Seguimiento del impacto de la elevacin andina en la evolucin de las plantas neotropicales

Estudios filogenticos recientes han revelado el papel principal desempeado por el

levantamiento de los Andes en la extraordinaria diversificacin de la flora Neotropical. Sin
embargo, estos estudios han considerado tpicamente el levantamiento andino como un
evento nico y limitado en el tiempo que fomenta la evolucin de los elementos de las tierras
altas. Esto contrasta con las reconstrucciones geolgicas que indican que el levantamiento
ocurri en perodos discretos de oeste a este y que afect a diferentes regiones en diferentes
momentos. Presentamos un enfoque para integrar la tectnica andina con reconstrucciones
biogeogrficas de plantas neotropicales, utilizando la familia del caf (Rubiaceae) como grupo
modelo. La distribucin de esta familia abarca hbitats montaosos y montaosos, as como las
tierras bajas tropicales de Amrica Central y del Sur, ofreciendo as una oportunidad nica para
estudiar la influencia del levantamiento andino en toda la flora Neotropical. Nuestros
resultados sugieren que las Rubiaceae se originaron en los Paleotrpicos y utilizaron la
conexin boreotropical para llegar a Amrica del Sur. Los patrones biogeogrficos encontrados
corroboran la existencia de una barrera de dispersin duradera entre los Andes Norte y Central,
el "Portal Andino Occidental". El levantamiento de la Cordillera Oriental termin con esta
barrera, permitiendo la dispersin de linajes boreotropicales hacia el Sur, pero Dio lugar a un
enorme sistema de humedales ("Lake Pebas") en la Amazona occidental que impidi la
especiacin in situ y la dispersin florstica entre los Andes y la Amazonia durante al menos 6
millones de aos. Aqu, proporcionamos evidencia de estos eventos en las plantas.

El levantamiento de los Andes tropicales en el Neogene tuvo un profundo impacto en la

historia del continente sudamericano. Cambi el curso del sistema amaznico de fluir hacia el
noroeste al sistema moderno que fluye hacia el lado atlntico (1, 2) y afect el clima de la
regin formando la nica barrera a la circulacin atmosfrica en el hemisferio sur (3). Recientes
estudios filogenticos han demostrado que la orogenia andina tambin tuvo un papel
importante en la evolucin de la flora neotropical. Los neotrpicos tienen la mayor diversidad
de especies vegetales en el mundo (4). Tradicionalmente, esta riqueza se ha explicado en
trminos de factores ambientales (5), pero ltimamente se han desarrollado explicaciones ms
integradoras que enfatizan el papel de los factores histricos y evolutivos en la formacin de la
diversidad neotropical (6, 7). La "hiptesis del conservadurismo tropical", por ejemplo, sostiene
que hay ms especies de plantas en el Neotrpico simplemente porque ms linajes se
originaron y diversificaron all, debido a la estabilidad climtica a largo plazo de la regin ya la
tendencia de las especies a conservar su Nichos climticos durante el tiempo evolutivo (7, 8).
Ahora tambin est claro que parte de esta riqueza ha sido obtenida por la migracin de linajes
de otras regiones biogeogrficas (6). Por ejemplo, familias pantropicales de plantas como
Malpighiaceae, Fabaceae y Annonaceae (6, 9, 10, 11) se originaron en latitudes templadas
como parte de la antigua flora boreotropical (12-14) y posteriormente entraron en el
Neotropics via Las cordilleras de Amrica Central y los recin formados Andes del Norte.

