UNIVERSIDAD TCNICA PARTICULAR DE LOJA

ESTUDIANTE: BRYAN ISRAEL MELGAR PAZ

FECHA: 24/5/2017
CUESTIONARIO 2
-Microorganismos utilizados en Microbiologa industrial y Biotecnologa

1. Diferencias entre procariota y eucariota

PROCARIOTA
En su pared celular contiene
glicopptidos.
En los ribosomas son 70s y tienen dos
sub unidades 30S (pequea) y 50S
(grande) sub-unidades.
Carecen de mitocondrias y los procesos
de liberacin de energa
Contiene una macromolcula de ADN
EUCARIOTA
Contienen celulosa y polmeros de
azcar en su pared celular
Ribosomas eucariticos son 80S y tienen
subunidades de 40S (pequeas) y 60S
(grandes). Unidades de svedberg,
consiste en la sedimentacin.
Aerbicas se producen los procesos de
respiracin y fosforilacin oxidativa en
la liberacin de energa
Tienen ADN propagado en varios
cromosomas
Tienen estructura dentro del ncleo para
la sntesis de ARN

2. Ventajas del uso de los microorganismos en Biotecnologa comparado a plantas y

animales
Se tiene las siguientes ventajas:
Los microorganismos tienen un crecimiento acelerado con respecto a las plantas y animales.
La obtencin de los productos con los microorganismos s los puede obtener en menor tiempo
comparndolos con los animales y plantas.
No se necesita un espacio grande para el crecimiento de los microorganismos.
El clima nos les afecta a los microorganismos, como las plantas y los animales si se ven
afectados.
Las enfermedades no pueden afectar a los microorganismos.

3. Caractersticas y requerimientos de microorganismos utilizados en Biotecnologa

Caractersticas y Requerimientos:
Crecimientos en medios sencillos
Que no requieran de factores de crecimientos
Crecimiento vigoroso y rpido en el medio
Producir los productos deseados en el menor tiempo posible.
Los productos finales no deben incluir materiales txicos.
Estabilidad fisiolgica y buena gentica.
Tener cuidado de las mutaciones pueden producir productos indeseados.
Tener en cuenta el dimetro bacteriano del organismo para el final de la cosecha poder
eliminar lo ms pronto el microorganismo del producto.
Tener factibilidad que los organismos no requieran de altos valor de O 2 o aireacin.
Debe poseer resistencia a depredadores que afecten a su crecimiento o produccin.

4. Catabolismo de carbohidratos, rutas Embden Meyerhof-Parnas o Gliclisis (EMP) y

pentosas fosfato (PP)
 Reacciones va glucoltica:

1. Sntesis de glucosa-6-fosfato: La glucosa y otras molculas de azcar se fosforilan, esto

impide que la glucosa salga fuera de la clula y aumenta la reactividad del oxgeno. El ATP
es un cosustrato de la reaccin, forma complejos con el Mg 2+. Esta reaccin es catalizada
por la hexocinasa, debido a que la reaccin es irreversible la enzima no tiene capacidad para
retener o acomodar el producto en un sitio activo.

2. Conversin de la glucosa 6 fosfato en fructosa 6 fosfatos: Se convierte en fructosa 6

fosfatos por medio de la isomerasa fosfoglucosa, en una reaccin irreversible. Esta reaccin
comporta un intermediario enodio, que hace el C-1 de la fructosa est disponible para la
fosforilacin.

3. Fosforilacin de la fructosa 6 fosfato: Se utiliza la enzima fosfofructocinasa cataliza de

forma irreversible la fosforilacin de la fructosa 6 fosfato y forma fructosa 1,6 difosfato.

4. Escisin de la fructosa 1,6 difosfato: En esta finaliza la fase 1 de la gluclisis, generando

fos molculas de tres carbonos: gliceraldehdo 3 fosfato y fosfato dihidroxiacetona. Esta
reaccin es una escisin aldlica, en el cual se utiliza la enzima aldolsa por lo que se genera
un aldehdo y una cetona.

5. Interconvesin del gliceraldehdo 3 fosfato y del fosfato dihidroxiacetona: Se utiliza el

gliceraldehdo 3 fosfato como sustrato para la siguiente reaccin de la gluclisis. La triosa
fosfato isomerasa cataliza la conversin reversible del dihidroxiacetona en dliceraldehdo 3
fosfato.
6. Oxidacin del gliceraldehdo 3 fosfato: El G3P se oxida y se fosforila. El producto el
glicerato 1,3 difosfato contiene un enlace de alta energa fosfoanhdro, que puede utilizarse
en la siguiente reaccin para generar ATP. Este complejo es catalizado por la
deshidrogenasa de gliceraldehdo 3 fosfato.

