INSEMINACIN ARTIFICIAL Y TRANSFERENCIA DE EMBRIONES EN

BORREGAS Y CABRAS.
Octavio Meja Villanueva. Centro de Enseanza, Investigacin y Extensin en Produccin
Ovina, FMVZ-UNAM.

Inseminacin artificial.
La inseminacin artificial puede definirse como un mtodo reproductivo
mediante el cual los espermatozoides son depositadas dentro del aparato
reproductor femenino, por medios distintos a la cpula. Se le considera una
tcnica que permite un mayor uso del material gentico de los machos con
caractersticas productivas superiores o de inters.
La inseminacin artificial en los ovinos y los caprinos no es una tcnica nueva
puesto que lleva ms de 50 aos practicndose a nivel mundial y, en Mxico,
en forma comercial y con buenos resultados desde los aos 70, gracias a la
aplicacin de la hormonas para la sincronizacin del ciclo estral. Pases
sobresalientes en cuanto al uso masivo de la inseminacin artificial en
rumiantes pequeos seran principalmente Francia, Australia, Nueva Zelanda,
Inglaterra y los Estados Unidos de Norteamrica.
El objetivo principal de un programa de inseminacin artificial es la mejora
gentica y con sta, el mejoramiento de las caractersticas de produccin como
son la cantidad y calidad de la carne, lana, leche o pelo. Obviamente, antes de
contemplar cualquier programa de mejoramiento gentico tanto los machos
como las hembras debern encontrarse en buena condicin corporal, reflejo de
un buen estado nutricional.
Al igual que con cualquier otro tipo de tecnologa existen ventajas y
desventajas para su aplicacin y desarrollo. Entre algunas de las ventajas de la
inseminacin artificial tenemos:
Mejora gentica: Mejoramiento gentico acelerado mediante el uso de
sementales probados. Con la utilizacin de sementales superiores se
puede tener un beneficio directo sobre la produccin de la progenie
resultante. Tambin facilita la introduccin o el cambio a otro genotipo.
Fcil transporte del material gentico: Gracias al manejo del semen
diluido en fresco, enfriado o congelado, es ms fcil y econmico el
transporte del semen que el de los sementales.
 Conservacin prolongada del semen: El semen procedente de
sementales valiosos se puede conservar en forma congelada para
utilizarlo en aos venideros e incluso despus de la muerte del
semental.
Aumento de la eficiencia reproductiva: Mejor y mayor utilizacin del
material gentico, ya que a partir de un eyaculado es comn obtener
entre 30-40 dosis de semen fresco diluido, con lo que el potencial de
cras producidos por cada semental aumenta considerablemente. Se
reducen tambin los gastos de la manutencin de un gran nmero de
machos.
Prevencin de enfermedades: Por medio de la inseminacin artificial se
evita el contacto directo entre el macho y la hembra, por lo que puede
existir un mejor control y prevencin de diferentes enfermedades,
principalmente las de transmisin sexual.
Utilizacin de programas de reproduccin dirigida o asistida: Al contar
con programas de induccin y sincronizacin del estro, se pueden tener
ms cras a lo largo del ao, adems de planear con mayor precisin las
temporadas de empadre y en consecuencia, los partos, sobre todo para
su mejor atencin.
Facilita las pruebas de progenie: Este tipo de pruebas establecidas
desde hace muchos aos en otras especies, permiten evaluar las
caractersticas productivas de las hijas e hijos de los machos y hembras
usados como pie de cra, por lo que se puede conocer de cada macho o
hembra en particular su potencial para producir leche o carne, evitando
el usar como criterio de seleccin de los reproductores solamente a los
animales con mejor tipo o fenotipo.
Como algunas de las desventajas de la inseminacin artificial hay que tener en
cuenta las siguientes consideraciones:
Debido a que la mayora de las hormonas y equipo usado en la
inseminacin artificial son de importacin, tienen un costo relativamente
elevado.
Para obtener buenos resultados es importante que lo haga una persona
capacitada en inseminacin artificial (sea tcnico agropecuario,
 agrnomo o veterinario) y contar con uno o dos ayudantes durante el
manejo de los animales.
La fertilidad obtenida en programas de inseminacin artificial es menor si
se compara con la monta natural o dirigida.
De manera general, la inseminacin artificial en las ovejas y cabras se puede
realizar con semen diluido en fresco, enfriado o congelado y el sitio de depsito
puede ser la vagina, el crvix o el tero.
En la inseminacin artificial con semen fresco, el eyaculado colectado es
diluido, en ocasiones hasta sin haber sido previamente evaluado con detalle,
para ser utilizado lo ms rpidamente posible, es decir en el transcurso del da.