Un punto en comn con estas hiptesis es el papel clave que la formacin de los Andes
tropicales habra tenido en la diversificacin histrica de la flora neotropical (15). Recientes
estudios filogenticos han demostrado que el levantamiento andino actu tanto como una va
de dispersin para los linajes boreotrpicos (16, 17) como un motor para promover una
diversificacin rpida, mediante especiacin aloptrica y desplazamiento ecolgico, en tierras
altas (16-19) y montanas (11) ) Hbitats. Menos estudios, sin embargo, han documentado el
impacto del levantamiento andino en la flora amaznica de tierras bajas. Claramente, el
levantamiento debe haber afectado a estos taxa formando una nueva barrera bitica y
cambiando profundamente la hidrologa y el clima de la regin (20). Adems, los estudios
biogeogrficos previos sobre las radiaciones andinas han considerado tpicamente la orogenia
andina como un evento nico y limitado en el tiempo, generalmente en conexin con el
levantamiento final de los Andes (Mioceno al Pleistoceno) (11,19). Esto contrasta con las
reconstrucciones geolgicas que indican que el levantamiento tuvo lugar en perodos discretos,
progresando de sur a norte y de oeste a este y afectando diferentes regiones en diferentes
momentos (2, 3, 21, 22). Las incursiones marinas episdicas, relacionadas con el nivel global
del mar, aumentan durante las fases tectnicas extensionales que siguieron a perodos de
levantamiento mayor, tuvieron un impacto dramtico en los patrones de drenaje de la regin,
como lo demuestran las pruebas paleogeogrficas y paleontolgicas (1,2,23-28) . Estas
incursiones marinas han sido discutidas en relacin a su papel como va en la transicin
evolutiva de hbitats marinos a hbitats de agua dulce de peces neotropicales (24, 29), pero
tambin podran haber actuado como barreras a la dispersin o como eventos de vicariancia
que fragmentan los rangos de Animales y plantas terrestres. Parece sorprendente que, a pesar
de las cada vez ms detalladas reconstrucciones geolgicas (2, 24, 26-28), hasta el momento
ningn estudio ha intentado documentar el efecto de estos eventos sobre la evolucin de la
flora neotropical. En general, las reconstrucciones detalladas se han visto obstaculizadas por la
falta de resolucin en muchos clados ricos en especies andinas (19). Los mtodos
biogeogrficos actuales requieren filogenias bien resueltas y la incertidumbre en las relaciones
filogenticas dificulta la reconstruccin de la secuencia especfica de sucesos geolgicos de
vicariancia y especiacin.

Aqu, utilizamos una integracin de mtodos filogenticos, biogeogrficos y de datacin

molecular para reconstruir la historia evolutiva de las tribus Cinchoneae e Isertieae, que en
conjunto forman uno de los principales clados de Neotropical Rubiaceae. La distribucin de
este clado abarca hbitats montaosos y montaosos (los Andes, la Guayana y los Escudos
Brasileos), as como bosques tropicales de tierras bajas (la Amazonia y el Choco). Por lo tanto,
ofrece una oportunidad nica para desentraar los procesos evolutivos que subyacen a la
evolucin botnica en la regin. Nuestros resultados revelan un nivel extraordinario de
congruencia entre la evolucin de las Rubiaceae neotropicales y el progresivo levantamiento
andino de oeste a este, lo que provoc una serie de incursiones marinas y sistemas lacustres
que bloquearon la dispersin de las plantas y modelaron la distribucin de los modernos flora.

Grupo de estudio La familia del caf (Rubiaceae) es la cuarta familia ms grande de plantas con
flores, con unas 13.100 especies en 611 gneros y 3 subfamilias (30, 31). Aunque cosmopolita
en la distribucin, su diversidad ms alta se confina claramente a los trpicos. La subfamilia
Rubioideae est pantropically distribuida y comprende algunos grupos altamente diversos en el
Neotropics (por ejemplo, Palicoureeae y Spermacocae), pero se concentra de otra manera al
viejo mundo donde se origin probablemente (32, 33). La subfamilia Ixoroideae muestra un
patrn similar, ya que comprende un clado neotropical rico en especies (la alianza ''
Condaminae-Calycophylleae ''), pero de otra manera se concentra en los paleotrpicos.
Contrastando, excepto para la tribu Naucleeae, la subfamilia grande Cinchonoideae es
predominantemente Neotropical. En la Sudamrica tropical, Cinchonoideae est representada
por las tribus hermanas Cinchoneae e Isertieae, que han demostrado construir un clado
fuertemente apoyado (34) y algunas veces se trata como una sola tribu (30). Comprendiendo
unas 130 especies de pequeos rboles y arbustos divididos en 11 gneros [ver informacin de
apoyo (SI) Tabla S1], las Cinchoneae e Isertieae son componentes ecolgicos importantes de
una amplia gama de hbitats. Algunas especies son tambin econmicamente importantes
como fuente de quinina. La distribucin de Isertieae se concentra en las tierras bajas de la
cuenca del Amazonas y la Guayana oriental, mientras que las Cinchoneae se concentran
principalmente en los hbitats montaosos de los Andes septentrionales y centrales,
alcanzando los 3.300 m (Fig. S1 y S2).