7. Transferencia del grupo fosfato: En esta reaccin se sintnetiza ATP al catalizar la

fosfoglicerato cinasa la transferencia de un grupo fosfato de energa elevada del glicerato
1,3 difosfato al ADP.
 8. Interconversin del 3 fosfoglicerato y del 2 fosfoglicerato: El glicerato 3 fosfato tiene un
potencial bajo de transferencia de un grupo fosfato. Las clulas convierten el glicerato 3
fosfato con su ster fosfato de baja energa en fosfoenolpiruvato.

9. Deshidratacin del 2 fosfoglicerato: La enolasa cataliza la deshidratacin del glicerato 2

fosfato para formar fosfoenolpiruvato (PEP): Tiene un potencial de transferencia de grupo
fosfato mayor que el glicerato 2 fosfato deido a que contiene un grupo de enol-fosfato en
lugar de un ster fosfato simple. Estas formas ceto y enol, se denominan tautomeras.

10. Sntesis de piruvato: En la reaccin final de la gluclisis, la cinasa de piruvato catala la

transferencia de un grupo fosfato desde el PEP al ADP. Se forman dos molculas de ATP
por cada molcula de glucosa. El PEP se convierte en piruvato de manera irreversible
porque esta reaccin la transferencia de un grupo fosfato de una molcula con alto potencial
de transferencia a otra con bajo potencial.

Reacciones va de las pentosas:

El objetivo principal de la va PP parece ser generar energa en forma de NADPH para propsitos
biosintticos y otros y fosfatos de pentosa para la sntesis de nucletidos.
Comienza en la conversin de la ribulosa 5 fosfato en xilulosa 5 fosfato atraves de la epiremasa de
ribulosa 5 fosfato. La transcetolasa cataliza dos reacciones, en la primera la enzima transfiere una
unidad de dos carbonos de la xilulosa 5 fosfato a la ribosa 5 fosfato porduciendo gliceraldehdo 3
fosfato y sedoheptulosa 7 fosfato. En la segunda una unidad de dos carbonos de otra molcula de
xilulosa 5 fosfato se transfiere a la eritrosa 6 fosfato para formar una segunda molcula de
gliceraldehdo 3 fosfato y fructosa 6 fosfato. El resultado es la sntesis de ribosa 5 fosfato y de los
intermediario glucolticos gliceraldehdo 3 fosato y fructosa 6 fosfato para luego la obtencin del
piruvato.

5. Necesidades nutricionales de las levaduras

Se necesita de los siguientes nutrientes para las necesidades energticas de las levaduras:
Carbono: Es el compuesto mayoritario en las levaduras, aportando como fuente de energa y como
fuente de carbono, algunas necesitan mayor compuestos carbonados con respecto a otras. Los
glucsidos son las fuentes de carbono ms utilizadas, estos compuestos tambin aportan la cantidad
de hidrgeno necesaria a la biomasa.
Nitrgeno: Es utilizado por las clulas en los aminocidos, los nucletidos y algunas vitaminas, las
levaduras utilizan al nitrgeno en forma de ion amonio para la sntesis de ciertos aminocidos.
Tener una mezcla de aminocidos permite un mejor crecimiento que un solo aminocido. Una
buena fuente de nitrgeno se requiere de los siguientes criterios:
- Penetracin rpida.
 - Conversin rpida en la clula con el mnimo de etapas de amoniaco.
- Sin ningn efecto secundario txico.
Fsforo: Se encuentra en los cidos nucleicos y los nuclesidos di y tri fosfato. La concentracin de
los iones fosfato regula la sntesis de los lpidos y los glcidos. La clula asimila al fosforo en forma
de iones ortofosfato.
Azufre: El 60% se tiene incorporado en las protenas, el 5% est en forma de sulfato inorgnico
libre, el resto se encuentra en forma de enlaces disolfuro y en aminocidos sulfurados libres. La
fuente de azufre ms utilizada es el sulfato amnico.
Potasio: Es el mineral cualitativamente ms importante en la levadura. Aporta caractersticas
fisiolgicas como:
- A pH cido, el potasio estimula la fermentacin y la respiracin.
- Acta como efector de numerosas enzimas: piruvato quinasa, aldolasa, aldehdo
deshidrogenasa.
- Interviene en la estructura de los ARN.
Las fuentes de potasio utilizadas son cloruro potsico y fosfatos mono y dipotsico. Las levaduras
en fermentacin consumen dos veces ms potasio que en respiracin.
Calcio: No es indispensable para el crecimiento pero juega un papel estimulador en las
sacchromyces. Es utilizado en la fase de crecimiento y se incorpora en las paredes y las membranas
citoplasmticas. Su papel en las membranas es favorecer la integridad celular y tiene un papel
importante en la floculacin.
Zinc: Ayuda en el metabolismo como:
- Un cofactor de enzimas como la aldolasa, es indispensable en la glicolisis.
- Es necesario en la sntesis de vitaminas como la rivoflavina.
- Ayuda la penetracin de la maltosa y la maltotriosa
- Estimula la accin del magnesio.

