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Fecha de Edicin:

Instituto Tecnolgico superior de Edicin


Unidad:
Coatzacoalcos. No. 1 FEBRERO 2015

Departamento: Ingeniera Bioqumica.

Materia:
ANALISIS INSTRUMENTAL

Prctica No. 2

NOMBRE DE LA PRCTICA: Elaboracin de una curva de calibracin con un


estndar externo.

1. Competencias a desarrollar

Elaborar una curva de calibracin con una solucin patrn externa, utilizando
sacarosa como analito, para posteriormente leer la concentracin de una
muestra problema.

2. Marco Terico

La curva de calibracin es un mtodo muy utilizado en qumica analtica para


determinar la concentracin de una sustancia (analito) en una muestra
desconocida, sobre todo en disoluciones. El mtodo se basa en la relacin
proporcional entre la concentracin y una determinada seal analtica (propiedad).
Conociendo esta relacin, ser posible conocer la concentracin en una muestra
dada mediante la medida de esa seal. La elaboracin de una curva de calibrado
se puede dividir en dos pasos: preparacin de las disoluciones patrn y obtencin
de la funcin seal concentracin (construccin de la curva propiamente dicha).
Una vez obtenida la curva de calibracin se podr utilizar para conocer la
concentracin de analito en una muestra desconocida.
La curva de calibrado se construye midiendo la
seal analtica en cada uno de los patrones
previamente elaborados. En el eje de
ordenadas se asigna el valor de la seal
medida y en el eje de abscisas la
concentracin del patrn. De esta forma
podemos sealar puntos en la grfica segn
las coordenadas (concentracin (x), seal (y).
Elabor: Judith Montesinos Ramos
Fecha de Edicin:
Instituto Tecnolgico superior de Edicin
Unidad:
Coatzacoalcos. No. 1 FEBRERO 2015

Departamento: Ingeniera Bioqumica.

Materia:
ANALISIS INSTRUMENTAL

3. Introduccin

La mayor parte de los mtodos analticos son relativos, es decir el


contenido de analito en la muestra se obtiene a travs de un patrn de
referencia. Se denomina disolucin patrn o estndar a una disolucin de
concentracin exactamente conocida. La grfica que representa la respuesta
analtica en funcin de la concentracin del analito correspondiente se llama
curva de calibrado o curva estndar.

En la calibracin con un estndar externo, la muestra se prepara por


separado del estndar. La propiedad analtica medida depende de manera
conocida y reproducible de la concentracin del analito. En teora, la medida de
la propiedad es directamente proporcional a la concentracin. Los estndares
externos se usan para calibrar instrumentos y procedimientos cuando no hay
efectos de interferencias de los componentes de la matriz en la disolucin del
analito. Se preparan una serie de estndares externos de distintas
concentraciones conocidas del analito. Idealmente se utilizan tres o ms
disoluciones en el proceso de calibracin. La calibracin con un nico patrn, no
es recomendable pues conlleva un alto riesgo de error.

La calibracin se lleva a cabo al obtener la seal de respuesta como


funcin de la concentracin conocida del analito. Al representar grficamente los
datos y ajustarlos a una ecuacin matemtica se obtiene la curva de calibrado.

Cuando se emplean estndares externos, se supone que cuando en la


muestra y el estndar est presente la misma concentracin de analito, se
obtendr la misma respuesta. Sin embargo, esto no siempre ocurre as y en esos
casos es necesario recurrir a otros mtodos de calibracin como el del estndar
interno o el de adiciones estndar a las muestras.
Fecha de Edicin:
Instituto Tecnolgico superior de Edicin
Unidad:
Coatzacoalcos. No. 1 FEBRERO 2015

Departamento: Ingeniera Bioqumica.

Materia:
ANALISIS INSTRUMENTAL

4. Objetivo

Elaborar una curva de calibracin con una solucin patrn externa, utilizando
sacarosa como analito, para posteriormente leer la concentracin de una muestra
problema.

5. Material, Equipos y Reactivos

Materiales Equipos Reactivos


7 Matraces aforados de 50 Balanza analtica . Sacarosa
2 Vasos de pp de 250 mL. Refractmetro de mano . Muestra
1 Esptula. problema
Vidrio de reloj. con
1
Agitador. contenido
1 Pizeta de
1 Pipeta azcar.
1 Pipeta graduada de 10 ml Agua
destilada.
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ANALISIS INSTRUMENTAL

6. Procedimiento:

1. Hacer los respectivos clculos para preparar 50 mL de cada uno de los


estndares, desde el cero hasta el 35% de sacarosa.

