Cogumelos: Uma Fonte Promissora de Compostos Ativos para O Desenvolvimento de Bioprodutos Farmacêuticos E Nutracêuticos

9
CAPTULO
COGUMELOS: UMA
FONTE PROMISSORA
DE COMPOSTOS
ATIVOS PARA O
DESENVOLVIMENTO
DE BIOPRODUTOS
FARMACUTICOS E
NUTRACUTICOS
Carlos Ricardo Soccol
Francisco Menino Destfanis Vtola
Roslia Rubel
Margarete Kimie Falbo
Luiz Alberto Junior Letti
Marcelo Bellettini
Vanete Thomaz Soccol
9.1 INTRODUO
Existe grande diversidade de macromicetos no mundo, e a rica variedade

de formas e cores que eles apresentam se reflete na diversidade de estruturas
moleculares que os compem. Alguns cogumelos so comestveis, outros, ou
316 Biotecnologia Aplicada Agro&Indstria
no apresentam caractersticas organolpticas agradveis ou so txicos.

Algumas espcies produzem substncias alucingenas e outras produzem
substncias potencialmente letais, outras ainda contm importantes substn-
cias que podem ser usadas para fins medicinais, capazes de curar ou tratar
as mais diversas enfermidades1,2.
Alguns dos benefcios proporcionados pelos cogumelos podem ser obti-
dos simplesmente incluindo cogumelos comestveis e produtos derivados na
alimentao3. Outra possibilidade a adio de extratos de cogumelos ricos
em substncias ativas como suplemento em alimentos, como massas, bebi-
das, cereais, gelatinas e temperos. Esses alimentos com propriedades fun-
cionais, denominados nutracuticos 4, contendo cogumelos e/ou substncias
derivadas apresentam um grande potencial de mercado, ainda quase total-
mente inexplorado no Brasil5-7.
O emprego de cogumelos medicinais para o preparo de frmacos requer
a identificao e purificao de compostos ativos. Trata-se de um campo j
relativamente desenvolvido na sia, Europa e Amrica do Norte, que repre-
senta um potencial estratgico para o Brasil, levando-se em conta a admir-
vel biodiversidade nacional de cogumelos8,9. Em todo o pas observa-se um
crescimento no nmero de pesquisadores e de laboratrios envolvidos em
variadas etapas de pesquisa, desde o levantamento da biodiversidade e iso-
lamento de novas espcies at a avaliao de propriedades farmacolgicas,
identificao e caracterizao molecular de princpios ativos.
Neste captulo esto descritos alguns exemplos de atividades farmacol-
gicas de substncias produzidas por cogumelos, com base em relatos ampla-
mente documentados na literatura cientfica, incluindo atividades antimi-
crobianas e antiparasitrias, imunomoduladoras e antitumorais, preveno/
tratamento de doenas cardiovasculares e como agentes antioxidante. Tam-
bm inclumos uma reviso geral dos fundamentos cientficos e desenvol-
vimentos tcnicos ao longo da histria, alm de breves revises acerca de
trs importantes espcies de cogumelos medicinais: Ganoderma lucidum,
Cordyceps militaris e Agaricus subrufescens. Como exemplo de aplicao
tcnica, destacamos a produo de polissacardeos bioativos a partir de cul-
tivos miceliais, por ser uma classe de substncias bem estudada e por j
existirem produtos no mercado mundial com base nessa tecnologia. Um pro-
tocolo para produo e recuperao, em escala laboratorial, de exopolissa-
cardeos a partir do cultivo micelial submerso de G. lucidum apresentado,
assim como um mtodo analtico para estimar a produtividade do processo,
de modo a fornecer subsdios para realizar experimentos de otimizao da
produo e da recuperao/purificao.
Cogumelos: uma fonte promissora de compostos ativos para o desenvolvimento de bioprodutos farmacuticos e nutracuticos 317
Muitas perspectivas emergem quanto ao futuro da biotecnologia de

macromicetos no desenvolvimento de produtos farmacuticos e nutracuti-
cos. Espera-se que o presente captulo contribua para esse objetivo, difun-
dindo informaes que estimulem novas pesquisas, direcionadas para a gera-
o de novos e melhores medicamentos e alimentos funcionais, com vistas
manuteno e promoo da sade e qualidade de vida da populao.
9.2 FUNGOS/COGUMELOS: ASPECTOS GERAIS E BIOLOGIA
Os fungos so um grupo de organismos distinto dos vegetais e dos ani-

mais, porm evolutivamente mais prximos dos vegetais e dos animais que
de qualquer outro grupo de organismos. Os fungos apresentam quitina
(comum em insetos) e glucanas (comuns em vegetais) na composio das
suas paredes celulares. Em geral, crescem fixos sobre substrato nutritivo,
como os vegetais, porm, diferentemente dos vegetais, os fungos no apre-
sentam clorofila, e dessa forma no so capazes de realizar fotossntese.
Retiram a energia e o material que precisam para se desenvolver da digesto
de matria orgnica. So, portanto, heterotrficos, como os animais. Podem
apresentar o papel ecolgico de decompositores, parasitas, comensais ou
simbiontes8,10.
Existem fungos unicelulares, como a levedura Saccharomyces cerevisae,
utilizada h milnios pela humanidade para produzir po, cerveja e vinho.
Esses organismos so tambm o ponto de partida para a fabricao de bebi-
das destiladas e de etanol combustvel. Outros fungos so multicelulares e
formam redes de filamentos. Cada filamento, formado por clulas alonga-
das, denominado hifa. Uma rede de hifas se denomina miclio. Os fungos
filamentosos podem se reproduzir de maneira assexuada, pela fragmenta-
o das hifas ou por reproduo sexuada ou assexuada, pela produo de
esporos. Alguns dos fungos filamentosos produzem esporos em estruturas
microscpicas. Outros so capazes de formar corpos de frutificao macros-
cpicos, que so tecnicamente chamados carpforos e popularmente conhe-
cidos como cogumelos (Figura 9.1). Tais fungos so cientificamente denomi-
nados macromicetos ou macrofungos8.
O ciclo de vida dos cogumelos pode ser dividido em pelo menos trs fases:
esporo, miclio e corpo de frutificao, tambm chamado carpforo (Figura
9.2). Dadas as condies adequadas de temperatura, umidade e nutrien-
tes, os esporos germinam, dando origem a estruturas filamentosas, multi-
celulares, denominadas hifas, que secretam enzimas digestivas e absorvem
Figura 9.1 Leveduras (esquerda)11, bolor (centro)12, cogumelos (direita).
Figura 9.2 Representao esquemtica do ciclo de vida dos cogumelos. Ver texto para maiores detalhes.
molculas do substrato. Um conjunto de hifas denominado miclio. Cada

esporo d origem ao que se denomina miclio primrio (formado por clu-
las mononucleadas haploides). Quando miclios primrios compatveis se
encontram, pode ocorrer plasmogamia (fuso de clulas), gerando miclio
secundrio (clulas binucleadas, ncleos haploides). O miclio secundrio
tem o potencial de gerar corpos de frutificao sob determinadas condies.

Nos carpforos, mais especificamente na regio do himnio (lamelas nos
champignons, por exemplo), so formadas estruturas (ascos ou basdios)
onde ocorrem fenmenos de fuso e recombinao entre os ncleos, gerando
novos esporos e fechando o ciclo (Figura 9.2).
Cogumelos decompositores primrios (por exemplo, Lentinus spp. e
Pleurotus spp.) so capazes de degradar e assimilar uma imensa variedade
de molculas orgnicas, podendo ser cultivados em substratos que incluem:
serragem, cepilho, lascas e toras de madeira, palhas, bagaos, farelos, cascas,
gros e substratos lquidos, como melao e milhacina13. J os decomposito-
res secundrios, como os Agaricus spp. (por exemplo, champignon de Paris
e cogumelo-do-sol) necessitam substratos previamente compostados (pr-
-decompostos por outros micro-organismos) 14. Dessa forma, os cogumelos
podem ser utilizados como ferramentas para reciclar resduos orgnicos15.
Em relao ao aspecto nutricional, os cogumelos so uma tima fonte
alimentar (Tabela 9.1), e a composio em carboidratos, gorduras, vitami-
nas varia segundo a espcie e tambm segundo o substrato utilizado no
seucultivo16.
Tabela 9.1 Composio fsico-qumica, em peso seco, de cogumelos. Adaptado de Trione e Michaels (1977, apud Yokomizo & Bononi,
1985)17
PROTENA CARBOIDRATO VALOR

COGUMELO GORDURA FIBRA
(NX4,38) TOTAL ENERGTICO
(%) (%) (%) (%) (KCAL/100G)
Agaricus bisporus 23,9 a 34,8 51,3 a 62,5 1,7 a 8,0 8,0 a 10,4 328 a 381
Auricularia spp. 4,2 a 7,7 79,9 a 87,6 0,8 a 9,7 11,9 a 19,8 347 a 384
Flammulina velutipes 17,6 73,1 1,9 3,7 378
Lentinula edodes 13,4 a 17,5 67,5 a 78,0 4,9 a 8,0 7,3 a 8,0 387 a 392
Pleurotus ostrearus 10,5 a 30,4 57,6 a 81,8 1,6 a 2,2 7,5 a 8,7 345 a 367
Volvariella volvacea 21,3 a 43,0 50,9 a 60,0 0,7 a 6,4 4,4 a 13,4 254 a 374
Os cogumelos so constitudos, de um modo geral, de 90% de gua, ele-

vados teores de protena, vitaminas (B1 e C), riboflavina, biotina e niacina.
Apresentam todos os 21 aminocidos essenciais, sendo ricos em sais mine-
rais e fibras de baixo valor calrico (30 cal/100 g de cogumelo)18. Desco-
briu-se tambm que so capazes de produzir vitamina D, quando brevemente
expostos ao sol19.
Mais de duas mil espcies de cogumelos so reconhecidas como comest-

veis. Sabe-se que outras dezenas produzem substncias alucingenas, como
a psilocibina (cogumelos do gnero Psilocybe) e a muscarina (Amanita
muscaria) 20,21 (ver Figura 9.3). Alm disso, existem dezenas de espcies
potencialmente letais. Como exemplo, pode ser citado que alguns miligra-
mas por quilograma de massa corprea da substncia alfa amanitina, pro-
duzida por Amanita phalloides (o chapu-da-morte) e Galerina marginata,
podem levar um indivduo saudvel a bito22 (ver Figura 9.4). Contudo, h
espcies de macromicetos que contm importantes substncias medicinais2,23.
Figura 9.3 Exemplos de macromicetos que produzem substncias alucingenas. Psylocibe cubensis (esquerda)24 e Amanita muscaria
(direita).
Exemplos de atividades farmacolgicas experimentalmente confirmadas,

exibidas por substncias encontradas em cogumelos, so: hipolipidmica,
antiarterosclertica27,28, hipocolesterolmica e diurtica (importantes na pre-
veno e tratamento de doenas cardiovasculares), imunomoduladora (que
resulta indiretamente em atividade antitumoral, aumento de resistncia a
infeces e amenizao de reaes alrgicas)29, antioxidante 30, hepatopro-
tetora, antiparasitria, anti-inflamatria, antidiabtica31,32 e moduladora da
produo de hormnios3,33.
Figura 9.4 Exemplos de macromicetos que produzem substncias letais. Amanita phalloides (esquerda) 25 e Galerina marginata
(direita)26.
9.3 USO TRADICIONAL E CONFIRMAES CLNICAS
Indcios na literatura e histria da humanidade apontam que os seres

humanos vm utilizando cogumelos com finalidades medicinais h vrios
milnios. Os registros formais mais antigos de propriedades medicinais de
cogumelos esto em livros de medicina tradicional chinesa e datam de mais
de 2 mil anos 34. Porm, h hipteses de que essa histria seja muito mais
antiga. Foram encontrados, na fronteira entre a Itlia e a ustria, os restos
mortais altamente conservados de um homem, que viveu em meados de 3300
a.C. Esse indivduo portava uma bolsa com fragmentos de cogumelos de
espcies no comestveis, possivelmente para utilizao medicinal35.
Os egpcios destinavam os cogumelos para a alimentao dos nobres, e
os romanos os consideravam comida dos deuses 36. Algumas religies anti-
gas, como a de povos astecas gregos, empregavam cogumelos alucinge-
nos em seus rituais 21. Povos nativos do Brasil apresentam conhecimentos
sobre a utilizao alimentcia e medicinal de vrias espcies de cogumelos.
Os tupis-guaranis utilizam uma espcie de cogumelo chamada Pycnoporus
sanguineus com finalidades medicinais. Os caingangues incluem a esp-
cie Pleurotus pulmonarius na sua alimentao 9. Os ianommis, da Ama-
znia, conhecem e utilizam vrias espcies para finalidades alimentcias
emedicinais37.
Apesar de existirem registros antigos do conhecimento e utilizao de

cogumelos, o cultivo apenas foi viabilizado mais recentemente, na era crist13.
Os primeiros cogumelos cultivados foram do gnero Auricularia, na China,
por volta de 400 d.C.;o domnio do cultivo do shiitake (Lentinula edodes),
tambm na China, foi registrado em torno de 600d.C. O champignon de
Paris (Agaricus bisporus) apenas comeou a ser cultivado em meados de
1600d.C.
Nas ltimas dcadas, foram desenvolvidas tcnicas para o cultivo de deze-
nas de espcies de cogumelos, inclusive algumas espcies de trufas. Porm,
o cultivo de diversas espcies permanece um desafio a ser vencido. Vrios
fatores so bastante complexos, tais como as interaes entre simbiontes
(rvore/cogumelo, por exemplo) e as relaes parasita/hospedeiro (cogu-
melo/inseto, por exemplo).
A utilizao teraputica milenar de cogumelos e as novas tecnologias de
produo motivaram uma srie de estudos para avaliar a bioatividade de
diversas substncias produzidas por esses organismos. Muitos artigos cient-
ficos confirmaram algumas das propriedades medicinais alegadas pela medi-
cina tradicional38-40.
A Tabela 9.2 mostra resultados obtidos em experimentos clnicos envol-
vendo substncias ativas derivadas de cogumelos.
Tabela 9.2 Atividades farmacolgicas de substncias extradas de cogumelos, confirmadas em testes clnicos
EFEITO/DOENA SUBSTNCIA ESPCIE DE COGUMELO MECANISMO/ DETALHES ANO REFERNCIAS