Manganeso: Permite el aumento del nivel de nitrgeno, de la sntesis de protenas y rendimiento

celular.
Otros iones: El hierro no tiene efecto sobre el rendimiento celular, pero es el centro activo de
algunas enzimas. El bario estimula el crecimiento a baja concentracin.
El cloruro parece necesario para el crecimiento pero se desconoce su papel fundamental.
El sodio es necesario para la concentracin de trazas.
Otros iones estn presentes en la composicin elemental de la levadura en pequea cantidad. Las
impurezas de los constituyentes bsicos de los medios son suficientes para aportar estos iones.
Otros compuestos: Algunos compuestos son factores de crecimiento, compuesto no sintetizado por
una cepa e indispensable para su crecimiento. El inosol tiene un papel importante en la sntesis de
lpidos de las membranas, este puede ser sintetizado por las levaduras. Es necesario tener en cuenta
las interacciones en los diferentes constituyentes, ya que algunas concentraciones afectan al
crecimiento. A concentraciones elevadas de ciertos compuestos pueden ser txicos. En funcin de la
cantidad de carbono y los coeficientes de conversin es necesario as se puede determinar las
cantidades de cada constituyente que permita la produccin mxima.

6. Influencia del entorno

Influyen las siguientes propiedades:

Temperatura: La temperatura de cultivo se encuentra entre 25 y 30C permite efectivamente el
crecimiento de la mayor parte de levaduras. Las levaduras pueden ser clasificadas en psicrfilas,
mesfilas y termfilas segn la temperatura lmite de crecimiento.
Levadura psicrfilas: La temperatura mxima de crecimiento es de 20C hasta 5C, estas levaduras
son limitadas.
Levaduras termfilas: Su temperatura mnima de crecimiento es de 20C y la mxima entre 48-
50C. Estas levaduras viven en los aparatos digestivos de los animales.
Levaduras mesfilas: Se pueden desarrollar entre 0-48C.
La temperatura de crecimiento influye en la composicin de cidos grasos poliinsaturados, el grado
de instauracin es poco modificado por la temperatura. Las levaduras no son termo resistente. La
termo destruccin comienza a partir de los 52C. La resistencia trmica depende de la temperatura
de crecimiento: clulas cultivadas a 36C son ms resistentes que las cultivadas a 23C. Una
elevacin de temperatura por encima de la temperatura mxima de crecimiento conlleva a
modificacin de las protenas, tambin puede llevar a mutaciones que afecten a la produccin.

La presin osmtica y la actividad de agua: A valores inferiores de Aw 0.99 la velocidad de

crecimiento disminuye hasta tender a 0, estos efectos son mal conocidos. El efecto de la presin
osmtica vara de una etapa a otra, la mayor parte de cepas no pueden desarrollarse a actividades de
agua inferiores a 0.90, aunque algunas toleran presiones osmticas ms elevadas correspondientes a
una actividad de agua de 0.60 con un metabolismo lento.
El mecanismo de la resistencia de actividad de agua baja es la acumulacin en la clula de polioles
para minimizar la diferencia de presin osmtica. La minimizacin de la presin osmtica sobre la
membrana citoplasmtica, los polioles tienen una funcin sobre las enzimas. En el caso de la
fermentacin alcohlica, la concentracin de etanol y la presin osmtica estn relacionadas. L
excrecin de etanol se ve frenado por la presin osmtica elevada.
Oxgeno: Todas las levaduras son capaces de desarrollarse en presencia de oxgeno, existen algunas
levaduras que son aerobias estrictas.
Las otras levaduras son aero-anaerobias facultativas entre ellas se tiene:
- Levaduras que prefieren metabolismo fermentativo incluso en presencia de oxgeno
- Levaduras que prefieren metabolismo respiratorio si hay oxgeno
El oxgeno interviene en la sntesis de los esteroles y del cido nicotnico. Si estos compuestos estn
presentes en el medio, las levaduras pueden desarrollarse en anaerobiosis total. En el caso contrario
para la supervivencia de la levadura se necesita 0.0015 miligramos de oxgeno por gramo de
biomasa para llevar a cabo la sntesis de esteroles.
o Agentes qumicos:

Los cidos: La sensibilidad de un cido orgnico depende del pH y despus de la capacidad de la

levadura en metabolizar o eliminar el cido si penetra en la clula. Es por esto que los cidos
srbico y propinico son ms inhibidores que los cidos actico, ctrico y lctico. La accin exacta
de los cidos es mal conocida. Parece que la multiplicacin celular se paraliza mientras que las otras
actividades continan, como algunas levaduras en presencias elevadas de cidos detienen su
crecimiento pero continan respirando y fermentando azcares.
El etanol: No todas las levaduras presentan la misma sensibilidad al etanol. Las ms resistentes son
las sacharomyces. El etanol es txico para algunas cepas en concentracin del 8 al 18%(P/V). La
tolerancia de etanol depende de la composicin de cidos grasos de las membranas citoplasmticas.
La mejor fluidez debida a los cidos grasos insaturados mejora la excrecin del etanol.
El sulfito: El SO2 tienen un efecto inhibidor ms pronunciado sobre las bacterias que sobre las
levaduras, pero entre las levaduras existe diferencias de sensibilidad. La accin del sulfito depende
del pH cuanto ms bajo es el pH ms desplazado se encuentra el equilibrio el compuesto ms activo
contra los microorganismos. A pH menores a 4 puede provocar la muerte de la clula si se expone a
un tiempo de 1 hora.
Los antibiticos: Estas son inhibidoras de la sntesis de las protenas mitocondriales sin afectar la
sntesis de protenas citoplasmticas. En presencia de cloranfenicol se pueden desarrollar levaduras
capaces de fermentar en presencia de un sustrato fermentable.

7. Aplicaciones industriales de las levaduras

1. Panadera: - Resistencia al etanol

- Sustrato melaza de caa 3. Vinos y alcoholes: kloeckera y
- Velocidad de crecimiento lo metschinokowa.
ms elevado posible y buen 4. Alcohol industrial:
rendimiento - Cepas estables y mismas
- Resistentes a la desecacin prestaciones en fermentacin
- Buen poder de conservacin - Fermentacin en el medio lo
- Conservacin: T y O2 ms rpido posible.
2. Cervecera: 5. Levaduras y quesos:
- Fermentacin rpida sin - Tolerantes a la sal en la
exceso de crecimiento de superficie
biomasa - Metabolismo del cido
- Buena conservacin de lctico, aumento de pH
maltosa y malto triosa en - Estimular el crecimiento de
etanol. otros microorganismos.
 6.
8. Composicin del zumo de uva
7. Est compuesta de sustancias y grupos de sustancias como:
8. Agua, azcar (glucosa, fructosa), cidos, materias minerales, compuestos nitrogenados
(albmina, peptona, aminocidos), sustancias tnicas y colorantes, grasas y ceras,
enzimas (invertasa, oxidasa, pectasa), sustancias aromticas.
9. Los compuestos tienen el siguiente promedio (gr/L) en la composicin de un zumo de
uva
10.
11. Agua 12. 800-860 g/l
13. Azcar 15. 120-250 g/l
14.
16. cidos 17. 6-14 g/l
18.
19. Sustancias minerales 21. 2.5-3.5 g/l
20.
22. Compuestos nitrogenados 23. 0.5-1 g/l
24.
25.
26. Los dems compuestos ocupan cantidades mnimas.
27. Contenido de agua: sirve como disolvente para el azcar, los cidos y las dems
sustancias.
28. Contenido de azcar: Contiene glucosa y fructosa, con la levadura fermenta estos
azucares y los convierte en alcohol etlico.
29. cidos: Se forman por oxidacin incompleta del azcar, su acidez depende de la clase
de uva. Contiene cido mlico que por desdoblamiento se transforma en cido lctico y
anhdrido carbnico, los cidos se en pequeas cantidades.
30. Sustancias minerales: El contenido de minerales vara segn el tipo de tierra,
fertilizantes y la atmsfera, en los mostos se encuentra mayor contenido que en el vino,
ya que la levadura necesita de algunos de estos minerales. Puede contener minerales d
calcio, potasio, magnesio, cloruros, sulfatos y silicatos.
31. Sustancias nitrogenadas: Son protenas (albminas y globulinas) y productos de
desintegracin de la protena (albumosas, pectosas y aminocidos). Estos compuestos
son importantes en la vinificacin ya que sirven como alimento para las levaduras y as
evitan la paralizacin de la actividad fermentativa de las levaduras.
32. Taninos y materiales colorantes: Taninos: Se encuentran en los escobajos, hollejos y
pepitas de la uva contienen sustancias tnicas, en los procesos fermentativos estos vinos
cambian de color debido a la formacin de compuestos de hierro y tanino.
33. Aceites, grasa y cera: Contiene en el zumo de uva en pequeas cantidades, en la
vinificacin se enriquece debido a la levadura. La sustancia aromatizante de las uvas es
similar a la cera.
34. Fermentos (enzimas): Existen enzima transportador de oxigeno (oxidasa), estas
enzimas dar al vino una quiebra parda y adoptar un color morado.
35.Sustancias responsables del olor y el sabor: el aroma: El olor se da en los grupos de
aceites esencial que contienen. El olor depende del tipo de uva utilizada. Las sustancias
aromticas se desarrollan en la fermentacin y el almacenamiento.