Aunque algunos tcnicos prefieren no diluir el semen sobre todo cuando se
inseminan pocas hembras, es importante hacerlo debido a que la viabilidad del
semen sin diluir disminuye rpidamente. En este caso el semen debe
conservarse a una temperatura de entre 24 y 30C y puede ser diluido en
sustancias sencillas en su composicin y fciles de elaborar o comprar.
En la inseminacin artificial con semen enfriado, el eyaculado obtenido se
evala y diluye, por ejemplo con leche, para posteriormente enfriarse hasta una
temperatura de 15C. Debido a que esta temperatura es relativamente difcil de
mantener, se prefiere enfriarlo a una menor temperatura, como sera alrededor
de 4 5C, usando cualquier refrigerador domstico. Es conveniente tambin
el utilizar diluyentes ms complejos, puesto que stos pueden prolongar la vida
til del semen por varios das.
Para la inseminacin artificial con semen congelado, el semen recolectado se
evala con detalle y se congela en nitrgeno lquido a -196C. Esta
temperatura tan baja, al detener por completo el metabolismo de los
espermatozoides, permite su conservacin por muchos aos. Los diluyentes
usados para congelar semen son ms complejos, ya que adems de contener
ingredientes para el mantenimiento del semen, contienen ingredientes que
protegen a los espermatozoides del enfriamiento y de la congelacin.
Dependiendo del sitio en donde se deposite el semen, puede considerarse que
la inseminacin artificial se realiza vaginalmente, cervicalmente o
intrauterinamente.
En la inseminacin vaginal o inseminacin a ciegas, slo debiera utilizarse
semen fresco diluido, aunque es comn el uso de semen fresco sin diluir.
Consiste simplemente en depositar el semen en lo ms profundo de la vagina
sin intentar encontrar el crvix. Se ha utilizado principalmente en ovejas y
cabras primalas o primerizas y de talla pequea, en las que se dificulta la
introduccin profunda de un vaginoscopio. Sin embargo, los resultados son en
la mayora de las ocasiones muy bajos o bajos en cuanto a fertilidad y
prolificidad.
La inseminacin cervical es la tcnica ms sencilla y puede ser muy efectiva
para el uso del semen fresco o enfriado. Consiste en la introduccin de un
vaginoscopio hasta la localizacin del crvix y el depsito del semen en la
entrada del crvix (os externa). En las ovejas es comn el depsito en la
entrada del crvix, mientras que en una buena proporcin de cabras, se puede
depositar el semen 2 3 centmetros dentro de los pliegues cervicales y en
algunas de ellas (20-30%), es factible introducir el semen ms profundamente,
casi hasta la entrada al cuerpo del tero. En cabras es comn el uso de la
inseminacin cervical con semen congelado, a pesar de los resultados poco
consistentes que pueden obtenerse, esto es, que en ocasiones la fertilidad
obtenida puede ser de alrededor del 50-60% mientras que en otras, menor al
20%.
Para alcanzar porcentajes de fertilidad de entre el 60 y 70%, es conveniente la
doble inseminacin cervical, particularmente en el caso de ovejas y cabras
sincronizadas con progestgeno y gonadotropina corinica equina, en las que
se disponga de semen fresco o enfriado.
De manera prctica, la inseminacin cervical se realiza despus de la
deteccin del celo con machos vasectomizados, con el pene desviado o
preferentemente cubiertos con un mandil de tela suave. Las hembras en celo
conductual que permanecen quietas cuando el macho trata de montarlas,
teniendo especial atencin en las primalas por su rechazo inicial a los
sementales, deben inseminarse por primera ocasin alrededor de las 10-12
horas despus de haber sido detectadas en celo y la segunda alrededor de las
12 horas despus de la primera inseminacin. En caso de realizar una sola
inseminacin, se har alrededor de las 20-30 horas de detectado el celo,
buscando cercana con el momento en que ocurra la ovulacin, esperando una
fertilidad en las hembras inseminadas de entre 30 y 50%. En caso de no
detectar calores, la inseminacin se realizar a tiempo fijo, alrededor de las 48-
50 horas despus de haberse retirado el progestgeno y de haber sido
administrada la gonadotropina corinica equina.