Prolongamento da sobrevida em
Anticncer (gstrico) Polissacardeo K lentinana Lentinus edodes 2009 41
pacientes com metstase
Supresso da atividade de aromatase
Extratos aquosos Agaricus bisporus e da proliferao de clulas tumorais. 2001 42
Anticncer (mama) Diminuio na produo de estrgeno.
Triterpenos hidroxilados Diversas Supresso da sinalizao Akt/NF-B 2008 43
Polissacar- Estimula as respostas imunolgicas 2007
Coriolus versicolor CM-10 44, 45
deo K (PSK) inata e adaptativa 2006
Inibe a proliferao de clulas
Lectina A. bisporus (ABL) 1993 46
Anticncer (coloretal) tumorais humanas invitro
Induo da expresso de protenas pr-
Extrato aquoso Inonotus obliquus -apoptticas e inibio da expresso 2009 47
de protenas antiapoptticas
A. blazei Murill Aumento da atividade de clulas NK. Alvio
Extrato no especificado 2004 48
Anticncer Kyowa (AbMK) de efeitos colaterais da quimioterapia
(cervical, ovariano, Lingzi Ganoderma lucidium
endometrial) 2010
Lentinana Lentinus edodes Efeitos antiproliferativos via induo da apoptose 49, 50
2008
Clitocinet Leucopaxillus giganteus

Melhora o international prostate symptom
Extrato etanlico G.lucidum score (IPSS) de homens com sintomas do trato 2008 51
Anticncer (prstata) urinrio inferior, via inibio de 5--redutase
2004
Extrato no especificado G. lucidum Induo da apoptose. Inibio da angiognese 52, 53
2005
Anticncer
Omphalotus olearius Atividade antitumoral e efeitos
(pancretico Irofulven (citotoxina) 2000 54
(no comestvel) pr-clnicos positivos
slido avanado)
Aumento na produo de citocinas in
A. blazei 82%; Hericium
vitro Reduo na produo de IL-1-
Imunomodulao Andosan erinaceus 14,7%; 2009 55
(97%), TNF- (84%), IL-17 (50%) e IL-2
Grifola frondosa 2,9%
(46%). Atividade antioxidante in vivo
Diminuio na produo de TNF induzida
Imunomodulao
Alfa-glucanas A. bisporus por lipopolissacardeos em 69%. Decrscimo 2010 56
(hipercolesterolemia)
na produo de IL-12 e IL-10 in vivo
Imunomodulao Aumento de sobrevida e funes
Glucana Trametes versicolor 2010 57
(cncer) imunolgicas melhoradas
Efeitos sobre clulas NK, macrfagos, clulas
Imunomodulao
Vrios extratos Vrias espcies T e produo de citocinas. Ativao de 2007 58
(doenas variadas)
vias mitognicas por quinases (MAPK)
Extrato AbM (com Aumento da resistncia insulina, devido ao
Diabetes (tipo II) A. blazei Murill (AbM) 2007 59
metformaina e gliclazida) aumento na concentrao de adiponectina
Reduo significativa na presso
Extrato no especificado Pleurotus ostreatus sangunea, glicose sangunea, colesterol 2007 60
Doenas total e triglicrides (in vivo)
cardiovasculares
Polissacardeos ligados a Efeito hipolipidmico e de controle de peso via
A. blazei; Lentinus edodes 2002 61
protenas (A-PBP e L-PBP) mecanismo envolvendo absoro de colesterol
Aumento de pontuao em funes cognitivas
Extrato no especificado Hericium erinaceus 2009 62
de pessoas com problemas cognitivos leves
Protege contra a morte celular neuronal
Dilinoleoil- causada pela toxicidade do peptdeo
Sade mental
fosfatidiletanolamina H. erinaceus beta-amiloide (A beta) e estresse oxidativo; 2008 63
e cognio
(DLPE) aumento de pontuao em funes
cognitivas de pessoas com demncia
HericenonasC Induz fator de crescimento de nervos
Hericium erinaceus 2008 63
H;Erinacinas A-I (NGF) (in vitro e in vivo)
Decresce concentraes de aspartato
Agarius blazei aminotransferase e alanina aminotransferase,
2008 64
Murill (AbM) normalizando as funes do fgado
Hepatite B de pacientes com hepatite B
Atividades hipoglicmica, antiviral e
Ganopoly G. lucidum 2005 65
protetora do fgado em hepatite crnica
Farnesil hidroquinona,
Antiviral (HIV) G. colossum Inibio da protease HIV-1 2009 66
ganomicina I
Antiviral A. subrufescens (A.
Polissacardeos Age no estgio inicial da replicao viral 2007 67
(poliomielite) brasiliensis, A. blazei)

Inibe a proliferao e a diferenciao das clulas
Th2 e reduz a expresso de citocinas, em
Asma Extrato no especificado Cordyceps sp. clulas mononucleares do sangue perifrico. 2010 68
Alivia inflamao crnica por aumentar
as concentraes de IL-10 (in vivo)
Atenuam sintomas relacionados constipao
Constipao Fibra Auricularia spp. 2004 69
sem efeitos colaterais significativos (in vivo)
Diversos laboratrios passaram a extrair substncias bioativas a partir

dos cogumelos e a elaborar uma srie de produtos alimentcios, medicinais e
cosmticos. Tcnicas foram desenvolvidas tambm para produzir molculas
bioativas a partir de massas miceliais cultivadas em substratos slidos70,71e
lquidos, encurtando assim o tempo de fabricao e permitindo mais fcil
assepsia e controle dos processos 5,27,72. Alguns produtos que incorporam
estas tecnologias j esto sendo fabricados e comercializados em vrios pa-
ses. Muitas substncias derivadas de cogumelos esto em fase de testes clni-
cos de eficcia e toxicidade em todo o mundo.
A seguir, abordaremos com mais profundidade algumas das mais impor-
tantes espcies de cogumelos medicinais utilizadas como fonte de molculas
ativas para produtos farmacuticos e nutracuticos, ao longo da histria.
9.3.1 Ganoderma lucidum
Ganoderma lucidum um cogumelo medicinal conhecido e utilizado na

China, Japo e Coreia h milnios e figura nos textos mais antigos de medi-
cina tradicional chinesa como um medicamento superior, indicado no tra-
tamento de uma srie de enfermidades e sem efeitos colaterais (Figura 9.5).
No apenas propriedades medicinais eram atribudas a esse cogumelo, mas
at mesmo alegria e prosperidade seriam conferidas queles que o consu-
missem. Era um cogumelo relativamente raro de encontrar e, dessa forma,
altamente valioso, destinado nobreza e aos mais ricos.
Shen Nong no seu Pen Tsao Jing, um antigo texto medicinal chins com
2000 anos diz que o sabor amargo, a sua energia neutra, no tem toxici-
dade. Cura a acumulao de fatores patognicos no peito. bom para o QI
da cabea, incluindo actividades mentais [...] O consumo em longo prazo
deixa o corpo mais leve; nunca envelhecers. Prolonga os anos74. Um livro
mdico chins denominado de O Bencao Gangmu, publicado no sculo XVI,
mostra tambm uma possvel ligao entre a pesquisa moderna e o conhe-
cimento popular ao descrever este cogumelo: Afeta positivamente o QI do
Figura 9.5 Ganoderma lucidum73.
corao, reparando a zona peitoral e beneficiando aqueles que tm um peito

congestionado. Tomado ao longo de grande perodo de tempo mantm a
agilidade do corpo, e os anos so prolongados [...]75.
O cultivo atualmente dominado, o que popularizou os produtos deriva-
dos e estimulou um grande nmero de pesquisas ao redor do mundo sobre
as diversas propriedades medicinais alegadas pela cultura popular 39. Con-
tudo, o preo desse cogumelo continua elevado, o que o torna disponvel
para poucos. Esta provavelmente a espcie de cogumelo medicinal mais
estudada no mundo at hoje. Sabe-se que algumas substncias produzidas
por G. lucidum apresentam marcantes efeitos farmacolgicos, com destaque
para polissacardeos e triterpenos76.
Um grande nmero de atividades farmacolgicas atribudas aos polissa-
cardeos oriundos deste cogumelo mediado pela atividade imunomodula-
dora dessas substncias, como: atividade antitumoral77, anti-inflamatria78,
antialrgica79 e aumento de resistncia a infeces.
Outras propriedades encontradas em substncias produzidas por G.
lucidum foram: atividade antioxidante, hipolipidmica28, hipocolesterol-
mica, hipoglicmica, antidiabtica32, antiangiognica e anti-HIV34,38. Foram
desenvolvidas tcnicas para a produo de substncias bioativas a partir
do cultivo micelial dessa espcie em meios slidos e lquidos, encurtando o
tempo de produo e facilitando a padronizao do produto final5.
Na Tabela 9.3 so apresentadas as substncias ativas encontradas em
G.lucidum e suas respectivas propriedades farmacolgicas.
So comercializados cogumelos secos, pulverizados, encapsulados, extra-

tos lquidos e em p, ricos em polissacardeos e produtos alimentcios suple-
mentados com G. lucidum, como caf e chocolate. Ainda no esto regu-
lamentadas a produo e o uso deste cogumelo e produtos derivados no
Brasil. Foi concluda no ano de 2015 a Consulta Pblica n14, de 15 de
maio de 2012, sobre produtos da medicina tradicional chinesa, realizada
pela ANVISA80. O projeto originalmente no contempla os cogumelos mais
especificamente, porm espera-se que o texto seja modificado para incluir
essas importantes fontes de substncias medicinais e nutracuticas. Com a
presso de grupos internacionais que visam introduzir produtos no Brasil,
de cultivadores brasileiros, de mdicos que prescrevem e pacientes que con-
somem esses cogumelos, de se esperar que tenhamos em breve posies
mais claras acerca da legislao que normatiza e regulamenta produtos desta
espcie e de outras da medicina chinesa.
Tabela 9.3 Substncias ativas encontradas em Ganoderma lucidum e seus respectivos efeitos
SUBSTNCIA EFEITOS ANO REFERNCIA

Imunomodulador, antitumoral 2008 77
Miclio Antioxidante, hipolipidmico,
2011 28
hipocolesterolmico
Anti-inflamatrio 2009 78
Inibio da produo de xido ntrico 2013 81
Triterpenos
Inibio da adipognese 2010 82
Antitumoral 2010 83
Antialrgico 2012 79
Polissacardeos Anti-hiperglicmico, anti-hiperlipidmico 2013 84
Anti-HIV 2013 34
Antioxidante, antidiabtico,
Proteoglicana 2014 32
nefroprotetor
Peptdeo glicana Hipoglicmico 1986 85
Extrato hidroalcolico
Antiangiognico, inibio da produo de xido ntrico 2004 86
(etanol 70%)
Apoptose, supresso da fosforilao de Erk1/2 estimulada
2008 e
Polissacaropeptdeos por estresse oxidativo, resultando na inibio da expresso 87, 88
2006
de c-fos e de fatores de transcrio AP-1 e NF-kappaB
9.3.2 Cordyceps militaris
Fungos ascomicetos do gnero Cordyceps tambm so conhecidos e uti-

lizados pelos chineses h milnios (Figura 9.6). Trata-se, em sua maioria de
cogumelos parasitos de insetos, relativamente raros e, assim, de preo ele-
vado. Ophiocordyceps sinensis uma espcie que ocorre naturalmente no
plat tibetano da China e margeando os campos elevados do Nepal, Buto
e ndia, usada tradicionalmente para uma srie de aplicaes medicinais90.
Acredita-se que a prpria coleta excessiva pode estar tornando esta espcie
cada vez mais rara.
Figura 9.6 Carpforo de Cordyceps militaris emergindo de um inseto89.
Atualmente se domina o cultivo micelial e de estromas de uma esp-

cie prxima, denominada Cordyceps militaris, que produz princpios ati-
vos semelhantes. Essa prtica viabiliza a produo dessas substncias em
escalaindustrial91,92.
Os compostos bioativos de Cordyceps geralmente so extrados de
corpo de frutificao (p e extrato), miclio (extrato e p) ou sobrenadante
dafermentao.
Dentre tais biocompostos destacam-se: polissacardeos extracelular e
intracelular, cordicepina, adenosina, guanosina, cordimina, lovastatina, cido
Gama Aminobutrico (GABA), ergosta-4,6,8, 22-tetraen-3-ona(ergona);
5,8-epidioxi-22E-ergosta-6,22-dien-3-ol; 5,8-epidioxi-22E-ergosta-
6,9(11),22-trien-3-ol; 5,6-epoxi-5-ergosta-7,22-dien-3-ol; 5,8--
epidioxi-24(R)-metilcolesta-6,22-dien-3-D-glucopiranosdio; 6-epoxi-
-24(R)-metilcolesta-7,22-dien-3-ol; miriocina; melanina; cordisinina A-E,
sitosterol, ergosterol, e serina protease93.
Para esses produtos, so citadas na literatura mais de 30 aes benficas
para o homem, quer como medicamentos quer como produtos nutracuticos.
As principais aes so: imunomoduladora, antifatiga, imunosupressora,
antimicrobiana, antitumoral, anti-inflamatria, antiglicmica, antioxidante,
anti-asma, produo de hormnio, antidepresso, anti-isquemia cerebral93.
Polissacardeos imunomoduladores e substncias com alto poder antio-
xidante so produzidas por C. militaris em cultivo micelial30,94. Esse cogu-
melo apresentou efeito hipolipidmico e normalizou nveis de testosterona
de camundongos expostos a dietas com alto contedo de lipdeos33.
Extratos desse cogumelo tambm vm demonstrando resultados promis-
sores no tratamento da asma: inibem a proliferao e a diferenciao das
clulas Th2 e reduzem a expresso de citocinas, por inibir a expresso do
mRNA GATA-3 e estimular a expresso do mRNA Foxp3 em clulas mono-
nucleares do sangue perifrico. Esses extratos aliviam inflamaes crnicas,
por aumentar as concentraes de IL-1068.
9.3.3 Agaricus subrufescens (A. brasiliensis, A. blazei)
Espcie nativa do Brasil, de taxonomia ainda controversa, conhecida