Resultados y discusin

Gentry (35), siguiendo a Raven y Axelrod (36), enumer las Rubiaceae neotropicales como un
grupo derivado de Gondwana, evolucionando en aislamiento desde la separacin de Amrica
del Sur de frica. Este origen hipottico predice que (i) el grupo tiene una edad mnima de 100
Ma (37), y (ii) los linajes Viejo y Nuevo Mundo son recprocamente monofilticos (6). En
contraste, la hiptesis de origen boreotrpico predice que i) los grupos sudamericanos se
derivan de parientes del norte con tboros del Viejo Mundo como grupos hermanos, ii) la
divergencia entre los grupos Viejo y Nuevo Mundo ocurri entre 40 y 50 Ma, es decir,
Alrededor del Eoceno climtico ptimo, que favoreci el intercambio de elementos florsticos
tropicales entre estas masas terrestres (38), y (iii) los fsiles terciarios tempranos se han
encontrado en Norteamrica, Europa o Asia (6). Nuestra reconstruccin biogeogrfica (Fig. I y
II) corrobora un origen boreotropical en las tres predicciones: (i) nuestra filogenia muestra las
tribus hermanas neotropicales Cinchoneae e Isertieae anidadas dentro de un clado de tribus
principalmente centroamericanas y antillanas, Hermana de la tribu esencialmente africana
Naucleeae y de la subfamilia paleotropical Ixoroideae; (Ii) nuestras estimaciones de tiempo de
divergencia sitan al ancestro comn ms reciente (MRCA) de las Rubiaceae en el Paleoceno
Temprano (66.1 Ma, 63.0-68.8, vase la Tabla S2), mientras que la edad mnima de
Cinchonoideae se estima como 51.3 (47.8- 54.6) Ma, mucho despus de que la ltima cadena
de islas conocida entre frica y Amrica del Sur posiblemente existiera [Cretcico Superior,? 88
Ma (37)]; Y finalmente, (iii) varios fsiles de Cephalanthus indican la presencia de la tribu
Naucleeae en Europa desde el Eoceno Tardo (39) (vase Texto SI).

. Hasta el Eoceno Tardo o el Oligoceno Temprano, un cinturn continuo de vegetacin

