PRCTICA N.

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RECUENTO DE BACTERIAS AEROBIAS MESOFILOS VIABLES
I.INTRODUCCIN.
Este mtodo se basa en la presuncin de que cada clula bacteriana puede crecer en un
medio de cultivo slido formando colonias. De acuerdo a este criterio el nmero de
colonias desarrolladas en un medio de cultivo slido puede corresponder al nmero de
clulas bacterianas viables presentes en una cantidad determinada de muestra que haya
sido inoculada.
El nmero de bacterias aerobias mesfilos encontrado en los alimentos es uno de los
Indicadores microbianos de calidad de los mismos (este ndice no es vlido para
alimentos fermentados: queso, leches fermentadas, yogurt, mantequilla).
Esta determinacin se utiliza para:
a) Verificar la eficacia de los sistemas de limpieza y desinfeccin y, averiguar la
temperatura a que fueron mantenidos los alimentos durante los procesos de
tratamiento industrial, transporte y almacenamiento.

b) Tener una idea sobre la alteracin incipiente de los alimentos, de su probable vida
til, de la descongelacin no controlada de los alimentos congelados o de las fallas
en el mantenimiento de la temperatura de refrigeracin de los alimentos
refrigerados.

c) Poner de manifiesto las fuentes de contaminacin durante el proceso de

elaboracin de los alimentos.

II. OBJETIVOS.
Determinar la presencia de bacterias aerobias mesfilas en alimentos.
Poner de manifiesto las fuentes de contaminacin durante el proceso de
elaboracin de los alimentos.
Materiales:
Los requisitos necesarios para la preparacin y Dilucin de la muestra son:
- Placas Petri (100 x 15 mm).
-Pipetas bacteriolgicas de 1 ml., 5 ml. y 10 ml.
-Bao de agua regulado a 44-46 C para mantener el agar.
-Incubadora regulada a 29-31C (chequear frecuentemente la constancia y uniformidad de
la temperatura interior termocuplas o termmetros adecuados en diferentes posiciones del
incubador minetras seencuentre lleno con varias placas de agar).
-Contador de colonias.
III. PROCEDIMIENTO.
Preparar la muestra por uno de los procedimientos recomendados, teniendo en cuenta la
naturaleza del producto, as, para la leche cruda deber hacerse mayores diluciones que
para la leche pasteurizada.
Pipetear por duplicado a placas Petri alcuotas de 1 ml a partir de dilucin , 10-2, 10-3, 10-4
y 10-5 y una alcuota de 0.1 ml de dilucin 10-5 para obtener de 10-1 a 10-6g o ml de
muestra por placa de Petri. Se sugiere esta serie de diluciones cuando no se conoce el
rango aproximado de nmeros de bacterias.
Licuar el agar de recuento en un bao de vapor o en un bao de agua hirviente, sin
exponerlo a tal calentamiento por un perodo prolongado. Temperara el agar a 44-46C y
controlar la temperatura cuidadosamente, para evitar la muerte de las bacterias en la
muestra diluida. Agregar rpidamente a las placas de Petri 15 ml de agar licuado y
temperado. Entre la preparacin de la dilucin y la adicin del agar no deben transcurrir
ms de 10 minutos.
Tambin en nuestro caso lo que se hizo fue el siguiente procedimiento.
Obtuvimos 10 ml de muestra y aparte 90 ml de agua destilada estril, los 10 ml de
muestra se mezcl con los 90 ml de agua destilada estril, que sera un primer tubo 10-1
luego de los 90 ml de agua destilada estril ms los 10 ml de muestra se sac 1 ml de
muestra, que sera el segundo tubo 10-2, de ese tubo se sac 1ml ms de muestra que
sera un tercer tubo 10-3, de ese tubo se sac otro ml de muestra a otro tubo que sera
104, finalmente se sac 1ml ms de muestra que sera un tubo 10-5. Despus de hacer
todo este procedimiento se procede a colocar 1 ml de muestra en un caja Petri y se
mueve hacia atrs y hacia adelante, luego se hace estras y finalmente se lleva a la
incubadora.

IV. RESULTADOS.
Dilucin 10-3
Placa 1: 241 colonias x 103= 241000
Placa 2: 85 colonias x 103= 85000
(241000 + 85000)/2= 163000
Por lo tanto hay 163000 colonias por ml. de muestra.

VI. BIBLIOGRAFA.
Cano, S. (2006). Metodos de Anlisis Microbiolgicos, Normas Iso, etc.
Consultora Analiza Calidad.
Flix, A. (2005). Calidad Sanitaria de alimentos disponibles al pblico de Ciudad
Obregn, Sonora, Mxico. Revista Salud Pblica y Nutricin (RESPYN),
http://www.respyn.uanl.mx/vi/3/articulos/calidad_sanitaria.htm.
Fernandez, E. (1981). Microbiologa Sanitaria agua y alimentos. Guadalajara,
Mxico: Universidad de Guadalajara.
SSA. (1993). NOM-031-SSA1-1993.