popularmente como cogumelo-do-sol (Figura 9.7). Estudos sugerem que
a espcie previamente identificada como Agaricus blazei e posteriormente
denominada A. brasiliensis pode ser a mesma espcie que ocorre na Amrica
do Norte com o nome de A. subrufescens. Independentemente da classifica-
o proposta, uma srie de propriedades farmacolgicas atribuda a esta
espcie pela medicina tradicional do interior do estado de So Paulo. Por
este motivo, na dcada de 1960, pesquisadores japoneses levaram espci-
mes nativos do Brasil (mais especificamente da cidade de Piedade, no inte-
rior do estado de So Paulo), para serem cultivados e estudados quanto
s suas propriedades medicinais. Atividades especialmente relacionadas
imunomodulao foram detectadas, inicialmente por pesquisadores japone-
ses e depois por vrios grupos de pesquisa ao redor do mundo, como: ativi-
dade antitumoral, antialrgica, anti-inflamatria e aumento de resistncia a
infeces40,95,96.
Em estudos clnicos com extratos deste cogumelo, foi detectado aumento

de atividade de clulas NK e alvio de efeitos colaterais da quimioterapia em
pacientes com cncer de ovrio, endomtrio e na regio cervical48.
Polissacardeos ligados a protenas A-PBP apresentaram efeito hipo-
lipidmico e de controle de peso via mecanismo envolvendo absoro
decolesterol61.
Extratos de A. blazei (A. subrufescens), em combinao com as substn-
cias metformina e gliclazida, resultaram em um aumento da resistncia
insulina em pacientes com diabetes tipo 2, devido ao aumento na concentra-
o de adiponectina59.
Descobriu-se tambm que polissacardeos de A. subrufescens apresentam
atividade antiviral, agindo no estgio inicial da replicao do vrus da polio-
mielite 67. Alm disso, extratos deste cogumelo resultam no decrscimo nas
concentraes de aspartato aminotransferase e alanina aminotransferase,
normalizando as funes do fgado de pacientes com hepatite B64.
Figura 9.7 Agaricus subrufescens97.
Apesar da utilizao culinria ser possvel, atualmente esta espcie culti-

vada apenas para utilizao medicinal. comercializada na forma de corpos
de frutificao secos em pedaos ou pulverizados, cpsulas de cogumelos
secos pulverizados ou de extratos ricos em polissacardeos. Contudo, apesar
dos estudos cientficos acerca das propriedades teraputicas de substncias
derivadas deste cogumelo, a legislao brasileira atualmente o aceita apenas

como cogumelo comestvel. Nenhuma propriedade farmacolgica pode ser
atribuda em material publicitrio dos produtos formulados contendo subs-
tncias oriundas deste cogumelo no pas. Tudo indica que, com o volume
de estudos realizados e o mercado que essas substncias podero alcanar,
os procedimentos para regulamentao da utilizao medicinal devam ser
concludos em breve. Este caso poder ser um dos pioneiros na rea de vali-
dao e regulamentao de frmacos derivados de cogumelos no Brasil.
9.4 POSSIBILIDADES TERAPUTICAS DE COGUMELOS
Com base em informaes da utilizao tradicional e resultados experi-

mentais rigorosos, novos produtos esto sendo desenvolvidos. Na Tabela 9.4
so apresentadas algumas patentes de produtos formulados com metablitos
bioativos obtidos a partir de cogumelos para a preveno de doenas huma-
nas, prova do grande interesse industrial e farmacutico que os cogumelos
vm despertando.
Tabela 9.4 Patentes referentes a produtos contendo substncias ativas de cogumelos
ANO PRODUTO REFERNCIAS

2013 Protena imunomoduladora de Ganoderma microsporum com atividade antitumoral 98
2013 Extratos antitumorais de Cyathus striatus 99
Polissacardeo de Lentinus spp. para aplicaes em produtos
2009 100
farmacuticos, nutracuticos e cosmticos
Polissacardeos produzidos por cultivo micelial no estado slido para
2009 70
aplicao em produtos nutracuticos e farmacuticos
2003 Cosmticos anidros contendo extratos de cogumelos 101
Extratos do miclio de Antrodia camphorata, compostos principalmente por
2003 102
polissacardeos, com atividade imunomoduladora, antitumoral e antiparasitria
Extratos ricos em polissacardeos, de diversas espcies de cogumelos, com
2003 atividades anticncer, imunomoduladora, antioxidante, hipotensiva e hipoglicmica, 103
principalmente para a fabricao de medicamentos injetveis
2002 Nutracuticos contendo cogumelos ou extratos 104
2002 Protenas de Tricholoma conglobatum e Scutellariae barbatae com atividade anticncer 105, 106
9.4.1 Antibiticos
Os fungos so notoriamente conhecidos como fontes de substncias com

atividade antibitica, com destaque para o primeiro antibitico (a penici-
lina), descoberta por Fleming em 1928. Fleming teve suas culturas bacteria-
nas contaminadas por fungos do gnero Penicillium. Percebeu que estes fun-
gos eram capazes de combater bactrias, e que deveriam produzir algum tipo
de substncia com ao antimicrobiana, o que foi comprovado em testes
subsequentes. Uma srie de tcnicas foi desenvolvida para aumentar a pro-
dutividade e a escala do processo para a obteno de penicilina, incluindo
tcnicas de mutao e manipulao gentica107.
Em 1950, foi encontrado um antibitico de nome pleuromutilina em
cogumelos do gnero Clitopilus 108. Plectasina, um peptdeo encontrado em
uma espcie de cogumelo chamada Pseudoplectania nigrella, apresentou
forte atividade antimicrobiana. Existem tcnicas para produzir plectasina
recombinante em grandes escalas109,110.
Os cogumelos so fonte de antibiticos naturais, de baixa e alta massa
molecular. Os compostos de baixa massa molecular so principalmente
metablitos secundrios, tais como terpenos, esteroides, antraquinona
e derivados do cido benzoico. J os metablitos de altamassa molecular
incluem, principalmente, os peptdeos e protenas.
Nas ltimas dcadas, numerosos estudos in vitro tm demonstrado que
essas substncias apresentam atividades contra as bactrias gram-positivas
e gram-negativas111-113 incluindo vrias cepas de bactrias patognicas trans-
mitidas por alimentos114. Tem sido sugerido que os efeitos antimicrobianos
do extrato de cogumelo podem ser indiretos. Foi demonstrado que uma fra-
o de polissacardeo de Agaricus brasiliensis pode aumentar a resistncia
do hospedeiro contra alguns agentes infecciosos, pela estimulao da ativi-
dade microbicida dos macrfagos115.
Estudos modelos demonstraram efeitos antibacterianos de A. blazei con-
tra Streptococcus pneumoniae em ratos com infeco sistmica. A falta de
um efeito antibitico em pneumococos em estudo in vitro e o aumento dos
nveis de citocinas MIP-2 e de TNF no soro de camundongos que receberam
extrato do fungo levanta a hiptese de que seu efeito protetor pode estar
relacionado ao sistema imunolgico nato116. Em estudo posterior, os autores
mostraram que um extrato de A. blazei pode proteger contra septicemia
bacteriana letal em um modelo de peritonite em rato117.
Extratos de A. bisporus tm maior nmero de estudos antimicrobianos
realizados. Seu extrato metanlico revelou atividade contra Bacillus subtilis,
em concentrao menor do que a ampicilina (MIC = 12,5 mcg/mL)7. O meta-

blito tambm foi eficiente contra B. cereus, Micrococcus luteus, M. flavus,
Staphylococcus aureus e S. epidermidis118-120.
9.4.2 Doenas cardiovasculares
Os cogumelos so uma fonte nutricional bastante saudvel, contendo bai-

xos nveis de lipdeos e acares e altas concentraes de fibras, vitaminas
e protenas. No apenas so alimentos de baixa caloria, mas tambm apre-
sentam substncias que podem colaborar na preveno e no tratamento de
doenas cardiovasculares.
Estatinas presentes nos cogumelos do gnero Pleurotus reduzem os nveis
de colesterol LDL no sangue. Substncias presentes no miclio das esp-
cies G.lucidum e A.subrufescens reduzem as concentraes de triglicrides
e de colesterol total no sangue 28. Foi demonstrado que lectinas, presentes
em cogumelos da espcie Pleurotus ostreatus, apresentam efeito supressor
doapetite121.
Vrias espcies de cogumelos comestveis, incluindo shiitake, cogumelos-
-ostra e maitake, apresentam altas concentraes de ergotioneina, amino-
cido com alto poder antioxidante e que pode atuar na preveno de doenas
coronarianas3.
Triterpenos produzidos por G. lucidum inibem a adipognese por um
mecanismo que envolve a reduo da expresso de um gene relacionado ao
processo, chamado SREBP-1c 82. Outras atividades farmacolgicas encon-
tradas em cogumelos e que podem contribuir para apreveno de doenas
cardiovasculares so: reduo da agregao de plaquetas e diminuio da
presso arterial122.
9.4.3 Antiparasitrios
Extratos de cogumelos tm sido avaliados na busca de medicamentos

contra protozorios, pois os medicamentos disponveis apresentam graves
efeitos colaterais. Extratos obtidos a partir do produto de cultivo micelial
em meio lquido de trs diferentes espcies de macromicetos comestveis
nativos, isolados pelo grupo (Pleurotus djamor, Lycoperdon marginatume
Oudemansiella canarii) foram avaliadas quanto sua atividade frente
Leishmania infantum, causadora da leishmaniose visceral 123,124. Foi utilizada
uma metodologia baseada na incorporao de timidina radiomarcada, em

microcultivos dos parasitas. Foram obtidos os seguintes valores de CPM
para cada tratamento testado: controle positivo (69520), controle nega-
tivo (1628113), P. djamor(1082272), L. marginatum(775139) e O.
canarii(806138). Duas espcies medicinais nativas (Ganoderma applanatum
e G. stipitatum) tambm foram testadas contra L. infantum, utilizando uma
metodologia envolvendo a incubao dos parasitas em microcultivos con-
tendo o reagente MTT125. Os resultados obtidos (absorbncia em 540 nm)
foram: controle positivo (0,2900,059), controle negativo (0,0430,102),G.
applanatum(0,0590,013) eG. stipitatum (0,2940,042).
Tambm os fungos tm sido relatados como inimigos naturais de nema-
toides parasitos de humanos, animais e plantas. So capazes de desenvolver
estratgias para infectar ou capturar nematdeos, para sua alimentao ou
sobrevivncia. Mais de 200 espcies de fungos nematfagos esto catalo-
gadas. So classificados em trs grupos com base no mecanismo de ao:
predadores, endoparasitos e parasitos de ovos126.
As espcies de fungos pertencentes ao grupo dos predadores formam
armadilhas como redes adesivas, anis constritores ou no, botes ao longo
de suas hifas, utilizando-as para capturar e penetrar no corpo do nematoide
e consumi-lo rapidamente127. Os fungos endoparasitos infectam os nematoi-
des atravs de seus esporos. A infeco pode ocorrer atravs da aderncia
do esporo cutcula do nematoide ou atravs da sua ingesto. Os esporos
germinam rapidamente e se difundem pela cavidade corprea, absorvendo
todo o contedo do nematoide 128. Os fungos parasitos de ovos fixam suas
hifas de modo a danificar a casca do ovo, provavelmente pela ao de enzi-
mas, facilitando a penetrao para, em seguida, provocar sua destruio129.
Um quarto grupo foi proposto por Li et al. (2000)130, que so os fungos
produtores de toxinas, como Pleurotus ostreatus, que imobiliza o nematoide
pela toxina produzida por suas hifas especializadas, as quais crescem qui-
miotropicamente em direo a boca de suas presas, digerindo-as126.Luo et
al. (2006) relataram que o fungo Stropharia rugosoannulata poderia repre-
sentar um quinto grupo, pois age mecanicamente, danificando a cutcula
do nematoide com uma estrutura redonda e espinhosa denominada spiny
ball131.
Estudos envolvendo fungos nematfagos na sade animal tiveram seu
incio no sculo XX, na Frana 132,133. Na dcada de 1990, vrios estudos
com fungos nematfagos foram realizados, impulsionados pela busca de
alternativas no controle da verminose, tendo em vista o crescente aumento
da resistncia anti-helmntica, principalmente em pequenos ruminantes,

relatado por diversos pesquisadores do Brasil 134-138 e de outras regies do
mundo139-141.
Estudo realizado na Holanda por Eysker et al. (2006)142 e outro na Sua
por Faessler et al. (2007)143 administraram por via oral em cordeiros a dose
diria de 5 105 e 10 6 clamidosporos de D. flagrans por quilograma, res-
pectivamente, por um perodo de quatro meses. No encontraram nenhum
efeito significativo em parmetros parasitolgicos como contagem de ovos
por grama de fezes, contagem de larvas de terceiro estgio (L3) na pastagem
e ganho de peso, embora a atividade do fungo tenha sido claramente visvel
nas coproculturas.
Os principais gargalos para o desenvolvimento de formulaes comerciais
de frmacos e nutracuticos antiparasitrios usando cogumelos so a produ-
o em larga escala, armazenamento e a forma de administrao144.
9.4.4 Imunomoduladores
Sabe-se que os cogumelos produzem substncias capazes de modular o

sistema imunolgico29,96. No apenas so capazes de estimul-lo, mantendo
as defesas altas, mas tambm podem amenizar as reaes imunolgicas exa-
cerbadas das alergias.
O aumento da resistncia a infeces, conferido pelo consumo de cogume-
los, est associado ativao do sistema imunolgico. Tambm a atividade
antitumoral dos cogumelos est em grande parte associada a essa ativao77.
As clulas natural killer (NK) so clulas diretamente relacionadas ao
combate a clulas estranhas, como clulas tumorais ou micro-organismos
patognicos. Os cogumelos contm substncias capazes de estimular as clu-
las NK, bem como outras populaes de clulas de defesa, como alguns tipos
de linfcitos T e B145.
Polissacardeos ricos em cadeias de -glucanas foram identificados como
responsveis por alteraes na contagem de diferentes tipos de clulas do
sistema imunolgico e na produo de molculas sinalizadoras, como cito-
cinas e xido ntrico 40,146. Polissacardeos de Antrodia camphorata, por
exemplo, estimulam a produo da citocina IL-2 por clulas Th1, enquanto
inibem a produo de IL-4 por clulas Th2102. Outras classes de compostos
imunomoduladores so: lectinas, terpenoides e protenas29. Triterpenos e o
extrato etanlico de G. lucidum inibem a produo de xido ntrico por
macrfagos81,86.
9.4.5 Antitumorais
Diversos so os mecanismos de ao antitumoral de substncias deri-

