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Ciclo:
V ciclo.
Trujillo Per
2017.
RECUENTO PLAQUETARIO PRACTICADO EN ALUMNOS DE MEDICINA DEL V CICLO DE
LA UCV DEL AO 2017 PARA EL ANLISIS, FUNDAMENTACIN E INTERPRETACIN DE
RESULTADOS
I. INTRODUCCIN
Actualmente conocemos muy bien la fisiologa de las plaquetas con todos sus detalles. Pero no
siempre fue as, de los elementos que forman la sangre, la plaqueta es el ltimo en ser
descubierto. Se considera al francs Alfied Donne (18011878) como el descubridor de las
plaquetas, aunque tambin se atribuye al mdico ingls George Gulliver (18041882). No fue
hasta finales del siglo XIX cuando Giulio Bizzozero (18411901) aisl las plaquetas de los trombos
e identific la hemostasia y la trombosis como procesos anlogos1.
Las plaquetas o trombocitos son clulas anucleadas de 12m de tamao, son los elementos
formes ms pequeos de la sangre, poseen multitud de grnulos citoplasmticos segregados
durante su activacin, generadas en la mdula sea por fragmentacin de los bordes de los
megacariocitos, que se acumulan en el lugar donde el endotelio est disfuncional o daado
dentro de la pared arterial, lo que inicia la formacin del trombo. El intervalo fisiolgico de las
plaquetas es de 150400 109/l. Un adulto sano produce cada da una media de alrededor de
11011 plaquetas. La expectativa de vida de las plaquetas es de 7 a 10 das1.
Los grnulos son reservorios de protenas que van desde factores de crecimiento hasta
molculas de adhesin o receptores que utiliza la plaqueta para interaccionar con otras clulas.
Entre estos receptores se incluyen las glucoprotenas (GP) Ib y IIb3. Otra de las molculas de
adhesin contenidas en estos grnulos es la P-selectina, que permite la interaccin de las
plaquetas con las clulas endoteliales, los leucocitos y otras clulas inmunitarias. En los grnulos
hay tambin molculas asociadas a la respuesta inflamatoria, como las citocinas3.
Estos factores tienen tambin efectos biolgicos sobre otras clulas del entorno plaquetario. Un
estudio protemico ha descrito que las plaquetas activadas por trombina liberan ms de 300
protenas diferentes, muchas de ellas relacionadas con reacciones inflamatorias. Adems, las
plaquetas pueden interaccionar con patgenos bacterianos e incluso expresar receptores del
complemento, lo que las convierte tambin en clulas involucradas en la inmunogenicidad del
organismo. De hecho, las plaquetas expresan y almacenan protenas antibacterianas llamadas
trombocidinas7.
Finalmente, por todas estas funciones y ms, nos resulta importante conocer de cuantas
plaquetas disponemos para cumplir estas. Aqu es donde un recuento plaquetario es til, este
prcticamente nos indica el nmero de plaquetas por mm3 de sangre. Existen dos mtodos para
recuento plaquetario: indirecto o manual; que se fundamenta en la relacin proporcional entre
plaquetas y eritrocitos en un extendido de sangre coloreada con Colorante Wright y el directo o
de Rees Ecker que se fundamenta por la produccin de hemlisis por la utilizacin de un lquido
hipotnico (en esta prctica ser oxalato de amonio), y el mantenimiento de las plaquetas
intactas y sin agrumar por la presencia de p-aminobenzoato de dietilaminoetilo8.
OBJETIVOS:
-Marcador indeleble
Utilizado para rotular el tubo con EDTA donde se depositar la sangre, el tubo de
ensayo y la cmara Neubauer con el nombre de la persona de quin se extrae la
sangre y a la vez el tipo de suero que se colocar.
-Jeringa y aguja.
Tubo de vidrio y plstico al vaco con tapn de plstico blando, diseado para
venopuncin. Tapn color violeta contiene EDTA; anticoagulante potente, usado en conteo
sanguneo completo y frotis. Conteniendo sangre venosa necesaria para el recuento de
plaquetas.