boreotropical cubri gran parte del sur de Norteamrica, Eurasia meridional y frica
noroccidental (40). En ese momento, la migracin de las plantas a travs de la conexin directa
a la tierra oa travs de brechas de agua limitadas (6) podra haber sido posible a travs del
puente terrestre "Thulean" del norte del Atlntico (13, 41) oa travs del puente terrenal
bergiano '' (42). Aunque los climas durante el Eoceno temprano eran ms calientes que hoy
(38), Beringia estaba en una paleolatitud considerablemente ms alta que el puente de
Thulean. Por lo tanto, la dispersin de elementos boreotrpicos se considera ms probable en
todo el Atlntico Norte durante este perodo (13, 42), lo que tambin es apoyado por el hecho
de que los fsiles ms antiguos de Cephalanthus se han encontrado en Europa (39). En
conjunto, estas lneas de evidencia sugieren fuertemente que las Rubiaceae usaron los
corredores proporcionados por la vegetacin boreotropical y el puente de tierra del Atlntico
Norte como una va para llegar a Norteamrica en el Paleoceno Tardo / Eoceno Temprano
(Figura 2I). Desde Amrica del Norte, las dispersiones a Amrica del Sur (Fig. 2II) pueden haber
sido facilitadas por las Antillas Proto-Mayores en el Eoceno Temprano y ms tarde por las
Antillas Mayores y la Cordillera Avies alrededor del lmite Eoceno / Oligoceno [GAARlandia, 33-
35 Ma (43)]. Nuestras estimaciones de tiempo de divergencia sugieren que los antepasados de
Cinchonoideae llegaron al noroeste de Amrica del Sur alrededor del Eoceno Temprano /
Medio (49.2 Ma, 44.9-53.1, nodo 26 en la Figura S4). En esa poca, los niveles del mar, unos 50
m por encima de los actuales (44), crearon una incursin marina del Caribe que limitaba la
dispersin de tierras hacia el este (1, 24) y otra incursin del Pacfico que bloqueaba la
dispersin hacia el sur (24, 45, 46) (Fig. 2III). Las zonas de tierras bajas estaban cubiertas por
bosques tropicales hmedos de dosel cerrado (47). La mayor parte de los Andes an no se
haban formado, excepto algunas montaas bajas en las regiones que ahora corresponden a los
Andes centrales y meridionales (3, 21). Curiosamente, la MRCA de las tribus Isertieae y
Cinchoneae se reconstruye como adaptada a las tierras bajas (ver Fig. S5). Pero a partir del
Eoceno medio, la orogenia andina pas por una fase importante de construccin de montaas,
a veces llamada Incaic II (21, 48). Esta fase se extendi longitudinalmente, y en la regin norte
provoc el levantamiento de la Cordillera Central (21, 49). Los hbitats montanos recin
formados deben haber actuado como una barrera ecolgica para los taxones de las tierras
bajas, lo que parece explicar la disyuncin geogrfica (Andes vs. Amazonia) entre los MRCA de
las tribus Cinchoneae e Isertieae (Fig. 1III y Fig. S5). En el caso de Isertieae, es muy probable
que su MRCA se reconstruya como confinada a la Amazonia de las tierras bajas (Figura 2III),
donde radi por primera vez en el Oligoceno Tardo, dando origen a los gneros Kerianthera e
Isertia (Figura 1III y Figura S5) . La diversificacin en Isertieae se produjo principalmente en el
Mioceno Medio y Tardo, que es sorprendentemente coincidente con el levantamiento de la
Cordillera Oriental en los Andes del Norte (Fig. 1IV; (2, 21)]. Para la tribu Cinchoneae, la
adaptacin ecolgica a altitudes superiores parece haber sido la clave para su diversificacin,
con la mayora de los eventos de especiacin confinados a hbitats montanos en los Andes
septentrionales y centrales (Fig. 1 III y IV y Fig. S5).

Portal Andino Occidental. La mayora de las optimizaciones indican que el MRCA de

Cinchoneae estaba confinado a los Andes del Norte, presumiblemente en los nuevos hbitats
creados por la Cordillera Central (Figura 1III). Desde el Eoceno hasta el Mioceno Medio, algunos
estudios han propuesto que las incursiones martimas del Pacfico invadieran un corredor de
tierras bajas entre los Andes septentrionales y centrales a la latitud del sur de Ecuador / norte
del Per [1,3,5 S , 46, 50)], denominado "Portal Andino Occidental" (WAP, Fig. 2III) o
"Guayaquil Gap" (23). La indicacin de estas incursiones proviene de las ocurrencias fsiles de
organismos marinos y palynomorphs (23, 46) y evidencia paleosedimentary (1, 2, 50). Se
sugiere que el WAP se elev y las incursiones marinas terminaron en relacin con el
levantamiento de las cordilleras orientales de los Andes centrales y septentrionales a partir del
Mioceno Medio (13-11 Ma) (2, 21, 50).

