NDICE

I. RESUMEN................................................................................................. 2
II. INTRODUCCIN........................................................................................ 3
III. PARTE TERICA..................................................................................... 4
IV. DETALLES EXPERIMENTALES.................................................................5
V. CLCULOS EXPERIMENTALES Y RESULTADOS...........................................5
A. PREPARACIN DEL EXTRACTO DE HOJAS..............................................5
B. CROMATOGRAFA EN PAPEL..................................................................6
C. CROMATOGRAFA EN COLUMNA............................................................7
VI. DISCUSIN DE RESULTADOS.................................................................9
VII. CONCLUSIONES..................................................................................... 9
VIII. RECOMENDACIONES............................................................................. 9
IX. APNDICE.............................................................................................. 9
X. BIBLIOGRAFA........................................................................................... 9

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I. RESUMEN

En esta experiencia se realiz la cromatografa en papel y

cromatografa en columna. Con respecto a la cromatografa en
papel la fase estacionaria lo cumple el papel filtro y como fase
mvil el cido actico glacial, se pigment el papel filtro
recortado luego se hallaron las medidas alcanzadas del
sobrenadante y el solvente una vez introducidos en la probeta.
Se calcul el Rf que es la relacin del soluto (sobrenadante) con
respecto al frente del disolvente.
En la cromatografa en columna, la fase estacionaria estuvo
representada por el azcar el cual se llen en una columna y la
fase mvil por el ter de petrleo aqu identificaron las
pigmentaciones mediante la coloracin en la columna
cromatogrfica las cuales salieron en orden descendente a su
peso molecular estas fueron xantofilas y clorofilas , se
observaron que las pigmentaciones verdes eran, una ms
oscura que la otra, eso quiere decir que existi la presencia de
clorofilas A que son ms oscuras que las clorofilas B, que son
ms claras.

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II. INTRODUCCIN

En este presente informe se hablara sobre la cromatografa,

este nombre proviene de kromato, color y graphos, escrito. El
nombre de la tcnica deriva de los primeros ensayos hechos por
el ruso de origen italiano Tswett cuando separo diversos
pigmentos de las plantas.
La cromatografa es un mtodo fsico de gran importancia
basado en el principio de retencin selectiva y caracterizada por
ser sencillo puesto que no necesita equipamiento complejo
adems de ser muy verstil porque presenta distintos tipos de
cromatografa al tomar distintos criterios.
Existen dos objetivos principales en la realizacin de esta
tcnica, el preparativo y analtico. El primero se obtiene con la
separacin de los distintos componentes de una mezcla y el
segundo permitiendo identificar y determinar las cantidades de
dicho componente. En toda cromatografa se cumple la ley del
reparto de una muestra dada entre dos fases una estacionaria
y otra mvil.

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 III. PARTE TERICA

CROMATOGRAFA

Es la tcnica para separar componentes de una mezcla, y su posterior

anlisis, basadas en que las distintas sustancias que forman los
componentes de una mezcla se dejan arrastrar a diferentes
velocidades sobre un soporte. El soporte puede ser papel, un gas,
otro lquido, etc. Es un mtodo fsico de separacin de componentes.
CLASES DE CROMATOGRAFIA
Cromatografa de papel:
Es un proceso donde el absorbente lo constituye un papel de Filtro.
Una vez corrido el disolvente se retira el papel y se deja secar, se
trata con un reactivo qumico con el fin de poder revelar las manchas.

Figura 1: Cromatografa en papel

Cromatografa de columna
Los elementos bsicos en la cromatografa de columna son una son
la fase estacionaria y la fase mvil. La fase estacionaria la forma un
slido poroso, el cual queda soportado en el interior de una columna
generalmente fabricada en plstico o vidri.
Cromatografa de intercambio inico
La fase estacionaria es un slido que lleva anclados grupos
funcionales ionizables cuya carga se puede intercambiar por aquellos
iones presentes en la fase mvil.

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Cromatografa de afinidad
La cromatografa de afinidad se basa en interacciones no covalentes
selectivas entre la muestra y molculas especficas. Es muy
especfica, pero no muy consistente. Se utiliza mucho en bioqumica
para la purificacin de protenas.

Cromatografa de exclusin
Se basa en la habilidad de materiales de porosidad controlada para
separar los componentes de una mezcla de acuerdo al tamao y
forma de las molculas.
Causas del desplazamiento de la fase movil
Capilaridad
La capilaridad es la cualidad que posee una sustancia de absorber a
otra. Sucede cuando las fuerzas intermoleculares adhesivas entre el
lquido y el slido son mayores que las fuerzas intermoleculares
cohesivas del lquido. Esto causa que el menisco tenga una forma
cncava cuando el lquido est en contacto con una superficie
vertical. En el caso del tubo delgado, ste succiona un lquido incluso
en contra de la fuerza de gravedad. Este es el mismo efecto que
causa que materiales porosos absorban lquidos