vadas de cogumelos. Algumas dessas molculas so capazes de combater
clulas tumorais, de maneira indireta, atravs da ativao do sistema imu-
nolgico 77. Dentre essas substncias indiretamente antitumorais se desta-
cam polissacardeos, frequentemente glucanas 72. Glucanas nada mais so
que cadeias de molculas de glicose. Contudo, dadas as diferentes possibi-
lidades de ligao entre as subunidades, existem diferentes tipos de gluca-
nas. Foram identificadas em cogumelos glucanas especialmente ativas, cuja
estrutura principal consiste em cadeias de glicose unidas por ligaes gli-
cosdicas do tipo -(13), com ramificaes do tipo -(16) (Figura 9.8).
Essas glucanas ativam linfcitos T, linfcitos B, clulas NK, neutrfilos, pela
interao com receptores celulares especficos. A massa, o padro de ramifi-
caes, a conformao espacial e modificaes qumicas podem influenciar
a atividade dessas molculas. Tambm j foram encontrados em cogume-
los alguns polissacardeos ativos formados por diferentes unidades monos-
sacardicas (heteropolissacardeos) e complexados com unidades proteicas
(proteoglucanas) 34. Existe uma srie de produtos comerciais cujos compos-
tos ativos so esses polissacardeos. Lentinana o nome de um polissacar-
deo extrado da espcie Lentinula edodes (o shiitake)100. A esquizofilana
extrada de Schyzophyllum commune. O PSK, tambm denominado Krestin
comercialmente, extrado de Trametes versicolor. Grifolana extrada do
cogumelo comestvel Grifola frondosa 147. Diversas outras espcies produ-
zem polissacardeos imunomoduladores, como G.lucidum 77,C.militaris 94 e
A.subrufescens96.
Figura 9.8 Cadeia de glucana (13) com ramificaes (16) (esquerda). Diagrama destacando posies das ligaes (direita).
Outras substncias derivadas de cogumelos apresentam atividade antitu-

moral por outros mecanismos, como substncias de baixa massa molecular
encontradas na espcie Cyathus striatus, que inibem a multiplicao das
clulas tumorais pela reduo da sntese de DNA e induo da apoptose99.
Protenas derivadas de Tricholoma conglobatum e Scutellariae barbatae
apresentam atividade antitumoral por inibir o crescimento de clulas endo-
teliais e a vascularizao de tecidos105,106.
Os mecanismos de atividade antitumoral de triterpenos de G. lucidum
sobre clulas HeLa foram estudados seguindo uma abordagem protemica.
Foram observados efeitos de modulao sobre a expresso de protenas
envolvidas na proliferao e morte celular, carcinognese, estresse oxidativo
e sinalizao de clcio83.
9.4.6 Antioxidantes
O cultivo micelial submerso de macromicetos est sendo estudado como

via para a produo de substncias antioxidantes a partir de resduos agroin-
dustriais, atualmente descartados em grande quantidade em nosso pas28.
O resduo lquido obtido pela prensagem do bagao de pupunha e a
gua residual de hidratao desse substrato depois de seco e reidratado
foram testados, com sucesso, como meio de cultivo para diferentes cepas
de macromicetos do gnero Pleurotus. Foram testadas guas residuais de
hidratao de duas diferentes fraes da planta (interna e externa) e cepas
de duas diferentes espcies (P. ostreatus e P. djamor). Os maiores valores
de atividade antioxidante foram obtidos com P. djamor cultivado na frao
interna, apresentando atividade antioxidante equivalente a Trolox (TEAC)
de 0,70,1g/mL148.
Um planejamento experimental do tipo Plackett-Burman de 12 fatores
foi aplicado para avaliar o efeito de cinco diferentes fatores (razo volume/
superfcie e adio de sulfato de cobre, sulfonato de lignina, perxido de
hidrognio e anilina aos meios de cultivo) como indutores de atividade da
enzima superxido dismutase (SOD) no produto do cultivo micelial sub-
merso de uma cepa de Pleurotus ostreatus. A adio de sulfonato de lignina
aos meios de cultivo praticamente triplicou os nveis de atividade enzimtica
dos produtos149.
Da mesma forma, um planejamento experimental multivariado foi utili-
zado para avaliar a influncia de seis variveis: concentrao de substrato,
tempo de cultivo, adio de extrato de levedura, glicose, sulfato de cobre e
sulfato de zinco, sobre a atividade antioxidante do produto do cultivo de P.

djamor, utilizando como substrato o resduo lquido obtido pela prensagem
do bagao de pupunha150. Os fatores mais significativos para o aumento da
atividade antioxidante testados foram: a concentrao de substrato e a adi-
o de extrato de levedura.
9.4.7 Antidiabticos
O diabetes mellitus a doena endcrina mais comumente encontrada na

populao, com variadas causas na sua etiologia e patogenesia. Atividades
antidiabticas do extrato etanlico da matria seca do caldo de Coriolus
versiolor, obtido por fermentao submersa, foi estudado31. Nesse estudo, os
autores observaram melhora nos quadros de hiperglicemia, hiperlipidemia,
estresse oxidativo e atividade protetora contra as clulas pancreticas em
ratos com diabetes induzida por estreptozotocina.
9.5 PROTOCOLO PARA PRODUO E RECUPERAO

DE EXOPOLISSACARDEOS A PARTIR DO CULTIVO
MICELIAL SUBMERSO DE GANODERMA LUCIDUM
O ciclo de produo da espcie G. lucidum pode levar de quatro a seis

meses para desenvolvimento completo dos corpos de frutificao. Porm,
algumas substncias podem ser produzidas a partir do cultivo micelial em
meios slidos ou lquidos, em menos de um ms, se a incubao for realizada
nas condies timas de temperatura e aerao 28,70,151. Biorreatores usuais
para o cultivo em meios lquidos incluem frascos Erlenmeyer, agitados ou
no, garrafes, biorreatores de bancada (Figura 9.9) ou fermentadores em
escala industrial.
Vrios tipos de sensores podem ser adaptados para o monitoramento e o
controle dos processos, como sondas de CO2 e O2, turbidmetros, e refrat-
metros. Os parmetros passveis de controle incluem a temperatura, a taxa
de aerao, a velocidade de agitao, o pH, a remoo de produtos e reali-
mentao de nutrientes.
O protocolo aqui sugerido foi adaptado de tcnicas correntemente utiliza-
das na pesquisa e na produo industrial34,76,151, para realizao em pequena
escala. O processo consiste na obteno de linhagens, formulao de meios
lquidos, distribuio em recipientes de cultivo, autoclavagem, inoculao
com culturas miceliais puras, incubao e operaes de recuperao e puri-

ficao de exopolissacardeos (Figura 9.10).
Cada uma das etapas ser mais detalhadamente descrita a seguir.
Figura 9.9 Biorreator de bancada.
Figura 9.10 Fluxograma da produo de exopolissacardeos a partir do cultivo micelial submerso.

9.5.1 Obteno de cultura pura
O processo de isolamento de novas estirpes depende de maneira funda-

mental da obteno e da seleo de linhagens com boa produtividade de
exopolissacardeos ativos, nos meios e nas condies de cultivo mais ade-
quados localidade em que ser implantada a produo. Existem culturas
de linhagens puras de diversas espcies de cogumelos disponveis em ban-
cos de cepas nacionais e internacionais, como a ATCC152, alm de existirem
empresas especializadas na produo e no comrcio de matrizes e sementes.
Um novo isolado tambm pode ser obtido utilizando esporos ou teci-
dos de corpos de frutificao como ponto de partida. Quando esporos so
utilizados, ocorrem processos de recombinao gentica, gerando novas
linhagens. No caso de realizar isolamento a partir de tecidos de corpos de
frutificao, so obtidos clones do cogumelo original. Em ambos os casos, o
material deve ser transferido, da maneira mais assptica possvel, para meios
de cultivo adequados.
Exemplos de meios de cultivo usualmente empregados para cogumelos
saprofticos incluem gar batata dextrosado (BDA) e gar extrato de malte
(MEA). Para cogumelos micorrzicos existem meios mais enriquecidos, como
o Melin Norkrans modificado (MMN). Ganoderma lucidum um cogumelo
necrosaproftico no sentido de que parasita rvores at a sua morte e, aps,
continua a decompor seus tecidos. Este cogumelo facilmente cultivado nos
meios BDA e MEA.
Para se coletar esporos, podem ser empregadas campnulas de vidro e
superfcies de papel-alumnio autoclavadas. O pleo posicionado com o
himnio para baixo.
Quando possvel, deve-se cortar o estipe, de forma que faa uma base
para apoiar o cogumelo, evitando tocar as lamelas no papel-alumnio. Tam-
bm pode ser utilizado arame para confeccionar um suporte, para posicionar
o cogumelo. O conjunto todo pode ser coberto com uma campnula, para
evitar que correntes de ar dispersem os esporos ou que tragam contami-
naes. Se o cogumelo j estiver relativamente seco, um pedao de papel
encharcado com gua esterilizada pode ser colocado no interior da camp-
nula, para manter a umidade alta. Se estiver no ponto de desenvolvimento
correto, o cogumelo liberar esporos, fazendo uma impresso sobre o papel-
-alumnio (Figura 9.11).
O sistema pode ser ento desmontado e o cogumelo descartado como
lixo orgnico comum. A campnula e o suporte podem ser lavados e utiliza-
dos novamente. O papel-alumnio, contendo esporos, pode ser armazenado
conforme descrito na Seo 9.5.2. Para reativ-los basta transferi-los para

placas de Petri (esterilizadas) contendo meios de cultivo adequados e incu-
b-los no escuro. Para G. lucidum o meio de cultivo pode ser BDA ou MEA
e a temperatura de incubao, 25 C.
Figura 9.11 Representao esquemtica de tcnica para coleta de esporos: (1) Campnula de vidro e papel-alumnio autoclavados;
pleo com himnio voltado para baixo, estipe cortado. (2) Sistema montado para coleta de esporos. (3) Impresso de esporos.
A esporada de G. lucidum apresenta colorao de ferrugem, entre laranja

e marrom. Quando maduros, os corpos de frutificao de G. lucidum produ-
zem esporos por vrios dias ou at meses. Porm, quando colhidos, a produ-
o de esporos cessa, de maneira que interessante para esta espcie adaptar
a tcnica para coletar os esporos com o cogumelo ainda crescendo no subs-
trato. Para tanto, basta posicionar folhas de papel-alumnio sob o himnio,
no prprio local de frutificao. Dessa forma, maior quantidade de contami-
nantes ir se misturar aos esporos, contudo, devido abundante esporulao
desta espcie, uma espessa camada ser depositada. Posteriormente, tcnicas
de isolamento podero ser utilizadas para eliminar as contaminaes.
Pelo menos duas tcnicas podem ser utilizadas para distribuir os esporos:
1) Lavar a superfcie do alumnio com gua esterilizada e distribuir gotas da

suspenso obtida sobre o meio de cultivo fresco, previamente esterilizado
e distribudo em placas de Petri, com o auxlio de uma pipeta, tambm

esterilizada.
2) Utilizar uma ala de platina previamente flambada e resfriar em meio
semisslido de cultivo. Antes do completo resfriamento (<42 C, apro-
ximadamente), passar a ala, com um pouco de gel aderido, sobre a
superfcie repleta de esporos do papel-alumnio; um grande nmero de
esporos fica aderido ao gel. Os esporos so depositados sobre meio de
cultivo fresco, podendo-se utilizar a tcnica de estriamento para espalhar
os esporos e distanciar os focos de contaminao de reas com miclio
saudvel.
Para isolamento, a partir de tecidos dos corpos de frutificao, devem-se

selecionar os indivduos mais saudveis e com caractersticas mais desejveis
(no caso deste exemplo, alta produo de exopolissacardeos), visto que o
isolamento gerar clones deste cogumelo inicial.
Uma assepsia superficial deve ser realizada a seco, removendo partes con-
taminadas e sujidades. Se necessrio, cortar e eliminar pores do cogumelo.
Com o cogumelo superficialmente limpo, se faz uma inciso superficial com
o auxlio de um bisturi flambado, e o corpo de frutificao ento cortado
ao meio com as mos. Isto feito para evitar carregar contaminaes da
superfcie para o interior do cogumelo. Ainda, com o auxlio do bisturi flam-
bado, corta-se um pedao pequeno descontaminado de uma regio interna
do pleo ou do estipe, e transfere-se para meio de cultivo fresco adequado. A
extremidade mais jovem do pleo a regio mais fcil de cortar e com mais
probabilidade de sucesso no isolamento de G. lucidum.
Independentemente da tcnica de isolamento, podem ser necessrios repi-
ques sucessivos para eliminar completamente qualquer foco de contamina-
o e para selecionar os isolados mais vigorosos.
9.5.2 Manuteno da cultura pura
Esporos coletados sobre papel-alumnio podem ser armazenados em

tubos de ensaio ou placas de Petri previamente autoclavados. Mesmo tem-
peratura ambiente, esporos podem ser mantidos viveis na ausncia de luz e
baixa umidade, por vrios anos.
Culturas miceliais puras em placas de Petri ou tubos de ensaio com meio
semisslido inclinado normalmente podem ser mantidas por semanas at
meses temperatura ambiente e por meses na geladeira (4 C). Miclio de G.
lucidum pode sobreviver nessas condies por mais de seis meses, mas usual-
mente no possvel conservar cepas nessas condies por anos. Consequen-
temente, para manter culturas puras dessa forma, se fazem necessrios repi-
ques peridicos. Algumas cepas no suportam refrigerao e precisam ser
mantidas em temperatura ambiente. A manuteno prolongada de miclios
por repique pode levar seleo de mutaes indesejadas e a consequente
degenerao das linhagens.
Para perodos de conservao mais longos existem outras tcnicas, como
a submerso em gua estril ou leo mineral e tcnicas de criopreservao
em ultrafreezer (80 C) ou nitrognio lquido (196 C). So necessrias
substncias crioprotetoras (como, por exemplo, glicerol) e/ ou suportes ade-
quados (como, por exemplo, perlita ou vermiculita) criopreservao. Com
essas tcnicas de conservao a baixas temperaturas, podem-se conservar
culturas miceliais de diversas espcies viveis por muitos anos, e imagina-se
que at mesmo por sculos, mantendo caractersticas genticas estveis.
9.5.3 Cultivo micelial submerso
Para a elaborao de um inculo lquido, utilizar frascos Erlenmeyer de

