ser utilizados en: reacciones especficas de biosntesis reacciones de degradacin Primero se realiza una bsqueda (Screening). Como es la primera se le llama bsqueda primaria. En esta bsqueda se detectan y aslan microorganismos potencialmente tiles para la industrial de entre una poblacin compleja de organismos utilizando procedimientos selectivos. Bsqueda secundaria En esta etapa se estudian los microorganismos aislados en la bsqueda primaria para separar los que tienen inters potencial de los que tienen inters real. Adems, en esta etapa se mejoran las cepas seleccionadas. Generalmente se parte de una poblacin mixta (suelo, fermentaciones naturales) donde existe tanto una gran cantidad como variedad de microorganismos potencialmente tiles que debemos seleccionar. En esta primera bsqueda se utiliza un medio selectivos donde crezca el tipo de microorganismo que nos interesa aislar. A este medio selectivo se le aaden inhibidores para eliminar los que no nos interesan. Ejemplos: medios reductores para condiciones anaerbicas, medios con antibiticos para inhibir el crecimiento de un grupo particular (cloramfenicol para hongos) Hay que tener en cuenta la fuente de carbono, la cantidad de nitrgeno, la aireacin, la temperatura, el pH e inhibidores. Por ltimo se obtiene un cultivo puro de aquellos microorganismos que hemos aislado para su posterior estudio. Los microorganismos productores de antibiticos incluyen los gneros bacteriales: Bacillus Pseudomonas Actinomicetos Del grupo de los hongos tambin se puede obtener antibiticos. Un gnero muy importante dentro de stos es Penicillum. Temperatura: Hongos 20-22C; Actinomicetos 28C pH: Hongos pH cido; Bacterias pH neutro Oxgeno: Todos los productores son aerobios (necesitan O2) Carbono: Los actinomicetos usan glicerol, quitina o almidn. Nitrgeno: Los actinomicetos usan casena, arginina (amino cido) o asparagina (amino cido). La bsqueda se realiza de forma similar al de la produccin de antibiticos, aunque en este caso al medio de cultivo le falta el factor de crecimiento buscado, de tal manera que el microorganismo a prueba slo crecer alrededor de las colonias que produzcan este factor de crecimiento formando un halo de crecimiento. A escala industrial se utilizan como microorganismos productores de amino cidos a las bacterias. Como microorganismos productores de vitaminas se utilizan levaduras y hongos filamentosos (eucariotas). Para la bsqueda de estos microorganismos se debe utilizar en el medio el sustrato de la enzima que queremos, por ejemplo si buscamos: Amilasas ----> debemos aadir almidn Celulasas ----> debemos aadir celulosa Si el organismo a usarse es aislado de fuentes naturales como agua, suelo, plantas y desechos el xito depende de: Aislamiento directo Enriquecimiento del cultivo El microorganismo se cultiva en presencia de un antibitico u otro microorganismo contra el cual se requiere la accin microbiana. Luego se observarn halos de inhibicin, lo que indica que el microorganismo inhibi al otro. El aislamiento de cepas se lleva a cabo siguiendo el siguiente esquema a partir de una muestra de suelo: La muestra de suelo se resuspende en agua estril. El sobrenadante se diluye. Muestras de estas series de diluciones se siembran sobre varios medios de cultivo (dependiendo del tipo de microorganismos que queramos aislar) y luego se incuban. Se aslan colonias separadas de distinta morfologa y se purifican por resiembra. Los cultivos puros se mantienen en tubos de ensayo como cultivos en medio slido listos para realizar las pruebas de seleccin. Favorece el crecimiento de un tipo de microorganismo utilizando condiciones ptimas, evitando as el crecimiento de microorganismos no deseados. Aqu el organismo dominante es el deseado, facilitando as su posterior aislamiento. Las siguientes son lugares donde encontramos cultivos de microorganismos, en estos lugares podemos comprar los microorganismos deseados. American Type Culture (bacterias, levaduras, algas, actinomicetos, mohos, protozoos, virus y lneas celulares (U.S.A) Collection Nationales de cultures de Microoganismes (Francia) Northern Regional Research Laboratory (U.S.A.) National Collection Type Culture (Londres) Waites, M.J.; Morgan, N.L.; Rockey, J.S. & Higton G. (2001). Industrial Microbiology, an Introduction. Blackwell Science. 288pp.