Nuestra reconstruccin biogeogrfica de la subfamilia Cinchonoideae (Fig. 1III) corrobora la

existencia de una barrera de dispersin entre los Andes septentrional y central coincidente con
la WAP y proporciona indicios para la persistencia de esta barrera hasta el Mioceno Medio. A lo
largo del Oligoceno y del Mioceno Temprano, todas las reconstrucciones del rea ancestral de
la tribu Cinchoneae ocurren -en parte o exclusivamente- en los Andes del Norte (Figura 1III). El
levantamiento del WAP se observa entonces como al menos 5 migraciones independientes
desde los Andes Norte a los Andes Centrales dentro de los gneros Cinchona y Ladenbergia
(Figura 1IV). Los 5 eventos estn fechados en torno al Mioceno Medio / Tardo (12-10 Ma, Fig.
S4 y Tabla S2), casi simultneamente con el final sugerido de incursiones marinas en el WAP (1,
2, 21, 50). Varias preguntas siguen sin respuesta sobre la extensin geogrfica y la duracin de
los entornos marinos en el WAP (24, 28]. Sin embargo, lo que s est claro es que constituy
una barrera biogeogrfica importante y duradera, como lo demuestra el hecho de que muchos
taxones montanos exhiben centros de endemismo a ambos lados de la WAP (vase SI Text para
una discusin ampliada), lo que sugiere que las especies En esos grupos no fueron capaces de
cruzar el WAP durante su tiempo de radiacin. En las plantas, este patrn ha sido reconocido
en muchas familias, como Campanulaceae, Calceolariaceae, Tropaeolaceae, Loasaceae,
Passifloraceae, Alstroemeriaceae, y Grossulariaceae (ver SI Text for references). En las aves,
esta rea ha sido reconocida desde hace mucho tiempo como un punto de rotacin entre las
regiones biogeogrficas Andina del Norte y Central del endemismo (51).

Lago Pebas. Hasta el final del Oligoceno (? 24 Ma), un sistema fluvial denominado paleo-
orinoco dominaba el drenaje del noroeste de la Amazona y las cuencas andinas del cabo hacia
el lago Maracaibo, en la costa caribea. Luego, en el Mioceno Temprano (? 23 Ma) los cambios
geotectnicos en la Cuenca del Amazonas asociados con el levantamiento continuo de la
Cordillera Oriental en los Andes Centrales (28) hicieron que la Amazonia occidental se
sumergiera gradualmente, de sur a norte y de oeste a este . Este proceso cre un sistema
enorme (> 1 milln de km2) de lagos de larga duracin y humedales de al menos 17 a 11 Ma,
conocidos como "Lake Pebas" o "Pebas Sea" (24-28). Si se trata de un sistema puramente
fluvio-lacustre (de agua dulce) o si los marinos estn presentes tambin es un tema de debate
(24, 27, 28). Sin embargo, la mayora de los autores coinciden en que la Amazonia occidental
estaba completamente inundada por algn tipo de sistema de humedales desde al menos el
Medio a Mioceno Superior y que este sistema estaba conectado a la incursin marina del
Caribe en el norte. A partir del Mioceno Superior (11-7 Ma), hubo un nuevo perodo de
elevacin rpida de las montaas, afectando principalmente a las Cordilleras Andinas
Orientales (a veces denominadas fases quechuas II y III). Esto supuestamente provoc el
surgimiento del margen occidental del Escudo Guayans, que cerr la conexin caribea del
paleo-orinoco, desplaz el drenaje de la Cuenca Amaznica hacia el este y condujo a la
desaparicin del Lago Pebas (27,28) (Fig. 2V ). Las condiciones acuticas, sin embargo, parecen
haber persistido en la Amazona occidental occidental hasta al menos 7 Ma, cuando el sistema
Amazonas moderno entr en vigor (28).