500 mL contendo 250 mL de meio de cultivo, fechados com tampes de
algodo e recoberto com papel pardo preso com elstico. Os recipientes
devem ser apenas parcialmente cheios. O espao deixado deve permitir a
agitao e a formao de espumas, durante a incubao, sem transborda-
mento. O tempo de autoclavagem deve ser adequado ao tamanho dos reci-
pientes de cultivo. Recipientes maiores levam tempo maior para atingirem a
temperatura de autoclavagem at o centro do seu volume. importante lem-
brar que tempo insuficiente na autoclavagem pode resultar na sobrevivncia
de contaminantes, mas, por outro lado, a autoclavagem por tempo excessivo
pode resultar em reaes indesejveis, como a caramelizao de acares e a
formao de compostos txicos a partir da reao entre compostos orgni-
cos, como acares e protenas.
O protocolo adequado a cada situao deve ser validado mediante expe-
rimentao criteriosa. Para os frascos de 500 mL, de 15 a 20 min. a 121 C
um tempo suficiente de tratamento trmico.
Aps o resfriamento dos recipientes contendo os meios de cultivo tem-
peratura ambiente, realiza-se a inoculao com culturas miceliais puras,
previamente desenvolvidas sobre meio semisslido distribudo em placas
de Petri. A transferncia de pedaos de meio semisslido coberto de massa
micelial feita, preferencialmente, em cmara de fluxo, com o auxlio de

uma ala microbiolgica e bico de Bunsen para flamb-la, ou utilizando
materiais adequadamente embalados e esterilizados. De trs a seis pedaos
de aproximadamente 0,5 cm2 de BDA cobertos de miclio so suficientes
para uma boa inoculao de 250 mL de meio lquido. Aps a transferncia,
os frascos devem ser novamente fechados com tampo de algodo e com o
papel. Os frascos so incubados em agitador orbital, a 25 C, 120 rpm, por
duas semanas. Deve ser observado crescimento micelial, pela formao e
multiplicao de pellets em suspenso. O lquido no deve turvar durante
o cultivo, pelo contrrio, o meio pode at mesmo ter sua turbidez redu-
zida durante o processo. Turvao do meio em cultivo micelial submerso de
macromicetos usualmente significa contaminao.
O pr-inculo, preparado conforme descrito, pode ser utilizado para ino-
cular volumes at dez vezes maiores de meio de cultivo. Para o presente
protocolo, sugerimos a inoculao de cinco frascos Erlenmeyer de 1.000mL,
contendo 450 mL de meio de cultivo fresco e autoclavado, com 50 mL do
inculo, cada. Os frascos inoculados devem ser incubados em agitador orbi-
tal, a 25 C, 120 rpm, por duas semanas, para concluir o crescimento mice-
lial e a produo de exopolissacardeos.
9.5.4 Recuperao dos exopolissacardeos
Aps um crescimento abundante de miclio, livre de contaminaes, o

meio lquido estar repleto de exopolissacardeos. A biomassa pode ser sepa-
rada do caldo por filtrao. Esse caldo rico em exopolissacardeos pode, teo-
ricamente, ser consumido diretamente. Porm, devido baixa concentrao
dos princpios ativos e s caractersticas organolpticas indesejveis, proces-
sos de recuperao e purificao se fazem necessrios. A simples secagem do
produto, utilizando equipamentos como spray-dryer ou liofilizador, reduz
bastante o volume, aumentando drasticamente a concentrao de princpios
ativos. Para maior grau de purificao, pode ser empregada uma precipi-
tao de polissacardeos com etanol previamente secagem. Esse procedi-
mento apresenta duas vantagens: so eliminadas impurezas solveis em uma
mistura de gua e lcool e se gasta menos energia e tempo com processos de
secagem. A desvantagem a utilizao de grandes quantidades de solvente.
Para reduzir a quantidade de solvente utilizada recomenda-se o seguinte
protocolo:
1) Reduzir o volume do caldo por rotoevaporao, at 1/10 do volume

original.
2) Adicionar 3 volumes de etanol gelado e deixar a 4 C precipitando, por
24 horas.
3) Recuperar o precipitado por centrifugao a 10.000 xg por 20 min., a
4C.
4) Secar o precipitado por liofilizao.
Etapas adicionais podem ser aplicadas antes da precipitao com etanol

para aumentar o grau de purificao, tais como: eliminao de protenas pelo
mtodo Sevag e eliminao de sais e compostos com baixa massa molecular
por dilise. Aps a precipitao, tcnicas cromatogrficas podem ser utili-
zadas para a obteno de polissacardeos altamente purificados. As colunas
mais utilizadas para essa finalidade so de troca inica e de gel-filtrao34.
Novas tcnicas de extrao, mais prticas, eficientes, econmicas, seguras
e sustentveis continuam sendo desenvolvidas, como, por exemplo, a utili-
zao de fluidos supercrticos. O processo de extrao de polissacardeos e
cidos ganodricos de G. lucidum utilizando fluidos supercrticos foi paten-
teado recentemente76.
9.5.5 Tcnica analtica para avaliar o rendimento

da produo de exopolissacardeos e estimar
o grau de pureza do produto final
A massa do extrato rico em polissacardeos obtido conforme descrito

na Seo 9.5.4 dividida pelo volume de meio de cultivo empregado para
a extrao representa uma medida de rendimento da produo desse tipo
dematerial.
Contudo, outros tipos de biomolculas podem estar sendo recuperados
em conjunto com os polissacardeos. Para avaliar o grau de pureza dos
polissacardeos, diversos testes podem ser feitos. Dois testes colorimtricos
simples esto descritos a seguir e podem ser utilizados tanto para avaliar a
proporo de polissacardeos no material purificado, depois da liofilizao
do precipitado, como tambm podem ser empregados para estimar a con-
centrao de EPS diretamente no caldo de cultivo, permitindo otimizar o
processo de produo, evitando a realizao de etapas de extrao e purifi-
cao para os testes.
Alm disso, essa tcnica permite acompanhar a produo de EPS ao longo

do tempo em um processo de cultivo. Basta retirar alquotas do caldo, de
maneira assptica, em intervalos definidos, para realizar as anlises sem
interromper o cultivo. Esse tipo de estudo se denomina cintica, neste caso
especfico, cintica da produo de EPS.
Para estimar a concentrao de polissacardeos produzidos, pode-se com-
binar resultados de um mtodo de dosagem de acares redutores (DNS)
com um mtodo de dosagem de acares totais (fenol-sulfrico). Uma rela-
o simples pode ser utilizada:
(Equao 9.1) At = Ar + EPS
em que At = acares totais, Ar = acares redutores e EPS =

exopolissacardeos.
Rearranjando:
(Equao 9.2) EPS = At Ar
Essa relao permite estimar a concentrao de EPS no caldo de cultivo,

a partir da determinao analtica da concentrao de acares totais e a-
cares redutores.
O mtodo de dosagem de acares redutores (o Ar da Equao 9.2) uti-
lizando o reagente DNS pode ser realizado conforme descrito por Miller
(1959)153.
Material
Reagente cido dinitrossaliclico (DNS): dissolver sob agitao 1 g de

DNS, 200 mg de fenol cristalino e 50 mg de sulfito de sdio em 100
mL de NaOH 1%. Armazenar a 4 C. Para estocagem, adicionar o
sulfito apenas logo antes de usar.
Soluo 40% de sal de Rochelle (tartarato de sdio e potssio).
Mtodo
1) Em tubos de ensaio, adicionar iguais volumes da amostra e do reagente

DNS. Exemplo: 3 mL de amostra + 3 mL de reagente DNS. Obs.: Pode
ser necessrio diluir a amostra com gua destilada se a concentrao de
acares for muito alta para a faixa de sensibilidade do mtodo.
2) Ferver em banho-maria por 5 minutos.

3) Com o material quente, adicionar 1 mL da soluo de sal de Rochelle
40%.
4) Deixar esfriar e ler a absorbncia em 510 nm, em um espectrofotmetro.
5) Interpretar os resultados utilizando uma curva padro, elaborada fazen-
do-se experimentos com solues de glicose a vrias concentraes (pelo
menos 5) de 0 at 150 g/mL.
O mtodo de dosagem de acares totais, utilizando os reagentes fenol

e cido sulfrico, pode ser realizado conforme descrito por Du Bois et al.
(1956)154
Material
Soluo de fenol 80% (m/v), cido sulfrico concentrado
Mtodo
1) Em tubos de ensaio, adicionar 100L de amostra, adequadamente diluda.

2) Adicionar 50 L da soluo de 80% de fenol.
3) Homogeneizar com um vrtex.
4) Adicionar 2 mL de cido sulfrico concentrado, em cmara de exausto.
5) Aguardar 10 min.
6) Ler a absorbncia a 490 nm em um espectrofotmetro.
7) Analisar os resultados com base em uma curva padro, elaborada com
solues de glicose a vrias concentraes (pelo menos 5) entre 0 g/mL
e 800 g/mL.
Este mtodo apresenta o inconveniente da manipulao de substncias

perigosas como o fenol e o cido sulfrico, alm de no permitir uma anlise
detalhada da composio e das estruturas dos polissacardeos. Porm, rela-
tivamente de fcil execuo e pode ser til para realizar experimentos que
necessitem da simples quantificao de polissacardeos em caldos de cultivo.
Existem tcnicas desenvolvidas para a determinao da composio
monossacardica, massa molecular e estrutura tridimensional dos polissaca-
rdeos. Todavia, fogem s limitaes do escopo deste captulo.
9.6 CONCLUSO E PERSPECTIVAS
Diversas substncias derivadas de muitas espcies de cogumelos vm