Para la inseminacin cervical se necesita de un vaginoscopio con luz y de una
pipeta de plstico rgido, con la punta alargada y adelgazada con calor y
ligeramente doblada, conectada por el otro extremo a una jeringa de plstico
para insulina (1 ml). Si se hace de manera rutinaria, es conveniente usar un
aplicador corto para semen de caprinos y ovinos (para pajillas de .25 .50),
contar con pajillas para semen de 0.25 y de 0.50 ml y de las respectivas
fundas. A la hembra por inseminar se le sostiene con el tren posterior levantado
por una persona, ya sea sosteniendo el cuello entre las piernas y recargando la
espalda en la pared o levantando con los brazos el tren posterior del animal,
mientras que otro la insemina. Es mejor contar con una base o barra para
realizar la inseminacin, denominada generalmente potro de inseminacin, con
una persona acomodando la parte posterior del abdomen sobre el potro y con
otra persona inseminando. Tambin se puede colocar el abdomen de la
hembra sobre unas pacas de pastura, amarradas entre ellas. Con la
introduccin del vaginoscopio, deber observarse la mucosa vaginal y cervical
enrojecida y con abundante y turbio moco cervical, y una ligera apertura del
crvix. Una mucosa plida y seca y un crvix cerrado indican que la hembra no
se encuentra en calor. Es conveniente mantener a la hembra en la posicin de
inseminacin un momento ms despus de realizada, para posteriormente
bajarla suavemente. Est comprobado que mientras mejor sea el trato dado a
los animales durante el manejo para la inseminacin artificial, mayores sern la
fertilidad y el nmero de cras nacidos con esta tcnica.
En el caso de desear intentar el depsito intrauterino de semen fresco o
congelado va cervical, se puede fijar el crvix con unas pinzas y con un
aplicador de semen o con una pipeta con punta de metal tratar de pasar sus
pliegues para depositar el semen dentro del tero.
Una mejor opcin para el uso de semen congelado es la inseminacin
intrauterina mediante laparoscopia. En caso de no contar con un endoscopio,
puede realizarse mediante una mini laparotoma medio ventral el depsito
intrauterino del semen congelado. En el caso del uso de semen congelado la
inseminacin se realiza alrededor de las 24 horas de haberse detectado el
estro o sin deteccin del estro alrededor de las 60 horas posteriores al retiro del
progestgeno y de la administracin de la gonadotropina corinica equina.

Transferencia de embriones.
La transferencia de embriones inicia como la posibilidad de utilizar, en gran
escala, el potencial gentico de las hembras de diferentes especies. La
transferencia de embriones inici experimentalmente en los ovinos y caprinos
desde 1932, pero no es sino a partir de 1970 cuando se utiliza a nivel
comercial, siendo pases pioneros Inglaterra y Estados Unidos y posteriormente
Australia, Nueva Zelanda, Francia, Sudfrica y Canad.
El principio fundamental se basa en la recoleccin de los embriones de una
hembra donadora y su transplante a las hembras receptoras, en las cuales
se establece y desarrolla la gestacin. Por tanto, los animales obtenidos por
transferencia, son portadores del 50% de los genes de la madre donadora de
los vulos a fertilizar y del 50% de los genes presentes en el semen del padre.
El objetivo productivo principal deber ser el incremento en el nmero de cras
nacidas de hembras y machos genticamente superiores. Sin embargo, en
nuestro pas su mayor uso ha sido para la reproduccin de los animales con los
diferentes fenotipos de inters, principalmente de borregos y cabras
especializadas para producir carne o leche. La transferencia de embriones ha
permitido la formacin de rebaos gentica y productivamente uniformes, al
aumentarse la presin de seleccin y reducirse el intervalo entre las
generaciones. Tambin con la transferencia embrionaria se ha podido obtener
en una sola ocasin, un mayor nmero de embriones y cras de los que podra
tener una hembra en toda su vida productiva.
La aplicacin de esta tcnica en nuestro pas, a travs del comercio
internacional de embriones congelados, ha permitido la introduccin de nuevas
razas y lneas genticas. Tal es el caso de los borregos de razas como la
Dorper, Ile de France o Charollais, especializadas en la produccin de carne, o
de los East Friesian, productores de leche. Mientras que para los caprinos, la
raza Boer se introdujo principalmente, gracias la importacin de embriones de
Nueva Zelanda. Tambin se han obtenido embriones en animales de stas y
otras razas que se encuentran en Mxico desde hace muchos aos, como
seran la Suffolk, Dorset y Pelibuey, as como de Toggenburgh, Nubio o Alpino
Francs. De las cuales sus embriones son generalmente transferidos en fresco,
es decir, el mismo da en que son recolectados.
Cuando se realiza un programa de transferencia embrionaria es conveniente
manejar grupos de animales, por lo que generalmente, por cada donadora se
sincronizan entre 5 y 6 receptoras. La mayora de los tratamientos prcticos
para sincronizar el celo de las ovejas y las cabras, se basan en la
administracin de progesterona o progestgenos solos o en combinacin con
prostaglandina F2 alfa.