Estudios previos han proporcionado indicaciones para el papel potencial que desempea el
lago Pebas como una va para que los organismos marinos se dispersen en biotopos de agua
dulce, basados en sucesiones fsiles de moluscos y filogenias de ADN de peces neotropicales
(23, 24, 26). Por otro lado, si este sistema de humedales fuera tan grande e interconectado
como se sugiri, tambin debera haber actuado como una barrera bitica a la dispersin de
organismos terrestres entre los Andes y las regiones orientales de la Amazonia y la Guayana.
De hecho, la existencia de una barrera de dispersin entre los Andes y las tierras bajas de la
Amazona durante el Mioceno Medio es corroborada por nuestras reconstrucciones
biogeogrficas (Figura 1IV). Hasta el lmite Mioceno Temprano / Medio, se infiere que varios
antepasados de la tribu Cinchoneae se han extendido en ambas reas. Pero despus de eso,
coincidiendo con el tiempo en que se propone que el lago Pebas haya existido, todos los linajes
ancestrales de Cinchoneae e Isertieae parecen haber ocupado los Andes o la Amazonia, pero
no ambos. La mayora de las especies endmicas de Isertieae se encuentran actualmente en la
Guiana y en las tierras bajas del Amazonas oriental (Figura S1A), mientras que las
distribuciones de la amazonia occidental y central estn representadas principalmente por
especies muy extendidas, lo que sugiere que estas distribuciones son el resultado de la
expansin reciente del rango probablemente despus del secado de Lago Pebas. Del mismo
modo, varios nodos ancestrales en Remijia se reconstruyen como ocurriendo en ambos lados
de la barrera (Fig. 1V), pero estos nodos se datan despus de la frontera Mioceno / Plioceno (?
5.3 Ma, Fig. S4) y as posdata el cierre de la barrera Pebas. El restablecimiento final de las
conexiones terrestres entre los Andes y la Amazonia se evidencia por al menos 7 eventos de
colonizacin independientes en Cinchoneae e Isertieae desde el Mioceno Superior (Figura 1V).
Finalmente, el surgimiento de nuevas tierras en Centroamrica despus del cierre del istmo de
Panam (3,5Ma) (21, 52) proporcion reas adecuadas para la dispersin hacia el norte de los
linajes sudamericanos. Especies tales como Joosia umbellifera e Isertia haenkeana, que ahora
estn muy extendidas en Centroamrica, probablemente se dispersaron poco despus del
establecimiento de esa conexin terrestre (Fig. 2V).

Materiales y mtodos

Los anlisis filogenticos se realizaron bajo parsimonia y mtodos Bayesianos como se

implement en PAUP * (53) y MrBayes3 (54). Se utilizaron gneros representativos de 4
familias de Gentianales como outgroup, basndose en la evidencia de que las Rubiaceae son el
grupo hermano del resto de Gentianales (por ejemplo, ref. 55). El ingrupo incluy
representantes de todas las subfamilias Rubiaceae, con nfasis en la subfamilia Cinchonoideae
en la que todas las tribus estaban representadas (Figura 1). El conjunto de datos final
comprenda 62 especies y 5.894 caracteres, derivados de matK, rbcL, ITS1-5.8S-ITS2, trnL-F y
rps16 (Tabla S3). Por lo tanto, nuestro conjunto de datos comprendi unos 3-3,5 veces ms
caracteres que los estudios similares (por ejemplo, las referencias 9 y 19), lo que dio lugar a
una robusta filogenia donde el 80% de todos los nodos de rbol fueron fuertemente apoyados
(bayesiano posterior probabilidad de los valores, O el cuchillo de malla? 85%). El conjunto de
datos y los rboles estn disponibles en TreeBase (www. Treebase.org). S2334 y M4437. Las
tasas evolutivas se estimaron con el algoritmo Penalizacin Probabilidad implementado en r8s
(56). Se ha sugerido que la calibracin exacta de los fsiles es un factor clave en la estimacin
de la edad (57). En este caso, las edades absolutas se estimaron mediante el uso de frutos
fsiles y semillas de Cephalanthus, un gnero con un registro fsil excepcionalmente rico y
fiable a partir del Eoceno tardo (Figura S4). Adems, una restriccin de edad mxima de 78 Ma
se aplic de forma independiente en el nodo basal del rbol basado en la edad de la corona de
Gentianales (58). Finalmente, para incorporar la incertidumbre topolgica y de longitud de
rama en nuestras estimaciones de edad, 1.000 rboles aleatoriamente muestreados de la
distribucin estacionaria bayesiana fueron fechados de forma independiente y los resultados
resumidos para obtener valores medianos e intervalos de credibilidad del 95% de las edades de
los nodos (Figura S4 y Tabla S2). Ver SI Text para una descripcin detallada de los mtodos
filogenticos y de datacin utilizados.

