INSTITUTO TECNOLGICO

SUPERIOR DE XALAPA
Requerimiento: 8.3 MANUAL DE PRCTICAS

Asignatura (Clave y nombre)* AEM-1050 Microbiologa

Carrera* Ing. Bioqumica Unidad* 6
Determinacin de bacterias coliformes fecales en agua por la tcnica del nmero
ms probable (NMP)
Bibliografa NOM-112-SSA1-1994, BIENES Y SERVICIOS.
DETERMINACIN DE BACTERIAS COLIFORMES. TCNICA
DEL NMERO MS PROBABLE.

1 INTRODUCCIN:

2 OBJETIVO:
El alumno aplicar los mtodos de la norma oficial mexicana (NOM-112-SSA1-1994,
BIENES Y SERVICIOS. DETERMINACIN DE BACTERIAS COLIFORMES. TCNICA DEL NMERO
MS PROBABLE.)

3 MATERIAL Y EQUIPO REQUERIDO

Matraz Erlenmeyer de 500 mL
Vaso de precipitado de 500 mL
Pipeta volumtrica de 1mL
Pipeta volumtrica de 10 mL
Pipeta Pasteur
Campana de fermentacin (tubos de Durham)
Tubos de ensaye con rosca y tapa
Gradillas
Cajas Petri
Perilla
Lmpara de alcohol
Magneto
Caldo lactosa
Parrilla de calentamiento
Parrilla de agitacin
Autoclave
Estufa de incubacin
Bao mara

4 METODOLOGA
1. Disolver los componentes o el medio completo deshidratado en agua, calentar si es
necesario.
2. Ajustar el pH, de tal manera que despus de la esterilizacin ste sea de 7.2 a 25 C.
3. Distribuir el medio en cantidades de 10 ml en tubos de 16 X 160 mm conteniendo
campana de fermentacin.
4. Esterilizar en autoclave por 15 minutos a 121 1,0 C.
Inoculacin

Ver.00/07/16 F-DC-04
 INSTITUTO TECNOLGICO
SUPERIOR DE XALAPA
Requerimiento: 8.3 MANUAL DE PRCTICAS

5. Tomar tres tubos de medio de enriquecimiento de mayor concentracin. Usar una pipeta
estril para transferir a cada tubo 10 ml de la muestra si es lquida o 10 ml de la dilucin
primaria inicial, en el caso de otros productos.
6. Tomar tres tubos de concentracin sencilla del medio selectivo de enriquecimiento. Usar
una pipeta estril para transferir a cada uno de estos tubos 1 ml de la muestra si es
lquida o 1 ml de la dilucin primaria en el caso de otros productos.
7. Para las diluciones subsecuentes, continuar como se indica en el prrafo anterior,
usando una pipeta diferente para cada dilucin. Mezclar suavemente el inculo con el
medio.
Incubacin
8. Incubar los tubos a 35 0,5 C por 24 2 horas y observar si hay formacin de gas, en
caso contrario prolongar la incubacin hasta 48 2 horas.
Prueba confirmativa
9. De cada tubo que muestre formacin de gas, tomar una azada y sembrar en un nmero
igual de tubos con medio de confirmacin. Incubar a 35 0,5 C por 24 2 horas o si la
formacin de gas no se observa en este tiempo, prolongar la incubacin por 48 2
horas.
10. Tomar la serie de tubos de la prueba confirmativa que d formacin de gas despus
del periodo de incubacin requerido y buscar el NMP en los cuadros correspondientes.
(Ver norma).

5. RESULTADOS

Elabor Verific

ING. XOCHITL ARELLANO ORTEGA ING. OSCAR CARRASCO ORTEGA

Nombre y firma del (la) docente Nombre y firma de la
jefatura de carrera

Las firmas anteriores hacen constar que se ha verificado que la presente prctica es representativa de los
objetivos de la unidad a que corresponda, que las instrucciones y la metodologa son acordes al objetivo de la
prctica y est referenciada en la bibliografa indicada y, que las instrucciones son claras.

Ver.00/07/16 F-DC-04
 INSTITUTO TECNOLGICO
SUPERIOR DE XALAPA
Requerimiento: 8.3 MANUAL DE PRCTICAS

INSTRUCTIVO DE LLENADO

El presente formato es utilizado para especificar la forma en que debe ser llevada a cabo la
prctica, y el alumno que realiza la prctica pudiera hacer un reporte como resultado de la
ejecucin de la misma. El reporte que realiza el alumno, ser con base a la estructura o
apartados que indique el docente.

1. Anotar clave y nombre de la asignatura a la que corresponda la prctica.

2. Nombre de la carrera a la que pertenezca la asignatura.
3. Nmero y nombre de la unidad a la que corresponda la prctica.
4. Nombre de la prctica.
5. Bibliografa de referencia que contenga temas relacionados con la prctica.
6. Nombre y firma del docente que elabora o disea la prctica.
7. Nombre y firma del par acadmico que verifica que la prctica es representativa de
los objetivos de la unidad a que corresponda, que las instrucciones y la metodologa
son acordes al objetivo de la prctica y est referenciada en la bibliografa indicada,
adems de que las indicaciones son claras.
8. Nombre y firma del jefe de carrera que autoriza la realizacin de la prctica.
9. Realizar una breve introduccin terica y referencial sobre la prctica a realizar.
10. Indicar el objetivo que se pretende lograr con la realizacin de la prctica.
11. Especificar la cantidad y el material que se utilizar para realizar la prctica,
especificar tambin el equipo necesario.
12. Indicar los pasos o metodologa que se deber llevar a cabo para obtener los
resultados esperados. Se recomienda ser claros y precisos.
13. Es este apartado se deber indicar los resultados en los cuales puede incluir una
recomendacin o sugerencia para poder llevar a cabo la prctica, evitar errores y/o
accidentes.
14. Escribir el nombre del (la) que realiz la prctica
15. Escribir el nombre del titular de la jefatura de carrera que valida la prctica

Ver.00/07/16 F-DC-04