Figura N2 Fenomeno de Capilaridad

Evaporacin del solvente

Durante el proceso fsico denominado evaporacin, una sustancia
lquida pasa lenta y gradualmente a un estado gaseoso, una vez que
haya adquirido la energa necesaria para aumentar su superficie

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IV. DETALLES EXPERIMENTALES

Cuadro N1: Detalles para la cromatografa en papel

flores de trituradas 2 gramos

cido clorhdrico 3 ml
metanlico

Papel filtro (fase estacionaria) 14.5cm x2cm

cido actico(fase mvil) 2 ml

Cuadro N2 : Detalles para la cromatografa en columna

Hojas verdes trituradas 2 gramos

ter de petrleo 10 ml

Azcar en polvo 300 gramos

V. CLCULOS EXPERIMENTALES Y RESULTADOS

A. PREPARACIN DEL EXTRACTO DE HOJAS

Se trituraron los ptalos (no necesariamente secas) en el

mortero hasta tener un tamaa muy pequeo, una vez que
obtuvimos el tamao adecuado, a la muestra triturada se le
agreg cido clorhdrico metanlico hasta que obtuvimos
suficiente sobrenadante que luego utilizamos en la posterior
experiencia.

Figura N 2. Aqu se observa la

manera de cmo se trituraron los
ptalos rojos y rosados, posterior a
esto se le agreg el cido
clorhdrico y as obtuvimos nuestro
sobrenadante.

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 Figura N 3. Aqu se observa el
sobrenadante, para nuestro grupo se
pudo triturar toda la muestra de ptalos
teniendo en su gran mayora la muestra
lquida sin ninguna impureza

B. CROMATOGRAFA EN PAPEL

Se cort una tira de papel filtro con las dimensiones adecuadas

para introducirlo en una probeta, luego de esto se trazaron con
un lpiz 2 lneas, una a 1.5 cm del borde inferior del papel filtro
y otra a 3,0 cm del borde superior, una vez hecho esto, se
agreg una cantidad mnima de la fase mvil en el fondo de la
probeta, se tuvo mucho cuidado con no empapar las paredes
de la probeta, se aplic el sobrenadante en el medio de la lnea
a 1.5 cm del borde inferior del papel filtro, aproximadamente 3
milmetros de dimetro.

Figura N 4. Como vemos en esta

imagen, se coloc la muestra
sobrenadante en el punto medio de la
lnea de 1.5 cm sobre el borde inferior
del papel filtro aproximadamente con 3
milmetros de dimetro.

Se midi la distancia de que alcanz la fase mvil y la distancia

que alcanz la muestra sobrenadante, luego se hall el Rf
dividiendo la mitad de la distancia de la muestra sobrenadante
entre la distancia al frente del disolvente.

Figura N 5. Aqu se observa la muestra

corrida en el papel filtro, se procedi a
hacer el clculo.
4 cm
Fr= 10 cm =0.4

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 C. CROMATOGRAFA EN
COLUMNA

Se arm una columna

cromatogrfica en un
soporte universal, luego se
tap en la parte inferior
con algodn y se llen la columna con azcar final, para esta
experiencia se trituraron hojas verdes y se le agrego cido
clorhdrico metanlico generando as sobrenadante.

Figura N 6. Aqu se observa la

trituracin que se les hizo a las hojas,
posteriormente se le agreg el cido
clorhdrico metanlico generando as el
sobrenadante.

Una vez que obtuvimos el

sobrenadante, en un vaso de
precipitados se disolvi con
suficiente cantidad de ter de petrleo, fue mezclado y se
verti en la parte superior de la columna cromatogrfica.

Figura N 7. En esta imagen vemos

como la coloracin amarilla y verde
comenzaron a descender por la
columna, esto indic la presencia de
xantofilas y clorofilas
respectivamente.
Figura N 8. En esta imagen se observa
que tambin se present una
coloracin verde ms oscura que la
anterior vista, esto denot la presencia
de la clorofila A que es ms oscura
que la clorofila B.
Figura N 9. En esta imagen se aprecia
con mucha ms claridad cmo se
presentaron las clorofilas A que son
ms oscuras.

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 Figura N 10. En esta imagen se
observa las xantofilas que cayeron al
vaso de precipitados resultado de la
cromatografa en columna.

VI. DISCUSIN DE RESULTADOS

VII. CONCLUSIONES

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VIII. RECOMENDACIONES
IX. APNDICE
X. BIBLIOGRAFA

BROWNING, D. R. Cromatografa-Toray-Masson. Espaa. 1971.

DOMINGUEZ, Xorge Alejandro. Cromatografa en Papel y en
Capa Delgada, Organizacin de los Estados Americanos U.S.A.
1975
http://quimica.laguia2000.com/general/cromatografia-en-
columna#ixzz3peICYCaf[29 mayo ,2017]
https://es.wikipedia.org/wiki/Geranium[29 mayo ,2017]

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