En Mxico, el mtodo de eleccin ha sido el uso de esponjas impregnadas con
20 40 mg de acetato de fluorogestona (FGA) y colocadas vaginalmente
durante 12 das. Tambin es factible usar dispositivos (CIDR) que contienen
300 mg de progesterona natural. Con estas hormonas la presentacin de los
estros, ocurre en la mayora de las donadoras a las 24 horas de su retiro y en
las receptoras entre las 36 y las 48 horas posteriores al tratamiento.
Debido a la importancia que tiene la sincrona entre el celo de la donadora de
embriones y la receptora, ya que la mayor fertilidad en la transferencia
embrionaria se obtiene cuando tanto la donadora como la receptora presentan
celo el mismo da, se ha utilizado en el protocolo de sincronizacin, una
aplicacin de PGF2 dos das antes del retiro de la progesterona o del
progestgeno. En caso de no aplicarse, es comn el terminar en las
receptoras, al menos 12 horas antes, el tratamiento de sincronizacin.
La superovulacin de las donadoras permite obtener un mayor nmero de
embriones de los que se consiguen normalmente, aunque la respuesta es muy
variable. La variacin individual, se debe principalmente a las diferencias en la
condicin fisiolgica en la que se encuentran los ovarios al momento de la
superovulacin, ya que el nmero de folculos en desarrollo, as como la
presencia de folculos dominantes es diferente en cada hembra. Por tanto,
existen hembras de las que se recolectan entre doce y quince embriones
transferibles, mientras que en otras no se recolecta ninguno. En promedio
puede considerarse que se obtienen seis embriones transferibles por hembra
donadora.
Para la superovulacin de las donadoras se utilizan principalmente dos
hormonas, la gonadotropina corinica equina y la hormona folculo estimulante
(FSH) de origen ovino o porcino, que se administran por va subcutnea o
intramuscular. En diversos trabajos se ha administrado eCG en una sola
inyeccin, con una dosis total que va desde las 1500 hasta las 3000 UI,
mientras que de FSH se han diseado una gran variedad de esquemas en
cantidades constantes o decrecientes, en donde la dosis total, dependiendo del
producto utilizado, es de 160 a 200 mg (Folltropin) o de 200 a 250 UI (Pluset),
administrada en 6 a 8 inyecciones cada doce horas, durante tres o cuatro das.
Los mejores resultados en cuanto al nmero de cuerpos lteos normales
producidos y de embriones transferibles recolectados, se obtienen utilizando la
FSH en dosis decreciente, en comparacin con la administracin de eCG. Esto
debido principalmente a que la vida media de la eCG es ms larga (26-72
horas), por contener una mayor proporcin de cido silico (10%), lo que
ocasiona un estimulacin excesiva y de mayor duracin, en comparacin con el
uso de FSH.
Un fenmeno que se presenta normalmente durante la superovulacin de las
ovejas y las cabras, es la formacin de cuerpos lteos con regresin
prematura, lo que se debe a una programacin adelantada de la secrecin de
las prostaglandinas uterinas.
La ovulacin en las ovejas y las cabras es espontnea y ocurre normalmente
entre las 24 y las 36 horas de iniciado el estro, aunque en las hembras
superovuladas la ovulacin puede adelantarse algunas horas (hasta alrededor
de 10 horas), por lo que la deteccin oportuna del estro conductual es
determinante para dar monta o para inseminar con mayor precisin a las
donadoras. Los estros debern detectarse a partir de las 24 horas del retiro del
progestgeno o de la progesterona, tanto en las donadoras como en las
receptoras, y la deteccin se realizar dos veces al da durante al menos 2
das. A las donadoras detectadas en celo se les debe dar monta dirigida tres o
cuatro veces al da, mientras presenten estro conductual, debido a que de esta
forma se incrementan las posibilidades de fertilizacin de los vulos y por tanto,
de colectar un mayor nmero de embriones. En caso de utilizarse inseminacin
artificial cervical con semen fresco diludo, se realizar cada 12 horas, al menos
en dos ocasiones y con una concentracin de 300 millones de
espermatozoides, mayor a la que usualmente se acostumbra (100 millones de
espermatozoides). La primera inseminacin se har 12 horas despus de
haberse detectado a la hembra en estro y la segunda a las 24 horas de
detectada. Si la inseminacin artificial es intrauterina, ya sea con semen
congelado o fresco, se puede realizar a tiempo fijo alrededor de las 50-60 horas
despus de retirada la progesterona natural o sinttica, utilizando un
laparoscopio y con una concentracin de por lo menos 100 millones de
espermatozoides. El da en que las donadoras son detectadas en celo y
reciben monta o son inseminadas por primera vez, se considera como el da
cero.