demonstrando atividades medicinais importantes em estudos cientficos.
Porm, por enquanto, nenhum cogumelo ou substncia derivada reconhe-
cido ou normatizado no Brasil pela ANVISA como medicinal. Sugere-se uma
colaborao mais intensa entre universidades, poder pblico e setor privado
para que o conhecimento produzido nas universidades seja efetivamente
transferido ao setor produtivo, beneficiando a populao.
O melhor conhecimento das espcies de cogumelos da biodiversidade
brasileira e suas propriedades medicinais permitiro o desenvolvimento de
novos medicamentos ou nutracuticos para a preveno e tratamento de
enfermidades que afligem a populao, como cncer, infeces e doenas
cardiovasculares.
Mais estudos tambm devem ser conduzidos para avaliar potenciais ati-
vidades medicinais da incluso de cogumelos na alimentao, estimulando
o consumo e a produo, contribuindo para o esclarecimento popular e
alterando uma cultura de medo e averso em relao aos cogumelos. Diver-
sas instituies de pesquisa, espalhadas pelo pas, esto dando passos nessa
direo, listando e descrevendo as espcies de cada regio, buscando tecno-
logias para a propagao de miclios e cultivo de cogumelos, testando apli-
caes tecnolgicas de materiais e substncias derivadas desses organismos
na preveno e tratamento de um grande nmero de enfermidades. Com as
tecnologias existentes nos laboratrios de pesquisa brasileiros hoje poss-
vel identificar e isolar os princpios ativos, descrever sua estrutura molecular
e aplicar tcnicas de DNA recombinante para aumentar a sua produtividade
e atividade.
Espera-se que novos produtos biotecnolgicos sejam desenvolvidos em
decorrncia dos avanos tecnolgicos recentes nas reas de produo e puri-
ficao de substncias medicinais a partir de cogumelos ou cultivos mice-
liais, refletindo em benefcios econmicos e ecolgicos e contribuindo para
uma vida mais saudvel.
REFERNCIAS
1. Hibbett DS, Binder M, Bischoff JF, Blackwell M, Cannon PF, Eriksson OE, et al.
A higher-level phylogenetic classification of the Fungi. Mycological Research.
2007;111(5):509-47.
2. Soccol CR, Dalla Santa HS, Rubel R, Vitola FM, Leifa F, Pandey A, et al. Mushrooms:
a promising source to produce nutraceutical and pharmaceutical bioproducts. In:
Koutinas A, Pandey A, Larroche C, editors. Current topics on bioprocessing in food
industry. 2. 1 ed: New Delhi: Asitech Publishers; 2007. p. 435-48.
3. Dubost NJ, Ou B, Beelman RB. Quantification of polyphenols and ergothioneine in
cultivated mushrooms and correlation to total antioxidant capacity. Food Chemistry.
2007;105(2):727-35.
4. Arango CS, Nieto IJ. Cultivo biotecnolgico de macrohongos comestibles: una
alternativa en la obtencin de nutracuticos. Revista Iberoamericana de Micologa.
2013;30(1):1-8.
5. Arango CS, Nieto IJ. Biotechnological cultivation of edible macrofungi: an alternative
for obtaining nutraceutics. Revista Iberoamericana de Micologa. 2013;30(1):1-8.
6. Bernal J, Mendiola JA, Ibez E, Cifuentes A. Advanced analysis of nutraceuticals.
Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 2011;55(4):758-74.
7. Barros L, Cruz T, Baptista P, Estevinho LM, Ferreira ICFR. Wild and commercial
mushrooms as source of nutrients and nutraceuticals. Food and Chemical Toxicology.
2008;46(8):2742-7.
8. Putzke J, Putzke MTL. Os Reinos dos Fungos. 1 ed. Santa Cruz do Sul: EDUNISC;
2002.
9. Meijer AARD. Macrofungos notveis das florestas de pinheiro-do-paran. Colombo:
Embrapa; 2008.
10. Pelczar MJ, Chan ECS, Krieg NR. Microbiologia - conceitos e aplicaes. 2 ed. So
Paulo: Makron Books; 1996.
11. Masur. Saccharomyces cerevisiae under DIC microscopy 2010 [Internet]. [Cited
2016 Nov 4]. Available from: pt.wikipedia.org/wiki/Ficheiro:S_cerevisiae_under_DIC_
microscopy.jpg.
12. Y_Tambe. Microscopic image of Penicillium sp. (environmental isolate).
Magnification:200 2005 [Internet]. [Cited 2016 Nov 3]. Available from: commons.
wikimedia.org/ wiki/File:Penicillium.jpg.
13. Robinson RF, Davidson RS. The Large-Scale Growth of Higher Fungi. Advances in
Applied Microbiology. 1959;1:261-78.
14. Ross RC, Harris PJ. The significance of thermophilic fungi in mushroom compost
preparation. Scientia Horticulturae. 21(1):61-70.
15. Chang ST. Mushrooms from waste. Food Policy. 1980;5(1):64-5.
16. Bononi VL, Capelari M, Maziero R, Trufem SFB. Cultivo de Cogumelos Comestveis.
So Paulo: cone; 1999.
17. Yokomizo NKS, Bononi VLR, editors. Cogumelos comestveis: perspectivas
de introduo de outras espcies no mercado brasileiro. I Encontro Nacional Sobre
Cogumelos Comestveis. Mogi da Cruzes: Secretaria de Agricultura e Abastecimento;
1980.
18. Vzquez JES. Produccin de hongos comestibles. San Cristbal de las Casas: Centro
de Investigaciones Ecolgicas del Sureste; 1994. 107 p.
19. Simon RR, Phillips KM, Horst RL, Munro IC. Vitamin D Mushrooms: comparison of
the composition of button mushrooms (agaricus bisporus) treated postharvest with UVB
light or sunlight. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 2011;59(16):8724-32.
20. Satora L, Pach D, Butryn B, Hydzik P, Balicka-lusarczyk B. Fly agaric (Amanita
muscaria) poisoning, case report and review. Toxicon. 2006;45(7):941-3.
21. Stamets P. Psilocybin Mushrooms of the World. Berkeley: Ten Speed Press; 1996.
22. Kaya E, Yilmaz I, Sinirliogluc ZA, Karahana S, Bayramd R, Yaykaslie KO, et al.
Amanitin and phallotoxin concentration in Amanita phalloides var. alba mushroom.
Toxicon. 2013;76:225-33.
23. Asatiani MD, Kachlishvili ET, Khardziani TS, Metreveli EM, Mikiashvili
NA, Songulashvili GG, et al. Basidiomycetes as a source of antioxidants, lectins,
polysaccharides and enzymes. Journal of Biotechnology. 2008;136:717.
24. Dr. Brainfish. Psilocybe cubensis Thai cultivadas en arroz integral, Tailandesas
[Internet]. [Cited 2016 Nov 3]. Available from: upload.wikimedia.org/wikipedia/
commons/ 2/2b/Psilocybe_Cubensis_Thai.jpg.
25. Archenzo. Amanita phalloides. Piacenzas mountains [Internet]. [Cited 2016 Nov 3].
Available from: upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/9/99/Amanita_phalloides_1.JPG.
26. Lebrac. Gifthublinge (Galerina marginata) 2006 [Internet]. [Cited 2016 Nov 3].
Available from: upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/a/a3/Gifth%C3%A4ublinge.jpg.
27. Santos LF, Zanatta AL, Thomaz-Soccol V, Torres MF, Rubel R, Bonatto SJR, et al.
Hypolipdemic and antiartherosclerotic potential of Pleurotus ostreatus cultivated by
submerged fermentation in the high-fat diet fed rats. Biotechnology and Bioprocess
Engineering (Seoul Print). 2013;18:201-8.
28. Rubel R, Dalla Santa HS, Fernandes LC, Bonatto SJR, Bello S, Figueiredo BC, et
al. Hypolipidemic and antioxidant properties of Ganoderma lucidum (Leyss:Fr) Karst
used as a dietary supplement. World Journal of Microbiology & Biotechnology. 2011;
27:1083-9.
29. Enshasy HAE, Hatti-Kaul R. Mushroom immunomodulators: unique molecules with
unlimited applications. Trends in Biotechnology. 2013 Dec;31(12):668-77.
30. Zhang Z, Guoying LV, Pan H, Leifa F, Soccol CR, Pandey A. Production of Powerful
Antioxidant Supplements via Solid-State Fermentation of Wheat (Triticum aestivum
Linn.) by Cordyceps militaris. Food Technology and Biotechnology. 2012;50:32-9.
31. Zhang Z, Guoying LV, Pan H, Santos LFD, Fan M, Soccol CR, et al. Antidiabetic
activities of ethanol extract of dry matters of culture broth of Coriolus versiolor in
submerged culture. Brazilian Archives of Biology and Technology. 2011;54:701-8.
32. Pana D, Zhangb D, Wuc J, Chena C, Xua Z, Yangb H, et al. A novel proteoglycan
from Ganoderma lucidum fruiting bodies protects kidney function and ameliorates
diabetic nephropathy via its antioxidant activity in C57BL/6 db/db mice. Food and
Chemical Toxicology. 2014;63:111-8.
33. Santos LFD, Rubel R, Bonatto SJR, Zanatta AL, Aikawa J, Yamaguchi AA, et al.
Cordyceps sinensis biomass produced by submerged fermentation in high-fat diet feed
rats normalizes the blood lipid and the low testosterone induced by diet. EXCLI Journal.
2012;11:767-75.
34. Nie S, Zhang H, Li W, Xie M. Current development of polysaccharides from
Ganoderma: Isolation, structure and bioactivities. Bioactive Carbohydrates and Dietary
Fibre. 2013;1(1):10-20.
35. Kutschera W, Rom W. Otzi. The prehistoric Iceman. Nuclear Instruments and
Methods in Physics Research. 2000 Apr;164-165:12-22.
36. Rajarathnam S, Shashirekha MN. Mushrooms and truffles. Use of Wild Mushrooms.
Encyclopedia of Food Sciences and Nutrition; 2003. p. 4048-54.
37. Vargas-Isla R, Ishikawa NK, Py-Daniel V. Contribuies etnomicolgicas dos povos
indgenas da Amaznia. Biota Amaznia. 2013;3(1):58-65.
38. Paterson RRM. Ganoderma A therapeutic fungal biofactory. Phytochemistry.
2006;67:1985-2001.
39. Boh B, Berovic M, Zhang J, Zhi-Bin L. Ganoderma lucidum and its pharmaceutically
active compounds. Biotechnology Annual Review. 2007;13:265-301.
40. Roupas P, Keogh J, Noakes M, Margetts C, Taylor P. The role of edible mushrooms
in health: evaluation of the evidence. Journal of Functional Foods. 2012;4(4):687-709.
41. Oba K, Kobayashi M, Matsui T, Kodera Y, Sakamoto J. Individual patient based
meta-analysis of lentinan for unresectable/recurrent gastric cancer. Anticancer Research.
2009;29(7):2739-45.
42. Grube BJ, Eng ET, Kao YC, Kwon A, Chen S. White button mushroom phytochemicals
inhibit aromatase activity and breast cancer cell proliferation. The Journal of Nutrition.
2001;131(12):3288-93.
43. Jiang J, Grieb B, Thyagarajan A, Sliva D. Ganoderic acids suppress growth and
invasive behavior of breast cancer cells by modulating AP-1 and NF-kappaB signaling.
International Journal of Molecular Medicine. 2008;21(5):577-84.
44. Oba K, Teramukai S, Kobayashi M, Matsui T, Kodera Y, Sakamoto J. Efficacy

of adjuvant immunochemotherapy with polysaccharide K for patients with
curative resections of gastric cancer. Cancer Immunology, Immunotherapy: CII.
2007;56(6):905-11.
45. Sakamoto J, Morita S, Oba K, Matsui T, Kobayashi M, Nakazato H, et al. Efficacy
of adjuvant immunochemotherapy with polysaccharide K for patients with curatively
resected colorectal cancer: a meta-analysis of centrally randomized controlled clinical
trials. Cancer Immunology, Immunotherapy: CII. 2006;55(4):404-11.
46. Yu L, Fernig DG, Smith JA, Milton JD, Rhodes JM. Reversible inhibition of
proliferation of epithelial cell lines by Agaricus bisporus (edible mushroom) lectin.
Cancer Research. 1993;53(19):4627-32.
47. Lee SH, Hwang HS, Yun JW. Antitumor activity of water extract of a mushroom,
Inonotus obliquus, against HT-29 human colon cancer cells. Phytotherapy research:
PTR. 2009;23(12):1784-9.
48. Ahn WS, Kim DJ, Chae GT, Lee JM, Bae SM, Sin JI, et al. Natural killer cell activity
and quality of life were improved by consumption of a mushroom extract, Agaricus
blazei Murill Kyowa, in gynecological cancer patients undergoing chemotherapy.
International Journal of Gynecological Cancer: Official Journal of the International
Gynecological Cancer Society. 2004;14(4):589-94.
49. Chen X, Wang W, Li S, Xue J, Fan L, Sheng Z, et al. Optimization of ultrasound-
assisted extraction of Lingzhi polysaccharides using response surface methodology and
its inhibitory effect on cervical cancer cells. Carbohydrate Polymers. 2010;80(3):944-8.
50. Ren G, Zhao Y-P, Yang L, Fu C-X. Anti-proliferative effect of clitocine from the
mushroom Leucopaxillus giganteus on human cervical cancer HeLa cells by inducing
apoptosis. Cancer Letters. 2008;262(2):190-200.
51. Noguchi M, Kakuma T, Tomiyasu K, Kurita Y, Kukihara H, Konishi F, et al. Effect
of an extract of Ganoderma lucidum in men with lower urinary tract symptoms: a
double-blind, placebo-controlled randomized and dose-ranging study. Asian Journal of
Andrology. 2008;10(4):651-8.
52. Jiang J, Slivova V, Valachovicova T, Harvey K, Sliva D. Ganoderma lucidum inhibits
proliferation and induces apoptosis in human prostate cancer cells PC-3. International
Journal of Oncology. 2004;24(5):1093-9.
53. Stanley G, Harvey K, Slivova V, Jiang J, Sliva D. Ganoderma lucidum suppresses
angiogenesis through the inhibition of secretion of VEGF and TGF-beta1 from prostate
cancer cells. Biochemical and Biophysical Research Communications. 2005;330(1):46-52.
54. Eckhardt SG, Baker SD, Britten CD, Hidalgo M, Siu L, Hammond LA, et al. Phase
I and pharmacokinetic study of irofulven, a novel mushroom-derived cytotoxin,
administered for five consecutive days every four weeks in patients with advanced solid
malignancies. Journal of Clinical Oncology: Official Journal of the American Society of