-Propipeta.
-Pipeta regulada.
Tubo de vidrio especial con una abertura en la zona superior, y en la zona inferior es
cerrado y cncavo, resiste a temperaturas muy altas, utilizada para preparacin de
soluciones y mezclas.
-Gradilla.
-Micropipeta.
Las amarillas sirven para pipetear volmenes pequeos (por ejemplo, 10 l).
-Cronmetro.
-Placa de Petri.
-Algodn.
-Microscopio.
Imagen N 01.
Rotulacin de tubos
con EDTA color lila.
Imagen N 04. Aspiracin de 1,98 mL de oxalato Imagen N 05. Tubo de ensayo con
de amonio con pipeta. oxalato de amonio.
Imagen N 06. Puntas amarillas Imagen N07. Micropipeta con punta puesta.
de micropipeta.
Imagen N 12.
Extraccion de
mezcla con
micropipeta.
Imagen N 13. Mezcla dispensada
en cmara por micropipeta.
11. Armar cmara hmeda, poniendo un trozo de algodn humedecido con agua en toda
la base de la placa Petri.
12. Posicionar cmara Neubauer con mezcla dentro de cmara hmeda (Placa de Petri) y
tapar, esperar por 15 minutos.
13. Pasados los 15 minutos, sacara cmara Neubauer y llevarla al microscopio para su
observacin primero en 10X para identificacin de plaquetas y luego en 40X para
realizar el conteo.
Tabla N 01. N de plaquetas x mm3 de sangre en alumnos de Medicina del V ciclo de la UCV
N ALUMNOS N de plaquetas X mm3 de
sangre.
01 Ftima Benites Otiniano 302 000
02 Ericka 200 000
03 Ana Rojas 116 000
04 Angeldonis 167 000
05 Paola 286 000
06 Peter 313 000
07 Jhair Bolaos 312 000
08 Manuel Rodriguez 268 000
09 Lesly Janampa 398 000
10 Teodoro Yllescas 323 000
ao 2017.
Descripcin:
V. DISCUSIN
Anlisis de resultados:
-Todos los valores excepto el de Ana Rojas se encuentran dentro del promedio normal de N
de plaquetas xmm3 de sangre.
Interpretacin de resultados:
Nios prematuros:100.000-300.000/mm3
Nios pequeos:200.000-475.000/mm3
Nios: 150.000-400.000/mm3
Leve: : 150,000-100,000
Fisiologa plaquetaria:
Trombopoyesis:
La hemostasia tiene como finalidad la formacin del tapn hemosttico e incluye procesos de
vasoconstriccin, agregacin plaquetaria y sntesis de trombina y fibrina.
La hemostasia secundaria incluye las reacciones del sistema de coagulacin que concluyen con
la formacin de fibrina; este proceso tarda varios minutos. La fibrina se encarga de dar mayor
fuerza al tapn hemosttico primario.
A pesar de que la figura presenta ambos eventos por separado, estos estn ligados. Por
ejemplo: Las plaquetas activadas aceleran la coagulacin plasmtica, en tanto que los
productos de la coagulacin plasmtica, como la trombina, estimulan la agregacin
plaquetaria14.
Activacin plaquetaria:
La activacin de las plaquetas mediada por GPVI permite una firme adhesin de las plaquetas y
la secrecin de las sustancias procoagulantes y proinflamatorias contenidas en ellas, lo que
hace que el trombo crezca y se consolide su formacin. Adems, a la unin de las plaquetas al
colgeno sigue la expresin de fosfatidilserina sobre la membrana plaquetaria. La
fosfatidilserina proporciona actividad protrombinasa, que aumenta la formacin de trombina.