Se definieron once reas (Fig. 1 Inset) para el anlisis biogeogrfico basado en los patrones de
distribucin existentes de Rubiaceae y en la historia geolgica (3, 21). Siempre que fue posible,
intentamos maximizar la congruencia con otros estudios biogeogrficos en Amrica del Sur (59,
60). Se utiliz el anlisis de dispersin-vicariancia [DIVA (61, 62)] para inferir distribuciones
ancestrales y eventos histricos involucrados en la historia biogeogrfica de Rubiaceae. Para
superar la incertidumbre asociada con la estimacin filogentica, se utiliza un enfoque que las
medias DIVA reconstrucciones biogeogrficas y temporales sobre una muestra bayesiana de
rboles altamente probables (en este caso n? 1.000), generando credibilidad apoyo valores
para las relaciones filogenticas alternativas. La integracin sobre la distribucin posterior de
los rboles a menudo revela la preferencia por un solo conjunto o ms restringido de
soluciones, lo que reduce la incertidumbre en las optimizaciones DIVA (63). El muestreo
incompleto de taxones puede causar problemas en los mtodos de inferencia histrica, ya que
reduce la precisin de las reconstrucciones de los estados ancestrales (vase la referencia 64
para una vista diferente). Esto es particularmente problemtico en una familia grande como
Rubiaceae, que abarca casi todos los continentes. Para superar este problema, utilizamos reas
abarcadoras fuera de los Neotrpicos, donde se encuentran la mayora de Ixoroideae (as como
el primer clade divergente en Cinchonoideae, la tribu Naucleeae). Tambin estimamos el sesgo
geogrfico en nuestra muestra para las tribus neotropicales Cinchoneae e Isertieae, el enfoque
principal de este artculo. Los resultados mostraron que nuestro muestreo de taxones es
bastante representativo de la distribucin real de las especies dentro de cada gnero y tribu
(ver Tabla S4, Figura S6 y Texto SI para una discusin detallada de los patrones de distribucin
en estas tribus). Adems, para probar la sensibilidad de nuestras reconstrucciones DIVA a
taxones que faltan, se realiz una serie de simulaciones heursticas en las que se aadieron
taxones hipotticos de reas subrepresentadas a nodos clave en la filogenia de estas dos tribus.
Las reconstrucciones ancestrales DIVA demostraron ser muy estables a la adicin de taxa
faltantes, al menos para los nodos involucrados en el escenario WAP y Lake Pebas (Figura S7).
Tambin examin el efecto de los taxones que faltaban en las estimaciones de tiempo de
divergencia mediante la eliminacin aleatoria de taxones de la muestra original y el clculo de
los tiempos de divergencia en estos conjuntos de datos reducidos. Como Linder et al. (65), PL
demostr ser en gran parte insensible al muestreo de taxones, y para la mayora de los nodos
las edades estimadas estaban dentro del intervalo de confianza del 95% del conjunto completo
de datos (ver SI Text para ms detalles sobre simulaciones). Esto nos da confianza en que el
escenario biogeogrfico presentado aqu (Fig. 2) no sera significativamente alterado por la
adicin de taxones que faltan.