La recoleccin de los embriones se realiza preferentemente entre los das 6 a 7
posteriores a la primera inseminacin o servicio, ya que en estos das los
embriones se encuentran en los cuernos uterinos y su estadio de desarrollo
corresponde al de mrula compacta o de blastocisto. Colectar los embriones en
este estadio de desarrollo permite adems su biparticin o congelacin exitosa.
Se puede realizar la recoleccin de los embriones mediante la introduccin de
una sonda de Foley a travs del crvix, lo cual es muy difcil, adems de
lesionarse en la mayora de las ocasiones la vagina y el crvix de las hembras
en las que se intenta. Tambin puede realizarse por medio de laparoscopa, a
travs de un catter metlico de tres vas, lo cual es complicado y requiere de
relativa experiencia.
Generalmente, la recoleccin de los embriones en los pequeos rumiantes, se
hace mediante laparotoma medio ventral, buscando la exteriorizacin del tero
para su adecuada manipulacin, para lavar cada uno de los cuernos uterinos
por separado, con lo cual se logra la recoleccin del mayor nmero de
embriones.
La desventaja principal de la laparotoma medio ventral, es el que se ocasionan
adherencias y fibrosis en los ovarios y el tero, as como en la lnea media, por
lo que el uso repetido de hembras de alto valor gentico de las que se obtienen
los embriones se reduce. Sin embargo, la correcta realizacin de la recoleccin
de embriones mediante laparotoma, manejando delicadamente los tejidos,
evitando el sangrado en los ovarios, el tero, los msculos o la piel y evitando
sobre todo la deshidratacin del tero expuesto, permite llevarla a cabo entre
cuatro a seis ocasiones en la misma hembra donadora.
Todos los embriones que sern posteriormente transferidos deben ser
evaluados morfolgicamente en un microscopio estereoscpico, clasificndose
de acuerdo a su grado de desarrollo y calidad. De manera estricta se
consideran como embriones transferibles, aquellos con un grado de desarrollo
que corresponda al da en que son recolectados y con una calidad excelente o
buena y regular (calidades 1 y 2). Los embriones de calidad pobre o
degenerados (calidades 3 y 4), son considerados como no transferibles. Como
los embriones se obtienen generalmente de los cuernos del tero entre los das
6-7 posteriores al estro, el grado de desarrollo deber ser el de mrula,
blastocisto temprano, blastocisto, y en ocasiones, de blastocisto expandido. A
esta edad de desarrollo los embriones de ovinos y caprinos, debern medir
entre 140-160 m de dimetro.
Hasta el momento, en los pequeos rumiantes no se ha desarrollado con xito
una tcnica de transferencia de embriones no quirrgica como la que se realiza
en vacas o en yeguas, debido a las caractersticas anatmicas del aparato
reproductor. La transferencia de los embriones se realiza mediante laparotoma
media ventral o con la ayuda de un laparoscopio. Aunque la laparotoma media
es una tcnica eficaz, el uso de un laparoscopio la supera al ser una tcnica
quirrgica invasiva menor, que permite realizar la transferencia de manera
rpida y segura. Para cualquiera de las dos opciones, las hembras receptoras
tambin deben dietarse 24 horas antes de la ciruga y anestesiarse de la
misma forma que las donadoras.
No obstante haberse determinado con anterioridad, que los mayores
porcentajes de fertilidad se obtienen con la transferencia de dos embriones por
receptora, tal vez el mejoramiento en la tcnica al auxiliarse de la laparoscopia
y el constante perfeccionamiento de los medios y del material usado para la
conservacin y el manejo de los embriones, la transferencia de un solo embrin
por receptora, ya sea fresco o congelado, ha originado por un lado, porcentajes
de fertilidad similares a la transferencia de dos embriones y por otro lado, ha
permitido la disminucin en el nmero de embriones que se pierden al no ser
gestados por las hembras receptoras. Otra opcin estudiada ha sido la
transferencia de embriones a cabras y borregas receptoras, que previamente
han sido inseminadas artificialmente o que han recibido monta natural dirigida.
Diferentes trabajos con embriones congelados de cabras y ovejas reportan
porcentajes de fertilidad entre el 50 y el 60% y prolificidad de 1.2 a 1.3,
mientras que la fertilidad con embriones frescos se encuentra entre el 60 y el
80% y la prolificidad presenta valores de entre 1.3 a 1.5, cuando se transfieren
dos embriones por receptora.

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