Las plaquetas adheridas permanecern vivas durante horas o das en el sitio de la lesin
vascular y liberarn microvesculas con actividad proinflamatoria y protrombtica, de las
cuales se habla ms adelante. Despus de la deposicin de las plaquetas sobre el FvW y el col-
geno, se requiere el reclutamiento de nuevas plaquetas desde la circulacin, en un proceso
conocido como agregacin plaquetaria. Esto es posible por la acumulacin local de agonistas
de la activacin de las plaquetas debida a su secrecin desde las plaquetas ya adheridas a la
pared del vaso. Entre estos agonistas se incluyen el ADP, el TxA2 , la epinefrina y la trombina.
La etapa final es la activacin de los receptores IIb3, que posibilitan la unin del fibringeno
y tambin del FvW, lo que permite el establecimiento de puentes estables entre las plaquetas.
En el proceso de estabilizacin participan tambin otras mol- culas, quiz una de las de mayor
inters sea el ligando de CD40 (CD40L)16.
Despus de la activacin inicial de las plaquetas, diferentes mecanismos cooperan para que
esta activacin se transmita al mayor nmero de plaquetas, y se produce lo que se conoce
como fenmeno de reclutamiento plaquetario. Uno de estos factores cooperadores
principales es el TxA2 , que se sintetiza en la plaqueta como consecuencia de la liberacin de
cido araquidnico por la accin de la fosfolipasa A2 17. El cido araquidnico es el sustrato de
la ciclooxigenasa-1 (COX-1). La COX-1 producir endoperxidos cclicos de las prostaglandinas,
PGG2 y PGH2 como productos iniciales, que se trasformarn en TxA2 por la actividad de la
TxA2 sintasa. El TxA2 , adems de activar ms plaquetas, contraer las clulas del msculo liso
vascular. Es conocido que la inhibicin de la COX-1 plaquetaria es el mecanismo principal de
accin antiplaquetaria del cido acetilsaliclico. El cido acetilsaliclico acetila de forma
irreversible la molcula de hidrxido (OH) de la serina en posicin 529 de la COX-1, con lo que
se inhibe la actividad de esta enzima. El resultado de que se reponga la actividad de COX-1 en
las plaquetas depende de la produccin de ms plaquetas debido al carcter anucleado de
estas, lo que las hace incapaces de generar nueva COX-1. Se calcula que se genera nuevo cada
da aproximadamente un 10% del total de las plaquetas circulantes y que casi el 30% de las
plaquetas tendrn activa la COX-1 y una produccin normal de TxA2 en las 48 h tras la ltima
dosis de cido acetilsaliclico18.
Todas lo hacen a travs de una regin especfica localizada en estas molculas, conocida como
regin RGD por ser la nomenclatura de los aminocidos que conforman esta regin (arginina,
glicina, asprtico). Por lo tanto, los pptidos que contienen la secuencia RGD son capaces de
interaccionar con la GPIIb/IIIa e inhibir su interaccin con otras molculas. Existen otras
secuencias peptdicas reconocidas por la GPIIb/IIIa, como por ejemplo lisina-glutamina-alanina-
glicina-asprtico-valina. A diferencia de la regin RGD, esta secuencia de 6 aminocidos slo se
ha localizado en el fibringeno20.
RECEPTORES DE LA TROMBINA
Inflamacin:
Finalmente podemos decir que las plaquetas no solo participan en la hemostasia sino tambin
en: inflamacin, la remodelacin tisular y la defensa innata contra microorganismos. Estas
caractersticas sugieren que las plaquetas tambin tienen una participacin importante en
patologas pulmonares, tales como el asma y la EPOC. La relativa sencillez en la obtencin y
manejo de las plaquetas las hace interesantes y atractivas para los estudios bsicos de los
mecanismos moleculares responsables de las alteraciones bioqumicas asociadas con diversas
enfermedades respiratorias23.
VI. CONCLUSIONES
El recuento plaquetario fue realizado con xito en la prctica, por ende obtuvimos los
resultados, todos dentro de los valores normales de plaquetas 150.000 -
450.000/mm3, excepto uno, el cual perteneca a Ana Rojas y estaba disminuido (116
000) valor que nos acerca a una trombocitopenia leve.
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