Clinical Oncology. 2000;18(24):4086-97.
55. Johnson E, Frland DT, Saetre L, Bernardshaw SV, Lyberg T, Hetland G. Effect
of an extract based on the medicinal mushroom Agaricus blazei murill on release of
cytokines, chemokines and leukocyte growth factors in human blood ex vivo and in
vivo. Scandinavian Journal of Immunology. 2009;69(3):242-50.
56. Volman JJ, Mensink RP, Van Griensven LJLD, Plat J. Effects of alpha-glucans from
Agaricus bisporus on ex vivo cytokine production by LPS and PHA-stimulated PBMCs;
a placebo-controlled study in slightly hypercholesterolemic subjects. European Journal
of Clinical Nutrition. 2010;64(7):720-6.
57. Ramberg JE, Nelson ED, Sinnott RA. Immunomodulatory dietary polysaccharides: a
systematic review of the literature. Nutrition Journal. 2010 Nov;9:54.
58. Kim HG, Yoon DH, Lee WH, Han SK, Shrestha B, Kim CH, et al. Phellinus
linteus inhibits inflammatory mediators by suppressing redox-based NF-kappaB and
MAPKs activation in lipopolysaccharide-induced RAW 264.7 macrophage. Journal of
Ethnopharmacology. 2007;114(3):307-15.
59. Hsu C-H, Liao Y-L, Lin S-C, Hwang K-C, Chou P. The mushroom Agaricus blazei
Murill in combination with metformin and gliclazide improves insulin resistance in type
2 diabetes: a randomized, double-blinded, and placebo-controlled clinical trial. Journal
of Alternative and Complementary Medicine. 2007;13(1):97-102.
60. Khatun K, Mahtab H, Khanam PA, Sayeed MA, Khan KA. Oyster mushroom reduced
blood glucose and cholesterol in diabetic subjects. Mymensingh Medical Journal: MMJ.
2007;16(1):94-9.
61. Mee-Hyang K, Kwon S-T, Kwon S-H, Ma M-S, Park YI. Lowering effects in plasma
cholesterol and body weight by mycelial extracts of two mushrooms: Agaricus blazei
and Lentinus edodes. Sanoeb Misaengmul Haghoeji. 30(4):402-9.
62. Mori K, Inatomi S, Ouchi K, Azumi Y, Tuchida T. Improving effects of the mushroom
Yamabushitake (Hericium erinaceus) on mild cognitive impairment: a double-blind
placebo-controlled clinical trial. Phytotherapy Research: PTR. 2009;23(3):367-72.
63. Kawagishi H, Zhuang C. Compounds for dementia from Hericium erinaceum. Drugs
of the Future. 2008;33(2).
64. Hsu C-H, Hwang K-C, Chiang Y-H, Chou P. The mushroom Agaricus blazei
Murill extract normalizes liver function in patients with chronic hepatitis B. Journal of
Alternative and Complementary Medicine. 2008;14(3):299-301.
65. Zhou S, Gao Y, Chan E. Clinical Trials for Medicinal Mushrooms: Experience with
Ganoderma lucidum (W.Curt.:Fr.) Lloyd (Lingzhi Mushroom). International Journal of
Medicinal Mushrooms. 2005;7(1-2):111-8.
66. El Dine RS, El Halawany AM, Ma C-M, Hattori M. Inhibition of the dimerization
and active site of HIV-1 protease by secondary metabolites from the Vietnamese
mushroom Ganoderma colossum. Journal of Natural Products. 2009;72(11):2019-23.
67. Faccin LC, Benati F, Rinco VP, Mantovani MS, Soares SA, Gonzaga ML, et al.
Antiviral activity of aqueous and ethanol extracts and of an isolated polysaccharide
from Agaricus brasiliensis against poliovirus type 1. Letters in Applied Microbiology.
2007;45(1):24-8.
68. Sun W, Yu J, Shi Y-M, Zhang H, Wang Y, Wu B-B. [Effects of Cordyceps extract on
cytokines and transcription factors in peripheral blood mononuclear cells of asthmatic
children during remission stage]. Zhong Xi Yi Jie He Xue Bao (Journal of Chinese
Integrative Medicine). 2010;8(4):341-6.
69. Kim TI, Park SJ, Choi CH, Lee SK, Kim WH. [Effect of ear mushroom (Auricularia)
on functional constipation]. Taehan Sohwagi Hakhoe chi (The Korean Journal of
Gastroenterology). 2004;44(1):34-41.
70. Chen SN, inventor. Production method for solid cultured active mushroom mycelium
and fruit-body metabolites (AMFM). United States patent 2009/0098620; 2009 Apr 16.
71. Dalla-Santa HS, Rubel R, Vitola FMD, Rodrigues-Leon JA, Dalla-Santa OR, Brand
D, et al. Growth Parameters of Agaricus brasiliensis Mycelium on Wheat Grains in
Solid-state Fermentation. Biotechnology (Faisalabad Print). 2012;11:144-53.
72. Chimilovski JS, Habu S, Teixeira RFB, Thomaz-Soccol V, Noseda MD, Pandey A,
et al. Antitumoral activities of exopolysaccharide of Grifola frondosa produced by
submerged fermentation using sugarcane and soybean molasses as carbon source. Food
Technology and Biotechnology. 2011;49:359-63.
73. Steinert E. Ganoderma lucidum 2013 [Internet]. [Cited 2016 Nov 3]. Available from:
upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/8/81/Ganoderma_lucidum_01.jpg.
74. Yang S. The Divine Farmers Materia Medica: A Translation of the Shen Nong Ben
Cao Jing. Boulder: Blue Poppy Enterprises; 1998. 236 p.
75. Shizen L. Compendium of materia medica: bencao gangmu. Beijing: Foreign
Languages Press; 2003.
76. Yu Z-R, Wang B-J. Inventors. Method and system for continuous separation
and purification of ganoderic acids and polysaccharides. United States patent
US20130075336A1; 2013 Mar 28.
77. Rubel R, Santa HSD, Fernandes LC, Filho JHCL, Figueiredo BC, Di Bernardi R,
et al. High Immunomodulatory and Preventive Effects Against Sarcoma 180 in Mice
Fed with Ling Zhi or Reishi Mushroom Ganoderma lucidum (W. Curt.: Fr.) P. Karst.
(Aphyllophoromycetideae) Mycelium. International Journal of Medicinal Mushrooms.
2008;10:37-48.
78. Dudhgaonkar S, Thyagarajan A, Sliva D. Suppression of the inflammatory response

by triterpenes isolated from the mushroom Ganoderma lucidum. International
Immunopharmacology. 2009;9(11):1272-80.
79. Jesenak M, Banovcin P, Rennerov Z, Majtan J. -Glucans in the treatment and
prevention of allergic diseases. Allergologia et Immunopathologia. 2012;in press.
80. ANVISA. Consulta Pblica n 15, 14 May 2012 [Internet]. [Cited 2016 Nov 2]. Available
from: portal.anvisa.gov.br/wps/wcm/connect/61f704004fa210b897f0f79a71dcc661/
consulta+p%c3%bablica+n%c2%b0+15+secol.pdf?mod=ajperes.
81. Tung NT, Cuong TD, Hung TM, Lee JH, Woo MH, Choi JS, et al. Inhibitory effect
on NO production of triterpenes from the fruiting bodies of Ganoderma lucidum.
Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters. 2013;23(5):1428-32.
82. Lee I, Kim J, Ryoo I, Kim Y, Choo S, Yoo I, et al. Lanostane triterpenes from
Ganoderma lucidum suppress the adipogenesis in 3T3-L1 cells through down-regulation
of SREBP-1c. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters. 2010;20(18):5577-81.
83. Yue Q-X, Song X-Y, Ma C, Feng L-X, Guan S-H, Wu W-Y, et al. Effects of triterpenes
from Ganoderma lucidum on protein expression profile of HeLa cells. Phytomedicine.
2010;17(8-9):606-13.
84. Zhu K, Nie S, Li C, Lin S, Xing M, Li W, et al. A newly identified polysaccharide
from Ganoderma atrum attenuates hyperglycemia and hyperlipidemia. International
Journal of Biological Macromolecules. 2013;57:142-50.
85. Tomoda M, Gonda R, Kasahara Y, Hikino H. Glycan structures of ganoderans
b and c, hypoglycemic glycans of Ganoderma lucidum fruit bodies. Phytochemistry.
1986;25(12):2817-20.
86. Song YS, Kim S-H, Sa J-H, Jin C, Lim C-J, Park E-H. Anti-angiogenic and inhibitory
activity on inducible nitric oxide production of the mushroom Ganoderma lucidum.
Journal of Ethnopharmacology. 2004;90(1):17-20.
87. Thyagarajan A, Jiang J, Hopf A, Adamec J, Sliva D. Inhibition of oxidative stress-
induced invasiveness of cancer cells by Ganoderma lucidum is mediated through the
suppression of interleukin-8 secretion. International Journal of Molecular Medicine.
2006;18(4):657-64.
88. Wan JM-F, Sit W-H, Louie JC-Y. Polysaccharopeptide enhances the anticancer activity
of doxorubicin and etoposide on human breast cancer cells ZR-75-30. International
Journal of Oncology. 2008;32(3):689-99.
89. Deutsche Gesellschaft Fr Myklogie. Cordyceps militaris 2000 [Internet]. [Cited
2016 Nov 3]. Available from: dgfm-ev.de/index.php?id=pdj_2007.
90. Shrestha B, Zhang W, Zhang Y, Liu X. What is the Chinese caterpillar fungus
Ophiocordyceps sinensis (Ophiocordycipitaceae)? Mycology: An International Journal
on Fungal Biology. 2010;1(4):228-36.
91. Das SK, Masuda M, Sakurai A, Sakakibara M. Medicinal uses of the mushroom
Cordyceps militaris: Current state and prospects. Fitoterapia. 2010;81(8):961-8.
92. Shrestha B, Zhang W, Zhang Y, Liu X. The medicinal fungus Cordyceps militaris:
research and development. Mycological Progress. 2012;11(3):599-614.
93. Lo H-C, Hsieh C, Lin F-Y, Hsu T-H. A Systematic Review of the Mysterious
Caterpillar Fungus Ophiocordyceps sinensis in Dong-ChongXiaCao (Dng Chng Xi
Co) and Related Bioactive Ingredients. Journal of Traditional and Complementary
Medicine. 2013;3(1):16-32.
94. Zhong S, Pan H, Leifa F, Wu Y, Binod P, Pandey A, et al. Advances in research
of polysaccharides in Cordyceps species. Food Technology and Biotechnology.
2009;47:304-12.
95. Firenzuoli F, Gori L, Lombardo G. The Medicinal Mushroom Agaricus blazei
Murrill: Review of Literature and Pharmaco-Toxicological Problems. Advance Access
Publication. 2007;5(1):3-15.
96. Dalla Santa HS, Rubel R, Vitola FMD, Buchi D, Di Bernardi R, Moreno AN, et al.
Agaricus brasiliensis mycelium supplementation in Sarcoma 180 tumor-bearing mice
reverses the immune reponse induced by the tumor. Food and Agricultural Immunology.
2012;212:1-14.
97. Wilson N. Agaricus subrufescens. 2002 [Internet] [Cited 2016 Nov 3]. Available
from: http://mushroomobserver.org/549.
98. Ko J-L, inventor. Uses of an Immunomodulatory Protein (GMI) from Ganoderma
microsporum. Mycomagic Biotechnology Co., assignee. United States patent
US8476238B2; 2013 Jul 13.
99. Fares F, Sharvit L, Wasser SP, inventors. Extracts of Cyathus striatus mushrooms,
pharmaceutical compositions comprising them and a new Cyathus striatus strain.
WO2011151831A1;2011 Dec 8.
100. Ales P, Escaut A, Choulot J-C, inventors. Polysaccharide Extract of Lentinus and
Pharmaceutical, Cosmetic or Nutraceutical Compositions Comprising Such an Extract.
US8383127B2; 2013 Fev 26.
101. Sandewicz IM, Russ JG, Zhu VX, inventors. Anhydrous cosmetic compositions
containing mushroom extract. US6645502B2; 2003 Nov 11.
102. Chen J-C, Chen C-N, Sheu S-J, inventors. Preparation and compositions for
Antrodia camphorata mycelium biologically active material. US20030148517A1. 2003
Aug 7.
103. Ikekawa T, Ikekawa A, Shimada F, inventors. Physiologically active substance eem-s
originating in mushroms, process for producing the same and drugs. US6783771 B2;
2004 Aug 31.
104. Donatini B, inventor. Novel pharmaceutical or dietetic mushroom-based
compositions. US20020164352A1; 2002 Nov 7.
105. Wong K-P, inventor. Compositions containing an active fraction isolated from
Tricholoma conglobatum and methods of use. Compositions containing an active
fraction isolated from Tricholoma conglobatum and methods of use. WO2002047705
A2; 2002 Jun 20.
106. Wong K-P, inventor. Compositions containing an active fraction isolated from
Scutellariae barbatae and methods of use. Patent 20020094350; 2002.
107. Fleming A. On the antibacterial action of cultures of a Penicillium, with special
reference to their use in the isolation of B. influenzae. British Journal of Experimental
Pathology. 1929;10:226-36.
108. Novak R, Shlaes DM. The pleuromutilin antibiotics: a new class for human use.
Current Opinion in Investigational Drugs. 2010;11(2).
109. Kilaru S, Collins CM, Hartley AJ, Bailey AM, Foster GD. Establishing Molecular
Tools for Genetic Manipulation of the Pleuromutilin-Producing Fungus Clitopilus
passeckerianus. Applied and Environmental Microbiology. 2009;75(22):7196-204.
110. Mygind PH, Fischer RL, Schnorr KM, Hansen MT, Snksen CP, Ludvigsen S, et al.
Plectasin is a peptide antibiotic with therapeutic potential from a saprophytic fungus.
Nature. 2005;437:975-80.
111. Jagadish LK, Krishnan VV, Shenbhagaraman R, Kaviyarasan V. Comparitive study
on the antioxidant, anticancer and antimicrobial property of Agaricus bisporus (J. E.
Lange) Imbach before and after boiling. African Journal of Biotechnology. 2009;8(4).
112. Soboleva AI, Krasnopolskaia LM, Fedorova GB, Katrukha GS. [Antibiotic
properties of the strains of the basidiomycete Lentinus edodes (Berk.) sing]. Antibiotiki
i khimioterapii a (Antibiotics and Chemoterapy). Ministerstvo meditsinsko i
mikrobiologichesko promyshlennosti SSSR. 2006;51(7):3-8.
113. Hearst R, Nelson D, Mccollum G, Millar BC, Maeda Y, Goldsmith CE, et al.
An examination of antibacterial and antifungal properties of constituents of Shiitake
(Lentinula edodes) and oyster (Pleurotus ostreatus) mushrooms. Complementary
Therapies in Clinical Practice. 2009;15(1):5-7.
114. Venturini ME, Rivera CS, Gonzalez C, Blanco D. Antimicrobial activity of extracts
of edible wild and cultivated mushrooms against foodborne bacterial strains. Journal of
Food Protection. 2008;71(8):1701-6.
115. Martins PR, Gameiro MC, Castoldi L, Romagnoli GG, Lopes FC, Pinto AVFDS, et al.
Polysaccharide-rich fraction of Agaricus brasiliensis enhances the candidacidal activity
of murine macrophages. Memrias do Instituto Oswaldo Cruz. 2008;103(3):244-50.
116. Bernardshaw S, Hetland G, Ellertsen LK, Tryggestad AMA, Johnson E. An Extract
of the Medicinal Mushroom Agaricus blazei Murill Differentially Stimulates Production
of Pro-inflammatory Cytokines in Human Monocytes and Human Vein Endothelial Cells
in vitro. Inflammation. 2005;29(4-6):147-53.
117. Bernardshaw S, Hetland G, Grinde B, Johnson E. An extract of the mushroom

