Cromatografa: tcnica de separacin en la cual, los componentes de la muestra, se distribuyen entre

dos fases de diferente naturaleza, como consecuencia de la variacin de velocidad que se establece al
ser arrastrados por una fase mvil, lquida o gaseosa, a travs de una fase estacionaria, slida o lquida.

Si el soluto es separado del adsorbente por lavado antes del anlisis, entonces se le llama elucin y al
agente a ser analizado se le llama eluyente, al lquido que sale de la columna se le nombra efluente.

Difusin longitudinal: Migracin de las molculas o iones desde la zona ms concentrada hacia las
ms diluidas.

Resolucin de columna: La resolucin (Rs) de una columna es una medida cuantitativa de su

capacidad para separar dos analitos (A y B), y permite evaluar la separacin entre dos bandas con
respecto a sus anchos:

Con una resolucin igual a 10 el solapamiento entre los dos picos es del 4 %. Con una
resolucin de 15 el solapamiento es tan slo del 03 % y permite una separacin
esencialmente completa de los dos componentes:

Problema general de la elucin

El problema general de la elucin

En muestras complejas de un gran nmero de componentes, en muchas ocasiones resulta
difcil encontrar unas condiciones experimentales nicas que consigan la resolucin de
todos los picos de los analitos y adems permitan la perfecta cuantificacin de los
mismos.

Una solucin frecuente consiste en cambiar las condiciones que afectan a k mientras tiene
lugar la separacin. En cromatografa de lquidos se recurre a variaciones en la
composicin de la fase mvil durante la elucin (elucin en gradiente). En cromatografa
de gases, el incremento de temperatura permite conseguir las condiciones ptimas para las
separaciones (programacin de temperatura).

Variables que generan el ensanchamiento de banda:

Los factores que contribuyen a la anchura de banda son:

Difusin en remolino o difusin de Eddy: las molculas en disolucin pueden

atravesar la columna siguiendo trayectorias de distinta longitud con tiempos de
retencin diferentes; es directamente proporcional al dimetro de las partculas que
componen el relleno de la columna y no se ve afectada por la velocidad de
difusin de la fase mvil, cuando stas son suficientemente altas.

Difusin longitudinal: desde la zona central de la banda, en la que la concentracin

de solutos es mayor, hacia los extremos de la banda, donde la concentracin es
menor; es inversamente proporcional a la velocidad de flujo de la fase mvil,
por lo que cuanto mayor es la velocidad de flujo de la fase mvil ms breve es el
periodo de tiempo que el analito reside en la columna (la difusin desde el centro de
la banda hacia los extremos tiene menos tiempo para producirse). La difusin en los
lquidos es muy lenta y su efecto es mucho menor que en los gases.

Resistencia a la transferencia de masa entre la fase mvil y la fase estacionaria,

ya que el equilibrio de distribucin no es inmediato y no tiene el tiempo suficiente
para establecerse, por lo que es proporcional a la velocidad de flujo.

Resumimos los factores que afectan al ensanchamiento (permiten optimizar el valor de H):

Dimetro de las partculas que constituyen el relleno de la columna: al aumentar

el dimetro aumenta la difusin en remolino
 Dimetro de la columna: al disminuir el dimetro de la columna se disminuye la
contribucin de la difusin de remolino a la altura de plato terico.

Coeficiente de difusin: su influencia es detectable en el caso de los gases, cuando

la velocidad de flujo no es muy grande y el trmino de difusin longitudinal es
determinante (aumenta con la temperatura); en el caso de los lquidos su efecto es
mnimo.

Velocidad de flujo de la fase mvil, ya que las velocidades suelen ser lo

suficientemente elevadas como para que el trmino de transferencia de masar sea el
que controla la eficacia de la columna.

Otros factores, como la naturaleza de la fase mvil (su viscosidad, por ejemplo), el
tamao de la muestra o la rapidez de la inyeccin (una inyeccin lenta conduce
al ensanchamiento de banda y disminuye la eficacia).

En HPLC, se debe tener en cuenta el ensanchamiento de banda extracolumna.

Diferencia entre cromatografa gas-lquido y liquido liquido

Diferencia entere cromatrografia L-L y L-S

Cromatografa de Adsorcin (lquido - slido o cromatografa

de fases normales).
Cromatografa de Reparto (o lquido - lquido), se basa en
las caractersticas de solubilidad
relativa de los solutos entre la fase mvil y una fase estacionaria
de un lquido no polar. La fase lquida se impregna a un soporte
inerte de slice o, en el caso de cromatografa de fase
invertida, se une qumicamente.

Variables que afectan al valor de correspondiente en los analitos

Como puede modificarse el factor de capacidad de una especie