2. Una vez tenidas las cantidades de sacarosa necesarias, pesar en la


balanza analtica dichas medidas y aforar a 50 mL con cada uno de los
matraces.

3. Ya hechos los estndares externos, leer el contenido de grados Brix de


cada uno en el refractmetro de mano.

4. Teniendo los grados Brix de cada uno de los estndares, elaborar la curva
de calibracin de estndar externo.

5. Leer cada una de las muestras problema con contenido de azcar en el


refractmetro de mano.

Ubicar las muestras problema dentro de la curva de calibracin de estndar


externo y obtener el porcentaje de sacarosa que contiene cada una.
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7. Observaciones

En la primera muestra (Disolucin de 35 gr de


sacarosa) obtuvimos una lectura de 30 grados brix.

En la segunda muestra (Disolucin de 12.25 gr de


sacarosa) se obtuvo una lectura de 11 grados brix.

En la tercera muestra (Disolucin de 0.06 gr de


sacarosa) se obtuvo una lectura de 0 grados brix.

NOTA: Los grados brix varan dependiendo de


la concentracin de sacarosa en cada estndar
o disolucin.

Refractmetro de mano
El refractmetro de mano se emple para para medir
los porcentajes de azcar de la muestra preparada.
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Departamento: Elabor:
Ingeniera Bioqumica. Jess Juan Len Guerra
Materia:
ANALISIS INSTRUMENTAL

7. Cuestionario

1.- Qu es una disolucin patrn?


R: Una solucin patrn es la disolucin de una sustancia utilizada como
referencia al momento de hacer una valoracin o estandarizacin.

2.- En qu consiste la calibracin?


R: mantener y verificar el buen funcionamiento de los equipos, responder los
requisitos establecidos en las normas de calidad y garantizar la fiabilidad y la
trazabilidad de las medidas.

3.- Qu es un estndar externo? Cundo se emplean?


R: Es un mtodo cuantitativo en cromatografa, especialmente en
cromatografa liquida, donde se utiliza una sustancia de concentracin
conocida y molcula similar a la que se va a cuantificar.

Elabor: Yoczet ngeles Quiterio


8. Conclusin

Con el ingreso de datos en Excel, obtenidos mediante la lectura de grados brix en


un refractmetro de mano y, haber sabido los gramos de soluto (sacarosa) por 100
ml de solvente de cada una de las muestras, pudimos obtener la curva de
calibracin de estndar externo, por lo tanto, logramos el objetivo de la prctica
que dice: Elaborar una curva de calibracin con una solucin patrn externa,
utilizando sacarosa como analito, para posteriormente leer la concentracin de
una muestra problema.
Elabor: Daniel de Jess Mndez Tadeo

9- Fuentes bibliogrficas
Sierra Alonso, I. Anlisis instrumental: Algunas herramientas de
enseanzaaprendizaje adaptadas al EEES Volumen 1 de Anlisis instrumental.
Espaa: Netbiblo. (2009)
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ANALISIS INSTRUMENTAL

Diagrama de Flujo

Hacer los respectivos clculos


Ingresar ordenandamente al para preparar 50 mL de cada
laboratorio. uno de los estndares, desde el
cero hasta el 35% de sacarosa. .

Una vez tenidas las cantidades


Ya hechos los estndares
de sacarosa necesarias, pesar
externos, leer el contenido de
en la balanza analtica dichas
grados Brix de cada uno en el
medidas y aforar a 50 mL con
refractmetro de mano.
cada uno de los matraces.

Leer cada una de las muestras Teniendo los grados Brix de


problema con contenido de cada uno de los estndares,
azcar en el refractmetro de elaborar la curva de calibracin
mano. de estndar externo.

Elabor: Mara Fernanda Ramos Gmez


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Coatzacoalcos. No. 1 FEBRERO 2015

Departamento: Ingeniera Bioqumica.

Materia:
ANALISIS INSTRUMENTAL

Curva de calibracin

gr de soluto por 100 ml de solvente Grados Brix


35 30
12.25 11
4.28 4
1.5 2
0.52 1
0.18 0.5
0.06 0
y = -0.0011x2 + 0.8841x + 0.3451
Curva de Calibracin R = 0.9995
35

30
Concentracin en gr.

25

20

15

10

0
0 5 10 15 20 25 30 35 40
Grados Brix

Elabor: Rey Miguel Agama Torres

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