Agaricus blazei Murill protects against lethal septicemia in a mouse model of fecal
peritonitis. Shock (Augusta, Ga). 2006;25(4):420-5.
118. Ozen T, Darcan C, Aktop O, Turkekul I. Screening of antioxidant, antimicrobial
activities and chemical contents of edible mushrooms wildly grown in the black sea region
of Turkey. Combinatorial Chemistry & High Throughput Screening. 2011;14(2):72-84.
119. ztrk M, Duru ME, Kivrak S, Mercan-Doan N, Trkoglu A, zler MA. In vitro
antioxidant, anticholinesterase and antimicrobial activity studies on three Agaricus
species with fatty acid compositions and iron contents: a comparative study on the
three most edible mushrooms. Food and Chemical Toxicology: an International Journal
Published for the British Industrial Biological Research Association. 2011;49(6):1353-60.
120. Tambekar DH, Sonar TP, Khodke MV, Khante BS. The Novel Antibacterials from
Two Edible Mushrooms: Agaricus bisporus and Pleurotus sajor caju. International
Journal of Pharmacology. 2006;2(5):584-7.
121. Kawagishi H, Suzuki H, Watanabe H, Nakamura H, Sekiguchi T, Murata T, et al.
A lectin from an edible mushroom Pleurotus ostreatus as a food intake-suppressing
substance. Biochimica et Biophysica Acta. 2000;1474(3):299-308.
122. Francia C, Rapior S, Courtecuisse R, Siroux Y. Current Research Findings on the
Effects of Selected Mushrooms on Cardiovascular Diseases. International Journal of
Medicinal Mushrooms. 1999;1(2):169-72.
123. Vtola FMD, Adjam E, Fernandes MBA, Fernandes LC, Meijer AAR, Thomaz-Soccol
V, et al. In vitro antiparasitic activity of quinones extracts, obtained from the submerged
mycelial cultivation broths of three edible macromycete species, against Leishmania
(L.) infantum. IV Simpsio Internacional Sobre Cogumelos No Brasil (IV SICOG) e III
Simpsio Nacional Sobre Cogumelos Comestveis; Caxias do Sul. Braslia: EMBRAPA;
2008. p. 128.
124. Fendrich RC, Vtola FMD, Thomaz-Soccol V, Soccol CR. Produo e caracterizao
de compostos com atividade anti-Leishmania produzidos por macromicetos. XXI
Congresso Brasileiro de Parasitologia e II Encontro de Parasitologia do Mercosul. Foz
do Iguau; 2009. p. 986.
125. Vtola FMD, Adjam E, Fernandes MBA, Meijer AAR, Thomaz-Soccol V, Soccol
CR. In vitro antiparasitic activity of quinones extracts, obtained from the submerged
mycelial cultivation broths of three macromycete species of the genus Ganoderma,
against Leishmania (L.) infantum. IV Simpsio Internacional Sobre Cogumelos No
Brasil (IV SICOG) e III Simpsio Nacional Sobre Cogumelos Comestveis; Caxias do
Sul: EMBRAPA; 2008. p. 193.
126. Nordbring-Hertz B, Jansson H-B, Tunlid A. Nematophagous Fungi. New York:
John Wiley & Sons, Ltd; 2001.
127. Barron GL. The nematode-destroying fungi. Guelph: Canadian Biological Publ.;
1977. 140 p.
128. Gray GD. Genetic resistance to haemonchosis in sheep. Parasitology Today
(Personal ed). 1987;3(8):253-5.
129. Padilha T. Estratgia para o controle da verminose gastrintestinal de bovinos de
leite na regio sudeste do Brasil. Simpsio Sobre Controle de Parasitos 1; Campinas/So
Paulo: CATI; 1996. p. 50-6.
130. Li T, Zhang K, Liu X. Taxonomy of nematophagous fungi. Beijing: Chinese
Scientific & Technological Publication; 2000.
131. Luo H, Li X, Li G, Pan Y, Zhang K. Acanthocytes of Stropharia rugosoannulata
function as a Nematode-Attacking Device. Applied and Environmental Microbiology.
2006;72(4):2982-7.
132. Descazeaux J, Capelle R. Contribuition letude des champignons prdateurs
des larves de nmatodes parasites des animaux domestiques. Bulletin de lAcademie
Veterinaire de France. 1939;12:284-8.
133. Roubaud , Deschiens R. Action des Hyphomycetes Prdateurs Sur Les Larves de
Synthtocaules et de Bunostomes. Masson; 1941.
134. Arajo JV, Santos MA, Ferraz S, Maia AS, Magalhes ACM. Controle de larvas
infectantes de Haemonchus placei por fungos predadores da espcie Monacrosporium
elypsosporum em condies de laboratrio. Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinria
e Zootecnia. 1992;44(6):521-6.
135. Arajo JV, Stephano MA, Sampaio WM. Effects of temperature, mineral salt and
passage through the gastrointestinal tract of calves on sodium alginate formulation of
Arthrobotrys robusta, a nematode trapping fungus. Revista Brasileira de Parasitologia
Veterinria. 2000;9:55-60.
136. Falbo MK, Soccol VT, Sandini IE, Vicente VA, Robl D, Soccol CR. Isolation and
characterization of the nematophagous fungus Arthrobotrys conoides. Parasitology
Research. 2013;112(1):177-85.
137. Thomaz-Soccol V, Souza FPD, Sotomaior C, Castro EA, Milczewski V, Mocelin G,
et al. Resistance of gastrointestinal nematodes to anthelmintics in sheep (Ovis aries).
Brazilian Archives of Biology and Technology. 2004;47(1):41-7.
138. Thomaz-Soccol V, Sotomaior C, Castro EA, Souza FP. Situao da resistncia dos
helmintos gastrintestinais de ovinos aos anti-helmnticos, no Estado do Paran. 1
Simpsio Sobre Controle de Parasitos. Campinas/So Paulo; CATI; 1996. p. 79-89.
139. Chartier C, Soubirac F, Pors I, Silvestre A, Hubert J, Couquet C, et al. Prevalence
of anthelmintic resistance in gastrointestinal nematodes of dairy goats under
extensive management conditions in southwestern France. Journal of Helminthology.
2001;75(4):325-30.
140. Sangster NC. Anthelmintic resistance: past, present and future. International
Journal for Parasitology. 1999;29(1):115-24.
141. Van Wyk JA, Stenson MO, Van Der Merwe JS, Vorster RJ, Viljoen PG. Anthelmintic
resistance in South Africa: surveys indicate an extremely serious situation in sheep and
goat farming. Onderstepoort J Vet Res. 1999 Dec;66(4):273-84.
142. Eysker M, Bakker N, Van Der Hall YA, Van Hecke I, Kooyman FNJ, Van Der
Linden D, et al. The impact of daily Duddingtonia flagrans application to lactating ewes
on gastrointestinal nematodes infections in their lambs in the Netherlands. Veterinary
Parasitology. 2006;141(1-2):91-100.
143. Faessler H, Torgerson PR, Hertzberg H. Failure of Duddingtonia flagrans to
reduce gastrointestinal nematode infections in dairy ewes. Veterinary Parasitology.
2007;147(1-2):96-102.
144. Mota MDA, Campos AK, Arajo JVD. Biological control of helminth parasites
of animals: current stage and future outlook. Pesquisa Veterinria Brasileira.
2003;23(3):93-100.
145. Dalla Santa HS, Rubelb R, Fernandes LC, Bonatto SJR, Bello SR, Monteiro
MC, Khalil NM, Dalla Santa OR, Gern JC, Soccol CR. Agaricus brasiliensis enriched
functional product promotes in mice increase in HDL levels and immunomodulate to
Th1 CD4+T subsets. A. brasiliensis functional product and biological benefics. Current
Trends in Biotechnology and Pharmacy. 2010;4(4):957-70.
146. Rubel R, Dalla Santa HS, Bonatto SJR, Bello S, Fernandes LC, Di Bernardi
R, et al. Medicinal Mushroom Ganoderma lucidum (Leyss: Fr) Karst. Triggers
Immunomodulatory Effects and Reduces Nitric Oxide Synthesis in Mice. Journal of
Medicinal Food. 2010;13:142-8.
147. Zhang M, Cui SW, Cheung PCK, Wang Q. Antitumor polysaccharides from
mushrooms: a review on their isolation process, structural characteristics and antitumor
activity. Trends in Food Science & Technology. 2007;18(1):4-19.
148. Bellettini MB, Vitola FMD, Santos LF, Thomaz-Soccol V, Soccol CR, editors.
Produo de biomassa e atividade antioxidante em cultivo micelial submerso de
Pleurotus ostreatus e Pleurotus djamor utilizando o caldo de hidratao de estirpe de
pupunha seco como substrato. VII International Symposium on Mushrooms in Brazil.
Manaus/Braslia: Embrapa; 2013.
149. Vitola FMD, Faraco V, Bellettini MB, Santos LF, Thomaz-Soccol V, Soccol CR,
editors. Screening of superoxide dismutase activity inducers in the submerged mycelial
cultivation of Pleurotus ostreatus. In: VII Simpsio Internacional sobre Cogumelos no
Brasil e VI Simpsio Nacional sobre Cogumelos Comestveis, 2013, Manaus. Anais do
VII Simpsio Internacional sobre Cogumelos no Brasil e VI Simpsio Nacional sobre
Cogumelos Comestveis. Braslia: Embrapa - Recursos Genticos e Biotecnologia, 2013.
v. 7. p. 385.
150. Bellettini MB, Vitola FMD, F. SL, Santos LF, Thomaz-Soccol V, Soccol CR,
editors. Fatores significativos para o desenvolvimento de Pleurotus djamor no suco
de pupunha em relao a atividade antioxidantes,concentrao proteica e de biomassa
em fermentao micelial submersa. In: VII Simpsio Internacional sobre Cogumelos no
Brasil e VI Simpsio Nacional sobre Cogumelos Comestveis, 2013, Manaus. Anais do
VII Simpsio Internacional sobre Cogumelos no Brasil e VI Simpsio Nacional sobre
Cogumelos Comestveis. Braslia: Embrapa - Recursos Genticos e Biotecnologia, 2013.
v. 7. p. 399.
151. Berovi M, Habijani J, Zore I, Wraber B, Hodar D, Boh B, Pohleven F. Submerged
cultivation of Ganoderma lucidum biomass and immunostimulatory effects of fungal
polysaccharides. Journal of Biotechnology. 2003;103(1):77-86.
152. ATCC. The Global Bioresource Center, c. 2013 [Internet]. [Cited 2016 Nov 3].
Available from: atcc.org.
153. Miller GL. Use of dinitrosalicylic acid reagent for determination of reducing sugar.
Analytical Chemistry. 1959;31(3):426-8.
154. Dubois M, Gilles KA, Hamilton JK, Rebers PA, Smith F. Colorimetric Method
for Determination of Sugars and Related Substances. Analytical Chemistry.
1956;28(3):350-6.

Cogumelos: Uma Fonte Promissora de Compostos Ativos para O Desenvolvimento de Bioprodutos Farmacêuticos E Nutracêuticos

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Existe grande diversidade de macromicetos no mundo, e a rica variedade

no apresentam caractersticas organolpticas agradveis ou so txicos.

Muitas perspectivas emergem quanto ao futuro da biotecnologia de

9.2 FUNGOS/COGUMELOS: ASPECTOS GERAIS E BIOLOGIA

Os fungos so um grupo de organismos distinto dos vegetais e dos ani-

Figura 9.1 Leveduras (esquerda)11, bolor (centro)12, cogumelos (direita).

molculas do substrato. Um conjunto de hifas denominado miclio. Cada

tem o potencial de gerar corpos de frutificao sob determinadas condies.

PROTENA CARBOIDRATO VALOR

Os cogumelos so constitudos, de um modo geral, de 90% de gua, ele-

Mais de duas mil espcies de cogumelos so reconhecidas como comest-

Exemplos de atividades farmacolgicas experimentalmente confirmadas,

9.3 USO TRADICIONAL E CONFIRMAES CLNICAS

Indcios na literatura e histria da humanidade apontam que os seres

Apesar de existirem registros antigos do conhecimento e utilizao de

EFEITO/DOENA SUBSTNCIA ESPCIE DE COGUMELO MECANISMO/ DETALHES ANO REFERNCIAS

EFEITO/DOENA SUBSTNCIA ESPCIE DE COGUMELO MECANISMO/ DETALHES ANO REFERNCIAS

EFEITO/DOENA SUBSTNCIA ESPCIE DE COGUMELO MECANISMO/ DETALHES ANO REFERNCIAS

Diversos laboratrios passaram a extrair substncias bioativas a partir

9.3.1 Ganoderma lucidum

Ganoderma lucidum um cogumelo medicinal conhecido e utilizado na

Figura 9.5 Ganoderma lucidum73.

corao, reparando a zona peitoral e beneficiando aqueles que tm um peito

So comercializados cogumelos secos, pulverizados, encapsulados, extra-

SUBSTNCIA EFEITOS ANO REFERNCIA

9.3.2 Cordyceps militaris

Fungos ascomicetos do gnero Cordyceps tambm so conhecidos e uti-

Figura 9.6 Carpforo de Cordyceps militaris emergindo de um inseto89.

Atualmente se domina o cultivo micelial e de estromas de uma esp-

9.3.3 Agaricus subrufescens (A. brasiliensis, A. blazei)

Espcie nativa do Brasil, de taxonomia ainda controversa, conhecida

Em estudos clnicos com extratos deste cogumelo, foi detectado aumento

Figura 9.7 Agaricus subrufescens97.

Apesar da utilizao culinria ser possvel, atualmente esta espcie culti-

derivadas deste cogumelo, a legislao brasileira atualmente o aceita apenas

9.4 POSSIBILIDADES TERAPUTICAS DE COGUMELOS

Com base em informaes da utilizao tradicional e resultados experi-

Tabela 9.4 Patentes referentes a produtos contendo substncias ativas de cogumelos

ANO PRODUTO REFERNCIAS

Os fungos so notoriamente conhecidos como fontes de substncias com

em concentrao menor do que a ampicilina (MIC = 12,5 mcg/mL)7. O meta-

9.4.2 Doenas cardiovasculares

Os cogumelos so uma fonte nutricional bastante saudvel, contendo bai-

Extratos de cogumelos tm sido avaliados na busca de medicamentos

uma metodologia baseada na incorporao de timidina radiomarcada, em

da resistncia anti-helmntica, principalmente em pequenos ruminantes,

Sabe-se que os cogumelos produzem substncias capazes de modular o

Diversos so os mecanismos de ao antitumoral de substncias deri-

Outras substncias derivadas de cogumelos apresentam atividade antitu-

O cultivo micelial submerso de macromicetos est sendo estudado como

sulfato de zinco, sobre a atividade antioxidante do produto do cultivo de P.

O diabetes mellitus a doena endcrina mais comumente encontrada na

9.5 PROTOCOLO PARA PRODUO E RECUPERAO

O ciclo de produo da espcie G. lucidum pode levar de quatro a seis

com culturas miceliais puras, incubao e operaes de recuperao e puri-

Figura 9.9 Biorreator de bancada.

Figura 9.10 Fluxograma da produo de exopolissacardeos a partir do cultivo micelial submerso.

9.5.1 Obteno de cultura pura

O processo de isolamento de novas estirpes depende de maneira funda-

conforme descrito na Seo 9.5.2. Para reativ-los basta transferi-los para

A esporada de G. lucidum apresenta colorao de ferrugem, entre laranja

1) Lavar a superfcie do alumnio com gua esterilizada e distribuir gotas da